检索结果-内蒙古大学图书馆

上海交通大学学报（医学版） 2010年第12期30卷 1513-1516页

作者：石玉荣耿建王惠章尧蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室蚌埠233000 蚌埠医学院检验诊断学实验中心蚌埠233000 皖南医学院生物化学教研室芜湖241002

目的探讨苯并[a]芘(BaP)对宫颈癌HeLa细胞增殖及细胞色素P450 1A1(CYP1A1)表达的影响。方法不同浓度(0、1.0、2.5、5.0、7.5和10.0μmol/L)的BaP处理宫颈癌HeLa细胞,MTT法检测BaP对HeLa细胞增殖的影响,W estern b lotting和RT-PCR分别检测CYP1A1的蛋白表达和mRNA表达,荧光素标记检测CYP1A1活性。结果 MTT法检测显示,各浓度BaP组光密度(D553 nm)均较对照组(0μmol/L BaP)升高,其中7.5μmol/L BaP组最高(P<0.05)。W estern b lotting和RT-PCR检测结果显示,各浓度BaP组CYP1A1 mRNA及蛋白的表达水平均高于对照组,其中7.5μmol/L BaP组最高(P<0.05)。CYP1A1活性检测结果显示,各浓度BaP组HeLa细胞CYP1A1酶活力均高于对照组,以5.0μmol/L BaP组活力最高(P<0.05)。结论 BaP可诱导HeLa细胞增殖,诱导HeLa细胞表达CYP1A1,并增加酶活性。

关键词：苯并[a]芘细胞色素P450 1A1 HeLa细胞

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超声造影LI-RADS分类标准对肝细胞癌的诊断价值

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中华全科医学 2021年第5期19卷 833-837页

作者：张家玲葛晖武文娟蚌埠医学院附属蚌埠市第三人民医院超声科安徽蚌埠233000 蚌埠医学院生化与分子生物学教研室安徽蚌埠233000

目的探讨超声造影肝脏影像报告与数据系统(liver imaging reporting and data system, LI-RADS)对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)的诊断效能,评估其在HCC诊断中的应用价值。方法选取2018年9月-2020年6月于蚌埠市第三人民医院... 详细信息

目的探讨超声造影肝脏影像报告与数据系统(liver imaging reporting and data system, LI-RADS)对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)的诊断效能,评估其在HCC诊断中的应用价值。方法选取2018年9月-2020年6月于蚌埠市第三人民医院就诊的具有HCC高危因素患者150例共163个肝脏局灶性病变的超声造影资料,由4名具有5年以上肝脏超声造影经验的医师按照超声造影常规法标准和LI-RADS分类法标准分为2组,分别对163个病灶进行诊断。以病理结果为金标准,计算敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、诊断符合率,绘制ROC曲线比较2组的诊断效能。结果 163个病灶经病理证实HCC为122个,非HCC恶性病变16个,良性病变25个。常规法诊断HCC符合率为87.1%(142/163),曲线下面积(AUC)为85.7%。LI-RADS分类法中LR-5类诊断HCC特异性最高(95.1%)但敏感性偏低(72.1%),若将LR-4+LR-5类诊断为HCC,其敏感性(98.4%,120/122)、特异性(82.9%,34/41)、诊断符合率(94.5%,154/163)及AUC(90.6%)均高于常规法。分类法诊断准确性优于常规法,二者差异具有统计学意义(χ^(2)=4.654,P=0.031)。结论超声造影LI-RADS分类标准可以提高HCC诊断符合率,具有较高的诊断价值。

关键词：肝细胞癌超声造影肝脏影像报告与数据系统(LI-RADS)

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Survivin反义寡核苷酸联合顺铂诱导肺癌细胞凋亡的研究

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中华内科杂志 2006年第5期45卷 414-416页

作者：李伟陈余清周继红夏雪梅李殿明高华蚌埠医学院第一附属医院呼吸病科安徽省蚌埠市233003 蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室

Survivin属于凋亡抑制蛋白（IAP）基因家族中的新成员，在多数肿瘤组织中高表达，但不表达于终末分化组织。该基因在肺癌组织的表达率达72％，且具有抗细胞凋亡和促进细胞增殖的双重作用。我们前期的研究已证实:Survivin反义寡核苷酸（A... 详细信息

