检索结果-内蒙古大学图书馆

吉林大学学报(医学版) 2025年第1期51卷 68-75页

作者：赵芳李珍玲朴丽花韩龙哲崔银姬权春姬金雪梅延边大学附属医院病理科吉林延吉133000 山东省菏泽市立医院病理科山东菏泽274000 延边大学医学院组织学与胚胎学教研室吉林延吉133000 海南省妇女儿童医学中心病理科海南海口570100

目的:探讨Yes相关蛋白(YAP)沉默对人宫颈癌(CC)SiHa细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:对人CC细胞株SiHa细胞进行体外培养,慢病毒YAPshRNA转染到SiHa细胞,建立稳定转染的YAP-shRNA实验组(sh-YAP组)和空载质粒对照组(对照组),采用Wes... 详细信息

目的:探讨Yes相关蛋白(YAP)沉默对人宫颈癌(CC)SiHa细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:对人CC细胞株SiHa细胞进行体外培养,慢病毒YAPshRNA转染到SiHa细胞,建立稳定转染的YAP-shRNA实验组(sh-YAP组)和空载质粒对照组(对照组),采用Western blotting法检测YAP沉默效果;免疫荧光法检测2组细胞中肌动蛋白(F-actin)微丝数量及形态变化;CCK-8法、Transwell小室实验和细胞划痕实验检测2组细胞存活率、迁移及侵袭细胞数以及细胞划痕愈合率;Western blotting法检测2组细胞中上皮-间质转化(EMT)相关标记物[E钙黏蛋白(E-cadherin)和锌指转录因子(Snail)]、DNA损伤修复相关蛋白γ(γ-H2AX)和凋亡相关蛋白[c-MYC和B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)]蛋白表达水平。结果:慢病毒YAPshRNA转染SiHa细胞后,SiHa细胞中YAP蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。免疫荧光实验,YAP沉默后SiHa细胞中F-actin微丝稀疏且排列规则,细胞数量减少、细胞呈现蜷缩的状态。CCK-8法,与对照组比较,sh-YAP组培养24和48 h后SiHa细胞存活率明显降低(P<0.01);Transwell小室实验和细胞划痕实验,与对照组比较,sh-YAP组的SiHa细胞迁移和侵袭细胞数明显减少(P<0.01),细胞划痕愈合率明显降低(P<0.05);Western blotting法,与对照组比较,sh-YAP组细胞中E-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05),c-MYC、Bcl-2和γ-H2AX蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01)。结论:YAP基因沉默导致人CC SiHa细胞F-actin的解聚,并调控细胞凋亡和DNA损伤修复,可能会逆转EMT进程,从而抑制肿瘤细胞增殖和迁移。

关键词：宫颈肿瘤 Yes相关蛋白细胞增殖细胞迁移

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维甲酸致小鼠胚胎畸形发生过程中维甲酸受体α/β及β-catenin和caspase-3基因的表达变化 (英文)

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生物化学与生物物理进展 2007年第11期34卷 1182-1189页

作者：张艳萍刘凯武玉玲山东大学医学院组织学与胚胎学教研室济南250012

流行病学研究显示,在胚胎发育过程中摄入过多维甲酸可致各种发育缺陷,其中神经管畸形最为常见. 因此有必要探明维甲酸致各种发育缺陷的发生机制,以便为各种生长缺陷的预防和治疗提供实验依据. 用 RT-PCR 及蛋白质印迹技术,探测了过量维... 详细信息

流行病学研究显示,在胚胎发育过程中摄入过多维甲酸可致各种发育缺陷,其中神经管畸形最为常见. 因此有必要探明维甲酸致各种发育缺陷的发生机制,以便为各种生长缺陷的预防和治疗提供实验依据. 用 RT-PCR 及蛋白质印迹技术,探测了过量维甲酸对昆明小鼠胚胎神经管中维甲酸受体α/β及β-catenin 和 caspase-3 基因表达的调整. 结果显示,在神经管闭合期过量维甲酸显著降低了维甲酸受体α/β及β-catenin 和 caspase-3 的基因表达,神经管闭合后,维甲酸受体β、β-catenin 及 caspase-3 的基因表达又出现了一个明显的回升过程. 提示,过量维甲酸改变了昆明小鼠胚胎神经管中维甲酸受体α/β及β-catenin 和 caspase-3 基因的正常时间表达模式,这种异常的基因表达模式可能参与了维甲酸致昆明小鼠胚胎畸形的发生机制.

