检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2017年第10期33卷 1385-1391页

作者：贾强杨锐刘小粉王其一卢浩宇马善峰蚌埠医学院生理学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院临床医学系安徽蚌埠233030

目的观察外源性硫化氢的供体硫氢化钠(Na HS)对糖尿病大鼠心肌硫氧还蛋白(Trx)系统的影响。方法雄性SD大鼠随机分为正常组、糖尿病组、(14、28、56)μmol/kg Na HS处理组,每组6只。采用一次性腹腔注射链脲佐菌素的方法制备1型糖尿病大... 详细信息

目的观察外源性硫化氢的供体硫氢化钠(Na HS)对糖尿病大鼠心肌硫氧还蛋白(Trx)系统的影响。方法雄性SD大鼠随机分为正常组、糖尿病组、(14、28、56)μmol/kg Na HS处理组,每组6只。采用一次性腹腔注射链脲佐菌素的方法制备1型糖尿病大鼠模型。造模成功4周后,Na HS处理组大鼠每天分别腹腔注射Na HS溶液(14、28、56)μmol/kg。处理4周后,测空腹血糖值(FBG)和左心室动力学指标;HE染色观察心肌病变情况、透射电镜观察心肌超微结构变化;利用试剂盒检测血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)和肌酸激酶MB同工酶(CK-MB),ELISA检测血清白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;利用试剂盒检测心肌组织总抗氧化能力(T-AOC)、脂质过氧化物(LPO)和丙二醛(MDA)含量;反转录PCR检测心肌组织血红素加氧酶1(HO-1)mRNA水平,Western blot法检测心肌组织Trx、Trx相互作用蛋白(TXNIP)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶2(NOX2)的蛋白水平。结果与正常组比较,糖尿病组左心室收缩和舒张功能均降低,心肌组织形态和心肌细胞超微结构损伤明显;FBG、LDH、CK、CK-MB、IL-1β、IL-6、TNF-α、LPO和MDA均明显增高,T-AOC明显下降;心肌Trx蛋白表达明显降低,HO-1 mRNA、TXNIP和NOX2蛋白表达明显增加。与糖尿病组比较,各剂量Na HS处理组中左心室收缩和舒张功能、心肌组织形态和心肌细胞超微结构均得到改善;LDH、CK、CK-MB、IL-1β、IL-6、TNF-α、LPO和MDA均下降,T-AOC增高;心肌组织HO-1 mRNA和Trx蛋白表达增强,TXNIP和NOX2蛋白表达降低。结论 Na HS处理可以减轻糖尿病大鼠心肌损伤,其机制可能与激活Trx系统,增强抗氧化能力及抑制炎症因子释放相关。

关键词：硫化氢糖尿病心肌硫氧还蛋白血红素加氧酶1(HO-1)

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硫化氢对1型糖尿病大鼠肾诱导型一氧化氮合酶的影响

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中南大学学报（医学版） 2017年第4期42卷 389-394页

作者：杨锐贾强马善峰崔淑俊刘小粉王元元高琴蚌埠医学院生理学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院生物科学系安徽蚌埠233030 蚌埠医学院机能实验中心安徽蚌埠233030

目的:观察硫化氢(hydrogen sulfide,H_2S)对1型糖尿病大鼠肾诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的影响。方法:将32只雄性SD大鼠随机分为4组(n=8):正常对照(NC)组、糖尿病(DM)组、糖尿病治疗(NaHS+DM)组和NaHS对照(NaHS)组。采用腹腔注射55 mg/kg链脲佐菌素复制1型糖尿病大鼠模型。造模成功后,NaHS+DM组和NaHS组大鼠腹腔注射56μmol/kg NaHS溶液进行干预治疗。8周后,分别测定各组大鼠血清和肾组织中总一氧化氮合酶(total nitric oxide synthase,T-NOS)、iNOS活性和一氧化氮(NO)水平;测定肾组织中谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性;采用透射电镜观察肾皮质超微结构变化;Western印迹检测肾组织iNOS蛋白表达。结果:与NC组相比,NaHS组各项指标间差异均无统计学意义(P>0.05),而DM组大鼠血清和肾组织中T-NOS,iNOS活性和NO水平均显著增高(P<0.01);肾组织GSH-Px活性明显下降(P<0.01)。电镜观察显示DM组大鼠肾小球基底膜增厚、系膜基质增多,足突融合;iNOS蛋白表达明显升高。与DM组相比,NaHS+DM组血清和肾T-NOS,iNOS活性和NO水平明显下降(P<0.01),GSH-Px活性明显升高(P<0.01),肾超微结构损伤明显减轻,iNOS蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论:H2S对1型糖尿病大鼠肾损伤具有保护作用,其机制可能与下调iNOS活性和蛋白表达,降低肾NO生成相关。

