检索结果-内蒙古大学图书馆

中国人兽共患病学报 2012年第3期28卷 209-212页

作者：钟政荣徐云侠宫继勇罗庆礼闻慧琴宋晓蓉沈继龙安徽省蚌埠医学院第一附属医院检验科蚌埠233004 安徽省蚌埠医学院第一附属医院神经内科蚌埠233004 安徽医科大学病原生物学教研室安徽省病原生物学省级实验室安徽省人兽共患病重点实验室合肥230032

目的探讨制备高纯度、高生物活性的的日本血吸虫卵分离方法。方法将匀浆后的血吸虫感染的兔肝组织悬液分级过滤,再将滤液离心,去除组织碎片,分离的虫卵再次经过325目分样筛过滤,收集筛上虫卵,最后将收集的虫卵用密度1.070的Percoll分离... 详细信息

目的探讨制备高纯度、高生物活性的的日本血吸虫卵分离方法。方法将匀浆后的血吸虫感染的兔肝组织悬液分级过滤,再将滤液离心,去除组织碎片,分离的虫卵再次经过325目分样筛过滤,收集筛上虫卵,最后将收集的虫卵用密度1.070的Percoll分离液梯度离心,吸取下层Percoll液中的纯化虫卵;显微镜观察分离虫卵的纯度,吖啶橙染色观察虫卵的死活,环卵沉淀试验鉴定虫卵的分泌活性。结果每个肝脏获得约1g左右的虫卵,分离的虫卵纯度高,吖啶橙染色和环卵沉淀试验结果显示,分离的活虫卵比例高、生物活性好。结论该虫卵分离方法操作简单、用时短、效果好,分离的虫卵完全满足各种研究的需要。

关键词：日本血吸虫虫卵分离纯化活性

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多重聚合酶链反应用于人血小板抗原-2、-4、-5系统基因分型的研究

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检验医学 2006年第2期21卷 125-128页

作者：卞茂红黄建尧杨鹏刘淑均许伟沈际佳安徽医科大学第一附属医院输血科安徽合肥230022 安徽医科大学第一附属医院血液内科实验室安徽合肥230022 安徽医科大学病原生物学教研室安徽合肥230032

目的建立用于检测人血小板抗原(HPA)-2、-4、-5系统基因型的多重聚合酶链反应(PCR)。方法在一个反应体系中同时扩增HPA-2、-4、-5系统特异性目的基因片段。用琼脂糖凝胶电泳确定HPA-2、-4、-5系统基因型;再用多重PCR对75名健康的单采血... 详细信息

目的建立用于检测人血小板抗原(HPA)-2、-4、-5系统基因型的多重聚合酶链反应(PCR)。方法在一个反应体系中同时扩增HPA-2、-4、-5系统特异性目的基因片段。用琼脂糖凝胶电泳确定HPA-2、-4、-5系统基因型;再用多重PCR对75名健康的单采血小板者进行HPA-2、-4-、5系统基因分型,分型结果与PCR-序列特异性引物(PCR-SSP)获得的结果进行比较。结果HPA-2、-4、-5系统分型的结果为:70名为2 a/2 a型,5名为2 a/2b型;73名为4 a/4 a型,2名为4 a/4b型;66名为5 a/5 a型,9名为5 a/5b型。未发现2b/2b、4b/4b及5b/5b纯合子个体。多重PCR结果与PCR-SSP方法获得的结果一致。结论多重PCR具有操作简便、快速、准确等特点,可以用于血小板血型抗原基因分型。

关键词：人血小板抗原基因分型多重聚合酶链反应

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基于2-DE和蛋白质组技术筛选的日本血吸虫鸟氨酸氨基转移酶的表达及其诊断应用

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中国人兽共患病学报 2011年第6期27卷 484-488页

作者：胡梅梅钟政荣罗庆礼方婷娜沈继龙人兽共患病安徽省重点试验室安徽病原生物学省级实验室(安徽医科大学)合肥230032 蚌埠医学院第一附属医院检验科蚌埠233004

目的扩增并表达日本血吸虫鸟氨酸氨基转移酶(SjOAT),评价其在日本血吸虫病免疫诊断中的应用价值。方法构建pET28a/SjOAT质粒,转化至***21,IPTG诱导表达;应用Ni2+亲和层析法纯化OAT;SDS-PAGE和Western blot分析、鉴定表达产物;应用ELISA... 详细信息

目的扩增并表达日本血吸虫鸟氨酸氨基转移酶(SjOAT),评价其在日本血吸虫病免疫诊断中的应用价值。方法构建pET28a/SjOAT质粒,转化至***21,IPTG诱导表达;应用Ni2+亲和层析法纯化OAT;SDS-PAGE和Western blot分析、鉴定表达产物;应用ELISA法检测待检患者血清,比较SjOAT与日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)对血吸虫和其它寄生虫感染的检测结果。结果成功克隆表达了SjOAT,Western blot检测结果表明rSjOAT能被血吸虫病患者血清识别;以rSjOAT-ELISA和SjSEA-ELISA分别检测急/慢性血吸虫病患者和其它寄生虫感染者血清的结果经校正χ2检验,差异无统计学意义(P>0.05);对于正常对照者血清和疫区粪检阴性者血清,两种检测方法的特异性比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 rSjOAT在体外获得表达,用于诊断人血吸虫病具有高度敏感性和特异性。

关键词：日本血吸虫鸟氨酸氨基转移酶 ELISA 诊断

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雌蚊如何选择最佳雄配?