关键词：维甲酸受体 β-catenin caspase-3 发育缺陷维甲酸小鼠

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胚胎干细胞移植对急性损伤肝脏的作用

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解剖学报 2007年第3期38卷 351-355页

作者：刘晓萍高英茂徐珞郭菲菲邴鲁军青岛大学医学院组织学胚胎学教研室青岛266021 山东大学医学院组织学胚胎学教研室济南250012

目的探索胚胎干细胞移植在急性损伤肝脏中的存活和分化情况。方法用四氯化碳(CCl4)制备小鼠急性肝损伤模型,将BrdU标记的来源于小鼠原始生殖细胞的胚胎干细胞经静脉移植于模型动物体内,分别于移植后2周、4周取出肝脏,用免疫组织化学、... 详细信息

目的探索胚胎干细胞移植在急性损伤肝脏中的存活和分化情况。方法用四氯化碳(CCl4)制备小鼠急性肝损伤模型,将BrdU标记的来源于小鼠原始生殖细胞的胚胎干细胞经静脉移植于模型动物体内,分别于移植后2周、4周取出肝脏,用免疫组织化学、免疫荧光双重染色和PAS染色方法检测移植细胞在受体小鼠肝内的分布、存活、白蛋白的表达和糖原代谢。结果急性损伤小鼠肝脏可见大量肝细胞空泡样变性,有严重出血现象;2周时损伤肝内可见炎性细胞浸润和未吸收的出血区;4周时仍见少量炎性细胞浸润。干细胞移植2周,肝小叶内可见散在分布的BrdU和ALB双阳性着色细胞,PAS染色呈阳性反应;部分小细胞呈BrdU单阳性着色;损伤移植组的肝小叶结构基本恢复。移植4周,损伤肝小叶结构正常,小的BrdU阳性细胞数量增多。结论原始生殖细胞可以在急性损伤肝脏中存活,并分化为肝细胞和肝小叶内的其他细胞,并明显改善损伤肝的组织结构。

关键词：原始生殖细胞细胞移植肝脏损伤免疫组织化学免疫荧光小鼠

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定向诱导小鼠原始生殖细胞向肝细胞分化的研究

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解剖学报 2005年第6期36卷 650-654页

作者：刘晓萍高英茂邴鲁军山东大学医学院组织学胚胎学教研室

目的探索诱导小鼠原始生殖细胞向肝细胞定向分化的最佳条件。方法分离提取小鼠的原始生殖细胞,体外培养扩增后,接种到6孔培养板中。向不同孔中分别加入不同浓度的bFGF、EGF、-βNGF、RA、肝细胞提取液和与胎肝组织分隔培养,进行诱导分... 详细信息

目的探索诱导小鼠原始生殖细胞向肝细胞定向分化的最佳条件。方法分离提取小鼠的原始生殖细胞,体外培养扩增后,接种到6孔培养板中。向不同孔中分别加入不同浓度的bFGF、EGF、-βNGF、RA、肝细胞提取液和与胎肝组织分隔培养,进行诱导分化。用靛青绿摄入试验和α-1-抗胰蛋白酶(AAT)、白蛋白(ALB)免疫细胞化学染色鉴定原始生殖细胞向肝细胞分化的状况。结果与胎肝组织分隔培养2 d,可见原始生殖细胞向肝样细胞分化,分化细胞呈圆形和星形,圆形细胞多呈簇状,可以摄入靛青绿呈绿色,并呈AAT和ALB免疫阳性着色,培养12 d时分化率达80%。肝细胞提取液也可诱导原始生殖细胞向肝样细胞分化,12 d时分化率达70%以上;0.5 g/L和1 g/L的肝细胞提取液的诱导分化率无显著差异;但是0.5 g/L提取液诱导组圆形细胞较多;而1 g/L肝提取液诱导组,星状分化细胞多。β-神经生长因子(-βNGF)诱导4 d,可见肝样细胞出现,随诱导时间延长,分化细胞增多,圆形分化细胞较多,12 d时分化率达60%以上;20μg/L和50μg/L两种浓度的-βNGF诱导分化率无显著差异。bFGF、EGF、RA诱导组未见ALB免疫反应阳性细胞。RA可以增强-βNGF的诱导分化作用,使星状细胞增多明显。结论-βNGF和肝细胞因子可诱导原始生殖细胞向肝细胞定向分化。

关键词：原始生殖细胞肝细胞 β-神经生长因子碱性成纤维细胞生长因子表皮生长因子维甲酸诱导分化小鼠

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脑缺血再灌注后神经元和内皮细胞凋亡与Bcl-2和Bax表达的时相关系

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解剖学报 2002年第2期33卷 151-156页

作者：郭云良高英茂山东大学医学院组织学胚胎学教研室济南250012

目的　探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注后受损伤的神经细胞和血管内皮细胞凋亡 ,以及Bcl 2和Bax蛋白表达与再灌注时间的关系。　方法　应用原位末端标记 (TUNEL)技术和免疫组织化学方法 ,分别观察脑缺血再灌注 2h、6h、12h、2 4h、2d、3d、7... 详细信息

