检索结果-内蒙古大学图书馆

林业科学 2014年第6期50卷 131-137页

作者：陈亮孙庚午王洪凯吴树敬林福呈刘会香山东农业大学植物保护学院、山东省林业有害生物防控工程技术研究中心泰安271018 浙江大学生物技术研究所水稻生物学国家重点实验室杭州310058 山东农业大学园艺科学与工程学院、作物生物学国家重点实验室、国家苹果工程技术研究中心泰安271018

葡萄座腔菌是木本植物溃疡类病害的重要病原,研究该病菌的侵染和致病过程有助于揭示病原与寄主的互作机制。携带gfp基因并高效表达的病菌可有效地实时检测和分析病菌的侵染过程,但由于该病菌在致病和室内培养过程中均不易产孢,因此,制... 详细信息

葡萄座腔菌是木本植物溃疡类病害的重要病原,研究该病菌的侵染和致病过程有助于揭示病原与寄主的互作机制。携带gfp基因并高效表达的病菌可有效地实时检测和分析病菌的侵染过程,但由于该病菌在致病和室内培养过程中均不易产孢,因此,制备高质量的原生质体是进行gfp基因转化和表达的首要步骤。通过对酶的种类、酶解液浓度、菌丝年龄、酶解时间、酶解温度和渗透压稳定剂6个可能影响原生质体制备效率的参数进行分析,结果表明:原生质体最大产量产生的条件是菌龄42 h,以1.5%崩溃酶、1.5%葡聚糖在0.7 mol·L-1NaCl的渗透压稳定剂中酶解3.5 h,最适酶解温度31℃,制备的原生质体在酵母蛋白胨蔗糖培养基(YPS)上再生率最高可达48.33%;通过PEG-CaCl2介导原生质体的遗传转化、gfp基因PCR检测、稳定性检测和荧光显微观察,实现了报告基因gfp在葡萄座腔菌转化子内的稳定遗传和高效表达。

关键词：葡萄座腔菌原生质体制备再生转化 gfp

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苹果腐烂病菌VmHMG基因敲除突变体获得及表型分析

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核农学报 2018年第3期32卷 448-454页

作者：贾晓曼王怡霖孙庚午何邦令葛顺峰王玉涛刘会香山东农业大学植物保护学院/山东省林业有害生物防控工程技术研究中心山东泰安271018 山东农业大学园艺科学与工程学院/作物生物学国家重点实验室山东泰安271018 山东泰安市泰山管理委员会巴山管理区山东泰安250311

苹果腐烂病菌是引起我国苹果腐烂病的主要病原真菌,对苹果产业造成了严重的经济损失。为有效控制病害的发生,本试验研究了VmHMG对苹果腐烂病菌的生长发育及致病性的影响。本研究通过融合PCR技术将苹果腐烂病菌HMG-box基因上下游片段与... 详细信息

苹果腐烂病菌是引起我国苹果腐烂病的主要病原真菌,对苹果产业造成了严重的经济损失。为有效控制病害的发生,本试验研究了VmHMG对苹果腐烂病菌的生长发育及致病性的影响。本研究通过融合PCR技术将苹果腐烂病菌HMG-box基因上下游片段与及潮霉素筛选标记基因Hpt片段,构建敲除载体,利用聚乙二醇(PEG)介导的原生质体转化,再经潮霉素初筛、PCR扩增和Southern杂交验证,最终从95个转化子中得到2株敲除突变体Δ1-5、Δ2-22,敲除效率为2.1%。与野生菌株相比,Δ1-5、Δ2-22在菌落颜色、子实体产生等方面没有发生明显变化;突变株平均生长速率分别下降了10.8%和19.8%,但致病性分别增加了48.5%和56.2%。由此可知,VmHMG基因缺失抑制了苹果腐烂病菌的生长,增强了其致病性,对其他性状影响不明显。本研究通过获得VmHMG基因敲除突变体,初步分析了该基因的功能,为明确病菌的生长发育及致病作用机制奠定了理论基础。

关键词：苹果腐烂病菌 VmHMG 同源重组融合PCR 致病性

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杨树细菌性溃疡病(Lonsdalea quercina)的免疫学检测

杨树细菌性溃疡病(Lonsdalea quercina)的免疫学检测

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第十届中国林业青年学术论坛

作者：于成明徐静伟何邦令刘会香山东农业大学植物保护学院/山东省林业有害生物防控工程技术研究中心/山东省农业微生物重点实验室山东泰安 271018

Lonsdalea引起的欧美杨细菌性溃疡病(Lonsdalea quercina)是我国杨树枝杆上一种新发现的毁灭性生物灾害,成为杨树发展的巨大威胁.据初步调查,该病害已在菏泽及周边的杨树栽培区普遍发生,分布在菏泽市的九个县区(牡丹区、曹县、定陶县、... 详细信息

