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第五届媒介生物可持续控制国际论坛

作者：陈泽任巧云罗金李凯罗建勋殷宏刘光远中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学生命科学技术学院甘肃兰州730070

目的调查长角血蜱在我国的分布现状，并基于16S rDNA序列对其进行多态性分析.方法用PCR技术克隆长角血蜱16S rDNA序列，其长度约为430 bp.利用Clustal X2.0.11对这些基因序列进行比对，然后用TCS 1.2.1进行不同地理分布的长角血蜱进... 详细信息

目的调查长角血蜱在我国的分布现状，并基于16S rDNA序列对其进行多态性分析.方法用PCR技术克隆长角血蜱16S rDNA序列，其长度约为430 bp.利用Clustal X2.0.11对这些基因序列进行比对，然后用TCS 1.2.1进行不同地理分布的长角血蜱进行多态性分析.结果长角血蜱存在8种单倍型，其中Ⅰ型和Ⅱ型最为常见，分别含有21和16个个体，其次为Ⅲ、Ⅳ型分别包括4和5个个体.Ⅴ-Ⅷ型均由单一个体构成.此外，同一地区的不同个体也包括几种不同的单倍型，其中北京和贵州独山的长角血蜱多态性最大(数量分别为4和3)，其次为湖北、广西和山东(单倍型均为2种)，云南、甘肃和河北的多态性最低(1种).结论我国分布的长角血蜱的16S rDNA具有较高的多态性，并具有一定的地区特异性.

关键词： 16S rRNA基因长角血蜱多态性分析

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长角血蜱MESK基因的克隆及其生物学特性分析

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中国兽医科学 2013年第8期43卷 806-811页

作者：赵波刘光远罗金张萍田占成谢俊仁田美媛王芳芳袁小松中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046

为进一步了解MESK基因在长角血蜱免疫应答中的作用,克隆了长角血蜱MESK基因全长序列,采用有关生物信息学软件对该基因序列的一级结构进行了分析;构建了真核表达载体pEGFP-C1-MESK,采用脂质体转染法在HEK293细胞及HeLa细胞中对其进行了... 详细信息

为进一步了解MESK基因在长角血蜱免疫应答中的作用,克隆了长角血蜱MESK基因全长序列,采用有关生物信息学软件对该基因序列的一级结构进行了分析;构建了真核表达载体pEGFP-C1-MESK,采用脂质体转染法在HEK293细胞及HeLa细胞中对其进行了表达。48h后对细胞进行裂解,用兔抗长角血蜱阳性血清与表达出的重组蛋白进行反应,以检测重组蛋白的免疫活性。结果显示,MESK基因全长为1 426bp,包括1个1 185bp的开放阅读框。该基因含有5个N-糖基化位点、5个豆蔻酰化位点、9个酪氨酸蛋白Ⅱ激酶磷酸化位点、1个酪氨酸蛋白激酶位点、2个cAMP和cGMP依赖性蛋白激酶磷酸化位点、1个蛋白磷酸激酶C磷酸化位点。SDS-PAGE分析及Western-blot分析表明,表达出的重组蛋白的分子质量约为71ku,且以与兔抗长角血蜱阳性血清反应,免疫原性良好。结果表明,MESK基因可以作为一种重要的分子标记参与蜱分类的研究,在作为候选抗蜱疫苗的研究中具有重要的开发价值。

关键词：长角血蜱 MESK基因生物信息学克隆真核表达

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羊口疮病的研究进展

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中国预防兽医学报 2013年第5期35卷 426-430页

作者：李慧霞朱学亮骆学农中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部草食动物疫病重点实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

羊口疮（OrO是由羊口疮病毒（Offvirus，ORFV）即接触传染性脓疱皮炎病毒（Contagious pustular dermatitisvirus，CPDV）引起的人畜共患、接触性、嗜上皮性传染病。以在口、唇、舌、鼻、乳房等部位形成丘疹、水疱、脓疱和疣状痂皮为特... 详细信息

羊口疮（OrO是由羊口疮病毒（Offvirus，ORFV）即接触传染性脓疱皮炎病毒（Contagious pustular dermatitisvirus，CPDV）引起的人畜共患、接触性、嗜上皮性传染病。以在口、唇、舌、鼻、乳房等部位形成丘疹、水疱、脓疱和疣状痂皮为特征。该病最早发现于欧洲，

关键词：羊口疮口疮病传染性脓疱皮炎人畜共患接触性传染病病毒乳房

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甘肃、湖南和广东三省蜱体内嗜吞噬细胞无形体与伯氏疏螺旋体共感染研究(英文)

