检索结果-内蒙古大学图书馆

赣南医学院学报 2023年第1期43卷 17-26页

作者：马俊杰安韶光陆进张浩轩蚌埠医学院蚌埠医学院人体解剖学教研室数字医学与智慧健康安徽省重点实验室安徽蚌埠233030

目的:基于生物信息学方法分析头颈鳞状细胞癌(Head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)关键基因PLAU与MMP1及其临床预后意义。方法:首先,通过基因表达总库(Gene Expression Omnibus,GEO)的GEO2R筛选4组HNSCC基因芯片数据的差异表... 详细信息

目的:基于生物信息学方法分析头颈鳞状细胞癌(Head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)关键基因PLAU与MMP1及其临床预后意义。方法:首先,通过基因表达总库(Gene Expression Omnibus,GEO)的GEO2R筛选4组HNSCC基因芯片数据的差异表达基因(Differentially expressed genes,DEGs),并利用Metascape数据库对DEGs进行基因本体论(Gene Ontology,GO)功能注释和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Gene and Genome,KEGG)通路富集分析;其次,采用String数据库和Cytoscape软件CytoHubba插件的MCC算法进行蛋白互作网络(Protein-protein interaction,PPI)分析和HUB基因筛选;再次,利用GEPIA数据库分析前10个HUB基因表达量与HNSCC患者预后和临床分期关系;最后,利用TIMER、GEPIA和TISIDB数据库分析关键基因与免疫细胞浸润水平的关系以及临床生信之家分析关键基因与通路关系。结果:筛选出24个DEGs,其GO功能主要富集在细胞间黏附和血管发育等过程,KEGG主要富集在松弛素信号通路和蛋白质消化吸收等通路;前10个HUB基因仅PLAU和MMP1与HNSCC患者预后显著相关,且在HNSCC中高表达,并与B细胞和CD8+T细胞浸润水平呈负相关,但仅B细胞浸润水平与HNSCC患者生存预后显著相关;B细胞的浸润水平分别与PLAU和MMP1基因的高倍扩增和臂水平缺失的拷贝数改变有关;PLAU和MMP1主要与EMT标记基因和ECM相关基因等通路相关。结论:PLAU和MMP1可作为HNSCC关键基因,有望成为HNSCC靶向治疗位点。

关键词：头颈鳞状细胞癌 PLAU MMP1 免疫细胞浸润 B细胞

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乳腺癌关键基因SDC1的临床预后意义及其与M1型巨噬细胞相关性分析

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齐齐哈尔医学院学报 2023年第11期44卷 1001-1010页

作者：路帅李文杰徐紫薇陶恒张磊陆进蚌埠医学院临床医学院安徽蚌埠233030 蚌埠医学院人体解剖学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院第二附属医院安徽蚌埠233030 蚌埠医学院数字医学与智慧健康安徽省重点实验室安徽蚌埠233030

