检索结果-内蒙古大学图书馆

蚌埠医学院学报 2007年第3期32卷 265-267页

作者：闵宏林沈继龙陈勇李柏青安徽医科大学病原生物学教研室蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室(蚌埠医学院) 安徽蚌埠233030

目的:纯化大肠埃希菌表达的GST-颗粒溶解素融合蛋白,并分析其体外抗菌活性。方法:将IPTG诱导处理后的细菌破碎,分离含有可溶性GST-颗粒溶解素融合蛋白的细菌裂解液,并通过GSH-琼脂糖珠亲和层析柱纯化。同时采用MTT法分析该纯化蛋白的抗... 详细信息

目的:纯化大肠埃希菌表达的GST-颗粒溶解素融合蛋白,并分析其体外抗菌活性。方法:将IPTG诱导处理后的细菌破碎,分离含有可溶性GST-颗粒溶解素融合蛋白的细菌裂解液,并通过GSH-琼脂糖珠亲和层析柱纯化。同时采用MTT法分析该纯化蛋白的抗菌活性。结果:GST-颗粒溶解素融合蛋白能以可溶性形式在大肠埃希菌中表达,采用亲和层析法可获得分子量为44kDa的单一蛋白条带。经抗菌活性分析,表明纯化产物对金黄色葡萄球菌和甲型溶血性链球菌具有显著抑制作用,而对伤寒沙门菌和大肠埃希菌BL21的抗菌活性不明显。结论:成功纯化GST-颗粒溶解素融合蛋白,该蛋白对革兰阳性菌具有高效抗菌活性。

关键词：大肠埃希菌颗粒溶解素融合表达纯化抗菌作用

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联合检测血清抗日本血吸虫IgM和IgG4抗体意义的探讨

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热带病与寄生虫学 2007年第3期5卷 155-156+176页

作者：蒋斌罗庆礼沈继龙教育部重要遗传病共同资源利用重点实验室安徽医科大学病原生物学教研室人兽共患病安徽省重点实验室

目的探讨联合检测血清特异性IgM和IgG4对日本血吸虫病的诊断价值。方法采用间接ELISA法检测急性血吸虫病、慢性血吸虫病及慢性血吸虫病患者治疗12月、24月后特异性IgM和IgG4的抗体变化。结果急性血吸虫病患者特异性IgM和IgG4阳性率分别... 详细信息

目的探讨联合检测血清特异性IgM和IgG4对日本血吸虫病的诊断价值。方法采用间接ELISA法检测急性血吸虫病、慢性血吸虫病及慢性血吸虫病患者治疗12月、24月后特异性IgM和IgG4的抗体变化。结果急性血吸虫病患者特异性IgM和IgG4阳性率分别是100%、87.9%,慢性血吸虫病患者特异性IgM和IgG4阳性率分别是45.5%、68.2%,联合检测急性血吸虫病和慢性血吸虫病患者特异性IgM和IgG4阳性率分别是100%和75.8%,慢性血吸虫病患者治疗12月、24月后特异性IgG4阳性率分别是16%、5%。结论并联检测特异性IgM和IgG4对急性血吸虫病早期诊断及慢性血吸虫病疗效考核具有较好的应用价值。

关键词：日本血吸虫间接ELISA法急性血吸虫病慢性血吸虫病早期诊断疗效考核

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胃癌14-3-3sigma mRNA的表达及其临床意义

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中国肿瘤 2008年第7期17卷 627-628页

作者：王凤超钟政荣姜丛桥胡建国沈继龙蚌埠医学院第一附属医院安徽蚌埠233004 安徽省基因研究重点实验室安徽医科大学病原生物学教研室安徽合肥230032

[目的]探讨胃癌14-3-3sigma mRNA的表达及其与胃癌生物行为学关系。[方法]用半定量RT-PCR检测胃癌患者肿瘤组织和远癌组织标本中的14-3-3sigma mRNA。[结果]39.6%(21/54)的胃癌组织中的14-3-3sigma mRNA出现低表达,但14-3-3sigma mRNA... 详细信息

[目的]探讨胃癌14-3-3sigma mRNA的表达及其与胃癌生物行为学关系。[方法]用半定量RT-PCR检测胃癌患者肿瘤组织和远癌组织标本中的14-3-3sigma mRNA。[结果]39.6%(21/54)的胃癌组织中的14-3-3sigma mRNA出现低表达,但14-3-3sigma mRNA的低表达与患者的性别、年龄以及胃癌的病理分型、分期以及淋巴结转移均无显著性相关。[结论]14-3-3sigmamRNA的低表达与胃癌的发生相关。

