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解剖学报 2023年第3期54卷 296-304页

作者：姚远赵曼杜静怡周文娟山东大学基础医学院组织学胚胎学系教育部实验畸形学重点实验室山东省精神疾病基础与临床重点实验室济南250012

目的探讨6-姜酚对新生鼠缺氧、缺血性脑损伤(HIE)后认知行为的作用,通过观察对突触可塑性、神经元存活、神经干细胞增殖的影响,探讨6-姜酚对新生小鼠HIE脑损伤保护的作用机制。方法利用出生后第7天昆明小鼠幼仔(78只)进行右侧颈总动... 详细信息

目的探讨6-姜酚对新生鼠缺氧、缺血性脑损伤(HIE)后认知行为的作用,通过观察对突触可塑性、神经元存活、神经干细胞增殖的影响,探讨6-姜酚对新生小鼠HIE脑损伤保护的作用机制。方法利用出生后第7天昆明小鼠幼仔(78只)进行右侧颈总动脉结扎,然后进行90 min的缺氧处理,构建新生小鼠、缺氧缺血性脑病模型,并通过腹腔注射6-姜酚,利用水迷宫行为学方法检测认知行为;采用2,3,5-三苯基氟化四氮唑(TTC)染色观察脑损伤变化情况;利用透射电子显微镜检测突触结构和数目的改变;采用HE染色、尼氏染色、二氢乙锭(DHE)染色观察各组小鼠脑海马组织病理形态学变化;利用免疫荧光和Real-time PCR检测各组神经干细胞增殖情况和相关转录因子的表达水平;利用Western blotting检测增殖相关信号通路Akt信号通路的变化。结果 6-姜酚早期处理可改善小鼠HIE后成年学习记忆能力,减轻新生小鼠HIE后脑损伤和增加突触数目和结构完整性。6-姜酚处理组HIE病变侧海马细胞排列紊乱现象有所改善,坏死细胞数目减少,海马神经干细胞增殖能力及神经干细胞增殖相关转录因子Nestin和性别决定区转录因子2(Sox2)表达水平显著升高,磷酸化Akt(p-Akt)水平增加。结论 6-姜酚可改善HIE小鼠成年后学习记忆能力并减轻HIE后脑组织损伤,其作用机制可能通过抑制活性氧簇(ROS)的产生而减轻神经元损伤并激活Akt信号通路促进海马神经干细胞的增殖能力。

关键词： 6-姜酚缺氧、缺血性脑损伤神经干细胞神经元认知行为透射电子显微术新生小鼠

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pcgf5a在斑马鱼胚胎早期发育中的作用

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解剖学报 2023年第1期54卷 99-103页

作者：周娟周文娟李心悦史玮郝爱军山东大学基础医学院组织学胚胎学系教育部实验畸形学重点实验室山东省精神疾病基础与临床重点实验室济南250012

目的探讨pcgf5a基因在斑马鱼胚胎发育过程中的作用和机制。方法通过显微注射pcgf5a吗啉代寡核苷酸(MO)抑制pcgf5a基因mRNA翻译过程,观察斑马鱼胚胎发育过程中相关表型的变化;利用胚胎整封原位杂交和Real-time PCR等技术检测抑制pcgf5a... 详细信息

目的探讨pcgf5a基因在斑马鱼胚胎发育过程中的作用和机制。方法通过显微注射pcgf5a吗啉代寡核苷酸(MO)抑制pcgf5a基因mRNA翻译过程,观察斑马鱼胚胎发育过程中相关表型的变化;利用胚胎整封原位杂交和Real-time PCR等技术检测抑制pcgf5a对胚胎神经及眼睛发育相关标记基因的表达变化。结果抑制pcgf5a基因后,斑马鱼胚胎中外胚层发育受到影响,表现为脑区变小,眼睛发育迟缓,尾部卷曲及体轴缩短(548/891),同时神经发育(sox2:82/98、sox3:73/84、foxg1:70/88、pax6a:36/45)和眼睛发育(pax2a、vsx2和rx1,n=5)相关基因表达明显降低。结论pcgf5a可能通过调节神经与眼睛发育相关转录因子的表达,进而影响细胞增殖和凋亡而参与胚层分化以及后续的神经系统与眼睛的发育。

