检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2023年第2期39卷 175-180页

作者：张丽张娅季江颖魏梓妤刘家宇许涛汪洪涛蚌埠医学院第一附属医院分子诊断中心安徽蚌埠233030 蚌埠医学院检验医学院检验医学实验中心安徽蚌埠233030 蚌埠医学院慢性疾病免疫学基础与临床安徽省重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院检验医学院临床检验诊断学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院检验医学院免疫学教研室安徽蚌埠233030

目的克隆、表达与纯化黏着斑激酶(FAK)基因C端黏着斑定位序列(第798~1041位氨基酸),制备兔抗FAK多克隆抗体并鉴定。方法PCR法体外扩增FAK基因C端序列(2671~3402 bp),克隆至pCZN1,构建pCZN1-FAK重组表达载体,将重组表达载体转化到大肠杆... 详细信息

目的克隆、表达与纯化黏着斑激酶(FAK)基因C端黏着斑定位序列(第798~1041位氨基酸),制备兔抗FAK多克隆抗体并鉴定。方法PCR法体外扩增FAK基因C端序列(2671~3402 bp),克隆至pCZN1,构建pCZN1-FAK重组表达载体,将重组表达载体转化到大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)感受态细胞,用异丙基β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达;利用镍-次氮基三乙酸(Ni-NTA)金属鳌合亲和层析树脂进行蛋白纯化,并免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体;通过间接ELISA和Western blot法进行效价和特异性鉴定。结果成功构建pCZN1-FAK重组表达载体,FAK蛋白主要以包涵体形式表达。目的蛋白纯化后,制备的兔抗FAK多克隆抗体效价达1∶512000,且与外源和内源FAK蛋白发生特异性反应。结论成功克隆、表达与纯化FAK蛋白,制备兔抗FAK多克隆抗体,可用于内源FAK蛋白特异性检测。

关键词：人黏着斑激酶(FAK) 多克隆抗体

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miR-16-5p通过靶向YWHAQ调控乳腺癌耐药细胞的凋亡与迁移能力

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南方医科大学学报 2022年第10期42卷 1476-1485页

作者：朱海涛毛慧兰陶爽王文锐陈昌杰杨清玲蚌埠医学院癌症转化医学安徽省重点实验室安徽蚌埠233000 蚌埠医学院肿瘤基础研究与临床检验诊断重点实验室安徽蚌埠233000 蚌埠医学院生物技术教研室安徽蚌埠233000 蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室安徽蚌埠233000

目的探究miR-16-5p对乳腺癌紫杉醇耐药细胞生物学活性的影响及分子机制。方法以人乳腺癌亲本细胞(SKBR-3)与乳腺癌紫杉醇耐药细胞(SKBR-3/PR)为研究对象。实验设空白对照组、阴性对照组、miR-16-5p类似物组(miR-16-5p mimics)、miR-16... 详细信息