关键词：胃肿瘤 14-3-3 sigma RT-PCR

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抗肠道病毒71型外壳蛋白1卵黄抗体的制备和鉴定

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徐州医学院学报 2011年第5期31卷 300-305页

作者：汪六庆胡元生沈继龙刘宜升徐州医学院病原生物学教研室江苏徐州221002 合肥市第一人民医院检验科安徽合肥223002 安徽医科大学病原生物学教研室教育部重要遗传病基因资源利用重点实验室安徽合肥230032

目的克隆肠道病毒71型（EV71）BrCr株外壳蛋白1（VP1）基因,构建原核表达载体PET28a/VP1,表达VP1重组蛋白,以VP1免疫产蛋母鸡,获得抗VP1的鸡免疫球蛋白（IgY）.方法培养Vero细胞,利用Vero细胞增殖肠道病毒EV71 BrCr株,提取病毒总RNA,... 详细信息

目的克隆肠道病毒71型（EV71）BrCr株外壳蛋白1（VP1）基因,构建原核表达载体PET28a/VP1,表达VP1重组蛋白,以VP1免疫产蛋母鸡,获得抗VP1的鸡免疫球蛋白（IgY）.方法培养Vero细胞,利用Vero细胞增殖肠道病毒EV71 BrCr株,提取病毒总RNA,利用RT-PCR扩增出VP1目的基因,目的基因插入克隆载体pGEM-T,提取重组质粒,经BamHⅠ、EcoRⅠ双酶切获得目的基因,插入原核表达载体pET-28a,重组子同时BamHⅠ,EcoRⅠ双酶切和测序鉴定,转化入感受态工程菌*** BL21（DE3）,获得阳性重组工程菌,经IPTG诱导获得表达融合蛋白,试剂盒纯化蛋白,经SDS-PAGE和Western blotting鉴定后,用VP1蛋白免疫开产母鸡,收集鸡蛋,利用EGG stractTM IgY Purification System试剂盒提取卵黄抗体IgY,间接ELISA测滴度,SDS-PAGE和Western blotting验证其表达量和免疫活性.结果本实验成功扩增出肠道病毒EV71 BrCr株VP1基因,获得了含重组表达质粒pET28a/VP1的阳性工程菌株,经IPTG诱导能高效表达VP1蛋白,VP1经SDS-PAGE和Western blotting鉴定后,利用纯化后VP1蛋白免疫产蛋母鸡,提取的IgY经ELISA 鉴定后其滴度为1：104,SDS-PAGE和Western blotting证实为抗VP1的特异性IgY.结论成功的从EV71 BrCr株扩增出VP1基因,构建了PET28a/VP1表达载体,获得高效表达融合蛋白,免疫产蛋母鸡后制备高效价抗VP1蛋白的特异性IgY.

关键词：人肠道病毒71型外壳蛋白1 卵黄抗体 IgY

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气单胞菌感染研究进展

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热带医学杂志 2009年第3期9卷 343-346页

作者：廖远泉钟政荣沈继龙安徽省泾县人民医院检验科宣城242500 安徽病原生物学省级实验室安徽省人兽共患病重点实验室/安徽医科大学合肥230032

新发现的人兽共患病的病原菌——气单胞菌,归类为气单胞菌科(以前隶属弧菌科),气单胞菌属,确认的已有14个气单胞菌表型种和16个基因种。气单胞菌不仅是某些水生生物的重要病原菌,其属中的一些种也可致人类感染性腹泻、急性胃肠炎……,... 详细信息

新发现的人兽共患病的病原菌——气单胞菌,归类为气单胞菌科(以前隶属弧菌科),气单胞菌属,确认的已有14个气单胞菌表型种和16个基因种。气单胞菌不仅是某些水生生物的重要病原菌,其属中的一些种也可致人类感染性腹泻、急性胃肠炎……,还可引起广泛的肠道外感染,如伤口感染、蜂窝织炎、胆囊炎等,以及免疫力低下患者的腹膜炎、败血症等医院内严重感染。病理机制与其毒力因子密切相关,主要的毒力因子有:外毒素(具溶血性、肠毒性和细胞毒性)、胞外酶和粘附因子等。可能是几种毒力因子相互协同或共同作用的结果。气单胞菌耐药性日趋严重,TEM-型β-内酰胺酶是其耐药的主要形式。在感染性疾病中已居显著位置,重视气单胞菌的病原学检测和药敏分析,临床合理应用抗生素,具有重要意义。

