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生物信息学和孟德尔随机化分析口腔鳞状细胞癌差异表达基因与患者预后的相关性

肿瘤防治研究 2025年第2期52卷 133-141页

作者：刘茂林宋晓娜刘雅琪史舒瑄宋国华山西医科大学资产管理部太原030001 山西医科大学实验动物中心实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室太原030001

目的通过生物信息学和孟德尔随机化分析口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的差异表达基因,探讨其与OSCC预后的相关性。方法TCGA数据库和数据集GSE138206筛选OSCC共同的差异基因,并利用孟德尔随机化分析它们之间的关系,进一步通过Cox风险回归分析... 详细信息

目的通过生物信息学和孟德尔随机化分析口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的差异表达基因,探讨其与OSCC预后的相关性。方法TCGA数据库和数据集GSE138206筛选OSCC共同的差异基因,并利用孟德尔随机化分析它们之间的关系,进一步通过Cox风险回归分析差异基因的预后价值,对预后价值高的基因进行单基因差异分析后进一步评估其生物学功能。结果两个数据库共筛选出147个共同差异基因,双样本孟德尔随机化结果显示GREM2与口腔鳞状细胞癌风险增加有关,SH3BGRL2与其风险减小有关,此外DKK1、CCL11和HOXC6是OSCC预后的独立标志基因,而DKK1的预测结果与实际结果的一致性最好。KEGG富集通路显示DKK1可能参与花生四烯酸代谢与亚油酸代谢。此外,DKK1与Tgd和Th2细胞呈正相关,与PDC、Cytotoxic、Mast、CD8 T、TFH、B、T和Th17细胞呈负相关。结论GREM2与OSCC风险增加有关、DKK1在OSCC中高表达且与不良预后相关,其可能参与调控OSCC中花生四烯酸与亚油酸代谢及免疫细胞浸润进程,为后续研究奠定了基础。

关键词：生物信息孟德尔随机化口腔鳞状细胞癌 Cox风险回归分析

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miR-181a-5p过表达慢病毒载体构建及其对OSCC细胞侵袭和迁移的影响

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实用口腔医学杂志 2025年第2期41卷 193-199页

作者：薛瑞续国强杨钧婷杨一言吴学海宋国华山西医科大学实验动物中心实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室太原030000 山西医科大学口腔医学院口腔疾病防治与新材料山西省重点实验室

目的:构建过表达miR-181a-5p的口腔鳞状细胞癌(OSCC)稳转细胞株,观察miR-181a-5p对OSCC细胞生物学行为的影响并探讨其潜在机制。方法:构建miR-181a-5p和对照慢病毒载体,分别转染CAL-27细胞,嘌呤霉素筛选获得稳定转染miR-181a-5p的细胞株... 详细信息

目的:构建过表达miR-181a-5p的口腔鳞状细胞癌(OSCC)稳转细胞株,观察miR-181a-5p对OSCC细胞生物学行为的影响并探讨其潜在机制。方法:构建miR-181a-5p和对照慢病毒载体,分别转染CAL-27细胞,嘌呤霉素筛选获得稳定转染miR-181a-5p的细胞株(OE)和对照细胞株(NC);运用激光共聚焦显微镜观察稳转细胞株荧光;qRT-PCR检测稳转株中miR-181a-5p和Bcl-2的表达、Western blot检测靶蛋白Bcl-2的表达;运用细胞划痕、Transwell实验和克隆形成实验检测稳转株的侵袭、迁移和增殖能力;使用qRT-PCR检测细胞侵袭和迁移关键因子的表达。结果:OE细胞中miR-181a-5p的表达量显著高于NC和未转染的空白对照组(Control)(P<0.01),OE组中Bcl-2的表达显著降低;同时,OE细胞的侵袭、迁移和增殖能力降低。此外,OE细胞中MMP2、MMP9、Vimentin和Ki67表达水平降低,而E-cadherin升高(P<0.01)。结论:miR-181a-5p过表达可显著抑制口腔癌的增殖、侵袭和迁移。