目的探究miR-16-5p对乳腺癌紫杉醇耐药细胞生物学活性的影响及分子机制。方法以人乳腺癌亲本细胞(SKBR-3)与乳腺癌紫杉醇耐药细胞(SKBR-3/PR)为研究对象。实验设空白对照组、阴性对照组、miR-16-5p类似物组(miR-16-5p mimics)、miR-16-5p抑制剂组(miR-16-5p inhibitor),YWHAQ干扰组(si-YWHAQ),以及联合组(miR-16-5p mimics+si-YWHAQ)。利用qRT-PCR检测乳腺癌组织与癌旁组织、SKBR-3与SKBR-3/PR间miR-16-5p的表达水平。使用生信数据对miR-16-5p的靶基因做预测,双荧光素酶实验验证靶向结合。免疫印迹检测细胞YWHAQ、Bcl-2和Bax表达。CCK-8和Transwell检测细胞增殖迁移能力。流式细胞术检测耐药细胞周期凋亡改变。结果 qRT-PCR显示乳腺癌组织中miR-16-5p水平低于癌旁组织(-1.19±1.90 vs 1.59±1.76,P<0.01)。生物信息预测YWHAQ是miR-16-5p的靶基因,荧光素酶实验证实miR-16-5p能够靶向调节YWHAQ(P<0.01)。相对于SKBR-3细胞,SKBR-3/PR细胞中miR-16-5p表达水平降低(P<0.01),YWHAQ表达水平增高(P<0.05)。Western blot结果显示miR-16-5p类似物能够抑制YWHAQ表达,miR-16-5p抑制剂能够促进YWHAQ表达(P<0.01)。相对于对照组,miR-16-5p类似物能够将耐药细胞阻滞在G0/G1期[(55.61±1.99)%vs(43.06±1.53)%,P<0.01],抑制细胞增殖和迁移能力(P<0.01),促进细胞凋亡[(10.37±0.23)%vs(3.81±0.88)%,P<0.01],YWHAQ干扰组细胞迁移能力下降,凋亡率升高,miR-16-5p类似物组与YWHAQ干扰组细胞的Bax蛋白表达增加,YWHAQ与Bcl-2蛋白水平降低。相对于miR-16-5p类似物组,联合组细胞迁移能力被抑制(75.75±29.85 vs 181.11±11.71,P<0.01),凋亡率显著升高[(24.20±2.43)%vs(14.10±4.47)%,P<0.01]。结论 miR-16-5p能够通过靶向调节YWHAQ调控Bcl-2/Bax的表达,从而改变乳腺癌紫杉醇耐药细胞的生物学活性。

关键词：乳腺癌耐药 miR-16-5p YWHAQ

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miR-372-5p促进结直肠癌细胞的转移:通过靶向PTEN调控PI3K/AKT/CXCL12信号通路

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南方医科大学学报 2022年第8期42卷 1191-1197页

作者：时秀茹魏可吴雨伦王文锐杨清玲陈昌杰蚌埠医学院癌症转化医学安徽省重点实验室安徽蚌埠233000 蚌埠医学院肿瘤基础研究与临床检验诊断重点实验室安徽蚌埠233000 蚌埠医学院生物技术教研室安徽蚌埠233000 蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室安徽蚌埠233000

目的探讨miR-372-5p通过靶向PTEN调控PI3K/AKT/CXCL12信号通路对结直肠癌细胞迁移能力的影响及机制。方法qRT-RCR检测miR-372-5p在结直肠癌和癌旁组织及结直肠癌细胞和正常肠上皮细胞中的表达;生物信息学和双荧光素酶实验验证miR-372-5p... 详细信息

目的探讨miR-372-5p通过靶向PTEN调控PI3K/AKT/CXCL12信号通路对结直肠癌细胞迁移能力的影响及机制。方法qRT-RCR检测miR-372-5p在结直肠癌和癌旁组织及结直肠癌细胞和正常肠上皮细胞中的表达;生物信息学和双荧光素酶实验验证miR-372-5p与PTEN的靶向关系;Western blotting检测转染inhibitor-NC/mimics-NC(miR-372-5p抑制剂/类似物的阴性对照)、miR-inhibitor(miR-372-5p抑制剂)、miR-mimics(miR-372-5p类似物)以及共转染miR-inhibitor+si-PTEN(PTEN干扰)、miR-mimics+PI3K抑制剂对PTEN、CXCL12表达和PI3K/AKT信号通路激活水平的影响;Transwell实验、划痕实验检测以上各组、共转染miR-mimics+si-CXCL12(CXCL12干扰)以及转染mimics-NC、miR-mimics后的HCT116条件培养基对细胞迁移能力的影响。结果结直肠癌组织中miR-372-5p较癌旁组织表达升高,相对于NCM460,HCT116较SW620中miR-372-5p表达上调更显著(P<0.01);双荧光素酶实验证实PTEN是miR-372-5p的潜在靶基因(P<0.05)。相较于NC组,miR-mimics可降低PTEN蛋白表达水平,增加CXCL12蛋白表达水平和AKT磷酸化水平,提高HCT116迁移能力;而miR-inhibitor则导致相反的结果(P<0.05),si-PTEN可中和miR-inhibitor的作用(P<0.01);PI3K抑制剂可降低CXCL12的蛋白表达水平,并抑制HCT116迁移能力(P<0.05),而miR-mimics可中和这一作用(P<0.01);miR-mimics转染HCT116的条件培养基可提高NCM460的迁移能力(P<0.01),联合si-CXCL12可逆转miR-mimics对HCT116转移的促进作用(P<0.01)。结论miR-372-5p通过靶向PTEN激活PI3K/AKT信号通路,上调CXCL12的表达,从而促进结直肠癌细胞的迁移能力。

