检索结果-内蒙古大学图书馆

山东大学学报（医学版） 2009年第2期47卷 25-29页

作者：彭莹张晓梅雷雪明程轶喆孙允东刘娟于晗齐眉王晓燕周亚滨山东大学实验畸形学教育部重点实验室山东大学医学院微生物学教研室济南250012

目的构建表达绿色荧光蛋白的巨细胞病毒Towne株,检测其活性,研究其在抗巨细胞病毒药物筛选中的应用价值。方法将PHM673质粒扩增纯化,采用脂质体转染法转入原代培养的人胚肺成纤维细胞,感染人巨细胞病毒,获得重组病毒GFP-HCMV,采用空斑... 详细信息

目的构建表达绿色荧光蛋白的巨细胞病毒Towne株,检测其活性,研究其在抗巨细胞病毒药物筛选中的应用价值。方法将PHM673质粒扩增纯化,采用脂质体转染法转入原代培养的人胚肺成纤维细胞,感染人巨细胞病毒,获得重组病毒GFP-HCMV,采用空斑法纯化重组病毒,采用PCR法鉴定,获得携带绿色荧光蛋白的重组巨细胞病毒。用抗病毒药物更昔洛韦进行干预,检测重组病毒荧光表达强度与药物浓度的关系。结果成功构建携带绿色荧光蛋白的重组巨细胞病毒,荧光病毒的活性与原始病毒的活性差异无统计学意义(P>0.05),生长繁殖并没有受到影响。重组病毒的荧光表达强度与抗巨细胞病毒药物更昔洛韦抑制病毒的效价有关。结论该荧光病毒可以作为研究病毒致病机制和抗病毒药物筛选的新型工具。

关键词：巨细胞病毒转染绿色荧光蛋白

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嗜酸乳杆菌作用人巨噬细胞后对其抗宫颈癌细胞作用影响的研究

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中国现代医学杂志 2009年第2期19卷 249-252,257页

作者：王红艳邵春红吴晓燕张旭艳周亚宾贾继辉潍坊医学院微生物学教研室山东潍坊261042 山东大学医学院实验畸形学教育部重点实验室山东济南250012 潍坊医学院附属医院妇科山东潍坊261042

目的诱导获得人外周血巨噬细胞(MΦ),研究嗜酸乳杆菌作用MΦ后对其抗肿瘤效应的影响及机制。方法自正常人外周血分离获得单核细胞,体外rhGM-CSF诱导培养,观察细胞形态并检测其相关表型;利用MTT法检测所诱导MΦ对宫颈癌细胞HeLa的直接抑... 详细信息

目的诱导获得人外周血巨噬细胞(MΦ),研究嗜酸乳杆菌作用MΦ后对其抗肿瘤效应的影响及机制。方法自正常人外周血分离获得单核细胞,体外rhGM-CSF诱导培养,观察细胞形态并检测其相关表型;利用MTT法检测所诱导MΦ对宫颈癌细胞HeLa的直接抑瘤效应;ELISA法检测其培养上清中TNF-α及IL-12的含量。结果诱导7d的贴壁细胞具有典型的MΦ形态,流式分析显示为分化成熟的MΦ;体外细胞毒实验显示:嗜酸乳杆菌活菌状态和热灭活状态以10∶1、1∶1与MΦ相互作用后能够显著增强MΦ对HeLa细胞的杀伤作用(P<0.05),激活后的MΦ在一定效靶比为10∶1时其肿瘤抑制率最大,与LPS阳性对照相比,其抗瘤活性差异不存在显著性(P>0.05);经嗜酸乳杆菌活菌和热灭活菌作用的MΦ能显著提高IL-12和TNF-α两种细胞因子的分泌量,而且存在剂量依赖性,与空白对照组比较差异存在显著性(P<0.05)。结论两种生物状态的嗜酸乳杆菌均能够增强人MΦ抗宫颈癌细胞作用。

关键词：嗜酸乳杆菌巨噬细胞抗肿瘤作用宫颈癌细胞

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热灭活嗜酸乳杆菌黏附于HeLa细胞后肿瘤细胞免疫学性状的变化

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中国病理生理杂志 2008年第8期24卷 1510-1513页

作者：王红艳吴晓燕张旭艳邢永梅周亚滨贾继辉田永杰潍坊医学院微生物学教研室潍坊医学院附属医院妇产科山东潍坊261042 山东大学医学院实验畸形学教育部重点实验室山东大学附属山东省立医院妇产科山东济南250012

