检索结果-内蒙古大学图书馆

环境与健康杂志 2010年第12期27卷 1083-1084页

作者：王晓春石连沈静李朝品安徽理工大学医学院生物医学工程教研室安徽淮南232001

目的检测3种不同生境中尘螨4种变应原。方法于2009年6—8月在淮南地区仓储、居室及公共环境采集样本各40份,提取样本总RNA,RT-PCR合成cDNA,应用PCR特异性扩增Der f 1、Der f 2、Der p 1、Der p 2,并对不同生境中变应原检测结果进行统计... 详细信息

目的检测3种不同生境中尘螨4种变应原。方法于2009年6—8月在淮南地区仓储、居室及公共环境采集样本各40份,提取样本总RNA,RT-PCR合成cDNA,应用PCR特异性扩增Der f 1、Der f 2、Der p 1、Der p 2,并对不同生境中变应原检测结果进行统计学分析。结果从尘螨基因组中特异扩增出大小约646、4559、23、408 bp的基因片段。仓储环境和居室环境中尘螨变应原的检测阳性率均高于公共环境(P<0.05),仓储环境中粉尘螨变应原阳性率较高(Der f 1为65.0%,Der f 2为62.5%),居室环境中屋尘螨变应原阳性率较高(Der p 1为80.0%,Der p 2为62.5%)。结论不同生境中不同尘螨变应原具有较大差异,可能与温湿度差异及尘螨的食性、习性有关。对尘螨基因组进行RT-PCR及PCR检测是简便有效的尘螨变应原检测方法。

关键词：尘螨变应原生境基因检测

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HBsAg诱饵载体的构建、表达及人胰腺cDNA文库的扩增、纯化和转化

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中国病原生物学杂志 2012年第5期7卷 332-336页

作者：王晓春许礼发李朝品安徽理工大学医学院生物医学工程教研室安徽淮南232001

目的构建HBsAg诱饵真核表达载体,并在AH109酵母菌中进行表达,同时扩增、纯化、鉴定及转化人胰腺cDNA文库。方法通过PCR扩增HBsAg基因,克隆到pGEM-T载体,测序正确后酶切并连接至表达载体pGBKT7中,转化酵母菌AH109,在色氨酸缺陷型培养基(S... 详细信息

目的构建HBsAg诱饵真核表达载体,并在AH109酵母菌中进行表达,同时扩增、纯化、鉴定及转化人胰腺cDNA文库。方法通过PCR扩增HBsAg基因,克隆到pGEM-T载体,测序正确后酶切并连接至表达载体pGBKT7中,转化酵母菌AH109,在色氨酸缺陷型培养基(SD/-Trp/Kana)上筛选阳性菌落,提取重组蛋白,经SDS-PAGE电泳后进行Western blot分析。扩增、纯化人胰腺cDNA文库并进行酶切鉴定及生物信息学分析,醋酸锂法将其转入Y187酵母菌。结果成功构建酵母表达载体pGBKT7-HBsAg、SDS-PAGE和Western blot显示重组蛋白在酵母细胞中正确表达;成功构建人胰腺cDNA文库,其容量为4×109 CFU/L,插入片段大小为0.5～2.0kb,长度不均,重组率为100%。结论成功构建HBsAg真核载体并在AH109酵母菌中表达,同时获得高质量的胰腺cDNA文库并转化入Y187酵母菌,为通过酵母双杂交筛选与HBsAg相互作用蛋白基因奠定了基础。

关键词： HBsAg 诱饵载体胰腺 cDNA文库

来源：评论

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安徽省不同种类汽车生境仓储螨和尘螨孳生情况及多样性调查

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中国媒介生物学及控制杂志 2012年第5期23卷 461-463页