关键词：硫化氢糖尿病肾诱导型一氧化氮合酶一氧化氮大鼠

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人4-1BB配体基因真核表达载体的构建、表达及其体外抗肿瘤效应

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细胞与分子免疫学杂志 2007年第6期23卷 511-514,519页

作者：吕坤吴俊英李柏青蚌埠医学院免疫学教研室安徽蚌埠233030

目的:构建人4-1BB配体(h4-1BBL)全长基因的真核表达载体,并在肿瘤细胞HT-29中转染表达;探讨人4-1BBL基因转染的肿瘤细胞体外诱导的抗肿瘤活性。方法:用RT-PCR从Raji细胞中克隆h4-1BBL全长基因,测序后,构建重组真核表达载体pcDNA3.1(-)-h... 详细信息

目的:构建人4-1BB配体(h4-1BBL)全长基因的真核表达载体,并在肿瘤细胞HT-29中转染表达;探讨人4-1BBL基因转染的肿瘤细胞体外诱导的抗肿瘤活性。方法:用RT-PCR从Raji细胞中克隆h4-1BBL全长基因,测序后,构建重组真核表达载体pcDNA3.1(-)-h4-1BBL。通过脂质体法以重组载体转染HT-29细胞,用RT-PCR检测转染细胞中h4-1BBLmRNA的表达;用流式细胞术检测转染细胞表面h4-1BBL分子的表达。分离外周血单个核细胞(PBMC),用抗CD3mAb扩增T细胞,并与h4-1BBL基因转染及未转染的HT-29细胞混合培养。用MTT比色法检测CTL的增殖及杀伤活性;用流式细胞术检测分泌IFN-γ的T细胞。结果:从Raji细胞中克隆到h4-1BBL全长cDNA,测序完全正确。构建的h4-1BBL基因真核表达载体在HT-29中获得稳定表达。与未转染的细胞相比较,h4-1BBL基因转染的肿瘤细胞HT-29能更有效地刺激T细胞活化、增殖,促进IFN-γ分泌,并能有效地诱导CTL产生针对野生型HT-29细胞的特异性杀伤。结论:成功地构建pcDNA3.1(-)h4-1BBL重组真核表达载体。4-1BBL基因转染的肿瘤细胞介导的协同刺激信号,能增强野生型肿瘤细胞的免疫原性,诱导T细胞产生有效的抗肿瘤免疫应答。

关键词： h4-1BBL 基因转染抗肿瘤免疫应答

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刺激人γδT细胞增殖的结核杆菌多肽抗原的生物学特性分析

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细胞与分子免疫学杂志 2003年第2期19卷 121-123页

作者：陈勇吕合作胡建国李柏青蚌埠医学院免疫学教研室安徽蚌埠233003

目的 :分析可刺激人γδT细胞增殖的结核杆菌多肽抗原(Mtb Ag)的某些生物学特性。方法 :以结核杆菌分泌蛋白与经透析或链霉蛋白酶处理的Mtb Ag体外分别刺激人外周血单个核细胞 (PBMC)增殖 ,培养 10d时 ,采用流式细胞仪分析细胞的表型。... 详细信息

目的 :分析可刺激人γδT细胞增殖的结核杆菌多肽抗原(Mtb Ag)的某些生物学特性。方法 :以结核杆菌分泌蛋白与经透析或链霉蛋白酶处理的Mtb Ag体外分别刺激人外周血单个核细胞 (PBMC)增殖 ,培养 10d时 ,采用流式细胞仪分析细胞的表型。结果 :透析后的Mtb Ag刺激γδT细胞增殖的活性未见明显降低 ;而经链霉蛋白酶处理的Mtb Ag促进γδT细胞增殖的活性则显著下降。另外 ,与结核杆菌分泌蛋白相比较 ,Mtb Ag刺激γδT细胞增殖的活性显著增强。结论 :Mtb Ag中可刺激人γδT细胞增殖的成分是一种相对分子质量 (Mr)大于 10 0 0 0、非分泌性。

关键词： γδT细胞细胞增殖结核杆菌多肽抗原生物学特性

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硫化氢对1型糖尿病大鼠膈肌收缩功能的影响

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中南大学学报（医学版） 2016年第5期41卷 496-501页

作者：贾强马善峰刘小粉李赛王元元高琴杨锐蚌埠医学院生理学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院生物科学系安徽蚌埠233030 蚌埠医学院机能实验中心安徽蚌埠233030