目的:比较热灭活嗜酸乳杆菌黏附于宫颈癌HeLa细胞后对肿瘤细胞免疫学性状的影响。方法:运用流式细胞技术检测热灭活嗜酸乳杆菌黏附于HeLa细胞后免疫分子表达状况,运用MTT法分析淋巴细胞对HeLa细胞的杀伤作用。结果:热灭活的嗜酸乳杆菌... 详细信息

目的:比较热灭活嗜酸乳杆菌黏附于宫颈癌HeLa细胞后对肿瘤细胞免疫学性状的影响。方法:运用流式细胞技术检测热灭活嗜酸乳杆菌黏附于HeLa细胞后免疫分子表达状况,运用MTT法分析淋巴细胞对HeLa细胞的杀伤作用。结果:热灭活的嗜酸乳杆菌黏附于HeLa细胞后不影响MHC-I分子的表达(P>0.05),可显著增强CD80、CD86的表达,并且可以显著增强NK细胞对其杀伤活性(P<0.05)。细胞毒性淋巴细胞(CTL)对热灭活嗜酸乳杆菌黏附的HeLa细胞的杀伤作用显著高于对照组(P<0.05)。结论:热灭活嗜酸乳杆菌黏附于宫颈癌HeLa细胞后可增强其诱导抗肿瘤效应。

关键词：乳杆菌嗜酸 HeLa细胞免疫细胞

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祛毒养心冲剂对病毒性心肌炎的疗效及机制

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山东大学学报（医学版） 2008年第5期46卷 466-469页

作者：王凤钟丽红周亚滨于庆涛唐伟雷雪明彭莹于晗董波山东大学附属省立医院心内科济南250021 山东大学齐鲁医院药剂科济南250012 实验畸形学教育部重点实验室山东大学医学院微生物学教研室济南250012

目的探讨祛毒养心冲剂对病毒性心肌炎(VMC)的疗效及作用机制。方法将60只小鼠随机分为正常对照组、病毒组、药物组,每组20只。后两组小鼠每只腹腔注射柯萨奇病毒(CVB3)液,正常对照组腹腔注射不含病毒的Eagle′s液。药物组于接种病毒后2... 详细信息

目的探讨祛毒养心冲剂对病毒性心肌炎(VMC)的疗效及作用机制。方法将60只小鼠随机分为正常对照组、病毒组、药物组,每组20只。后两组小鼠每只腹腔注射柯萨奇病毒(CVB3)液,正常对照组腹腔注射不含病毒的Eagle′s液。药物组于接种病毒后24 h灌胃给予祛毒养心冲剂。21 d后,处死所有小鼠并取其心脏。进行心肌病理检查,采用实时荧光定量PCR法和免疫组化技术检测心肌组织中白细胞介素-6(IL-6)mRAN和蛋白的表达。结果与病毒组相比,应用祛毒养心冲剂治疗后,小鼠心肌组织病变积分显著下降(P<0.05),心肌组织中IL-6的表达明显降低(P<0.05)。结论祛毒养心冲剂对VMC具有明显治疗作用,其作用机制是通过抑制IL-6在心脏中的表达而实现的。

关键词：柯萨奇病毒B 病毒性心肌炎白细胞介素-6 小鼠,BALBC 祛毒养心冲剂

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人巨细胞病毒感染致血管内皮细胞损伤机制的研究

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山东大学学报（医学版） 2007年第11期45卷 1081-1084页

作者：王凤吴建敏周亚滨李树英程轶喆齐眉唐伟王红刘娟于晗实验畸形学教育部重点实验室山东大学医学院微生物学教研室济南250012

目的观察人巨细胞病毒(HCMV)感染对人血管内皮细胞氧化应激的影响及对血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)和糖基化终产物受体(RAGE)时序性表达的影响,研究HCMV感染致动脉粥样硬化(AS)的作用机制。方法用HCMV感染血管内皮细胞,用激光共聚焦显微... 详细信息