关键词：结直肠癌转移 miR-372-5p CXCL12

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IL-6促进大鼠星形胶质细胞活化并下调内向整流钾离子通道4.1(Kir4.1)的表达

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细胞与分子免疫学杂志 2022年第4期38卷 316-320页

作者：卢思彤王京孙天祎严海芹邹维艳李徽徽齐琦孙美群蚌埠医学院:组胚教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院:临床医学院安徽蚌埠233030

目的探讨白细胞介素6(IL-6)对大鼠星形胶质细胞(Ast)的活化作用及其对内向整流钾离子通道4.1(Kir4.1)表达的影响。方法分离培养新生SD大鼠的大脑皮层Ast,用IL-6或联合IL-6受体拮抗剂(IL-6Ra)处理培养的Ast,CCK-8法检测细胞活力;实时荧... 详细信息

目的探讨白细胞介素6(IL-6)对大鼠星形胶质细胞(Ast)的活化作用及其对内向整流钾离子通道4.1(Kir4.1)表达的影响。方法分离培养新生SD大鼠的大脑皮层Ast,用IL-6或联合IL-6受体拮抗剂(IL-6Ra)处理培养的Ast,CCK-8法检测细胞活力;实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测IL-6对Ast Kir4.1通道的mRNA和蛋白表达的影响。结果IL-6在一定剂量(≤30 ng/mL)和作用时间(≤24 h)范围内可促进Ast的活化;用30 ng/mL的IL-6处理Ast 24 h后,Kir4.1通道的mRNA和蛋白表达均显著下降,但此作用可被IL-6Ra所逆转。结论IL-6可促进Ast活化和下调Kir4.1通道的表达。

关键词：白细胞介素6(IL-6) 星形胶质细胞(Ast) 内向整流钾离子通道4.1(Kir4.1)

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达格列净对2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝的影响

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药物生物技术 2023年第3期30卷 276-281页

作者：王春李娟杨菲黄丽蚌埠医学院第二附属医院全科医学科安徽蚌埠233030 蚌埠医学院第二附属医院内分泌科安徽蚌埠233030 蚌埠医学院第一附属医院老年医学科安徽蚌埠233030 蚌埠医学院病理生理教研室安徽蚌埠233030

评价达格列净对2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝(NAFLD)患者的体重、血糖、血脂等指标及对患者肝脏脂肪炎性变及肝脏纤维化的影响。方法:选取在蚌埠医学院第二附属医院内分泌科住院的NAFLD患者80例,随机分为对照组和达格列净组,每组40例。... 详细信息