目的通过生物信息学方法分析乳腺癌(Breast cancer,BC)关键基因SDC1,并分析其与M1型巨噬细胞的相关性。方法从GEO数据库下载3组BC芯片GSE42568、GSE71053和GSE8977数据,筛选其差异表达基因(Differential Expression Genes,DGEs),并进行基因本体(Gene Ontology,GO)功能注释和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Gene and Genome,KEGG)通路富集分析。利用STRING数据库和Cytoscape软件筛选DEGS中HUB基因。从癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)下载BC的RNAseq数据和相关临床信息,利用R语言对HUB基因进行单因素和多因素COX回归分析、列线图绘制以及关键基因的免疫检查点分析和风险预后分析;通过UALCAN与GEPIA数据库验证HUB基因的表达和预后;利用TIMER及GEPIA2021数据库进行关键基因与巨噬细胞相关性分析。结果共得到197个DEGs,其GO功能的生物学过程(BP)与细胞黏附、凋亡过程和细胞分化等有关,细胞成分(CC)主要富集在细胞外小体、细胞表面和染色质等位置,分子功能(MF)与锌离子结合、转录因子活性及整合素结合等相关,而KEGG通路主要富集在PI3K-Akt信号通路、黏着斑以及癌症中的蛋白聚糖等通路。通过逐步筛选得到BC的关键HUB基因SDC1,其在BC组织中高表达,且不利于患者预后。SDC1与SIGLEC15、IDO1、CD274,HAVCR2、CTLA4和PDCD1LG2等免疫检查点基因显著正相关(P<0.05),且也与巨噬细胞(r=0.189;P<0.05)以及M1型巨噬细胞(r=0.072;P<0.05)显著相关,同时也与M1型巨噬细胞标志物NOS2、CXCL10、IRF5、IL1A、IL1B、TLR2、TLR4、CD80及CD86等显著相关(P<0.05)。此外,高表达的M1型巨噬细胞显著利于BC患者的预后(P<0.05)。结论SDC1是BC的关键基因,并与M1型巨噬细胞显著相关,可成为BC潜在的免疫治疗靶点。

关键词：乳腺癌生物信息学巨噬细胞免疫分析

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枸杞多糖促进HL-60细胞的吞噬功能

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山西医科大学学报 2024年第1期55卷 44-49页

作者：庞洪源李帆华梦晴宋传旺蚌埠医学院检验医学院免疫教研室蚌埠233030 慢性疾病免疫学基础与临床安徽省重点实验室

目的探究枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharide,LBP)对人中性粒细胞株HL-60细胞吞噬功能的影响及其相关机制。方法采用不同浓度(0,1,10,100,200,500μg/mL)LBP刺激HL-60细胞24 h后,通过CCK-8和流式细胞术检测HL-60细胞的存活率和吞... 详细信息

目的探究枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharide,LBP)对人中性粒细胞株HL-60细胞吞噬功能的影响及其相关机制。方法采用不同浓度(0,1,10,100,200,500μg/mL)LBP刺激HL-60细胞24 h后,通过CCK-8和流式细胞术检测HL-60细胞的存活率和吞噬功能变化情况,通过免疫印迹法(Western blot)检测HL-60细胞磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)信号通路Akt磷酸化情况。阻断实验分为对照组、LBP组、LBP+PI3K抑制剂(Wortmannin)组。LBP组以200μg/mL LBP单独刺激HL-60细胞24 h;LBP+Wortmannin组先以1μmol/L Wortmannin预刺激HL-60细胞2 h,再加入200μg/mL LBP继续作用24 h后检测HL-60细胞吞噬功能情况。为了检测HL-60细胞表面受体的表达情况,实验分为对照组和LBP组(200μg/mL),采用流式细胞术检测CD36、CD204、CD209、胶原样结构巨噬细胞受体(macrophage receptor with collagenous structure,MARCO)和Dectin吞噬相关受体表达情况。结果不同剂量LBP处理后,HL-60细胞的存活率未发生明显变化(P>0.05);与0μg/mL LBP比较,1~200μg/mL LBP刺激HL-60细胞吞噬百分率明显增加(P<0.01);与对照组比较,200μg/mL LBP组磷酸化Akt表达增加(P<0.05)。PI3K阻断实验表明,与LBP组比较,LBP+Wortmannin组LBP促进HL-60吞噬***的效应部分抑制(P<0.05)。与对照组比较,LBP组HL-60细胞MARCO受体表达水平明显增加(P<0.05),而CD36、CD204、CD209和Dectin无明显变化(P>0.05)。结论LBP通过PI3K-Akt信号通路促进HL-60细胞吞噬***,这种吞噬功能的提高可能与MARCO受体表达上调有关。

关键词：枸杞多糖 HL-60细胞吞噬作用 PI3K-Akt信号通路 MARCO受体

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紫花前胡苷通过抑制肠上皮细胞焦亡改善2,4,6-三硝基苯磺酸诱导的小鼠实验性结肠炎