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中国人兽共患病学报 2013年第2期29卷 117-121页

作者：李雁康逢义杨吉飞孙彩琴刘志杰殷宏家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省寄生虫学重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所兰州730046 兰州园艺试验场兰州730083 兰州良种场兰州730084

目的嗜吞噬细胞无形体和伯氏疏螺旋体是由媒介蜱传播的引起人粒细胞无形体病和莱姆病的病原。目前,对两种病原在蜱体内共感染流行情况的研究相对较少。方法以甘肃、湖南和广东三个省采集到3个蜱种、共543份样品为研究对象,检测嗜吞噬细... 详细信息

目的嗜吞噬细胞无形体和伯氏疏螺旋体是由媒介蜱传播的引起人粒细胞无形体病和莱姆病的病原。目前,对两种病原在蜱体内共感染流行情况的研究相对较少。方法以甘肃、湖南和广东三个省采集到3个蜱种、共543份样品为研究对象,检测嗜吞噬细胞无形体和伯氏疏螺旋体在蜱体内的感染情况。结果嗜吞噬细胞无形体和伯氏疏螺旋体在不同地区采集到的蜱体内的感染率不同,分别为3.2%～20.0%和2.3%～19.3%。在检测的样品中,共发现有7份样品中同时感染嗜吞噬细胞无形体和伯氏疏螺旋体。青海血蜱、血红扇头蜱和微小牛蜱中均检测到这两种病原。结论青海血蜱、血红扇头蜱和微小牛蜱均能够携带嗜吞噬细胞无形体和伯氏疏螺旋体,可能为这两种病原在自然界的持续存在和循环提供了条件。此研究结果丰富了人粒细胞无形体病和莱姆病的流行病学信息,有利于提高这两种病的防控策略。

关键词：蜱嗜吞噬细胞无形体伯氏疏螺旋体流行

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microRNA碱基编辑特性的研究进展

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中国兽医科学 2013年第6期43卷 650-654页

作者：罗金刘光远袁小松王芳芳田占成谢俊仁王辉中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫原病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046 牛津大学生态水文研究中心

为了更好地了解microRNA分子中碱基编辑的产生机理,论述了microRNA序列碱基编辑特征,以及碱基编辑在生物组织、物种进化、神经发育等方面的特征,并就碱基编辑在microRNA中的研究方法进行了阐述。展望了碱基编辑在microRNA分子中的研究前... 详细信息

为了更好地了解microRNA分子中碱基编辑的产生机理,论述了microRNA序列碱基编辑特征,以及碱基编辑在生物组织、物种进化、神经发育等方面的特征,并就碱基编辑在microRNA中的研究方法进行了阐述。展望了碱基编辑在microRNA分子中的研究前景,以期为碱基编辑的生物学机制研究提供参考。

关键词： microRNA 碱基编辑研究进展

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梨形虫及其宿主硬蜱的协同进化分析

梨形虫及其宿主硬蜱的协同进化分析

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中国动物学会寄生虫学专业委员会第十四次全国学术会议暨第五次国际寄生虫学学术研讨会

作者：苟惠天关贵全刘爱红刘志杰李有全任巧云陈泽杨吉飞殷宏罗建勋家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省寄生虫学重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所

宿主-寄生虫之间的协同进化是寄生虫生物多样性的主要作用力,而且这种影响依赖于长期的自然动态过程。虽然在全球范围内硬蜱的种类很多,但对于某一种梨形虫来说,其宿主还是非常有限。甚至,对于进化关系很近的梨形虫,其宿主仍相差很大。... 详细信息