目的观察人巨细胞病毒(HCMV)感染对人血管内皮细胞氧化应激的影响及对血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)和糖基化终产物受体(RAGE)时序性表达的影响,研究HCMV感染致动脉粥样硬化(AS)的作用机制。方法用HCMV感染血管内皮细胞,用激光共聚焦显微镜检测细胞内活性氧(ROS)的改变;采用RT-PCR方法检测不同感染时段细胞VCAM-1及RAGEmRNA的表达。结果HCMV感染血管内皮细胞后,HCMV组荧光强度显著高于对照组(P<0.01)。感染0 h时,VCAM-1 mRNA有基础水平的表达,4 h开始升高,8 h时达高峰,12 h开始回落,24 h回落更明显,与0 h比较,均有统计学意义(P<0.01),48 h接近0 h表达水平(P>0.05)。感染0 h时,RAGEmRNA有基础水平的表达,4 h开始升高,8 h时表达水平明显升高,随感染时间延长,表达量逐渐增高,感染24 h时达高峰,48 h开始回落,仍维持在较高的水平,各时段与0 h比较,均有统计学意义(P<0.01)。结论HCMV感染血管内皮细胞后能够增强氧化应激,促进VCAM-1及RAGE的mRNA表达,并且呈时间依赖性。HCMV有可能通过增强氧化应激、上调VCAM-1及RAGE的表达介导血管内皮细胞的炎症反应,促进动脉粥样硬化的发生、发展。

关键词：巨细胞病毒脐静脉活性氧血管细胞粘附分子-1 糖基化终产物受体

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巨细胞病毒感染致人脐静脉内皮细胞E选择素时序性的表达

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山东大学学报（医学版） 2007年第2期45卷 124-126页

作者：刘真真周亚滨唐伟李树英吴建敏程轶喆齐眉王红刘娟于晗实验畸形学教育部重点实验室山东大学医学院微生物学教研室山东济南250012

目的:观察人类巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)作用于血管内皮细胞(vein endothelialcells,ECV)对E选择素时序性的表达,探讨HCMV感染致动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)发生和发展的可能机制。方法:用HCMV感染ECV,采用RT-PCR方法检测不同感染时段细胞E选择素mRNA及蛋白的表达。结果:HCMV感染ECV后,感染0 h时E选择素mRNA有基础水平的表达,4 h升高并达高峰,8 h时开始回落,12 h回落显著,24 h回落更明显,与0 h比较,差异均有统计学意义(P<0.01),48 h接近0 h表达水平(P>0.05)。结论:HCMV感染ECV后能够促进E选择素表达,并且呈时间依赖性。HCMV有可能通过上调E选择素的表达,介导ECV的炎症反应,促进AS的发生、发展。

关键词：人类巨细胞病毒人脐静脉内皮细胞 E选择素

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高三尖杉酯碱白血病多药耐药细胞系K562/HHT的诱导及米非司酮逆转耐药的研究

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中国病理生理杂志 2007年第11期23卷 2168-2172页

作者：刘永陈春燕孔德晓王琳琳曹倩贾继辉山东大学第二医院血液-肿瘤科山东济南250033 山东大学医学院微生物学教研室山东济南250012 山东大学实验畸形学教育部重点实验室山东济南250012

目的:研究高三尖杉酯碱(HHT)诱导的白血病多药耐药细胞株耐药机制以及米非司酮(RU486)逆转其耐药效应。方法:采用反复短期暴露并逐渐增加HHT浓度的方法建立白血病多药耐药细胞系K562/HHT,MTT法检测K562/HHT细胞对化疗药物的敏感性及RU48... 详细信息

目的:研究高三尖杉酯碱(HHT)诱导的白血病多药耐药细胞株耐药机制以及米非司酮(RU486)逆转其耐药效应。方法:采用反复短期暴露并逐渐增加HHT浓度的方法建立白血病多药耐药细胞系K562/HHT,MTT法检测K562/HHT细胞对化疗药物的敏感性及RU486对该细胞的细胞毒效应,RT-PCR法检测细胞MDR1基因、葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)基因的表达,流式细胞术检测细胞P-糖蛋白的表达和柔红霉素积累量,免疫组化法检测细胞Bcl-2、Bax、caspase-3的表达状况。结果:成功诱导出多药耐药细胞系K562/HHT,K562/HHT较其亲代细胞K562对HHT、阿霉素、长春新碱、依托泊苷的耐药性分别提高462.6、2.8、1183.4、2.6倍,K562/HHT细胞MDR1基因、GCS基因、P-糖蛋白和Bcl-2/Bax比值明显高于K562细胞(P<0.05),caspase-3表达、柔红霉素积累量明显低于K562细胞(P<0.05)。10μmol/L的RU486对K562/HHT细胞无明显杀伤(存活率94.67%±2.48%),该浓度RU486可不同程度地逆转K562/HHT细胞对上述化疗药物的耐药性,RU486作用后K562/HHT细胞caspase-3表达、柔红霉素积累量明显高于作用前(P<0.05),Bcl-2/Bax比值明显低于作用前(P<0.05)。结论:白血病细胞系K562在HHT的作用下可形成多药耐药细胞系K562/HHT,其耐药性的形成与P-糖蛋白、GCS、Bcl-2/Bax比值及caspase-3等机制有关,RU486可通过提高细胞内药物积累、调节Bcl-2/Bax比值和caspase-3的表达逆转此细胞的耐药性。