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南方医科大学学报 2025年第2期45卷 261-268页

作者：黄菊殷丽霞牛民主耿志军左芦根李静胡建国蚌埠医科大学第一附属医院中心实验室安徽蚌埠233003 蚌埠医科大学第一附属医院炎症相关性疾病基础与转化研究安徽省重点实验室安徽蚌埠233003 蚌埠医科大学第一附属医院检验科安徽蚌埠233003 蚌埠医科大学第一附属医院胃肠外科安徽蚌埠233003 蚌埠医科大学检验医学院免疫学教研室安徽蚌埠233000

目的探讨天然植物单体紫花前胡苷(Nod)对克罗恩病(CD)样结肠炎的影响及其作用机制。方法建立脂多糖和三磷酸腺苷(ATP)联合诱导的结肠类器官焦亡模型,通过检测焦亡关键调节因子、通透性和促炎因子,探讨Nod对细胞焦亡、肠道屏障功能和炎... 详细信息

目的探讨天然植物单体紫花前胡苷(Nod)对克罗恩病(CD)样结肠炎的影响及其作用机制。方法建立脂多糖和三磷酸腺苷(ATP)联合诱导的结肠类器官焦亡模型,通过检测焦亡关键调节因子、通透性和促炎因子,探讨Nod对细胞焦亡、肠道屏障功能和炎症反应的影响。以2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)干预小鼠为CD动物模型,通过检测体质量、DAI评分、组织病理学分析、炎症评分、肠屏障功能和肠上皮细胞焦亡,探讨Nod对CD样结肠炎的治疗效果。通过网络药理学和体内、体外实验验证探索Nod保护肠上皮细胞焦亡的潜在机制。结果脂多糖和ATP诱导的结肠类器官经Nod干预后显著抑制NLRP3、GSDMD-N、cleaved caspase-1和caspase-11的表达,改善肠道FITC-dextran(FD4,4000)通透性,以及降低IL-1β和IL-18水平(P<0.05)。在TNBS诱导的结肠炎小鼠中,Nod治疗后能缓解小鼠体质量下降幅度、降低DAI评分、改善炎症细胞浸润和炎症评分(P<0.05),并降低血清中FD4、I-FABP的含量与细菌移位至肠系膜淋巴结、脾和肝脏中比例(P<0.05)。Nod可抑制小鼠肠黏膜中NLRP3、GSDMD-N、cleaved caspase-1和caspase-11的表达(P<0.05)。网络药理学预测分析显示,Nod抗结肠炎可能与PI3K/Akt通路有关;体内外实验证实,Nod抑制PI3K/Akt通路的激活,且PI3K/Akt通路的激活剂(IGF-1)逆转了Nod对肠上皮细胞焦亡和肠屏障功能的保护作用(P<0.05)。结论Nod至少部分通过抑制PI3K/Akt信号传导拮抗肠上皮细胞的焦亡,从而保护肠屏障功能和改善CD样结肠炎,有望成为一种新的CD治疗药物。

关键词：克罗恩病紫花前胡苷细胞焦亡肠上皮细胞 PI3K/Akt

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热休克蛋白70促进急性肺损伤小鼠肺部炎症反应

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华中科技大学学报（医学版） 2022年第2期51卷 152-157页

作者：陈艳王梓璇冀彩丽华梦晴宋传旺蚌埠医学院检验医学院免疫学教研室慢性疾病免疫学基础与临床安徽省重点实验室蚌埠233030

目的探讨热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)对急性肺损伤(acute lung injury,ALI)小鼠发病的影响及其相关机制。方法构建ALI模型小鼠,免疫印迹法检测肺组织中HSP70的表达情况,酶联免疫法检测支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar ... 详细信息