目的:观察硫化氢(H_2S)对1型糖尿病大鼠膈肌收缩功能的影响。方法:将32只雄性SD大鼠随机分为正常组(NC组)、糖尿病组(DM组)、NaHS治疗组(DM+NaHS组)和NaHS对照组(NaHS组)。采用腹腔注射链脲佐菌素的方法制备大鼠糖尿病模型,造模成功后,D... 详细信息

目的:观察硫化氢(H_2S)对1型糖尿病大鼠膈肌收缩功能的影响。方法:将32只雄性SD大鼠随机分为正常组(NC组)、糖尿病组(DM组)、NaHS治疗组(DM+NaHS组)和NaHS对照组(NaHS组)。采用腹腔注射链脲佐菌素的方法制备大鼠糖尿病模型,造模成功后,DM+NaHS组和NaHS组大鼠腹腔注射NaHS溶液28μmol/kg干预治疗。8周后,利用离体灌流大鼠膈肌条的方法,测定单收缩张力(Pt)、最大强直张力(Po)和张力最大上升/下降速率(±dT/dtmax);电镜观察膈肌超微结构变化;计算大鼠膈肌质量/体质量(DW/BW)比值;测定膈肌组织琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)和肌质网钙泵(SERCA)活性;RT-PCR检测膈肌SERCA和受磷蛋白(PLB)mRNA的表达。结果:与NC组比较,NaHS组各项指标均无明显差异(P>0.05);而DM组膈肌Pt,Po和±dT/dtmax明显降低,膈肌超微结构损伤明显,DW/BW明显下降,膈肌组织SDH,LDH,SERCA活性和SERCA mRNA表达明显降低,PLB mRNA表达明显升高(均P<0.05)。与DM组比较,DM+NaHS组膈肌收缩功能和超微结构明显改善,DW/BW增高,膈肌组织SDH,LDH,SERCA活性和SERCA mRNA表达明显升高,PLB mRNA表达明显下降(均P<0.05)。结论:外源性补充H_2S可以增强1型糖尿病大鼠膈肌的收缩能力,其机制可能与调节膈肌生物酶活性及钙调控蛋白的基因表达相关。

关键词：糖尿病硫化氢膈肌收缩能力钙调控蛋白

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变异链球菌sepM基因中存在与变链素IV形成相关的突变类型

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南方医科大学学报 2021年第6期41卷 876-882页

作者：刘姗姗刘玉东张容秀路晓淼胡浩胡洁张凯孙钰蚌埠医学院第一附属医院口腔科安徽蚌埠233004 蚌埠医学院组织胚胎学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院卫生检验与检疫学教研室安徽蚌埠233030

目的了解sepM基因在变异链球菌临床株中的突变类型及其分布特征;探索sepM基因突变与变异链球菌变链素IV形成能力的关系。方法采用抑菌圈法检测80株变异链球菌临床株的变链素IV形成能力,根据核心基因组多位点序列分型方法构建这80株变异... 详细信息

目的了解sepM基因在变异链球菌临床株中的突变类型及其分布特征;探索sepM基因突变与变异链球菌变链素IV形成能力的关系。方法采用抑菌圈法检测80株变异链球菌临床株的变链素IV形成能力,根据核心基因组多位点序列分型方法构建这80株变异链球菌临床株的最小生成树,根据最大似然法构建这80个样本的进化树。采用GeneMarkS软件预测这些菌株的编码基因,并将预测到的基因与参考基因组UA159的sepM基因序列进行比对,了解sepM基因在变异链球菌临床株中的突变类型及其分布特征。通过分析变链素IV形成组和无变链素IV形成组菌株中差异分布的突变类型及比较突变组和无突变组菌株中抑菌圈的大小,明确与变链素IV形成相关的突变类型。结果 80株变异链球菌临床株中有变链素IV形成(变链素IV形成组)和无变链素IV形成(无变链素IV形成组)的菌株各25和55株。最小生成树结果提示变链素IV形成组菌株之间的等位基因差异少于变链素IV形成组和无变链素形成组组间菌株,并且变链素IV形成组菌株间起源类似。80株变异链球菌临床株中共检测到34个单碱基突变位点,其中有4个碱基突变(C31T、G533A、C756T、C1036T)在组间存在差异(P分别为0.001、<0.001、0.025及0.003)。这些差异分布的突变均与变链素IV的形成呈正相关。结论变异链球菌临床株sepM基因中存在与变链素IV形成相关的突变类型。

关键词： sepM基因基因突变变链素IV 变异链球菌

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激动线粒体ALDH2抑制脓毒症小鼠肝损伤铁死亡机制的研究