目的　探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注后受损伤的神经细胞和血管内皮细胞凋亡 ,以及Bcl 2和Bax蛋白表达与再灌注时间的关系。　方法　应用原位末端标记 (TUNEL)技术和免疫组织化学方法 ,分别观察脑缺血再灌注 2h、6h、12h、2 4h、2d、3d、7d、14d和 2 1d等不同时间点神经细胞和血管内皮细胞凋亡数及Bcl 2和Bax蛋白的表达。　结果　 1.脑缺血周围区 ,再灌注 2h神经细胞和内皮细胞凋亡开始明显增多 ,12～ 2 4h达高峰 ,之后逐渐减少 ,7～ 14d降至假手术组水平 ;血管内皮细胞凋亡迟于神经元凋亡约 12h。 2 .Bcl 2蛋白表达于缺血再灌注 2h开始逐渐增强 ,12～ 2 4h达高峰 ,之后逐渐下降 ,至 7～ 14d接近假手术组水平 ;***蛋白表达于缺血再灌注 6h开始逐步增高 ,2 4～ 4 8h达高峰 ,之后逐渐下降 ,至 14d与假手术组已无显著性差异。 4 .Bcl 2表达与细胞凋亡的时相变化基本一致 ,Bax表达时相迟于细胞凋亡。　结论　细胞凋亡是脑缺血再灌注损伤细胞死亡的形式之一 ,血管内皮细胞凋亡迟于神经细胞凋亡 ,Bcl 2和Bax参与细胞凋亡的调节。

关键词：神经元内皮细胞蛋白表达 Bcl-2 Bax 脑缺血再灌注损伤细胞凋亡动物实验

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凝集素PHA-E、UEA受体在真孕小鼠和假孕模型小鼠孕早期子宫内膜中的变化

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解剖学杂志 2004年第6期27卷 596-599,i001页

作者：石运芝刘凯邴鲁军李少玲泰山医学院组织学与胚胎学教研室泰安271000 山东大学医学院组织学与胚胎学教研室

目的 :探讨子宫内膜凝集素PHA E和UEA的受体与胚泡植入的关系。方法 :应用生物素标记的凝集素PHA E和UEA ,来检测真孕组、单纯假孕组和蜕膜化假孕组小鼠孕早期子宫内膜中两种凝集素受体的分布状况和变化规律。结果 :PHA E受体广泛分布... 详细信息

目的 :探讨子宫内膜凝集素PHA E和UEA的受体与胚泡植入的关系。方法 :应用生物素标记的凝集素PHA E和UEA ,来检测真孕组、单纯假孕组和蜕膜化假孕组小鼠孕早期子宫内膜中两种凝集素受体的分布状况和变化规律。结果 :PHA E受体广泛分布于各组小鼠子宫内膜腔上皮和腺上皮、蜕膜细胞表面及其周围的ECM ;其在真孕组的水平均显著高于假孕组 ,且在孕 9d时 ,蜕膜化假孕组的水平又显著高于单纯假孕组。UEA受体则主要分布于子宫内膜腺上皮游离缘 ;其在真孕组的水平高于单纯假孕组 ,在孕 6、9d时 ,真孕组的水平又明显低于蜕膜化假孕组。结论 :凝集素PHA E受体与小鼠胚泡植入过程密切相关。

关键词：受体子宫内膜蜕膜化胚泡植入凝集素模型小鼠上皮假孕生物素标记分布

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凝集素DBA和WGA的受体在生殖周期小鼠子宫内膜中的亲合细胞化学

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解剖学杂志 2003年第6期26卷 543-546页

作者：石运芝刘凯邴鲁军李少玲泰山医学院组织胚胎学教研室泰安271000 山东大学医学院组织胚胎学教研室

目的:探讨凝集素DBA和WGA的受体在胚泡着床过程中的生物学作用。方法:取生殖周期不同阶段的小鼠子宫内膜组织,采用亲合细胞化学和图像分析方法,检测WGA和DBA的受体在子宫内膜中的分布和变化情况。结果:以上2种凝集素受体均存在于生殖周... 详细信息

目的:探讨凝集素DBA和WGA的受体在胚泡着床过程中的生物学作用。方法:取生殖周期不同阶段的小鼠子宫内膜组织,采用亲合细胞化学和图像分析方法,检测WGA和DBA的受体在子宫内膜中的分布和变化情况。结果:以上2种凝集素受体均存在于生殖周期不同阶段的小鼠子宫内膜,但2者的存在部位和数量有差异。WGA受体广泛存在于子宫内膜腔上皮和腺上皮的游离缘,以及孕期胚胎组织和蜕膜细胞表面及ECM,DBA受体仅见于子宫内膜或胚胎组织血管的内皮及其基膜。并且2种受体在孕早期,尤其是因植入期的水平均显著高于间情期和哺乳期的水平。结论:凝集素WGA和DBA的受体与小鼠胚泡植入过程相关。