目的探讨热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)对急性肺损伤(acute lung injury,ALI)小鼠发病的影响及其相关机制。方法构建ALI模型小鼠,免疫印迹法检测肺组织中HSP70的表达情况,酶联免疫法检测支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中HSP70的分泌情况。ALI小鼠经鼻滴HSP70抗体(anti-HSP70)后,抽取BALF,检测其中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)、白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)和蛋白的含量,并计数中性粒细胞的数目;获取肺组织进行苏木精-伊红染色并计算肺湿/干重比。以LPS刺激小鼠肺泡上皮细胞株MLE-12细胞,酶联免疫法检测培养上清液中TNF-α和IL-1β的含量。不同浓度的HSP70(10~500 ng/mL)刺激小鼠肺泡上皮细胞(alveolar epithelial cells,AECs)后,流式细胞术检测AEC吞噬凋亡细胞的情况。结果与正常对照组小鼠相比,ALI小鼠肺组织中HSP70的表达及BALF中HSP70的分泌均增加(均P<0.05)。与ALI组小鼠相比,经anti-HSP70鼻滴治疗后的ALI小鼠,其BALF中TNF-α、IL-6、IL-1β和蛋白的含量均降低(均P<0.05),中性粒细胞数目减少(P<0.05);其肺组织中炎性细胞浸润减少,肺湿/干重比降低(P<0.05)。与LPS刺激组相比,anti-HSP70+LPS组MLE-12细胞培养上清液中TNF-α和IL-1β含量均减少(均P<0.05)。与未刺激组相比,10~500 ng/mL HSP70刺激组MLE-12细胞吞噬凋亡细胞百分率明显降低,其中以200 ng/mL HSP70刺激组降低最为明显(P<0.01);与未刺激组相比,200 ng/mL HSP70刺激的小鼠原代肺泡上皮细胞吞噬率降低(P<0.01)。结论HSP70促进ALI小鼠肺部炎症反应,这一效应可能与HSP70降低肺泡上皮细胞吞噬凋亡细胞的功能相关。

关键词：热休克蛋白70 急性肺损伤肺泡上皮细胞吞噬功能

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安徽省蚌埠市二甲以上医院弥漫性血管内凝血患病情况及影响因素分析

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医学理论与实践 2023年第11期36卷 1953-1954页

作者：徐静怡张小楠赵云霞葛荣靖张浩然赵士弟蚌埠医学院临床医学院安徽省蚌埠市233000 蚌埠医学院病理生理学教研室蚌埠医学院第一附属医院

目的:调查分析安徽省蚌埠市4所二甲以上医院弥漫性血管内凝血(DIC)的患病情况、病因、死亡率及相关影响因素,为临床对DIC的预防和治疗提供依据。方法:采用2001年ISTH SSC DIC专业委员会及《弥散性血管内凝血诊断中国专家共识(2017年版)... 详细信息

目的:调查分析安徽省蚌埠市4所二甲以上医院弥漫性血管内凝血(DIC)的患病情况、病因、死亡率及相关影响因素,为临床对DIC的预防和治疗提供依据。方法:采用2001年ISTH SSC DIC专业委员会及《弥散性血管内凝血诊断中国专家共识(2017年版)》修订的DIC诊断标准,回顾性调查分析2018年1月—2022年10月4所二甲以上医院住院人数及死亡率、DIC的患病情况及病因、病死率及相关影响因素等。结果:共收治住院患者1135906例,死亡8035例,病死率为0.71%。其中DIC患者319例,占同期住院患者的0.03%;DIC患者死亡占58.31%。DIC患者其致病主要因素是感染,占67.71%,其次是创伤、肿瘤、产科意外等。单纯DIC的患者死亡率为17.39%,DIC患者累及器官发生功能障碍数目越多,死亡率越高。结论:DIC因感染出现较高的患病率,并易诱发多器官功能障碍导致临床高死亡率。因此针对相关影响因素制定防治策略,以期早期诊断和早期干预治疗。