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中华危重病急救医学 2023年第7期35卷 684-689页

作者：李璐李玉萍陆娜杜若丽李文韬叶红伟高琴蚌埠医学院生理学教研室心脑血管基础与临床重点实验室安徽蚌埠233000 蚌埠医学院第一附属医院呼吸与危重症医学科安徽蚌埠233000 蚌埠医学院临床医学院安徽蚌埠233000

目的观察盲肠结扎穿孔术(CLP)诱导的脓毒症小鼠肝损伤时不同途径铁死亡的发生,探讨线粒体乙醛脱氢酶2(ALDH2)是否通过抑制铁死亡减轻脓毒症肝损伤。方法选取60只8周龄雄性C57BL/6J小鼠,按随机数字表法分为假手术(Sham)组、CLP组、铁死... 详细信息

目的观察盲肠结扎穿孔术(CLP)诱导的脓毒症小鼠肝损伤时不同途径铁死亡的发生,探讨线粒体乙醛脱氢酶2(ALDH2)是否通过抑制铁死亡减轻脓毒症肝损伤。方法选取60只8周龄雄性C57BL/6J小鼠,按随机数字表法分为假手术(Sham)组、CLP组、铁死亡抑制剂铁抑素-1(Fer-1)组、ALDH2特异性激动剂Alda-1组、铁螯合剂右雷佐生(DXZ)组、二甲基亚砜(DMSO)组,每组10只。采用CLP法建立小鼠脓毒症肝损伤模型;Sham组仅开腹不结扎和穿刺盲肠。DMSO组、Fer-1组、DXZ组和Alda-1组分别于CLP术前1 h腹腔注射10 mL/kg 5%DMSO、5 mg/kg Fer-1、50 mg/kg DXZ和10 mg/kg Alda-1。术后24 h,麻醉小鼠取眼球血及肝组织。苏木素-伊红(HE)染色,镜下观察肝脏结构和炎症浸润情况;检测各组血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平及肝组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)水平;蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测肝组织ALDH2、铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、铁死亡抑制蛋白1(FSP1)和转铁蛋白受体1(TFR1)的蛋白表达。结果与Sham组相比,CLP组小鼠术后24 h肝脏可见不同程度淤血、肝细胞排列紊乱及炎症细胞浸润;与CLP组相比,Fer-1组、DXZ组和Alda-1组小鼠肝脏形态学有改善,损伤减轻,炎症细胞浸润减少。与Sham组相比,CLP组血清ALT、AST水平及肝组织MDA、ROS含量和TFR1蛋白表达显著升高,肝组织SOD活性及ALDH2、GPX4和FSP1蛋白表达显著降低。与CLP组相比,Fer-1组、DXZ组和Alda-1组血清ALT、AST水平显著降低〔ALT(U/L):45.76±10.81、37.30±2.98、36.40±12.75比73.06±12.20,AST(U/L):61.57±2.69、52.41±6.92、56.05±8.29比81.59±5.46,均P<0.05〕,肝组织MDA、ROS含量及TFR1蛋白表达显著降低〔MDA(μmol/L):0.60±0.10、0.57±0.18、0.83±0.39比1.61±0.30,ROS(荧光强度):270.34±9.64、276.02±62.33、262.05±18.55比455.38±36.07,TFR1/GAPDH:0.90±0.04、1.01±0.09、0.55±0.08比1.18±0.06,均P<0.05〕,肝组织SOD活性及ALDH2、GPX4、FSP1蛋白表达显著升高〔SOD(kU/g):88.77±8.20、88.37±4.47、93.43±7.24比50.27±3.57,ALDH2/GAPDH:1.10±0.15、1.02±0.07、1.14±0.07比0.70±0.04,GPX4/GAPDH:1.02±0.12、0.99±0.08、1.05±0.19比0.71±0.10,FSP1/GAPDH:1.06±0.24、1.02±0.08、0.93±0.09比0.66±0.03,均P<0.05〕。DMSO组各指标与CLP组差异无统计学意义。结论GPX4和FSP1介导的铁死亡均参与脓毒症小鼠肝损伤,激动ALDH2、抑制铁死亡可减轻肝损伤,ALDH2可能通过调控GPX4和FSP1介导的铁死亡发挥保护作用。

关键词：线粒体乙醛脱氢酶2 脓毒症肝损伤铁死亡

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TrKA-siRNA抑制乳腺癌细胞系MCF-7 NF-κB的表达并促细胞凋亡

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基础医学与临床 2009年第10期29卷 1059-1064页