宿主-寄生虫之间的协同进化是寄生虫生物多样性的主要作用力,而且这种影响依赖于长期的自然动态过程。虽然在全球范围内硬蜱的种类很多,但对于某一种梨形虫来说,其宿主还是非常有限。甚至,对于进化关系很近的梨形虫,其宿主仍相差很大。这种复杂的现象说明梨形虫和硬蜱经历了相当长的进化时间。为了探讨这种宿主-寄生虫之间的协同进化关系,我们基于COI基因使用系统进化分析方法以及计算分子钟的方法来进行研究。结果,共收集到14种梨形虫(8种巴贝斯虫和6种泰勒虫)的COI序列,序列长度为950bp;收集到31种硬蜱(5种血蜱,3种革蜱,7种璃眼蜱,3种花蜱,7种扇头蜱,6种硬蜱)的COI序列,序列长度为586bp。用BEAST估算到梨形虫的分化时间在古新世(Palaeoceno,53-65Mya),约为56.48 Mya(95%HPD 28.17-86.87Mya),泰勒虫的分化时间约为23.38Mya(95%HPD 11.11-36.71 Mya),巴贝斯虫的分化时间约为25.74Mya(95%HPD 12.75-40.73 Mya)。巴贝斯虫形成的时间略早于泰勒虫,但二者均发生在始新世晚期。同时,估算到硬蜱科的分化时间在白垩纪(Cretaceous,65-145Mya),约为86 Mya(95%HPD 61.11-104.16Mya)。硬蜱属、血蜱属、革蜱属、璃眼蜱属、花蜱属、扇头蜱属的分化时间分别为46.71 Mya,46.58 Mya,35.72 Mya,35.42 Mya,34.85 Mya,37.72 Mya。硬蜱科各属的分化时间均发生在古新世(Palaeoceno)晚期-始新世(Eocene)早期。将二者的分子钟进行比较,梨形虫的分化时间晚于其宿主硬蜱。这种寄生虫-宿主进化时间上的不一致性说明梨形虫早期的多样性形成过程,并非由硬蜱伴随而发生。宿主转移事件导致了主要梨形虫谱系的快速分化。另外,从系统进化关系上分析梨形虫和其相应宿主的一致性,某些硬蜱可以传播两种或者以上的梨形虫;反之,有些梨形虫也可被多种硬蜱传播。这说明梨形虫的形成过程并不受宿主的影响,而是独立于宿主单独进行。

关键词：梨形虫硬蜱协同进化 COI

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我国南方地区羊泰勒虫病的流行病学调查

我国南方地区羊泰勒虫病的流行病学调查

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会

作者：袁延庆李有全刘志杰杨吉飞陈泽关贵全罗建勋殷宏家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省寄生虫学重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃兰州730046

为研究我国南方四省区羊泰勒虫病的流行情况,分别采用血涂片镜检和PCR方法对采自我国广西壮族自治区、贵州省、广东省和重庆市部分地区的180份份羊血液样品进行检测,并对部分阳性样品进行测序分析.PCR检测结果显示,在贵州省、广东省和... 详细信息

为研究我国南方四省区羊泰勒虫病的流行情况,分别采用血涂片镜检和PCR方法对采自我国广西壮族自治区、贵州省、广东省和重庆市部分地区的180份份羊血液样品进行检测,并对部分阳性样品进行测序分析.PCR检测结果显示,在贵州省、广东省和重庆市的样品中均有羊泰勒虫感染,其中吕氏泰勒虫平均阳性率分别为46.8％(29/62)、90.9％(30/33)和12.7(7/55),绵羊泰勒虫和尤氏泰勒虫均为阴性;广西壮族自治区样品中没有检测到羊泰勒虫感染.18S rRNA基因序列分析表明,检测到的泰勒虫与我国流行的吕氏泰勒虫亲缘关系最近,同源性均高于99.5％.以上结果为进一步了解我国羊泰勒虫病的流行现状及优势虫株的分布提供了重要的参考依据.

关键词：羊泰勒虫病流行病学聚合酶链反应血涂片镜检法序列分析

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梨形虫及其宿主硬蜱的协同进化分析

梨形虫及其宿主硬蜱的协同进化分析

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会

作者：苟惠天罗建勋关贵全刘爱红刘志杰李有全任巧云陈泽杨吉飞殷宏家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省寄生虫学重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃兰州730046

为了探讨宿主-寄生虫之间的协同进化关系,基于COI基因使用系统进化分析方法以及计算分子钟的方法来进行研究.结果,共收集到14种梨形虫(8种巴贝斯虫和6种泰勒虫)的COI序列,序列长度为950bp;收集到31种硬蜱(5种血蜱,3种革蜱,7种璃眼蜱,3... 详细信息