关键词：弥漫性血管内凝血患病情况影响因素安徽蚌埠

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重组日本血吸虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂对小鼠急性肝衰竭相关急性肾损伤的保护作用

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中国血吸虫病防治杂志 2023年第4期35卷 331-339页

作者：薛媛杨小迪张华平张婷婷陈伟豪常欣悦王艳红山西医科大学微生物与免疫学教研室山西晋中030600 蚌埠医学院微生物学与寄生虫学系/安徽省感染与免疫重点实验室山西医科大学病理生理教研室

目的探究重组日本血吸虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂(rSj-Cys)对急性肝衰竭所致急性肾损伤的保护作用及其机制,为急性肾损伤临床治疗提供科学依据。方法将24只雄性C57BL/6J小鼠(6~8周龄)随机分为正常对照组、rSj-Cys对照组、脂多糖(LPS)-D-氨... 详细信息

目的探究重组日本血吸虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂(rSj-Cys)对急性肝衰竭所致急性肾损伤的保护作用及其机制,为急性肾损伤临床治疗提供科学依据。方法将24只雄性C57BL/6J小鼠(6~8周龄)随机分为正常对照组、rSj-Cys对照组、脂多糖(LPS)-D-氨基半乳糖(D-GaIN)模型组和LPS/D-GaIN+rSj-Cys治疗组,每组6只小鼠。LPS/D-GaIN组和LPS/D-GaIN+rSj-Cys组小鼠均腹腔注射LPS(10μg/kg)和D-GaIN(700 mg/kg)造模;造模后30 min,LPS/D-GaIN+rSj-Cys组及rSj-Cys对照组小鼠均腹腔注射rSj-Cys(1.25 mg/kg),正常对照组小鼠注射等体积PBS。造模6 h后,处死各组小鼠,收集小鼠血清及肾组织,检测血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)含量。苏木精-伊红(HE)染色观察各组小鼠肾脏组织病理形态,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清炎性因子肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6表达,采用免疫组化法检测肾组织炎性因子和焦亡相关蛋白表达水平,采用免疫印迹法检测肾组织焦亡相关蛋白和核因子-κB(NF-κB)信号通路蛋白表达水平。结果HE染色显示,正常对照组和rSj-Cys对照组小鼠肾脏结构未见明显异常,LPS/D-GaIN组小鼠肾组织出现肾小管损伤,而LPS/D-GaIN+rSj-Cys治疗组小鼠肾小管损伤减轻。4组小鼠血清Cr(F=46.33,P<0.001)、BUN(F=128.60,P<0.001)、TNF-α(F=102.00,P<0.001)和IL-6水平(F=202.10,P<0.001)差异均有统计学意义,LPS/D-GaIN+rSj-Cys治疗组小鼠血清Cr[(85.35±32.05)μmol/L]、BUN[(11.90±2.76)mmol/L]、TNF-α[(158.27±15.83)pg/mL]和IL-6水平[(56.72±4.37)pg/mL]均低于LPS/D-GaIN组(P均<0.01)。4组小鼠肾组织TNF-α(F=24.16,P<0.001)和IL-10表达水平(F=15.07,P<0.01)差异均有统计学意义;LPS/D-GaIN+rSj-Cys治疗组肾组织TNF-α表达水平[(106.50±16.57)%]低于LPS/D-GaIN组(P<0.01),IL-10表达水平[(91.83±5.23)%]高于LPS/D-GaIN组(P<0.01)。免疫印迹法及免疫组化染色结果均表明,各组小鼠肾脏焦亡相关蛋白NLRP3(F=24.57、30.72,P均<0.001)、IL-1β(F=19.24、22.59,P均<0.001)和IL-18表达水平(F=16.60、19.30,P均<0.001)差异均有统计学意义,LPS/D-GaIN+rSj-Cys治疗组小鼠NLRP3、IL-1β和IL-18蛋白表达水平均低于LPS/D-GaIN组(P均<0.05)。各组小鼠肾脏NF-κB信号通路相关蛋白p-NF-κB p-p65/NF-κB p65(F=71.88,P<0.001)、TLR4(F=45.49,P<0.001)和p-IκB/IκB表达水平(F=60.87,P<0.001)差异均有统计学意义,LPS/D-GaIN+rSj-Cys治疗组小鼠肾脏NF-κB信号通路相关蛋白表达水平均低于LPS/D-GaIN组(P均<0.01)。结论rSj-Cys可通过抑制炎症和焦亡下调NF-κB通路,从而发挥对急性肝衰竭所致的急性肾损伤的保护作用。