Lonsdalea引起的欧美杨细菌性溃疡病(Lonsdalea quercina)是我国杨树枝杆上一种新发现的毁灭性生物灾害,成为杨树发展的巨大威胁.据初步调查,该病害已在菏泽及周边的杨树栽培区普遍发生,分布在菏泽市的九个县区(牡丹区、曹县、定陶县、成武县、单县、巨野县、郓城县、鄄城县、东明县),以及周边的济宁市、河南省濮阳市、开封市等.发病多集中在丰产林,林网、四旁树也存在不同程度的发生.2-20年生的幼苗、幼林和成林均可发病,被危害的树木在茎干上引起树皮开裂、并从开裂处流出大量汁液,引起树干韧皮部局部坏死、皮层腐烂,导致生长衰弱,树干畸形,木材变色,溃烂严重时可造成树干风折,甚至全株死亡,严重影响杨树的生长和成材,造成重大经济损失,因此,筛选快速、特异和有效的病害诊断和早期检测技术,对于减少病害的危害十分重要和关键. 本研究采用的酶联免疫吸附法(Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay,ELISA)是以免疫学原理为基础,通过双抗夹心法对杨树细菌性溃疡菌进行特异性检测.用杨树溃疡菌作为抗原通过新西兰兔进行免疫原注射制造特异性抗体,作为一抗;HRP标记的山羊抗兔抗体作为二抗.一抗先与包被原反应,再加入二抗与二抗反应,最后加入底物反应产生颜色,待反应结束加入终止液,测量OD值,根据颜色深浅或根据OD值的大小来判断抗原抗体反应的量的大小,在试验中通过控制包被原以及一抗的浓度对一抗的灵敏度进行效价,找出了一抗的最佳检测浓度和检测时间,建立了ELISA快速检测体系.该体系可以快速,灵敏的对杨树细菌性溃疡病菌进行检测.

关键词：杨树细菌性溃疡病 Lonsdalea quercina ELISA检测

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松材线虫病早期诊断技术研究评述

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山东农业大学学报（自然科学版） 2014年第1期45卷 158-160,76,153页

作者：马跃吕全于成明李琴刘会香张星耀山东农业大学植物保护学院/山东省林业有害生物防控工程技术研究中心山东泰安271018 国家林业局森林保护学重点实验室中国林业科学院森林生态环境与保护研究所北京100091 山东新河矿业有限公司嘉祥林场山东嘉祥272400

早期诊断技术的应用是对松材线虫病这一重大森林生物灾害进行监测预警,进而防控该病害的重要举措。本文从发病症状、病原鉴定、化学生化、媒介昆虫、光谱学、电学、早期检测管等方面对目前松材线虫病早期诊断技术研究进展进行了总结评价... 详细信息

早期诊断技术的应用是对松材线虫病这一重大森林生物灾害进行监测预警,进而防控该病害的重要举措。本文从发病症状、病原鉴定、化学生化、媒介昆虫、光谱学、电学、早期检测管等方面对目前松材线虫病早期诊断技术研究进展进行了总结评价,以期对未来更为简便、快速、准确的早期诊断方法的研究提供理论参考。

关键词：松材线虫病松材线虫早期诊断技术评价

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杨树溃疡病(Botryosphaeria dothidea)典型病斑的蛋白质组学解析

杨树溃疡病(Botryosphaeria dothidea)典型病斑的蛋白质组学解析

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第十届中国林业青年学术论坛

作者：赵相涛吕全何邦令刘会香张星耀山东农业大学植物保护学院/山东省林业有害生物防控工程技术研究中心/山东省农业微生物重点实验室山东泰安 271018 国家林业局森林保护学重点实验室中国林科院森林生态环境与保护研究所北京 100091

杨树是非常重要的经济树种.杨树溃疡病是危害杨树枝干的主要病害之一,研究杨树溃疡病的致病机制有重大的经济和生态意义,蛋白质组学作为后基因组时代的新兴研究领域,是当今生物学研究中揭示物质生命现象的重要手段,是林木生物学的重要内... 详细信息