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中国血吸虫病防治杂志 2024年第3期36卷 321-328页

作者：李奕彤李东刘晓菲王英刘婷婷徐艳秋邓胜群安徽医科大学基础医学院病原生物学教研室、动物源性传染病安徽省重点实验室、人畜共患病安徽高校省级重点实验室安徽合肥230032 陆军军医大学军事预防医学系热带医学教研室重庆400038 安徽医科大学第二附属医院内分泌科安徽合肥230601

全球80%以上的人口面临病媒传播疾病风险,其中蚊媒传染病是全球核心公共卫生问题之一。阻止蚊媒传染病传播的关键是控制蚊虫。本文从蚊虫体型、嗅觉、视觉、触觉和听觉等方面阐述雌蚊的择偶偏好,探究雌蚊选择最佳雄配的机制,为蚊媒传染... 详细信息

全球80%以上的人口面临病媒传播疾病风险,其中蚊媒传染病是全球核心公共卫生问题之一。阻止蚊媒传染病传播的关键是控制蚊虫。本文从蚊虫体型、嗅觉、视觉、触觉和听觉等方面阐述雌蚊的择偶偏好,探究雌蚊选择最佳雄配的机制,为蚊媒传染病的控制提供新思路。

关键词：蚊虫性选择交配系统蚊媒传染病

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某医院2012-2013年242株肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶及整合子耐药基因检测

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中国人兽共患病学报 2015年第5期31卷 437-440,452页

作者：郭普贺晓珊梅传忠李兴武刘双成沈继龙蚌埠医学院第一附属医院检验科蚌埠233004 蚌埠医学院医学检验系蚌埠233003 安徽病原生物学省级实验室和人兽共患病安徽省重点实验室安徽医科大学病原学教研室合肥230032

目的了解肺炎克雷伯菌主要的β-内酰胺酶和整合子耐药基因型,明确其耐药特性。方法回顾性分析我院2012年1月至2013年5月临床分离的242株肺炎克雷伯菌药敏结果,聚合酶链反应(PCR)检测其β-内酰胺酶及整合子耐药基因。结果 242株肺炎克雷... 详细信息

目的了解肺炎克雷伯菌主要的β-内酰胺酶和整合子耐药基因型,明确其耐药特性。方法回顾性分析我院2012年1月至2013年5月临床分离的242株肺炎克雷伯菌药敏结果,聚合酶链反应(PCR)检测其β-内酰胺酶及整合子耐药基因。结果 242株肺炎克雷伯菌对16种抗生素存在不同程度的耐药,其中氨曲南、头孢唑啉、氨苄西林/舒巴坦、头孢曲松和头孢他啶耐药率较高,分别为76.86%、65.70%、63.64%、62.40%和59.92%;亚胺培南、丁胺卡那、厄他培南和哌拉西林/他唑巴坦较为敏感,分别为17.77%、18.88%、18.88%和23.55%。PCR结果显示,ESBLs基因阳性155株,占64.05%,主要为TEM型和SHV型,两者均存在的菌株有114株,占产ESBLs基因菌株的73.55%(114/155)。其次为KPC基因86株,占35.54%;此外AmpC基因43株,占17.77%,全部为DHA型。整合子基因128株,占52.89%,以整合子1(intI-1)为主,共检出120株,占49.59%。结论我院肺炎克雷伯菌耐药情况严重,主要的耐药基因型为TEM型、SHV型、KPC和intI-1。

关键词：肺炎克雷伯菌耐药基因聚合酶链反应(PCR)

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危重症患者血浆DNA水平及其对疾病严重程度和预后的预测价值

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安徽医科大学学报 2014年第9期49卷 1339-1342页

作者：蔡晓培张泓罗庆礼安徽医科大学第一附属医院急诊科合肥230022 安徽病原生物学省级实验室和人兽共患病安徽省重点实验室合肥230032

摘要采用实时荧光定量PCR技术对132例急诊重症监扩室（EICU）患者血浆DNA水平进行定量检测，根据预后将患者分为存活组（95例）、死亡组（37例），分别检测患者入EICU后即刻、24h、48h及1周血浆DNA的量；另选30例健康体检者为健康对照... 详细信息