Survivin属于凋亡抑制蛋白（IAP）基因家族中的新成员，在多数肿瘤组织中高表达，但不表达于终末分化组织。该基因在肺癌组织的表达率达72％，且具有抗细胞凋亡和促进细胞增殖的双重作用。我们前期的研究已证实:Survivin反义寡核苷酸（ASODN）能有效抑制肺癌细胞株NCI-H446 Survivin mRNA和蛋白的表达，并诱导凋亡，抑制细胞生长。顺铂是目前治疗肺癌最常用的一线化疗药，但因严重毒副作用和耐药性的产生限制了它的应用。如何提高顺铂抗癌效果、减少耐药和毒副作用是改善肺癌预后的关键之一。本研究合成Survivin ASODN，转染人肺癌细胞株NCI-H446，并与顺铂联用，观察其抗癌效果，为肺癌治疗提供新的理论基础和实验依据。

关键词： Survivin反义寡核苷酸肺癌细胞凋亡细胞株NCI-H446 顺铂凋亡抑制蛋白联合基因家族肿瘤组织毒副作用抗癌效果

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survivin抗肺癌细胞凋亡的分子机制

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中华肿瘤杂志 2006年第6期28卷 413-417页

作者：陈余清李伟周继红李殿明夏雪梅黄礼年李柏青蚌埠医学院第一附属医院呼吸科安徽省卫生厅临床重点专科 233004 蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室免疫学教研室安徽省教育厅重点实验室

目的研究survivin反义寡核苷酸(ASODN)诱导肺癌细胞凋亡的作用,探讨survivin抗肺癌细胞凋亡的分子机制。方法在脂质体介导下,分别以100 mmol/L、300 mmol/L和500 mmol/L浓度的survivin ASODN,作用于肺癌细胞株NCI-H446 24 h、48 h和72 h... 详细信息

目的研究survivin反义寡核苷酸(ASODN)诱导肺癌细胞凋亡的作用,探讨survivin抗肺癌细胞凋亡的分子机制。方法在脂质体介导下,分别以100 mmol/L、300 mmol/L和500 mmol/L浓度的survivin ASODN,作用于肺癌细胞株NCI-H446 24 h、48 h和72 h后,用RT-PCR和Western blot检测survivin mRNA及蛋白表达,流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡；Rh123染色法检测细胞线粒体膜电位(△Ψm)变化；ELISA法检测胞浆细胞色素C(cyt C)浓度；比色法检测胞浆内天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-9(caspase-9)、caspase-3的活性；Western blot检测caspase-8蛋白表达；加入环孢霉素A (CsA)后,以FCM检测细胞凋亡。结果与各对照组相比,survivin ASODN显著下调了survivin mRNA表达,且呈时间和浓度依赖性,其中以500 mmol/L作用72 h时效果最佳,抑制率达62．7%,其蛋白表达也显著下调。NCI-H446细胞的凋亡指数(AI)为48．35%,明显高于对照组(3．75%)、空脂质体组(3．41%)、无义寡核苷酸(NSODN)组(4．69%)、100和300 mmol/L ASODN组(19．85%和34．39%)；增殖指数(PI)为24．38%,明显低于上述各组(75．54%、73．12%、71．76%、51．03%和38．94%,P均＜0．01)。survivin ASODN导致细胞△Ψm逐渐下降,并相继引起cyt C的释放、caspase-9和caspase-3的激活,而caspase-8酶原无变化。CsA显著抑制了survivin ASODN诱导的细胞凋亡。结论survivin通过调控线粒体凋亡途径发挥抗肺癌细胞凋亡作用；survivin ASODN能够显著下调survivin mRNA及蛋白表达,诱导肺癌细胞凋亡,抑制细胞增殖。

关键词： survivin 肺癌,细胞系细胞凋亡

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SPOP上调c-Jun蛋白表达并促进肾癌细胞的增殖和侵袭

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南方医科大学学报 2021年第3期41卷 447-452页

作者：吴林慧余珂崔悦朱雪莲杨正马佳蚌埠医学院肿瘤基础研究与临床检验诊断重点实验室安徽蚌埠233030 安徽省阜阳市妇女儿童医院检验科安徽阜阳236000 蚌埠医学院检验医学院安徽蚌埠233030 蚌埠医学院检验医学院生物化学与分子生物学教研室安徽蚌埠233030