关键词： miR-181a-5p 稳转细胞株口腔癌侵袭迁移

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中国地鼠口腔鳞状细胞癌相关的长链非编码RNA差异表达谱建立及应用

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中国比较医学杂志 2019年第11期29卷 7-15页

作者：王晓堂肖兰飞高继萍梁宇翔轩瑞晶闫晓如高莉宋国华山西医科大学实验动物中心实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室

目的筛选中国地鼠口腔鳞状细胞癌组织样本中具有差异表达的长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA),预测其靶基因,探究靶基因的生物学功能及富集的信号通路。方法采用二甲基苯并蒽涂抹法建立中国地鼠口腔鳞状细胞癌模型,高通量测... 详细信息

目的筛选中国地鼠口腔鳞状细胞癌组织样本中具有差异表达的长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA),预测其靶基因,探究靶基因的生物学功能及富集的信号通路。方法采用二甲基苯并蒽涂抹法建立中国地鼠口腔鳞状细胞癌模型,高通量测序技术构建LncRNA差异表达谱,生物信息学技术筛选差异表达的LncRNA并进行靶基因预测,GO与KEGG富集分析分别预测靶基因的生物学功能及富集的信号通路。结果与正常组织样本相比,口腔鳞状细胞癌组织样本中筛选出54个显著差异表达LncRNA(31个上调,23个下调)。功能性分析表明:与口腔癌相关的GO条目73条;KEGG富集的信号通路25条。结论中国地鼠口腔鳞状细胞癌样本中差异表达的LncRNA可能通过靶向调控其靶基因参与调控多种生物学功能及口腔癌相关的信号通路,在口腔鳞状细胞癌形成过程中可能发挥重要作用。

关键词：中国地鼠口腔鳞状细胞癌长链非编码RNA

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莲心碱通过抑制NF-κB激活Nrf2/HO-1通路发挥抗炎抗氧化作用

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中国实验动物学报 2022年第2期30卷 191-197页

作者：张锐虎姚茹史泽雅郭民霍怡彤侯佳楠陈朝阳山西医科大学实验动物中心太原030001 山西省实验动物与人类疾病动物模型重点实验室太原030001

目的探讨莲心碱(liensinine, lie)在脂多糖(lipid polysaccharides, lPS)诱导的RAW264.7细胞炎症模型中的抗炎抗氧化作用机制。方法将细胞分为对照组(Control group),LPS组(LPS group),莲心碱(0.5、1、2μmol/L)组。采用CCK-8法筛选莲心碱的无细胞毒性浓度,Griess法检测一氧化氮(NO)的浓度,酶联免疫法(ELISA)检测前列腺素2(PGE2)的浓度以及促炎因子(TNF-α、IL-6和IL-1β)的含量、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测COX-2和iNOS mRNA的表达,DCFH-DA探针检测细胞中活性氧(ROS)含量,试剂盒检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)的活性以及谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的含量,蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测NF-κB、MAPK和Nrf2/HO-1通路中关键蛋白的表达情况。结果 0~4μmol/L莲心碱对细胞活力无影响,与LPS组相比,莲心碱组(0.5、1、2μmol/L)细胞中的促炎因子含量下降(P<0.05),NO和PGE2浓度下降(P<0.05),COX-2和iNOS mRNA表达降低(P<0.05),NF-κB和MAPK通路被抑制(P<0.05),且具有剂量依赖性,莲心碱处理后ROS和MDA的含量显著低于LPS组(P<0.01),SOD的活性和GSH的含量显著高于LPS组(P<0.01),Nrf2/HO-1通路活性也较于LPS组显著增加(P<0.05)。结论莲心碱通过抑制NF-κB和MAPK通路与激活Nrf2/HO-1通路发挥抗炎抗氧化作用。

关键词：莲心碱脂多糖 RAW264.7巨噬细胞炎症氧化应激

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周脂素在糖尿病肾病大鼠肾组织中的表达

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中国实验动物学报 2019年第3期27卷 347-352页