关键词：气单胞菌感染毒力因子耐药性

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鲍曼不动杆菌108株β-内酰胺酶检测及耐药分析

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蚌埠医学院学报 2010年第6期35卷 624-626页

作者：郭普乔艳李峰郑晶沈继龙蚌埠医学院第一附属医院检验科安徽蚌埠233004 安徽医科大学病原生物学教研室安徽省病原生物学省级实验室安徽省人兽共患病重点实验室安徽合肥230032 蚌埠医学院第一附属医院感染病科安徽蚌埠233004

目的:分析鲍曼不动杆菌的医院感染分布特点、产β-内酰胺酶情况和耐药性。方法:对临床送检标本中分离出的108株引起医院感染的鲍曼不动杆菌分布及药敏结果进行回顾性分析,并分别采用硝基头孢噻吩纸片法、双纸片协同法、三维试验检测β-... 详细信息

目的:分析鲍曼不动杆菌的医院感染分布特点、产β-内酰胺酶情况和耐药性。方法:对临床送检标本中分离出的108株引起医院感染的鲍曼不动杆菌分布及药敏结果进行回顾性分析,并分别采用硝基头孢噻吩纸片法、双纸片协同法、三维试验检测β-内酰胺酶、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和头孢菌素酶。结果:鲍曼不动杆菌在重症监护治疗病房、神经外科的检出率分别为63.89%、11.11%;感染部位以呼吸道和手术切口为主,分别为77.78%和12.96%。该菌对临床常用抗生素有不同程度的耐药,发现多重耐药菌96株(88.89%)。108株鲍曼不动杆菌中共检出产ESBLs 11株,阳性率为10.19%;头孢菌素酶78株,阳性率为72.22%;产β-内酰胺酶阳性率为100.00%。结论:鲍曼不动杆菌是医院感染重要的条件致病菌,其对抗生素耐药率高,且多重耐药。产β-内酰胺酶为鲍曼不动杆菌耐药的主要原因之一。临床要重视合理使用抗生素,减少多重耐药菌株的产生。

关键词：鲍曼不动杆菌 β-内酰胺酶耐药

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红细胞碎片对白细胞计数结果的影响

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临床输血与检验 2005年第1期7卷 15-17页

作者：钟政荣沈继龙李兴武张凡 230032 合肥安徽医科大学病原生物学教研室安徽省基因研究重点实验室蚌埠医学院附属医院检验科

目的分析在CD-1700型血液分析仪上作白细胞(WBC)计数检测时,在35 fl线附近出现一匕首样峰的异常白细胞直方图和不准确的白细胞计数结果的原因.方法对20例(肝病患者18例,新生儿2例)异常白细胞直方图的可能原因进行逐一分析;采用制片染色... 详细信息

目的分析在CD-1700型血液分析仪上作白细胞(WBC)计数检测时,在35 fl线附近出现一匕首样峰的异常白细胞直方图和不准确的白细胞计数结果的原因.方法对20例(肝病患者18例,新生儿2例)异常白细胞直方图的可能原因进行逐一分析;采用制片染色作显微镜检查,用稀释液洗涤红细胞后再用仪器检测和进行红细胞渗透脆性试验,同时对这些标本用显微镜目测法计数WBC,并与计数法结果进行配对t检验.结果出现异常直方图的WBC计数结果与目测法结果的差异有显著性(P＜0.01),仪器法结果显著增高,且这些标本的红细胞渗透脆性均显著降低. 结论白细胞计数假性增高与红细胞膜脆性变化密切相关.建议出现异常白细胞直方图时,须用显微镜目测法计数白细胞.

关键词：红细胞膜脆性直方图白细胞计数

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血清前白蛋白检测在晚期血吸虫病诊断中的临床意义

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临床输血与检验 2006年第3期8卷 193-194页

作者：罗江龙罗庆礼方静沈继龙安徽省东至县血防专科医院 247230 安徽医科大学教育部省部共建重点实验室病原生物学教研室

目的探讨晚期血吸虫病(简称晚血)患者血清前白蛋白(PA)的变化及其对晚血的诊断价值。方法采用免疫比浊法检测177例晚血患者血清PA水平;同时采用溴甲酚绿法测定血清白蛋白(ALB),比较不同肝损害程度患者血清PA和ALB的水平及其差异。结果血... 详细信息