评价达格列净对2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝(NAFLD)患者的体重、血糖、血脂等指标及对患者肝脏脂肪炎性变及肝脏纤维化的影响。方法:选取在蚌埠医学院第二附属医院内分泌科住院的NAFLD患者80例,随机分为对照组和达格列净组,每组40例。两组患者均进行相同饮食、运动指导,并进行相关糖尿病教育。对照组患者根据血糖情况调整胰岛素和/或口服降糖药方案联用(非钠-葡萄糖协同转运体-2抑制剂),达格列净组患者根据血糖情况在原有口服降糖药和/或胰岛素治疗基础上加用达格列净。比较两组患者治疗前后的体重指数(BMI)、血糖、血脂、天冬氨酸转氨酶与血小板比率指数(APRI)、NAFLD纤维化评分(NFS)变化情况,并通过腹部超声和瞬时弹性成像检查对患者治疗前后脂肪肝及肝脏纤维化情况进行比较分析。治疗24 w后两组患者的胆固醇、低密度脂蛋白、NFS无显著变化(P>0.05),达格列净组BMI、甘油三酯(TG)、APRI、可控衰减参数(CAP)、肝脏硬度(LSM)较治疗前显著下降(P<0.05),高密度脂蛋白(HDL-C)显著增高(P<0.05)。治疗后达格列净组BMI、TG及胰岛素抵抗指数明显低于对照组(P<0.05),HDL-C高于对照组(P<0.05)。达格列净组患者在治疗24 w后中度及重度脂肪肝患者显著减少,轻度脂肪肝患者显著增加(P<0.05),对照组患者治疗前后脂肪肝分级无显著变化;两组患者治疗前后肝脏纤维化分级均无明显变化(P>0.05)。达格列净显著降低了2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝患者的血糖、BMI、TG,减轻了患者的胰岛素抵抗,增加了HDL-C,同时,达格列净显著改善了患者的肝脏脂肪变性,但对肝脏的纤维化进展影响较小。

关键词： 2型糖尿病非酒精性脂肪肝达格列净

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敲低lncRNA CACNA1C-AS2促进上皮间质转化增强人食管癌细胞的增殖、侵袭和迁移

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细胞与分子免疫学杂志 2023年第3期39卷 249-257页

作者：秦玉萍曹通许颖蒋旭马佳禹莉蚌埠医学院肿瘤基础研究与临床检验诊断重点实验室安徽蚌埠233000 蚌埠医学院检验医学院输血学教研室安徽蚌埠233000

目的探讨钙电压门控通道亚基α1C反义RNA2(CACNA1C-AS2)通过调节上皮间质转化(EMT)对食管癌细胞恶性生物学行为的影响。方法通过癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析CACNA1C-AS2在癌旁组织和食管癌组织的表达;实时定量PCR检测食管癌细胞中... 详细信息

目的探讨钙电压门控通道亚基α1C反义RNA2(CACNA1C-AS2)通过调节上皮间质转化(EMT)对食管癌细胞恶性生物学行为的影响。方法通过癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析CACNA1C-AS2在癌旁组织和食管癌组织的表达;实时定量PCR检测食管癌细胞中CACNA1C-AS2 mRNA表达水平;在食管癌细胞中敲低和高表达CACNA1C-AS2后,采用噻唑蓝(MTT)法和细胞集落形成实验检测细胞的活力,TranswellTM小室法检测细胞的侵袭能力和纵向迁移能力,划痕愈合实验检测细胞的横向迁移能力,流式细胞术检测细胞的凋亡率;Western blot法检测神经钙黏素(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)和锌指转录因子snail 2(slug)蛋白表达。结果 CACNA1C-AS2在食管癌组织和细胞系中均低表达;敲低EC-9706细胞和Eca-109细胞中CACNA1C-AS2后,食管癌细胞的侵袭、迁移能力和细胞活力显著增强,细胞凋亡减少;N-cadherin、vimentin和slug表达上调。过表达CACNA1C-AS2则结果相反。结论 CACNA1C-AS2通过促进EMT增强食管癌细胞的增殖、侵袭和迁移。

关键词：食管癌长链非编码RNA(lncRNA) 钙电压门控通道亚基α1C反义RNA2(CACNA1C-AS2) 上皮间质转化(EMT)