作者：卫兵艳樊林花刘茂林轩瑞晶刘田福山西医科大学实验动物中心实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室

目的观察大鼠糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)模型的特点和尿LN对早期DN的诊断价值,探讨周脂素(perilipin,Plin)在DN大鼠肾脏中的表达情况。方法将14只SD雄性大鼠随机分为对照组(普通饲料)和糖尿病肾病模型组(高糖高脂饲料),对照组... 详细信息

目的观察大鼠糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)模型的特点和尿LN对早期DN的诊断价值,探讨周脂素(perilipin,Plin)在DN大鼠肾脏中的表达情况。方法将14只SD雄性大鼠随机分为对照组(普通饲料)和糖尿病肾病模型组(高糖高脂饲料),对照组6只,模型组8只,饲养4周后模型组按照30mg/kg剂量注射1%链脲佐菌素(STZ),检测血糖≥16.7mmol/L,糖尿病模型制作成功,继续喂养6周,检测24h尿蛋白≥30mg/kg,糖尿病肾病模型制作成功。考马斯亮蓝检测24h尿蛋白、ELISA测尿层粘连蛋白,HE染色观察肾组织的病理变化,Real-time PCR及Western blot检测肾脏组织中perilipin表达情况。结果模型鼠24h尿蛋白≥30mg/kg,糖尿病肾病大鼠模型制作成功。和对照组大鼠相比,模型组的肾重/体重比明显增高(P<0.05),尿量、尿层粘连蛋白于5周出现升高、24h尿蛋白于6周时出现升高,且三项指标均随着时间不断增高。肾组织病理检查显示:肾小球肥大,基膜增生,微小血管瘤形成,肾小管管腔变形,上皮脱落、空泡样变,大量单核、淋巴等炎性细胞浸润,间质内胶原纤维增生。模型组大鼠肾组织Plin的mRNA及蛋白表达均明显的升高(P<0.05)。结论尿层粘连蛋白比24h尿蛋白升高得早,可作为早期糖尿病肾病的警示指标。Plin表达增高可能参与了糖尿病肾病肾病变过程,为进一步探讨糖尿病肾病的发病机制提供新的思路。

关键词：周脂素尿层粘连蛋白糖尿病肾病 24h尿蛋白肾脏病理学大鼠

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冬凌草甲素对急性肺损伤小鼠肺组织炎症的抑制作用及相关机制研究

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中药新药与临床药理 2022年第4期33卷 441-445页

作者：郭民高继萍张瑞虎景志杰史泽雅侯佳楠霍怡彤陈朝阳山西医科大学实验动物中心实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室山西太原030001

目的研究冬凌草甲素(oridonin)对急性肺损伤(ALI)小鼠的抗炎作用及其机制。方法将24只Balb/c雄性小鼠随机分为4组:对照组、模型组、冬凌草甲素组和地塞米松(DEX)组,每组6只。小鼠腹腔注射冬凌草甲素(10 mg·kg^(-1))或地塞米松(5 mg... 详细信息

目的研究冬凌草甲素(oridonin)对急性肺损伤(ALI)小鼠的抗炎作用及其机制。方法将24只Balb/c雄性小鼠随机分为4组:对照组、模型组、冬凌草甲素组和地塞米松(DEX)组,每组6只。小鼠腹腔注射冬凌草甲素(10 mg·kg^(-1))或地塞米松(5 mg·kg^(-1))1 h后,鼻内滴注脂多糖(0.5 mg·kg^(-1))作用12 h诱导急性肺损伤,设为冬凌草甲素组和地塞米松组;模型组小鼠仅鼻内滴注脂多糖作用12 h,建立急性肺损伤模型;对照组仅鼻内滴注等剂量生理盐水。采用HE染色检测肺组织病理损伤;酶联免疫吸附(ELISA)法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6;Western Blot法检测肺组织核因子κB(NF-κB)p65、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)相关蛋白质(ERK、p38和JNK)磷酸化。结果与对照组比较,模型组肺组织出现明显病理损伤,中性粒细胞和巨噬细胞浸润增多(P<0.01);与模型组比较,冬凌草甲素组和地塞米松组小鼠肺组织中性粒细胞和巨噬细胞浸润减少(P<0.05)。与对照组比较,模型组支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β和IL-6含量增加(P<0.01);与模型组比较,冬凌草甲素组和地塞米松组小鼠支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β和IL-6含量减少(P<0.01)。与对照组比较,模型组肺组织磷酸化的p65、ERK、p38和JNK增多(P<0.01);与模型组比较,冬凌草甲素组和地塞米松组肺组织磷酸化的p65、ERK、p38和JNK减弱(P<0.05,P<0.01)。结论冬凌草甲素可减轻急性肺损伤小鼠肺组织炎症反应,其作用机制与抑制NF-κB和MAPK信号通路有关。