目的探讨晚期血吸虫病(简称晚血)患者血清前白蛋白(PA)的变化及其对晚血的诊断价值。方法采用免疫比浊法检测177例晚血患者血清PA水平;同时采用溴甲酚绿法测定血清白蛋白(ALB),比较不同肝损害程度患者血清PA和ALB的水平及其差异。结果血清PA水平在不同的血吸虫性肝损害程度的差异均有显著性(P<0.05);而血清ALB水平在血吸虫性肝损害程度级与级间的差异无显著性(P>0.05),而在级与级间的差异有显著性(P<0.05)。结论检测PA较ALB能更灵敏地反映血吸虫性肝损害程度,并对晚血肝损害的早期诊断、病情判断和预后有一定的参考价值。

关键词：前白蛋白白蛋白晚期血吸虫病免疫比浊

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大鼠CD4~＋CD25-T细胞的Foxp3基因转染及其表达

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中国组织工程研究 2012年第18期16卷 3337-3340页

作者：黄洋李永翔沈继龙罗庆礼陆威霍星星安徽医科大学第一附属医院安徽省合肥市230032 安徽病原生物学省级实验室(安徽医科大学) 人兽共患病安徽省重点实验室(安徽医科大学)安徽省合肥市230032

背景:调节性T细胞在维持机体免疫应答稳态和免疫耐受方面具有非常重要的作用,但外周血中CD4+CD25+调节性T细胞含量极低,且增殖能力较差。目的:以携带Foxp3基因的慢病毒EGFP+载体转染大鼠CD4+CD25-T细胞,观察其在大鼠CD4+CD25-T细胞中的... 详细信息

背景:调节性T细胞在维持机体免疫应答稳态和免疫耐受方面具有非常重要的作用,但外周血中CD4+CD25+调节性T细胞含量极低,且增殖能力较差。目的:以携带Foxp3基因的慢病毒EGFP+载体转染大鼠CD4+CD25-T细胞,观察其在大鼠CD4+CD25-T细胞中的表达。方法:以免疫磁珠两步法分选大鼠CD4+CD25-T细胞,用携带大鼠Foxp3基因的慢病毒载体体外转染分选的细胞,以转染Foxp3基因的CD4+CD25-T细胞为实验组,EGFP空白质粒组及CD4+CD25-T细胞为阴性对照组,CD4+CD25+T细胞为阳性对照组。荧光显微镜和RT-PCR分别从蛋白和mRNA水平检测Foxp3基因的表达。结果与结论:成功完成了免疫磁珠的分选,获得了纯度较高的CD4+CD25-T细胞和CD4+CD25+T细胞,细胞存活率为(94±2)%,慢病毒转染的CD4+CD25-T细胞高表达Foxp3基因。表明以携带Foxp3基因的慢病毒载体系统可有效介导Foxp3基因在大鼠CD4+CD25-T细胞中高表达。

关键词：调节性T细胞 CD4+CD25-T细胞慢病毒 Foxp3 磁珠分选

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IL-13及其诱饵受体IL-13Rα2在血吸虫病肝纤维化中的作用

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国际医学寄生虫病杂志 2008年第5期35卷 260-264页

作者：李静储德勇沈继龙安徽医科大学病原生物学教研室人兽共患病安徽省重点实验审教育部省部共建基因资源利用重点实验室合肥230032

虽然目前对血吸虫病肝纤维化的分子机制尚不太明确,但许多研究表明,细胞因子IL-13对血吸虫病肝纤维化起关键性的促进作用,而其IL-13α2受体(IL-13Rα2)是一个诱饵蛋白,起重要的抑制作用.这些研究结果为今后更全面、明确地了解血吸虫病... 详细信息

虽然目前对血吸虫病肝纤维化的分子机制尚不太明确,但许多研究表明,细胞因子IL-13对血吸虫病肝纤维化起关键性的促进作用,而其IL-13α2受体(IL-13Rα2)是一个诱饵蛋白,起重要的抑制作用.这些研究结果为今后更全面、明确地了解血吸虫病肝纤维化的分子机制提供了极其重要的线索.为阐明诱饵受体IL-13Rα2与血吸虫病肝纤维化之间的关系,该文综述了IL-13以及IL-13Rα2在血吸虫病肝纤维化形成及其信号转导中的作用.

关键词：血吸虫病肝硬化白细胞介素13 白细胞介素13Rα2 诱饵受体

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