关键词：凝集素 DBA WGA 胚泡着床小鼠子宫内膜亲合细胞化学受体分布细胞粘附分子

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过量维生素A酸对金黄地鼠胚胎神经管维生素A酸受体α、β基因表达的影响

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解剖学杂志 2005年第2期28卷 157-160页

作者：芦志红刘凯高英茂李少玲山东大学医学院组织学与胚胎学教研室济南250012

目的:探讨过量维生素A酸(RA)对金黄地鼠胚胎神经管RA受体α和RA受体β基因表达的影响。方法:采用RTPCR方法,半定量分析金黄地鼠神经管正常发生及RA致神经管畸形过程中RA受体α和RA受体βmRNA表达水平的变化。结果:过量RA可使RA受体α和R... 详细信息

目的:探讨过量维生素A酸(RA)对金黄地鼠胚胎神经管RA受体α和RA受体β基因表达的影响。方法:采用RTPCR方法,半定量分析金黄地鼠神经管正常发生及RA致神经管畸形过程中RA受体α和RA受体βmRNA表达水平的变化。结果:过量RA可使RA受体α和RA受体βmRNA在金黄地鼠神经管中的表达水平呈现短时下降,而后又大幅上升的变化。结论:过量RA引起的RA受体α和RA受体βmRNA表达水平的变化与RA致金黄地鼠神经管畸形相关。

关键词：维生素A酸基因表达受体α 鼠胚胎过量 RT-PCR方法 mRNA表达神经管畸形金黄地鼠半定量分析 A受体 RA 水平

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小鼠胚胎干细胞构建嵌合体的方法

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解剖学报 2004年第3期35卷 324-327页

作者：郭雨霁高英茂邴鲁军李盛芳山东大学医学院组织学与胚胎学教研室济南250012

目的　利用本实验室新近分离培养的远交系KM小鼠胚胎干细胞进行嵌合体构建实验。　方法　从KM小鼠囊胚的内细胞团中分离培养胚胎干细胞 ,进行近交系C5 7BL 6J小鼠受体囊胚腔内注射 ,进行嵌合体构建实验。　结果　从内细胞团中分离的胚... 详细信息

目的　利用本实验室新近分离培养的远交系KM小鼠胚胎干细胞进行嵌合体构建实验。　方法　从KM小鼠囊胚的内细胞团中分离培养胚胎干细胞 ,进行近交系C5 7BL 6J小鼠受体囊胚腔内注射 ,进行嵌合体构建实验。　结果　从内细胞团中分离的胚胎干细胞具有胚胎干细胞的典型特征 ,克隆状生长 ,碱性磷酸酶染色呈强阳性 ,核型正常 ,悬浮培养能形成类胚体 ,已成功构建 1只嵌合鼠。　结论　利用我们分离的KM小鼠胚胎干细胞可成功地构建嵌合体。

关键词：胚胎干细胞嵌合体显微注射小鼠

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应用抑制性消减杂交技术筛选及鉴定高温致金黄地鼠神经管畸形下调表达基因

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中华医学遗传学杂志 2007年第2期24卷 128-130页

作者：杨青高英茂李少玲山东大学医学院组织胚胎学教研室济南250012

目的克隆高温致金黄地鼠神经管畸形下调表达基因，探讨其分子生物学机理。方法应用抑制性消减杂交技术构建高温致畸金黄地鼠胚胎神经管反向消减cDNA文库；联合蓝白斑和菌落PCR方法筛选阳性克隆进行测序和同源性分析；用Northern印迹方... 详细信息

目的克隆高温致金黄地鼠神经管畸形下调表达基因，探讨其分子生物学机理。方法应用抑制性消减杂交技术构建高温致畸金黄地鼠胚胎神经管反向消减cDNA文库；联合蓝白斑和菌落PCR方法筛选阳性克隆进行测序和同源性分析；用Northern印迹方法证实这些基因的表达。结果成功构建高温致畸金黄地鼠胚胎神经管反向消减cDNA文库，从中筛选到15个基因，均与GenBank中已知基因有同源性。Northern印迹证实这些基因在高温致畸胚胎神经管中均呈下调表达。结论发现了高温致金黄地鼠神经管畸形过程中的一些重要相关基因并对其功能进行了初步探讨。

关键词：神经管畸形高温抑制性消减杂交金黄地鼠

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