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纳洛酮对内吗啡肽-1减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤作用的影响

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中国临床药理学杂志 2022年第15期38卷 1752-1756页

作者：吴胜男宗巧凤何珊张蔚屏高琴李正红蚌埠医学院生理教研室蚌埠医学院科研中心

目的探讨纳洛酮对内吗啡肽-1（EM-1）减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤作用的影响。方法将30只SD雄性大鼠随机分为假手术组（S组）、心肌缺血再灌注组（IR组）、内吗啡肽-1后处理组（EM50组）、内吗啡肽-1+纳洛酮后处理组（EM50+Nal组）、... 详细信息

目的探讨纳洛酮对内吗啡肽-1（EM-1）减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤作用的影响。方法将30只SD雄性大鼠随机分为假手术组（S组）、心肌缺血再灌注组（IR组）、内吗啡肽-1后处理组（EM50组）、内吗啡肽-1+纳洛酮后处理组（EM50+Nal组）、纳洛酮后处理组（Nal组）;S组冠状动脉左前降支（LAD）下穿丝线不结扎维持150 min, EM50组在结扎LAD 25 min后经尾静脉输注50μg·kg-1EM-1,EM50+Nal组结扎LAD 10 min后静脉推注3 mg·kg-1纳洛酮，在灌注前5 min将经静脉输注50μg·kg-1EM-1,Nal组结扎LAD 10 min后，静脉注射3 mg·kg-1纳洛酮。用酶联免疫吸附试验试剂盒法检测血浆中乳酸脱氢酶（LDH）、心肌肌钙蛋白Ⅰ（cTnⅠ）、肌酸激酶（CK-MB）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、超氧化物歧化酶（SOD）以及丙二醛（MDA）的含量。结果 S组、IR组、EM50组、EM50+Nal组和Nal组的血浆中CK-MB表达量分别为（38.47±3.88）,（76.27±4.25）,（41.48±2.42）,（70.33±2.50）和（67.58±3.89） U·L-1;这5组血浆中TNF-α表达量分别为（123.58±12.06）,（200.70±7.42）,（135.50±5.04）,（158.25±7.72）和（184.16±9.96） pg·mL-1;这5组血浆中SOD表达量分别为（143.86±7.41）,（84.10±12.42）,（132.77±8.25）,（88.19±7.92）和（94.70±18.31） U·mL-1。IR组的上述指标与EM50组相比，差异均有统计学意义（均P<0.05）;EM50组的上述指标与EM50+Nal组相比，差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论纳洛酮抑制了内吗啡肽-1后处理对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。

关键词：内吗啡肽-1 纳洛酮心肌缺血再灌注损伤心肌保护

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干细胞在皮肤光老化治疗方面的研究进展

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中国皮肤性病学杂志 2022年第8期36卷 963-967页

作者：高薇司悦李姗姗庞金龙王玉帅蚌埠医学院药学院药理学教研室安徽蚌埠233030

皮肤作为机体天然屏障,不仅影响机体健康,在外貌、美容等方面同样重要,但随着时间的推移以及外界环境因素尤其紫外线辐射影响,会诱发多种皮肤损伤问题,如氧化应激、皮肤老化、炎症反应、色素沉积甚至癌变。干细胞是一类具有自我复制能... 详细信息

皮肤作为机体天然屏障,不仅影响机体健康,在外貌、美容等方面同样重要,但随着时间的推移以及外界环境因素尤其紫外线辐射影响,会诱发多种皮肤损伤问题,如氧化应激、皮肤老化、炎症反应、色素沉积甚至癌变。干细胞是一类具有自我复制能力及多向分化潜能的细胞,其强大的旁分泌功能,在抗皮肤光损伤中发挥重要保护作用。本文就紫外线引起的皮肤光老化问题综述干细胞对皮肤的光保护作用及机制,可为临床皮肤病的治疗提供更多可靠依据。