关键词：冬凌草甲素急性肺损伤抑制炎症因子核因子κB(NF-κB) 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK) 小鼠

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中国实验动物学报 2017年第3期25卷 263-269页

作者：庞文彪李莉红皇甫冰刘茂林张锐虎宋国华山西医科大学实验动物中心实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室太原030001

目的探讨凋亡相关基因caspase-3、caspase-9、Bax、Bcl-2在中国地鼠口腔正常黏膜、上皮单纯增生、上皮异常增生和鳞状细胞癌组织中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学法、RT-PCR检测正常中国地鼠口腔黏膜上皮、单纯增生上皮、异常增... 详细信息

目的探讨凋亡相关基因caspase-3、caspase-9、Bax、Bcl-2在中国地鼠口腔正常黏膜、上皮单纯增生、上皮异常增生和鳞状细胞癌组织中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学法、RT-PCR检测正常中国地鼠口腔黏膜上皮、单纯增生上皮、异常增生上皮和鳞癌组织中caspase-3、caspase-9、Bax、Bcl-2蛋白及mRNA的表达。结果在口腔黏膜癌变过程中,鳞癌组织中抑制凋亡蛋白Bcl-2表达明显高于口腔正常黏膜、上皮单纯增生、上皮异常增生(P<0.05);异常增生上皮caspase-3、caspase-9、Bax表达均明显高于正常组(P<0.05),但随着增生程度的加重,caspase-3、caspase-9、Bax表达明显降低(P>0.05)。相关性分析显示,鳞癌组织中Bcl-2与Bax、caspase-3、caspase-9呈负相关(P<0.05)。RT-PCR结果表明,与正常组织相比,鳞癌组织中Bcl-2高表达,而caspase-3、caspase-9、Bax的mRNA表达显著下调(P<0.05)。结论本实验在中国地鼠鳞癌组织中caspase-3、caspase-9、Bax表达降低而Bcl-2表达上升,揭示了caspase-3、caspase-9、Bax、Bcl-2表达与口腔鳞癌的发生、发展密切相关,可以为口腔颊囊黏膜癌的基因治疗提供一些线索或并为评价OSCC的生物学特征及预后提供参考。

关键词：中国地鼠口腔鳞状细胞癌凋亡

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中国地鼠口腔颊黏膜癌中miRNA与mRNA表达谱的关联分析

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中国实验动物学报 2018年第2期26卷 158-164页

作者：李莉红庞文彪常凯阎小艳高继萍宋国华山西医科大学实验动物中心实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室太原030001

目的构建中国地鼠口腔颊黏膜癌(OSCC)中差异表达的miRNA和mRNA表达谱,初步预测与OSCC发生发展相关的miRNA和mRNA。方法运用新一代高通量测序技术构建miRNA和mRNA表达谱,通过Gene Ontology功能富集和KEGG Pathway分析预测与OSCC发生发展... 详细信息