关键词：日本血吸虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂急性肝衰竭急性肾损伤焦亡核因子κB

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细粒棘球蚴囊液蛋白组分分析

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中国血吸虫病防治杂志 2021年第5期33卷 476-482,539页

作者：王舒颖杨小迪高宏宇邢敬雨胡琪黄婷婷吴培赵艺婷刘浩伟刘为玥王会娜周瑞褚亮蚌埠医学院第一附属医院儿科蚌埠233000 安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠医学院病原生物学教研室蚌埠医学院第二附属医院普外科

目的利用鸟枪法分析细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus)囊液蛋白(hydatid cyst fluid protein,HCFP)组分,寻找其中具有潜在调控免疫失调性疾病功能的活性组分。方法无菌收集细粒棘球蚴病患者肝囊肿中的细粒棘球蚴囊液,采用鸟枪法进行... 详细信息

目的利用鸟枪法分析细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus)囊液蛋白(hydatid cyst fluid protein,HCFP)组分,寻找其中具有潜在调控免疫失调性疾病功能的活性组分。方法无菌收集细粒棘球蚴病患者肝囊肿中的细粒棘球蚴囊液,采用鸟枪法进行液相色谱-串联质谱鉴定,采用Max Quant 1.6.1.0软件进行数据库检索。利用基因本体论(Gene Ontol-ogy,GO)对已鉴定的蛋白质从细胞组分、分子功能和生物学功能三个方面进行分类。结果经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离的细粒棘球蚴囊液蛋白条带相对分子量为25~70 k Da,质谱分析共获得37个蛋白,其中已鉴定蛋白32种、未知蛋白5种。已初步发现至少有4种蛋白具有潜在调节免疫失调性疾病作用,即抗原B、谷胱甘肽S-转移酶、硫氧还蛋白过氧化物酶和苹果酸脱氢酶。GO富集分析显示,已鉴定蛋白具有149种分子功能,参与341种生物学过程。结论细粒棘球蚴囊液蛋白成分复杂多样,从已知蛋白中初步筛选出4种与调节免疫失调性疾病潜在相关的蛋白。

关键词：细粒棘球蚴囊液蛋白质组鸟枪法免疫失调性疾病

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miR-125b-2-3p表达对鼻咽癌细胞HNE1增殖和凋亡的影响

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山西医科大学学报 2023年第9期54卷 1192-1199页

作者：陶露汤迎凯韦卓利项平蚌埠医学院第一附属医院中心实验室蚌埠233000 蚌埠医学院人体解剖学教研室蚌埠医学院组织移植安徽省重点实验室

目的探讨miR-125b-2-3p表达对鼻咽癌细胞HNE1增殖和凋亡的影响。方法荧光定量PCR检测miR-125b-2-3p在人永生化鼻咽上皮细胞NP69和鼻咽癌细胞中的表达。荧光定量PCR检测上调和下调miR-125b-2-3p表达转染效率。实验分为control组(未处理)... 详细信息