目的探讨SPOP对肾癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭等的影响及潜在的作用机制。方法体外培养肾癌细胞株786-O、A704、Caki-2,对照组(EV)和过表达组(SPOP)质粒采用脂质体法转染至上述肾癌细胞株;分别利用克隆形成实验及MTT法检测SPOP基因对... 详细信息

目的探讨SPOP对肾癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭等的影响及潜在的作用机制。方法体外培养肾癌细胞株786-O、A704、Caki-2,对照组(EV)和过表达组(SPOP)质粒采用脂质体法转染至上述肾癌细胞株;分别利用克隆形成实验及MTT法检测SPOP基因对肾癌细胞株增殖的影响;采用TUNEL法检测SPOP基因对肾癌细胞株凋亡的影响;利用创伤愈合实验和Transwell实验检测SPOP基因对肾癌细胞株迁移和侵袭能力的作用;运用Real-time PCR和Western blotting技术检测转染后肾癌细胞株SPOP和c-Jun的mRNA水平以及相关蛋白的表达情况。结果在786-O、A704、Caki-2细胞上调SPOP的表达能促进肾癌细胞的增殖、迁移和侵袭(P<0.05);与对照组相比,SPOP组的肾癌细胞株786-O、Caki-2的凋亡率较对照组相对减少(P<0.05);Real-time PCR结果显示,c-Jun mRNA的表达水平未发生改变,但Western blotting结果显示,SPOP组肾癌细胞株786-O、Caki-2的SPOP蛋白表达明显高于对照组(P<0.05),c-Jun蛋白的表达也明显高于对照组(P<0.05)。结论SPOP能促进肾癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,抑制肾癌细胞的凋亡,潜在的机制可能为促进c-Jun的表达。

关键词： SPOP c-Jun 肾癌增殖迁移侵袭凋亡

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结核杆菌抗原诱导的人γδT细胞表达L-选择素的调控机制

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现代免疫学 2006年第5期26卷 413-417页

作者：武文娟李柏青蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室蚌埠233030 安徽省感染与免疫重点实验室(蚌埠医学院)

采用CD62L生物素-链霉亲和素染色流式细胞术检测L-选择素在细胞表面表达的方法，分别观察新鲜PBMC和刺激后培养3～21d的γδT细胞表面L-选择素的表达，并研究培养6～7d的MtbAT预先用LY294002（PI3K途径抑制剂）、SB203580（p38途径抑制... 详细信息

采用CD62L生物素-链霉亲和素染色流式细胞术检测L-选择素在细胞表面表达的方法，分别观察新鲜PBMC和刺激后培养3～21d的γδT细胞表面L-选择素的表达，并研究培养6～7d的MtbAT预先用LY294002（PI3K途径抑制剂）、SB203580（p38途径抑制剂）、PD98059（MEK抑制剂）分别处理20min，然后用Mtb-Ag再刺激3h时γδT细胞表面L-选择素的表达情况。结果显示新鲜PBMC中γδT细胞L-选择素的表达率为（43．9％±6．7％），γδT细胞L-选择素的表达率为（76．6％±7．9％），有显著差异（P〈0．05）。用Mtb-Ag激活后培养第6天时L-选择素在γδT细胞的表达达到高峰（90．7％）；以后L-选择素表达逐渐下降，15～21dγδT细胞L-选择素的表达在低水平（16．2％～10．6％）维持；Mtb—Ag再刺激MtbAT诱导γδT细胞L-选择素表达下调为69．5％，预先加入LY294002或PD98059，则L-选择素表达率分别为83．1％和78．7％；而加入SB203580未见明显影响。提示γδT细胞活化时L-选择素表达调控与PI3K、Ras／Erk途径有关，但与p38MAPK途径无关。

关键词： L-选择素 γδT细胞结核杆菌抗原信号转导

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三氧化二砷抑制苯并(a)芘诱导的HeLa细胞细胞色素P450 1A1的表达

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华中科技大学学报（医学版） 2012年第2期41卷 161-164页

作者：耿建石玉荣王慧安徽省蚌埠市蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室蚌埠233000 安徽省蚌埠市蚌埠医学院检验诊断学实验中心蚌埠233000