关键词：高三尖杉酯碱米非司酮抗药性多药 K562细胞

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巨细胞病毒感染人脐静脉内皮细胞后RAGEmRNA的时序性表达及其意义

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山东大学学报（医学版） 2006年第8期44卷 757-759,769页

作者：吴建敏周亚滨程轶喆李树英唐伟赵蔚明贾继辉栾怡齐眉王红刘娟于晗于修平实验畸形学教育部重点实验室山东大学医学院微生物学教研室山东济南250012

目的:研究人巨细胞病毒(HCMV)感染对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)糖基化终产物受体(RAGE)表达的影响,探讨HCMV感染致动脉粥样硬化的作用机制。方法:用HCMV感染HUVEC,采用RT-PCR方法检测不同感染时段细胞RAGEmRNA的表达。结果:HCMV感染HUVEC... 详细信息

目的:研究人巨细胞病毒(HCMV)感染对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)糖基化终产物受体(RAGE)表达的影响,探讨HCMV感染致动脉粥样硬化的作用机制。方法:用HCMV感染HUVEC,采用RT-PCR方法检测不同感染时段细胞RAGEmRNA的表达。结果:HCMV感染HUVEC后,0 h时RAGEmR-NA有基础水平的表达,4 h开始升高,8 h时表达水平明显升高,随感染时间延长,表达量逐渐增高,感染24 h时达高峰,48 h开始回落,72 h表达量仍维持在较高的水平,显著高于0 h。各时段与0 h比较,均有统计学意义(P<0.01)。结论:HCMV感染人脐静脉内皮细胞后能够促进RAGE mRNA的表达,并且呈时间依赖性。HCMV有可能通过上调RAGE介导内皮细胞的炎症反应,促进动脉粥样硬化的发生、发展。

关键词：人巨细胞病毒感染受体,糖基化终产物人脐静脉内皮细胞

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COX-2在人膀胱移行细胞癌中的表达

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山东大学学报（医学版） 2006年第11期44卷 1139-1141,1145页

作者：马天加周亚滨张怀强周春文山东大学第二医院泌尿外科山东济南250033 山东大学实验畸形学教育部重点实验室医学院微生物学教研室山东济南250012

目的:检测在人膀胱移行细胞癌(transitional cell carcinoma of bladder,BTCC)组织和正常膀胱组织中COX-2 mRNA和COX-2蛋白的表达,探讨COX-2在人BTCC中发生发展的作用。方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学技术检测人BTC... 详细信息

目的:检测在人膀胱移行细胞癌(transitional cell carcinoma of bladder,BTCC)组织和正常膀胱组织中COX-2 mRNA和COX-2蛋白的表达,探讨COX-2在人BTCC中发生发展的作用。方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学技术检测人BTCC和正常膀胱组织中COX-2 mRNA和COX-2蛋白的表达,并行统计分析。结果:RT-PCR检测13例新鲜BTCC组织COX-2mRNA均阳性表达,7例正常膀胱粘膜中无阳性表达,两者差异有统计学意义(P<0.01)。免疫组织化学研究结果与RT-PCR相似,COX-2蛋白主要集中在肿瘤细胞胞浆内,阳性表达率为55.74%,正常膀胱粘膜中没有表达。结论:COX-2 mRNA和蛋白在人BTCC组织中表达增高,COX-2蛋白的表达强度与肿瘤的分级和分期有关,表达强度随肿瘤恶性程度的增加而增加,说明COX-2可能在BTCC的发生发展中起着重要作用。

关键词：膀胱肿瘤环氧合酶-2 逆转录聚合酶链反应免疫组织化学

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