为了探讨宿主-寄生虫之间的协同进化关系,基于COI基因使用系统进化分析方法以及计算分子钟的方法来进行研究.结果,共收集到14种梨形虫(8种巴贝斯虫和6种泰勒虫)的COI序列,序列长度为950bp;收集到31种硬蜱(5种血蜱,3种革蜱,7种璃眼蜱,3种花蜱,7种扇头蜱,6种硬蜱)的COI序列,序列长度为586bp.用BEAST估算到梨形虫的分化时间在古新世,约为56.48 Mya,泰勒虫的分化时间约为23.38Mya,巴贝斯虫的分化时间约为25.74Mya.巴贝斯虫形成的时间略早于泰勒虫,但二者均发生在始新世晚期.同时,估算到硬蜱科的分化时间在白垩纪),约为86 Mya.硬蜱属、血蜱属、革蜱属、璃眼蜱属、花蜱属、扇头蜱属的分化时间分别为46.71Mya,46.58 Mya,35.72 Mya,35.42Mya,34.85Mya,37.72 Mya.硬蜱科各属的分化时间均发生在古新世(Palaeoceno)晚期:始新世(Eocene)早期.将二者的分子钟进行比较,梨形虫的分化时间晚于其宿主硬蜱.这种寄生虫宿主进化时间上的不一致性说明梨形虫早期的多样性形成过程,并非由硬蜱伴随而发生.宿主转移事件导致了主要梨形虫谱系的快速分化.另外,从系统进化关系上分析梨形虫和其相应宿主的一致性,某些硬蜱可以传播两种或者以上的梨形虫,有些梨形虫也可被多种硬蜱传播.这说明梨形虫的形成过程并不受宿主的影响,而是独立于宿主单独进行.

关键词：硬蜱梨形虫协同进化计算分子钟

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微小牛蜱饱血雌蜱高毒力真菌菌株的筛选

微小牛蜱饱血雌蜱高毒力真菌菌株的筛选

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会

作者：任巧云杨吉飞殷宏罗建勋刘志杰关贵全孙明马米玲牛庆丽李有全刘爱红刘军龙家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省寄生虫学重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃兰州730046

国外学者做了许多有关用昆虫病原真菌防治蜱的试验,结果表明,其对多种蜱的各个生长阶段均有一定程度的杀伤作用,甚至会影响蜱后代的生长发育;国内对昆虫病原真菌的应用研究多集中在对林业害虫的防治,对蜱类的防治研究还未见报道.本实验... 详细信息

国外学者做了许多有关用昆虫病原真菌防治蜱的试验,结果表明,其对多种蜱的各个生长阶段均有一定程度的杀伤作用,甚至会影响蜱后代的生长发育;国内对昆虫病原真菌的应用研究多集中在对林业害虫的防治,对蜱类的防治研究还未见报道.本实验通过浸渍法进行了二十株真菌菌株(13株白僵菌和7株绿僵菌)对微小牛蜱饱血雌蜱的毒力测定,从中筛选出3株白僵菌和一株绿僵菌,此四株菌在孢子浓度为108 conidia mL-1时对蜱的致死率均达到100％.Gindin报道绿僵菌Ma-7菌株在孢子浓度为108 conidia mL-1时对具环牛蜱的致死率为100％.另外,其他四株白僵菌和两株绿僵菌对蜱的致死率也达到了80％.为昆虫病原真菌杀蜱制剂的研究及生产应用提供了参考依据.

关键词：兽医学微小牛蜱生物防控高毒力真菌菌株筛选

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梨形虫条形码基因的筛选

梨形虫条形码基因的筛选

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会

本研究对包括18S rRNA、28S rRNA、ITS、COI的全长,以及它们的部分序列(18SD、28SD、ITS1、ITS2)在内的8段DAN区域的484条序列,按照国际条形码联盟推荐的方法对几个候选基因分别从扩增效率、种内距离、种间距离、物种鉴定效率几个方面... 详细信息

本研究对包括18S rRNA、28S rRNA、ITS、COI的全长,以及它们的部分序列(18SD、28SD、ITS1、ITS2)在内的8段DAN区域的484条序列,按照国际条形码联盟推荐的方法对几个候选基因分别从扩增效率、种内距离、种间距离、物种鉴定效率几个方面进行了比较.结果对本实验室25株梨形虫扩增后,18S rRNA、28S rRNA、ITS的扩增效率为100％;而COI在使用了数十对引物后最后的扩增效率仍为84％.通过分析种间变异/种内变异分布频率,除了28SD以外,其余7个片段在种间和种内变异之间都没有明显的gap.虽然两者之间有重叠,但ITS2的重叠部分最小.用三种不同的方法(建树法、最小距离法、本地BLAST法)分别对每条序列作为条形码对物种在种、属水平的鉴定效率进行评价,结果在种一级水平上,28S和28SD具有最高的平均正确鉴定率(98％),其次是COI(95％),最低的为18SD(84％).在属一级水平上,ITS1和CO1的鉴定成功率都为100％,最低的为ITS(91％).虽然18S和18SD在属一级上具有很高的鉴定率,分别为(99％)和(98％),但在种一级上却比较低,仅为(87％)和(81％).总之,通过从扩增效率、序列质量、覆盖度及物种区分能力,综合考虑几个候选序列,得出ITS2是梨形虫现有数据情况下最适的条形码基因.

关键词：兽医学梨形虫条形码基因分子标记序列分析

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