作者：王晓春郭冬梅李朝品安徽理工大学医学院生物医学工程教研室安徽淮南232001

目的调查安徽省3种不同种类汽车生境中仓储螨和尘螨孳生情况及多样性。方法 2011年5-10月在安徽省合肥等10个城市中选取私家车、出租车、公交车3种生境进行孳生螨类样本的采集、分离、计数、制片鉴定及进行数据分析。结果 600份样本中... 详细信息

目的调查安徽省3种不同种类汽车生境中仓储螨和尘螨孳生情况及多样性。方法 2011年5-10月在安徽省合肥等10个城市中选取私家车、出租车、公交车3种生境进行孳生螨类样本的采集、分离、计数、制片鉴定及进行数据分析。结果 600份样本中检出孳生螨类313份,阳性率为52.2%。共检获螨21种,隶属于6科16属。多样性分析结果表明,3种生境中螨平均孳生密度为(11.85±5.01)～(33.60±8.49)只/g,丰富度指数为0.532～1.525,多样性指数为2.264～3.035,均匀度指数为1.050～1.264,优势度指数为0.296～0.414,物种相似性指数为0.381、0.211、0.385。结论私家车环境中仓储螨和尘螨平均孳生密度最高,螨种类最多,物种多样性指数最高,优势度指数最低;出租车和公交车环境中相应数据与私家车中相反,且公交车孳生螨种与私家车的相似度最低。可能与不同种类汽车生境内储藏物、温湿度及人为干扰的差异有关。

关键词：仓储螨尘螨生境多样性

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乙型肝炎病毒核心抗原诱饵载体的构建及酵母表达

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热带病与寄生虫学 2011年第1期9卷 1-3页

作者：王晓春许礼发张超李朝品安徽理工大学医学院生物医学工程教研室

目的构建乙型肝炎病毒核心抗原真核表达载体,并在酵母细胞中进行表达。方法以实验室保存质粒为模板,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增HBcAg基因,克隆到pGEM-T载体。测序正确后酶切并连接至酵母表达载体pGBKT7中,转化酵母菌AH109,在色氨酸缺... 详细信息

目的构建乙型肝炎病毒核心抗原真核表达载体,并在酵母细胞中进行表达。方法以实验室保存质粒为模板,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增HBcAg基因,克隆到pGEM-T载体。测序正确后酶切并连接至酵母表达载体pGBKT7中,转化酵母菌AH109,在色氨酸缺陷型培养基(SD/-Trp/Kana)上筛选阳性菌落后大量表达并提取重组蛋白,再进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果成功构建酵母表达载体pGBKT7-HBcAg,Western blot结果显示重组蛋白在酵母细胞中正确表达。结论利用真核表达载体在酵母细胞中成功表达HBcAg蛋白,为研究HBV合并代谢性疾病的机制奠定了基础。

关键词：乙型肝炎病毒 HBcAg 真核表达酵母细胞

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GPI-B7-1分子膜表面修饰瘤苗抗肿瘤作用的研究

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中国病理生理杂志 2008年第2期24卷 225-230页

作者：唐小龙赵桂梅许礼发周昕蔡淑玉暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广东广州510632 深圳龙珠医院肿瘤科广东深圳518055 安徽理工大学医学院生物医学工程研究所安徽淮南232001

目的:研制抗肿瘤免疫治疗的新疫苗。方法:用含目的基因的质粒pcDNA3.1(+)/GPI-B7-1转染QK10341细胞,提取膜蛋白GPI-B7-1,经Western blotting鉴定后,用蛋白转化法锚定在肿瘤细胞SKOV3膜上,取正常健康人外周血中非贴壁的淋巴细胞,进行淋... 详细信息