杨树是非常重要的经济树种.杨树溃疡病是危害杨树枝干的主要病害之一,研究杨树溃疡病的致病机制有重大的经济和生态意义,蛋白质组学作为后基因组时代的新兴研究领域,是当今生物学研究中揭示物质生命现象的重要手段,是林木生物学的重要内容.对杨树溃疡病的典型病斑进行蛋白质组学分析,对阐明杨树溃疡病的致病机制以及杨树的抗病机制有重要意义;也为其他林木与病原菌互作的蛋白质组学研究提供了参考.本研究以野外采集的、9月份发病高峰期的107杨树树皮健康组织和溃疡病斑为实验材料,建立了一种适合杨树树皮的蛋白质提取方法,并运用蛋白质组学方法对杨树与溃疡病菌互作所产生典型病斑的蛋白质进行了分离和分析,对差异表达的蛋白点进行了质谱鉴定和生物信息学分析,主要研究结果如下：1.建立了一种适合杨树树皮的双向电泳方法,针对蛋白质提取过程中的样品沉淀时间、所加裂解液的量和振荡裂解时间,设置不同梯度,通过实验反复验证,确定了蛋白质提取的最优沉淀时间为12h;每克样品干粉中加入裂解液的最佳量为500μL;最优裂解时间为3h.本研究通过多次试验,确定了效果良好的等电点聚焦(IEF)程序参数：Grad 500V,2h;Grad 1000V,1h;Grad 8000V,20000vh;Step 8000V,60000vh;本研究选择pH4-7、长度为24cm的胶条,浓度为12％分离胶分离杨树树皮蛋白,效果良好. 2.通过对杨树树皮健康组织和病斑组织的双向电泳图谱进行分析,共发现54个差异表达的蛋白点,其中有21个是发生质变的差异蛋白点;有17个质变的差异蛋白点为杨树树皮健康组织的蛋白质凝胶图谱所有;剩余的5个质变差异蛋白点为杨树树皮病斑组织的蛋白质图谱所有;有33个是发生量变的差异表达蛋白点,以健康杨树树皮的蛋白质图谱作为对照,病斑组织蛋白质图谱有20个蛋白点的表达量上调,11个蛋白点的表达量下调.3.选择其中的46个差异表达的蛋白点进行质谱鉴定,通过Mascot软件分析和数据库查询结果,确定了这些差异蛋白点的等电点和分子量等基本属性,发现共有22个蛋白点的检测结果呈阳性(得分≥73),共有6差异个蛋白点基本上得到明确的鉴定,其他大多为预测蛋白.这6个差异蛋白点分别是：抗坏血酸过氧化物酶(APX)、热休克蛋白(HSP)、纤维素合成酶、富含亮氨酸重复序列型受体蛋白激酶(LRR-RLK)、树皮储存蛋白和烯醇化酶.通过对这些差异蛋白点功能的分析,发现这些差异蛋白点主要涉及到杨树的防御应答、信号传导及调控、氨基酸代谢、能量代谢、转录等多个生理过程.这些差异蛋白点可能与杨树的抗性有关.

关键词：杨树杨树溃疡病典型病斑蛋白质组学双向电泳技术肽指纹图谱

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山东省松材线虫病的发生和研究进展

山东省松材线虫病的发生和研究进展

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第十届中国林业青年学术论坛

作者：刘会香吕全马跃于成明何邦令张星耀山东农业大学植物保护学院/山东省林业有害生物防控工程技术研究中心/山东省农业微生物重点实验室山东泰安 271018 国家林业局森林保护学重点实验室中国林科院森林生态环境与保护研究所北京 100091

山东省作为我国松材线虫病分布的最北界,自1990年在山东长岛发现以来,松材线虫病在山东呈迅速扩展蔓延,2007年荣成市发生松材线虫病,面积达1万亩,病死松树50,000株;2008年青岛崂山区发生面积0.2万亩,病死松树4000株;2009年文登市发生新... 详细信息