目的观察不同浓度三氧化二砷(As2O3)对苯并(a)芘[B(a)P]诱导的子宫颈癌HeLa细胞的增殖及细胞色素P450 1A1(CYP1A1)表达的影响。方法用7.5μmol/L B(a)P分别与不同浓度的As2O3共同作用于HeLa细胞,MTT法检测As2O3对HeLa细胞增殖的影响,Wes... 详细信息

目的观察不同浓度三氧化二砷(As2O3)对苯并(a)芘[B(a)P]诱导的子宫颈癌HeLa细胞的增殖及细胞色素P450 1A1(CYP1A1)表达的影响。方法用7.5μmol/L B(a)P分别与不同浓度的As2O3共同作用于HeLa细胞,MTT法检测As2O3对HeLa细胞增殖的影响,Western blot和实时荧光定量PCR分别检测CYP1A1的蛋白表达和mRNA表达,荧光素标记检测CYP1A1活性。结果 MTT法结果显示,随着As2O3浓度增加,各实验组吸光度值逐渐减少,与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05);As2O3下调B(a)P诱导的HeLa细胞CYP1A1的mRNA和蛋白质的表达,抑制作用显著(P<0.05)。CYP1A1活性检测结果显示,随着As2O3浓度增加,HeLa细胞CYP1A1酶活力逐渐降低,各实验组与对照组差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 As2O3能抑制B(a)P诱导的HeLa细胞增殖,抑制CYP1A1的表达并降低CYP1A1酶活性且呈现剂量依赖性。

关键词：三氧化二砷苯并(a)芘细胞色素P450 1A1 HeLa细胞

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人源性抗乳腺癌HER2噬菌体单链抗体库的构建与筛选

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浙江大学学报（医学版） 2014年第4期43卷 434-440页

作者：卢晓辉王志文蔡颖黄静朱丽华杨清玲陈昌杰蚌埠医学院临床检验诊断学实验中心安徽蚌埠233000 蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室安徽蚌埠233000 河南大学淮河医院检验科河南开封475000

目的：构建人源性抗乳腺癌噬菌体单链抗体（scFv）库，筛选和鉴定抗乳腺癌人类表皮生长因子受体2（HER2）特异性scFv，为HER2和CXC趋化因子受体4（CXCR4）双靶向融合蛋白的研制提供靶向HER2的高亲和力序列。方法：取已确诊的乳腺癌患者... 详细信息

目的：构建人源性抗乳腺癌噬菌体单链抗体（scFv）库，筛选和鉴定抗乳腺癌人类表皮生长因子受体2（HER2）特异性scFv，为HER2和CXC趋化因子受体4（CXCR4）双靶向融合蛋白的研制提供靶向HER2的高亲和力序列。方法：取已确诊的乳腺癌患者癌旁淋巴组织，提取总RNA；构建可变区基因的T载体库，将重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）基因与pCANTAB连接肽连接，获得pCANTAB-scFv，电转化感受态大肠杆菌TG1；以M13K07辅助噬菌体进行感染，获噬菌体抗体库；利用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测筛选后获得的噬菌体抗体活性，以免疫组织化学法检测抗体亲和力，并通过测序进一步鉴定。结果：成功构建大容量pCANTAB-scFv抗体库，获得的scFv长度为750bp，VH和VL长度分别为375和330kb；电转化大肠杆菌TG1后酶切验证插入片段大小正确，得到库容为2．48×10^8的大容量抗体库；通过噬菌体展示和淘洗筛选，富集针对乳腺癌细胞株SKBR-3表面抗原的抗体库；所得抗体对HER2有高度的亲和力和特异性，对乳腺癌组织HER2抗原也具有较高的亲和力；测序结果与人IgG抗体进行对比，所获得的scFv具有高度的人源性。结论：主要构建了大容量人源性抗乳腺癌细胞的噬菌体scFv库，并筛选获得可特异性识别人乳腺癌HER2的高亲和力scFv，为制备以HER2为靶点的抗肿瘤HER2和CXCR4双靶向融合蛋白提供了载体。

关键词：乳腺肿瘤/免疫学 DNA,互补/遗传学基因文库抗体,细菌/遗传学细菌噬菌体/遗传学受体,erbB-2 受体,CXCR4 聚合酶链反应

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天然虾青素治疗肾透明细胞癌的作用机制:基于网络药理学与生物信息学方法

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南方医科大学学报 2021年第12期41卷 1763-1772页