目的:研制抗肿瘤免疫治疗的新疫苗。方法:用含目的基因的质粒pcDNA3.1(+)/GPI-B7-1转染QK10341细胞,提取膜蛋白GPI-B7-1,经Western blotting鉴定后,用蛋白转化法锚定在肿瘤细胞SKOV3膜上,取正常健康人外周血中非贴壁的淋巴细胞,进行淋巴细胞扩增和CTL功能检测,并检测细胞培养液中IL-2、TNF-α和IFN-γ水平,FCM检测CTL的Fas表达水平。结果:与野生型SKOV3细胞比较,用GPI-B7-1修饰的SKOV3细胞能够更有效地刺激淋巴细胞增殖、诱导特异CTL杀伤活性(P<0.01),还可诱导CTL表达的Fas水平升高等活性增强以及分泌的IL-2、IFN-γ和TNF-α等细胞因子水平均显著上升(P<0.05)。结论:B7-1基因在肿瘤细胞中表达可增强其免疫原性,在体外有效诱导T细胞活化,显著增强T细胞杀伤肿瘤细胞的活性;对防治肿瘤侵袭具有一定作用。

关键词：糖基磷脂酰肌醇-B7-1 癌症疫苗 SKOV3细胞

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分子生物学综合性开放实验的探索与实践

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生物学杂志 2011年第6期28卷 109-111页

作者：王晓春尤其许礼发张超安徽理工大学医学院生物医学工程教研室淮南232001

为了探索分子生物学实验教学新模式,提高本科生在实验中应用理论知识的能力,设计了从胰腺癌细胞中克隆弹性蛋白酶(Elastase 3A,ELA3A)基因的综合性开放实验,该实验由学生查阅资料,自行设计,在教师的指导下最终完成。从效果来看,不仅使... 详细信息

为了探索分子生物学实验教学新模式,提高本科生在实验中应用理论知识的能力,设计了从胰腺癌细胞中克隆弹性蛋白酶(Elastase 3A,ELA3A)基因的综合性开放实验,该实验由学生查阅资料,自行设计,在教师的指导下最终完成。从效果来看,不仅使学生对分子克隆技术有了总体的了解和把握,而且激发了他们对这门学科的兴趣和学习主动性。

关键词：分子生物学综合性开放实验实验教学

来源：评论

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通过肿瘤致敏的DCs活化的CD8^+ T细胞可有效地杀死肿瘤细胞(英文)

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中国病理生理杂志 2008年第4期24卷 645-649页

作者：唐小龙江振友蔡淑玉暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广东广州510632 安徽理工大学医学院生物医学工程研究所安徽淮南232001

目的:探索肿瘤裂解物负载的DCs诱导活化的初始T细胞介导细胞免疫及活化的T细胞杀死肿瘤细胞的能力。方法:应用黏附法分离外周血中的淋巴细胞和单核细胞,应用GM-CSF +IL-4刺激单核细胞并诱导为iDCs,然后进行分组,应用相应的细胞因子等刺... 详细信息

目的:探索肿瘤裂解物负载的DCs诱导活化的初始T细胞介导细胞免疫及活化的T细胞杀死肿瘤细胞的能力。方法:应用黏附法分离外周血中的淋巴细胞和单核细胞,应用GM-CSF +IL-4刺激单核细胞并诱导为iDCs,然后进行分组,应用相应的细胞因子等刺激iDCs转化为mDCs,其中肿瘤裂解物冲击DCs组:冻融抗原负载+TNF-α+IL-1β;无肿瘤裂解物冲击组: TNF-α+IL-1β。再分别用上述DCs与淋巴细胞进行混合培养以刺激混合淋巴细胞中的T细胞转化为细胞毒性T细胞,并进行分组,肿瘤裂解物冲击DCs组:肿瘤裂解物冲击DCs +IL-2 +IL-7;无肿瘤裂解物冲击DCs组:无肿瘤裂解物冲击DCs +IL-2 +IL-7;对照组: IL-2 +IL-7。结果:成功获得iDCs,并高表达CD86、CD80和HLA-DR;相对于其它组,肿瘤裂解物冲击DCs组mDCs更显著上调CD83,且更有效地刺激淋巴细胞增殖;肿瘤裂解物冲击DCs组的CTLs也高表达CD95(Fas)且TNF -α和IFN-γ的表达水平显著提高(P<0.05)。结论:肿瘤裂解物冲击DCs可有效促进T细胞活化、增殖;并显著增强相应CTLs的杀死靶细胞的能力,这为发展DCs +CTLs的免疫治疗肿瘤提供了一种新而且简便的生物治疗模式。