关键词：干细胞旁分泌皮肤光老化光保护

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蠕虫及其衍生产物治疗自身免疫性疾病的临床进展

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细胞与分子免疫学杂志 2023年第12期39卷 1132-1140页

作者：吴心悦高宏宇段姝瑶丁文博杨小迪安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院第一附属医院安徽蚌埠233030 蚌埠医学院病原生物学教研室安徽蚌埠233030

自身免疫性疾病传统治疗自身免疫性疾病的药物会产生诸多不良反应,且目前治疗的方式多侧重于症状的控制而不是治愈,给人们造成了巨大的健康问题和经济负担。近年来,临床研究证明某些蠕虫及其衍生产物治疗自身免疫性疾病具有明显的治疗效... 详细信息

自身免疫性疾病传统治疗自身免疫性疾病的药物会产生诸多不良反应,且目前治疗的方式多侧重于症状的控制而不是治愈,给人们造成了巨大的健康问题和经济负担。近年来,临床研究证明某些蠕虫及其衍生产物治疗自身免疫性疾病具有明显的治疗效果,而其作为一种近天然的免疫调节剂,作用相较于治疗自身免疫性疾病的广谱免疫抑制剂和皮质类固醇更加温和。但不同的蠕虫及其衍生产物治疗自身免疫性疾病的机制与效果也不尽相同。本文主要总结了蠕虫及其衍生产物治疗炎症性肠病、多发性硬化症和自闭症谱系障碍的临床进展,以提供新的临床治疗思路。

关键词：蠕虫自身免疫性疾病临床进展综述

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低分子肝素联合普通肝素在下肢深静脉血栓形成导管直接溶栓中的应用

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中华全科医学 2023年第4期21卷 568-571页

作者：王颖王孝高官泽宇 Ayoade Philip Adegoke 高涌余朝文陈世远卢冉蚌埠医学院检验医学院生化与分子生物学教研室安徽蚌埠233000 蚌埠医学院第一附属医院血管外科安徽蚌埠233004

目的探索不同抗凝方案在下肢深静脉血栓形成(deep venous thrombosis, DVT)导管直接溶栓治疗(catheter-directed thrombectomy, CDT)过程中的溶栓疗效。方法将2021年3月—2022年2月蚌埠医学院医院第一附属医院血管外科收治的35例下肢... 详细信息

目的探索不同抗凝方案在下肢深静脉血栓形成(deep venous thrombosis, DVT)导管直接溶栓治疗(catheter-directed thrombectomy, CDT)过程中的溶栓疗效。方法将2021年3月—2022年2月蚌埠医学院医院第一附属医院血管外科收治的35例下肢DVT患者,采用随机数字表法分为低分子肝素(low molecular weight heparin, LMWH)+小剂量普通肝素(unfractionated heparin, UFH)脉冲应用组(观察组,18例)及单独低分子肝素组(对照组,17例),通过动态监测血浆D-二聚体来评估血栓溶解情况,治疗完成后通过测量手术前后下肢周径的差值及下肢静脉通畅评分分析疗效。结果观察组与对照组的血浆D-二聚体在溶栓过程中(第3天)升高情况为(78.26±11.57)mg/L、(66.06±12.31) mg/L(t=3.020,P=0.005);溶栓后患肢膝下15 cm周径差值为(1.43±0.34)cm、(2.48±0.63)cm(t=6.185,P<0.001);患肢下肢静脉通畅评分为(5.34±0.90)分、(7.29±1.19)分(t=5.235,P<0.001);尿激酶用量为(302.22±20.45)万U、(381.17±27.59)万U(t=9.656,P<0.001),上述数据对比差异均有统计学意义。结论低分子肝素+小剂量普通肝素脉冲在DVT的CDT中疗效是确切的、安全的,可在下肢DVT临床治疗中推广应用。

关键词：深静脉血栓形成溶栓肝素抗凝导管直接溶栓

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