作者：章菊陈昌杰刘臣彪杨清玲滕凤猛蚌埠医学院临床检验诊断实验中心安徽蚌埠233000 蚌埠医学院生化与分子生物学教研室安徽蚌埠233000

目的探讨TrKA基因表达的变化对NF-κBP65核蛋白的表达和细胞凋亡的影响。方法构建TrKA特异小干扰RNA(siRNA)表达载体,重组体经测序鉴定正确后转染乳腺癌MCF-7细胞。G418(geneticin)筛选稳定表达TrKAsiRNA干扰细胞株,命名为TrKA-siRNA。... 详细信息

目的探讨TrKA基因表达的变化对NF-κBP65核蛋白的表达和细胞凋亡的影响。方法构建TrKA特异小干扰RNA(siRNA)表达载体,重组体经测序鉴定正确后转染乳腺癌MCF-7细胞。G418(geneticin)筛选稳定表达TrKAsiRNA干扰细胞株,命名为TrKA-siRNA。荧光实时定量RT-PCR、Western blot和免疫组化法检测TrKA基因和蛋白的表达,Western blot检测NF-κBP65核蛋白的表达,流式细胞术检测细胞凋亡。结果成功构建TrKA-siRNA表达载体,TrKA mRNA和蛋白水平分别下调74.7%和80.5%(P<0.05)。神经生长因子(NGF)作用2h后,MCF-7组细胞NF-κBP65核蛋白表达明显增加,而TrKA-siRNA组细胞NF-κBP65核蛋白改变不显著。与MCF-7组相比,TrKA-siRNA组细胞凋亡明显增加(P<0.05),NGF对其凋亡无促进作用。结论有效阻断TrKA基因的表达能抑制NF-κB抗凋亡途径的活化,从而增加了乳腺癌MCF-7细胞的凋亡。此作用可能不依赖于外源性的NGF。

关键词： RNA干扰 NF-κB TrKA 乳腺肿瘤 MCF-7细胞

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多孔TaON半导体的制备及其光催化选择性氧化苯甲醇作用

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中山大学学报（自然科学版） 2017年第4期56卷 97-101页

作者：陈艳杨俊松蚌埠医学院公共基础学院化学教研室安徽蚌埠233030

通过优化处理商品五氧化二钽(Ta_2O_5),制备得到含有结晶水的Ta_2O_5·n H_2O无定型化合物,在硫脲和NH_3的共同作用下,在较短时间内成功合成出氮氧钽(TaON)纳米光催化剂。测试结果表明,TaON半导体在形貌上表现出大量的蜂窝孔状结构... 详细信息

通过优化处理商品五氧化二钽(Ta_2O_5),制备得到含有结晶水的Ta_2O_5·n H_2O无定型化合物,在硫脲和NH_3的共同作用下,在较短时间内成功合成出氮氧钽(TaON)纳米光催化剂。测试结果表明,TaON半导体在形貌上表现出大量的蜂窝孔状结构,比表面积相对于传统体相提高了6倍。在光催化性能方面,多孔的TaON半导体材料具有一定的光催化选择性氧化苯甲醇的能力,而在Pd、Ag助催化剂的共同作用下,其性能能够得到进一步的提高。

关键词：氮氧钽选择性氧化光催化

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人神经营养素-3基因真核表达载体的构建和鉴定

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中国临床解剖学杂志 2004年第6期22卷 652-654页

作者：陈昌杰赵莉蚌埠医学院生化与分子生物学教研室蚌埠医学院解剖学教研室安徽蚌埠233003

目的:构建含有人NT-3基因真核表达载体pcDNA3.1-NT-3。方法:采用PCR技术,扩增编码神经营养素-3基因,克隆到PMD18-T载体上,再亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1的Hind Ⅲ和BamHI位点。结果:重组真核表达载体pcDNA3.1-NT-3经酶切鉴定证明NT-3... 详细信息

目的:构建含有人NT-3基因真核表达载体pcDNA3.1-NT-3。方法:采用PCR技术,扩增编码神经营养素-3基因,克隆到PMD18-T载体上,再亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1的Hind Ⅲ和BamHI位点。结果:重组真核表达载体pcDNA3.1-NT-3经酶切鉴定证明NT-3基因正向插入真核表达载体中,碱基序列的测定证明重组质粒中含有人的NT-3基因序列。结论:构建的真核表达载体携有人NT-3cDNA序列,并且含有巨细胞病毒强启动子、ploy(A)加尾信号和neo标志基因,可能具有转染多种哺乳类细胞通用性,可用于NT-3基因的真核表达及基因治疗的研究。

关键词：神经营养素-3 真核表达载体

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