目的构建中国地鼠口腔颊黏膜癌(OSCC)中差异表达的miRNA和mRNA表达谱,初步预测与OSCC发生发展相关的miRNA和mRNA。方法运用新一代高通量测序技术构建miRNA和mRNA表达谱,通过Gene Ontology功能富集和KEGG Pathway分析预测与OSCC发生发展相关的miRNA和mRNA。结果成功构建中国地鼠口腔颊黏膜癌中差异表达的miRNA和mRNA表达谱,共发现11个已知miRNA、3个新miRNA显著性差异表达和194个mRNA差异表达,且一个miRNA可调控多个mRNA,多个miRNA靶向调控某个mRNA。结论本实验OSCC中差异表达的miRNA通过调控mRNA形成复杂的调控网络,在口腔癌的发生发展中发挥重要作用,为口腔癌的发生、发病机制,及临床治疗及预后判断提供理论依据。

关键词：口腔鳞状细胞癌 miRNA mRNA 高通量测序

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非编码RNA调控口腔鳞状细胞癌葡萄糖代谢重编程的研究进展

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中国比较医学杂志 2022年第3期32卷 91-97页

作者：杨一言高继萍续国强王晓堂宋国华山西医科大学实验动物中心实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室太原030001

口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)是头颈部最常见的恶性肿瘤之一,其发病率在全球范围内逐年上升。葡萄糖代谢重编程是肿瘤中最具代表的代谢特征,具有独特能量代谢特点,在氧气充足的情况下,肿瘤细胞仍会优先选择糖酵解... 详细信息

口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)是头颈部最常见的恶性肿瘤之一,其发病率在全球范围内逐年上升。葡萄糖代谢重编程是肿瘤中最具代表的代谢特征,具有独特能量代谢特点,在氧气充足的情况下,肿瘤细胞仍会优先选择糖酵解,而不是选择能够高效产能的线粒体氧化磷酸化(oxidative phosphorylation,OXPHOS)。当前研究表明在口腔鳞状细胞癌的发生发展过程中非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)可以直接靶向葡萄糖转运蛋白及关键酶来改变葡萄糖代谢,或者通过调节癌症相关信号通路间接改变葡萄糖代谢。本文对ncRNA调控口腔鳞状细胞癌有氧糖酵解的有关机制进行综述。

关键词：非编码RNA 口腔鳞状细胞癌葡萄糖代谢有氧糖酵解

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MiR-31转基因小鼠的构建及其在组织器官的表达

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中国实验动物学报 2018年第1期26卷 1-7页

作者：付明阳王春芳李宵田峰张永涛李鹏飞陈朝阳刘芳景志杰张引红山西医科大学实验动物中心实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室太原030001

目的构建稳定过表达的miR-31转基因小鼠,检测其主要组织器官中miR-31的表达变化情况并对在体miR-31过表达的应用提供合格的工具鼠。方法使用Gateway cloning技术构建miR-31过表达载体,使用DNA显微注射技术将构建好的载体注入受精卵内,... 详细信息

目的构建稳定过表达的miR-31转基因小鼠,检测其主要组织器官中miR-31的表达变化情况并对在体miR-31过表达的应用提供合格的工具鼠。方法使用Gateway cloning技术构建miR-31过表达载体,使用DNA显微注射技术将构建好的载体注入受精卵内,随后转移至假孕母鼠内,待其自然生产。将新生小鼠提取尾部DNA,PCR及琼脂糖凝胶电泳鉴定miR-31过表达阳性小鼠,筛选阳性小鼠并饲养繁殖。另取阳性小鼠,提取主要组织器官的miRNA并使用RT-PCR检测其miR-31的表达量。同时对比阳性小鼠和野生型小鼠神经系统中Nestin的表达和神经干细胞的数量。结果成功构建了miR-31过表达转基因小鼠,并在屏障环境下饲养繁殖至14代以上。各主要组织器官miR-31的表达均升高且稳定表达。阳性小鼠Nestin的表达和神经干细胞数量均高于野生型小鼠。结论通过使用Gateway cloning技术成功构建了miR-31过表达转基因小鼠,且在各代小鼠中miR-31的表达稳定,神经系统内的神经干细胞数量多于野生型小鼠,可为进一步研究miR-31过表达后在体内的功能和神经系统疾病的治疗提供良好的工具小鼠。

关键词： MiR-31 转基因 FVB小鼠

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