摘要采用实时荧光定量PCR技术对132例急诊重症监扩室（EICU）患者血浆DNA水平进行定量检测，根据预后将患者分为存活组（95例）、死亡组（37例），分别检测患者入EICU后即刻、24h、48h及1周血浆DNA的量；另选30例健康体检者为健康对照组。与健康对照组相比，EICU患者血浆DNA水平明显升高，各时相点血浆DNA水平升高差异均有统计学意义（P〈0．05）。EICU患者死亡组血浆DNA水平高于存活组，其中24h、48h时相点血浆DNA水平升高差异有统计学意义（P〈0．05）。血浆DNA的受试者工作特征曲线（ROC）曲线下面积（AUC）较乳酸及APACHEⅡ评分的AUC大，其中48h血浆DNA的AUC最大为0．847（95％CI0．648～1．000）。

关键词：外周血血浆DNA 危重症预后

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弓形虫缓殖子期抗原1的原核表达及其多克隆抗体制备与初步应用

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中国病原生物学杂志 2023年第7期18卷 803-807页

作者：幸忆恩吴宏宇蔡亦红安徽医科大学公共卫生学院卫生检验与检疫安徽合肥230032 安徽医科大学病原生物学安徽省重点实验室安徽医科大学人畜共患病安徽高校省级重点实验室安徽医科大学第一临床医学院

目的对弓形虫缓殖子期抗原1(BAG1)基因进行优化、克隆、原核表达,表达产物纯化后免疫小鼠,制备BAG1多克隆抗体,评价重组蛋白的免疫原性,并观察BAG1在虫体内的定位。方法对bag1基因序列进行筛选和优化,利用生物信息学方法分析其编码蛋白... 详细信息

目的对弓形虫缓殖子期抗原1(BAG1)基因进行优化、克隆、原核表达,表达产物纯化后免疫小鼠,制备BAG1多克隆抗体,评价重组蛋白的免疫原性,并观察BAG1在虫体内的定位。方法对bag1基因序列进行筛选和优化,利用生物信息学方法分析其编码蛋白的氨基酸序列结构和功能,预测其免疫原性。将合成的pET28a(+)-bag1质粒转化至BL21感受态细胞中,加入异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)至终浓度l mmol/L,37℃诱导4 h,用HIS标签蛋白纯化试剂盒纯化表达蛋白。取纯化蛋白做SDS-PAGE凝胶电泳分析,用BCA法测定蛋白浓度。取7只BALB/c小鼠,取纯化的BAG1蛋白与等体积的弗氏佐剂按双推法混匀,皮下多点注射免疫小鼠,每鼠每次注射蛋白25μg(第一次使用弗氏完全佐剂,后两次均使用弗氏不完全佐剂,每隔两周免疫一次),末次免疫4 d后摘眼球取血,分离血清,以此为一抗,采用Western blot检测碱性条件下我国流行优势基因型Chinese 1虫株(TgCtwh6)速殖子向缓殖子转化及含有TgCtwh6包囊小鼠脑组织中的BAG1蛋白,间接免疫荧光(IFA)试验检测TgCtwh6虫株碱性诱导成为缓殖子情况。结果预测BAG1含有7个潜在抗原表位,具有良好的免疫原性。Western blot显示,BAG1多克隆抗体能识别在体外碱性培养基诱导的TgCtwh6和小鼠脑组织内形成的TgCtwh6虫株缓殖子;IFA结果显示,BAG1多克隆抗体能识别体外诱导的TgCtwh6缓殖子,且BAG1蛋白主要定位在弓形虫的胞质中。结论成功制备弓形虫BAG1多克隆抗体,该抗体能识别我国优势流行虫株的BAG1蛋白及缓殖子,为我国流行虫株的监测和鉴定提供了良好的手段。

关键词：弓形虫 Chinese 1基因型 BAG1 多克隆抗体

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GRA15_(Ⅱ)在小鼠肿瘤微环境中促进巨噬细胞极化抗肝癌

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中国动物传染病学报 2024年第1期32卷 36-47页

作者：余焱霞张远王艳玲蔡亦红安徽医科大学公共卫生学院卫生检验与检疫合肥230032 安徽医科大学病原生物学安徽省重点实验室合肥230032 安徽医科大学人畜共患病安徽高校省级重点实验室合肥230032

肿瘤相关巨噬细胞(TAM)与肿瘤的转归密切相关,探索刚地弓形虫致密颗粒蛋白分子(GRA15_(Ⅱ))在肿瘤微环境中通过诱导巨噬细胞(Mφ)极化抑制肿瘤生长的作用机制。通过构建肝细胞癌小鼠,注射LV-gra15_(Ⅱ)重组慢病毒后,采用实时荧光定量PC... 详细信息