作者：高俊杰杨丹丹曹若雪潘雪珊夏俊蚌埠医学院检验医学院肿瘤基础研究与临床检验诊断重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院检验医学院生化与分子生物学教研室安徽蚌埠233030 连云港市第二人民医院检验科江苏连云港222000

目的基于网络药理学和生物信息学研究天然虾青素(AST)治疗肾透明细胞癌(KIRC)的分子作用机制。方法利用PharmMapper数据库检索AST的作用靶点,TCGA数据库获得并筛选KIRC癌组织和癌旁组织中的差异基因,Cytoscape软件对靶基因进行分析并构... 详细信息

目的基于网络药理学和生物信息学研究天然虾青素(AST)治疗肾透明细胞癌(KIRC)的分子作用机制。方法利用PharmMapper数据库检索AST的作用靶点,TCGA数据库获得并筛选KIRC癌组织和癌旁组织中的差异基因,Cytoscape软件对靶基因进行分析并构建“药物-靶点”网络图,String数据库构建可视化PPI网络,对核心作用靶点进行GO富集分析。接着,对筛选出的核心靶点胎盘生长因子(PGF)进行单基因生物信息学分析,采用CCK-8法验证AST对KIRC细胞活性的影响,分子对接技术验证AST与PGF结合情况,RT-qPCR和Westernblot验证AST对靶基因mRNA和蛋白表达的影响。结果分析得到AST作用靶点278个,KIRC相关作用靶点1081个,AST治疗KIRC的核心作用靶点7个,其中核心靶点PGF在KIRC中表达增高(P<0.001)且与预后不良相关(HR=1.37,P=0.043);分子对接显示AST与PGF的结合能为-5.43 kcal/mol;CCK-8显示当AST浓度为50μmol/L时即可以抑制KIRC细胞的增殖且AST浓度越高抑制作用越显著;RT-qPCR结果显示,AST处理KIRC后PGF的mRNA表达水平显著降低;Westernblot结果显示,经AST处理后KIRC中PGF的蛋白表达受到了明显抑制。结论AST可以抑制KIRC的增殖并抑制其细胞中PGF的表达。

关键词：网络药理学生物信息学天然虾青素肾透明细胞癌胎盘生长因子

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SLeX对肝癌HepG2细胞迁移和侵袭的影响

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中国病理生理杂志 2017年第4期33卷 688-693页

作者：武文娟崔灿康品方石玉荣耿英华蚌埠医学院生化与分子生物学教研室安徽蚌埠233030 徐州市中心医院检验科江苏徐州221009 蚌埠医学院第一附属医院心血管科安徽蚌埠233004 蚌埠医学院第一附属医院血液科安徽蚌埠233004

目的:探讨唾液酸化路易斯寡糖X(sialyl Lewis X,SLeX)在肝癌HepG2细胞中的表达及其对HepG2细胞迁移能力和侵袭能力的影响。方法:实时荧光定量PCR和Western blot法检测α1,3-岩藻糖基转移酶Ⅶ(α1,3-fucosyltransferase Ⅶ,FUT7)在HepG2... 详细信息

目的:探讨唾液酸化路易斯寡糖X(sialyl Lewis X,SLeX)在肝癌HepG2细胞中的表达及其对HepG2细胞迁移能力和侵袭能力的影响。方法:实时荧光定量PCR和Western blot法检测α1,3-岩藻糖基转移酶Ⅶ(α1,3-fucosyltransferase Ⅶ,FUT7)在HepG2细胞和L-02细胞中的表达,Western blot及免疫细胞化学染色检测SLeX在HepG2细胞和L-02细胞中表达,应用Transwell小室检测SLeX单克隆抗体封闭后HepG2细胞侵袭和迁移能力的改变。结果:FUT7和SLeX在HepG2细胞中表达,而在L-02细胞中无表达;0.05、0.5和5 mg/L的SLeX单克隆抗体封闭后,HepG2细胞的迁移率逐渐下降,与对照组相比差异显著(P<0.05),侵袭穿膜细胞数明显少于对照组(P<0.05);SLeX单克隆抗体封闭组间两两比较迁移率与侵袭细胞数的差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:SLeX在肝癌HepG2细胞中高表达,与HepG2细胞迁移能力和侵袭能力密切相关。

关键词：唾液酸化路易斯寡糖X 肝细胞癌 HepG2细胞细胞迁移细胞侵袭

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