山东省作为我国松材线虫病分布的最北界,自1990年在山东长岛发现以来,松材线虫病在山东呈迅速扩展蔓延,2007年荣成市发生松材线虫病,面积达1万亩,病死松树50,000株;2008年青岛崂山区发生面积0.2万亩,病死松树4000株;2009年文登市发生新疫情,面积0.2万亩,病死松树2586株.2010年在淄博市博山区,潍坊市临朐县鲁山发现松材线虫病.目前,山东省已有6个疫情县(淄博市博山区,潍坊市临朐县,烟台市长岛县,威海市文登市、荣成市,青岛市崂山区),11个疫情乡镇(办事处),发生面积2万多亩,病死松树34.2万株.山东省独特的地理位置、气候条件和四通八达的交通条件为松材线虫病的扩展蔓延提供了便利条件和风险,山东省松材线虫病的发生和防控形势十分严峻. 通过对山东省和泰山松材线虫病的风险分析研究表明：山东省全境范围内的气候条件和以油松和黑松为主要的松林生态系统均满足松材线虫的生长和发育,其中鲁中和鲁西南地区更适合于松材线虫病的发生;通过对泰山松材线虫入侵、定殖的可能性和风险性性研究表明,松材线虫在400米以下的低海拔地区人为入侵和定殖的可能性为高度,风险性属于高度风险,入侵后造成的危害度为中等危害.其中低海拔地区的天烛峰、巴山、桃花峪、玉泉寺、桃花源、竹林寺、樱桃园和长城岭等风景区为松材线虫病最易发生的区域,应重点进行监控这些地区.通过对野外健康黑松采用人工接种不同浓度松材线虫的方法,研究不同发病阶段黑松松针的反射光谱特征曲线及多个光谱特征参数.研究结果表明：绿光和近红外波段反射光谱曲线对松树发病程度有一定的指示作用;红边位置蓝移、绿峰反射高度及红谷吸收深度降低、红边斜率减小等光谱特征参数的变化能够很好的反映松树的感病情况.该研究结果可为利用高光谱遥感技术进行松材线虫病监测与预警提供理论依据.通过特异性引物PCR扩增和系统树构建的分子系统学研究表明,山东省四个地市的松材线虫在种群结构上明显分为三个类群,存在种群结构差异.山东省的松材线虫与日本、葡萄牙的松材线虫亲缘关系较近,与加拿大、美国、墨西哥的松材线虫亲缘关系较远.其系统关系尚需继续丰富松材线虫来源地、数量以及结合多种分子标记技术进行研究.田间调查表明,山东省松材线虫病的主要传播媒介为松褐天牛,同时在山东徂徕山发现了松褐天牛的天敌花绒寄甲,目前已饲养成功,有望进行田间的大量释放,实现松褐天牛的自然控制.未来山东省松材线虫病应以明确其传播途径、区域性流行规律、不同气候区松褐天牛的天敌资源开发和利用等无害化生态调控关键技术研究为重点,同时充分吸收和利用国内外松材线虫病的最新研究成果,实现松材线虫病的有效防控,为山东省松林健康和生态省的建设提供技术支撑.

关键词：山东省松材线虫病风险光谱特征分子系统学花绒寄甲生态调控

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一种适合杨树树皮的蛋白质提取方法

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山东农业科学 2012年第7期44卷 121-123页

作者：赵相涛吕全赵嘉平马跃陈亮刘会香张星耀山东农业大学植物保护学院/山东省林业有害生物防控工程技术研究中心/山东省农业微生物重点实验室山东泰安271018 国家林业局森林保护学重点实验室/中国林业科学院森林生态环境与保护研究所北京100091 北京林业大学林学院北京100083

双向电泳技术是进行蛋白质组分分离和功能鉴定的重要步骤。提取和制备高质量的蛋白质是进行双向电泳的首要前提。杨树树皮组织中含有大量的干扰物质,影响了蛋白质的提取和双向电泳的分离效果。为建立一种适合杨树树皮蛋白质的双向电泳程... 详细信息

双向电泳技术是进行蛋白质组分分离和功能鉴定的重要步骤。提取和制备高质量的蛋白质是进行双向电泳的首要前提。杨树树皮组织中含有大量的干扰物质,影响了蛋白质的提取和双向电泳的分离效果。为建立一种适合杨树树皮蛋白质的双向电泳程序,本实验以107杨为材料,采用改良的三氯乙酸-丙酮沉淀法提取杨树树皮蛋白质,经双向电泳和考马斯亮蓝染色检测,得到了理想的双向电泳图谱,为杨树与病原互作的蛋白质组学研究奠定了基础。

关键词：蛋白质组学杨树树皮双向电泳技术

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接种不同浓度松材线虫的黑松光谱学特征分析

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山东农业科学 2012年第11期44卷 12-16页

作者：马跃吕全赵相涛何邦令刘会香张星耀山东农业大学植物保护学院/山东省林业有害生物防控工程技术研究中心山东泰安271018 国家林业局森林保护学重点实验室/中国林业科学院森林生态环境与保护研究所北京100091

利用光谱学进行植物病害的早期诊断是近年来植物病害监测预警研究的一个热点。本试验采用人工接种不同浓度松材线虫的方法,研究了野外健康黑松不同发病阶段黑松松针的反射光谱特征曲线,分析了多个光谱特征参数。结果表明:绿光波段(500～... 详细信息

利用光谱学进行植物病害的早期诊断是近年来植物病害监测预警研究的一个热点。本试验采用人工接种不同浓度松材线虫的方法,研究了野外健康黑松不同发病阶段黑松松针的反射光谱特征曲线,分析了多个光谱特征参数。结果表明:绿光波段(500～560 nm)和近红外波段(750～900 nm)反射光谱曲线对松树发病程度有一定的指示作用;红边(680～780 nm)位置蓝移、绿峰(510～580 nm)反射高度及红谷(640～700 nm)吸收深度降低、红边斜率减小等光谱特征参数的变化能够很好地反映松树的感病情况。本研究结果可为利用高光谱遥感技术进行松材线虫病监测与预警提供理论依据。

关键词：松材线虫黑松光谱分析光谱特征参数

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