肿瘤相关巨噬细胞(TAM)与肿瘤的转归密切相关,探索刚地弓形虫致密颗粒蛋白分子(GRA15_(Ⅱ))在肿瘤微环境中通过诱导巨噬细胞(Mφ)极化抑制肿瘤生长的作用机制。通过构建肝细胞癌小鼠,注射LV-gra15_(Ⅱ)重组慢病毒后,采用实时荧光定量PCR、酶联免疫法、免疫组化、流式细胞术和共聚焦显微镜分析肿瘤微环境中的免疫应答情况。结果显示,GRA15_(Ⅱ)可在体外诱导M2样Mφ向M1表型偏移。而且,在荷瘤小鼠注射LV-gra15_(Ⅱ)后,肿瘤体积明显减小,进一步分析发现,在肿瘤微环境中GRA15_(Ⅱ)主要通过TRAF6途径激活NF-κB,诱导TAM从M2向M1偏移,且NO、IL-12、TNF-α的表达上调,发挥Th1免疫应答。GRA15_(Ⅱ)能够抑制肿瘤生长,此研究为肿瘤免疫治疗提供新的思路和策略,为开发新的药物提供实验室基础。

关键词：弓形虫致密颗粒蛋白肝细胞癌巨噬细胞极化

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人巨噬细胞金属弹力酶催化域基因的克隆及表达

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安徽医科大学学报 2007年第3期42卷 269-271页

作者：鲍德明胡乃中沈际佳石海许建明安徽医科大学第一附属医院消化内科安徽省高校消化疾病重点实验室合肥230022 安徽医科大学病原生物学教研室合肥230032

目的克隆人巨噬细胞金属弹力酶催化域(HMEcd)基因,构建原核表达质粒,在大肠杆菌中表达HMEcd基因融合蛋白。方法用RT-PCR方法提取人胃癌组织总RNA并扩增出HMEcd cDNA,克隆入pMD18-T载体,构建克隆载体pMD18-T-HM Ecd,双酶切鉴定及DNA测序... 详细信息

目的克隆人巨噬细胞金属弹力酶催化域(HMEcd)基因,构建原核表达质粒,在大肠杆菌中表达HMEcd基因融合蛋白。方法用RT-PCR方法提取人胃癌组织总RNA并扩增出HMEcd cDNA,克隆入pMD18-T载体,构建克隆载体pMD18-T-HM Ecd,双酶切鉴定及DNA测序正确后再将HMEcd cDNA亚克隆至pET-28a(+)载体,构建原核表达载体pET-28a(+)-HM Ecd,转化大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达,并行SDS-PAGE及Western blotting鉴定。结果RT-PCR获得预期的HMEcd cDNA,双酶切鉴定及DNA测序证实将HM Ecd基因分别正确插入克隆载体和原核表达载体中,SDS-PAGE及Western blotting鉴定证实表达出HMEcd融合蛋白。结论成功表达出HMEcd基因融合蛋白,为进一步功能实验研究奠定基础。

关键词：基质金属蛋白酶类基因表达克隆,分子

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IL-13及其受体在血吸虫病肝纤维化中的作用

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国际医学寄生虫病杂志 2010年第6期37卷 351-355页

作者：杜明占沈继龙吴强胡向阳储德勇安徽医科大学病理学解剖教研室合肥 230032 安徽医科大学病原生物学教研室安徽病原生物学省级实验室人兽共患病安徽省重点实验室合肥230032

血吸虫病肝纤维化是以胶原蛋白为主的细胞外基质（extracellular matrix，ECM）的合成与降解失衡导致胶原过度沉积的结果，其纤维化过程主要是由多条信号转导途径和一系列的细胞因子网络共同调控的。近几年国内外研究发现白细胞介素-13... 详细信息

血吸虫病肝纤维化是以胶原蛋白为主的细胞外基质（extracellular matrix，ECM）的合成与降解失衡导致胶原过度沉积的结果，其纤维化过程主要是由多条信号转导途径和一系列的细胞因子网络共同调控的。近几年国内外研究发现白细胞介素-13（interleukin-13，IL-13）在血吸虫病肝纤维化形成和发展过程中起着重要作用。白细胞介素-13受体α1（interleukin-13receptor α1，IL-13Rα1）作为IL-13功能受体，在肝星状细胞（hapatic stellate cells，HSC）膜表面起促纤维化作用，而IL-13Rα作为IL-13诱饵受体（decoyreceptor），起抑制纤维化的作用。此外，IL-13还可通过替代激活途径激活巨噬细胞发挥促纤维化作用。总之，IL-13及其受体与血吸虫病肝纤维化关系的研究目前已成为热点之一。该文就IL-13及其受体在血吸虫病肝纤维化中作用的最新研究进展做一综述。

关键词： IL-13 IL-13受体α2 肝纤维化血吸虫病

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