目的探讨miR-125b-2-3p表达对鼻咽癌细胞HNE1增殖和凋亡的影响。方法荧光定量PCR检测miR-125b-2-3p在人永生化鼻咽上皮细胞NP69和鼻咽癌细胞中的表达。荧光定量PCR检测上调和下调miR-125b-2-3p表达转染效率。实验分为control组(未处理)、mimics NC组(Lip 2000+mimics NC)、miR-125b-2-3p mimics组(Lip 2000+miR-125b-2-3p mimics)、inhibitor NC组(Lip 2000+inhibitor NC)和miR-125b-2-3p inhibitor组(Lip 2000+miR-125b-2-3p inhibitor)。CCK-8实验、细胞集落形成实验和活细胞/死细胞双染色实验检测细胞增殖的情况;流式细胞术检测细胞凋亡情况;DAPI细胞核染色检测细胞核的形态变化;线粒体膜电位检测细胞早期凋亡情况。结果与人永生化鼻咽上皮细胞NP69相比,鼻咽癌细胞中miR-125b-2-3p的表达较高(P<0.05)。与control组和mimics NC组相比,miR-125b-2-3p mimics组miR-125b-2-3p表达上调(P<0.01);与control组和inhibitor NC组相比,miR-125b-2-3p inhibitor组miR-125b-2-3p表达下调(P<0.01)。与mimics NC组相比,miR-125b-2-3p mimics组细胞增殖能力较强(P<0.01),细胞凋亡能力较弱(P<0.01),线粒体膜电位较高(P<0.01);相较于inhibitor NC组,miR-125b-2-3p inhibitor组细胞增殖能力被抑制(P<0.01),细胞凋亡能力较强(P<0.01),核固缩核碎裂较多,线粒体膜电位较低(P<0.05)。结论下调miR-125b-2-3p能抑制鼻咽癌细胞HNE1的增殖,促进细胞的凋亡。

关键词： miR-125b-2-3p 鼻咽癌细胞增殖细胞凋亡 HNE1

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结核分枝杆菌PPE59蛋白的表达、纯化和生物信息学分析

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长治医学院学报 2023年第1期37卷 1-7页

作者：王楚彤袁美丽魏婧李敏英许涛汪洪涛蚌埠医学院检验医学院检验医学实验中心安徽蚌埠233030 蚌埠医学院检验医学院免疫学教研室蚌埠医学院检验医学院临床检验诊断学教研室蚌埠医学院慢性疾病免疫学基础与临床安徽省重点实验室

目的:构建结核分枝杆菌pET28a-PPE59原核表达载体,异丙基-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达和纯化获得PPE59蛋白;同时对PPE59蛋白进行生物信息学分析,预测其可能结构和功能。方法:以H37Rv基因组为模板扩增获得PPE59基因,利用同源重组将其克... 详细信息

目的:构建结核分枝杆菌pET28a-PPE59原核表达载体,异丙基-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达和纯化获得PPE59蛋白;同时对PPE59蛋白进行生物信息学分析,预测其可能结构和功能。方法:以H37Rv基因组为模板扩增获得PPE59基因,利用同源重组将其克隆至原核表达载体pET28a,后转化至大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,采用Ni~+-NTA亲和层析柱对PPE59蛋白进行纯化,获得重组PPE59蛋白并进行鉴定。使用Protparam、NetPhos 3.1 Servera、ABCpred、SYEPEITHI等软件对PPE59蛋白的理化性质、磷酸化位点和T、B细胞表位等进行预测和分析。结果:成功构建pET28a-PPE59重组载体,经诱导表达和纯化,成功获得PPE59蛋白;生物信息学预测发现,PPE59有2个开放阅读框,31个磷酸化位点,并含有多个T细胞和B细胞抗原表位。结论:成功构建pET28a-PPE59表达载体,获得高纯度PPE59蛋白,且被抗His-tag小鼠单抗特异性识别;PPE59具有大量的磷酸化位点及丰富的T、B细胞表位,可作为结核病疫苗的重要候选蛋白之一。

关键词：结核分枝杆菌 PPE59蛋白原核表达生物信息学

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