关键词：树突细胞抗原肿瘤疫苗免疫疗法

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STC1在胃癌组织与外周血液中表达的意义

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中国病理生理杂志 2008年第5期24卷 978-981页

作者：唐小龙江振友蔡淑玉许礼发周昕暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广东广州510632 安徽理工大学医学院生物医学工程研究所安徽淮南232001

目的:研究外周血液与胃癌组织中斯钙素1(STC1)的表达情况。方法:分别在I-IV型的胃癌74例患者中,应用RT-PCR法检测外周血和肿瘤组织中STC1mRNA表达情况,应用免疫组化法检测肿瘤组织中STC1蛋白表达情况。结果:74例胃癌患者,48例外周血液中... 详细信息

目的:研究外周血液与胃癌组织中斯钙素1(STC1)的表达情况。方法:分别在I-IV型的胃癌74例患者中,应用RT-PCR法检测外周血和肿瘤组织中STC1mRNA表达情况,应用免疫组化法检测肿瘤组织中STC1蛋白表达情况。结果:74例胃癌患者,48例外周血液中STC1mRNA阳性;肿瘤组织STC1mRNA与STC1蛋白全部表达。外周血中STC1mRNA与肿瘤淋巴结转移数、肿瘤大小和病理TNM分期有(r分别为0.637、0.519、0.541,P<0.05、P<0.01、P<0.05)显著正相关。结论:STC1在胃癌的发生发展过程中具有抑制免疫系统功能等重要作用;外周血中STC1mRNA检测可试用作为肿瘤微转移的1个新指标。

关键词：斯钙素1 肿瘤转移胃肿瘤

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肾癌细胞冻融抗原负载树突状细胞瘤苗的活化

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中国病理生理杂志 2007年第3期23卷 465-468页

作者：唐小龙徐萌陆大祥谢春梅蔡淑玉暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学医学院第一临床学院肿瘤科广东广州510632 暨南大学医学院病理生理教研室广东广州510632 安徽理工大学医学院生物医学工程研究所安徽淮南232001

目的:探索体外诱导DCs活化的方法和制备肾癌树突状细胞(DCs)瘤苗。方法:制备肾癌细胞冻融抗原;取健康人新鲜血分离外周血单个核细胞(PBMC),应用GM-CSF+IL-4刺激,诱导PBMC为iDCs,然后进行分组,采用不同因子刺激iDCs转化为mDCs,其中A组:... 详细信息

目的:探索体外诱导DCs活化的方法和制备肾癌树突状细胞(DCs)瘤苗。方法:制备肾癌细胞冻融抗原;取健康人新鲜血分离外周血单个核细胞(PBMC),应用GM-CSF+IL-4刺激,诱导PBMC为iDCs,然后进行分组,采用不同因子刺激iDCs转化为mDCs,其中A组:冻融抗原负载;B组:TNF-α+冻融抗原负载;C组:IL-1β+冻融抗原负载;D组:TNF-α+IL-1β+冻融抗原负载。结果:各组均可诱导iDCs的成熟,并高表达CD86、CD80和HLA-DR;相对于其它组,D组DCs更显著上调CD83和CD54表达(P<0.05)和IL-12分泌(P<0.01),且D组mDCs更有效地刺激淋巴细胞增殖(P<0.05)。结论:TNF-α+IL-1β与肾癌细胞冻融抗原协同可有效促进DCs成熟、增强诱导淋巴细胞活化的能力。

关键词：树突细胞肾肿瘤抗原肿瘤疫苗

来源：评论

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