关键词： pcgf5a基因神经系统眼睛发育整封原位杂交实时定量聚合酶链反应斑马鱼

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人参皂苷Rb1促进小鼠坐骨神经损伤修复的作用及机制

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解剖学报 2022年第1期53卷 19-27页

作者：姚远杜静怡周文娟山东大学基础医学院组织学胚胎学系教育部实验畸形学重点实验室山东省精神疾病基础与临床重点实验室济南250012

目的构建小鼠坐骨神经损伤(SNI)模型,探讨人参皂苷Rb1对小鼠坐骨神经损伤修复的促进作用及机制。方法选取成年雄性昆明小鼠78只,随机分为假手术组(26只)、模型组(26只)、治疗组(26只)。模型制作采用钳夹损伤法,假手术组仅游离坐骨神经... 详细信息

目的构建小鼠坐骨神经损伤(SNI)模型,探讨人参皂苷Rb1对小鼠坐骨神经损伤修复的促进作用及机制。方法选取成年雄性昆明小鼠78只,随机分为假手术组(26只)、模型组(26只)、治疗组(26只)。模型制作采用钳夹损伤法,假手术组仅游离坐骨神经。模型制作后30 min,治疗组腹腔注射10 mg/kg人参皂苷Rb1,模型组与假手术组给予同等体积的生理盐水。采用坐骨神经功能指数(SFI)对小鼠坐骨神经功能进行追踪评价;利用HE染色及生长相关蛋白43(GAP43)免疫荧光染色检测损伤14 d后坐骨神经再生修复情况;利用透射电子显微镜观察损伤节段髓鞘的结构改变。损伤后14 d,检测脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)mRNA水平的表达变化。模型制作后3 d、7 d,利用Ki67、S100β免疫荧光染色检测施万细胞的增殖、迁移能力;利用Real-time PCR检测炎症相关因子以及施万细胞激活相关转录因子mRNA表达水平;通过Western blotting对Sox10在蛋白水平的变化进行验证。结果治疗组SFI评分高于模型组小鼠,神经近端、远端HE染色较均一。透射电子显微镜提示,治疗组髓鞘结构、厚度较模型组明显改善,髓鞘内神经纤维排列较为整齐。免疫荧光染色结果显示,治疗组坐骨神经GAP43;轴突伸长明显优于模型组,BDNF、NGF等营养因子表达升高。进一步检测发现,给予Rb1后损伤节段附近Ki67;细胞增殖、S100β;施万细胞迁移明显增多。Real-time PCR结果显示,治疗组肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1βmRNA表达水平明显下降,施万细胞激活相关转录因子表达水平上升。结论10 mg/kg Rb1能降低再生组织环境中炎症因子表达水平,增加BDNF、NGF等营养因子的表达水平,促进施万细胞激活,从而促进小鼠坐骨神经损伤后的神经再生。

关键词：坐骨神经损伤人参皂苷Rb1 轴突再生髓鞘再生施万细胞实时定量聚合酶链反应免疫印迹法小鼠

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人脑类器官在神经发育疾病研究中的应用

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山东大学学报(医学版) 2021年第9期59卷 22-29页

作者：马燕燕龚瑶琴山东大学基础医学院遗传学系实验畸形学教育部重点实验室

人脑类器官是由人多能干细胞(hPSC)包括人胚胎干细胞(hESC)和人诱导多功能干细胞(hiPSC)衍生而来的三维组织,能模拟人大脑的结构和功能,作为神经发育疾病的体外研究模型独具优势。本文将对神经疾病体外模型建立和发展的历程、脑类器官... 详细信息

人脑类器官是由人多能干细胞(hPSC)包括人胚胎干细胞(hESC)和人诱导多功能干细胞(hiPSC)衍生而来的三维组织,能模拟人大脑的结构和功能,作为神经发育疾病的体外研究模型独具优势。本文将对神经疾病体外模型建立和发展的历程、脑类器官在神经发育疾病研究中的应用、相关前沿技术和脑类器官技术的结合等进行综述和展望。

关键词：多能干细胞脑类器官神经发育疾病单细胞RNA测序

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基于辅助生殖人群的染色体多态性回顾性研究

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国际检验医学杂志 2023年第12期44卷 1430-1434页

作者：赵冰清高选刘敏陈虹李江夏山东大学生殖医学研究中心(山东大学附属生殖医院)/山东大学生殖内分泌教育部重点实验室医学检验科山东济南250012 山东大学基础医学院医学遗传学系/实验畸形学教育部重点实验室山东济南250012

目的分析染色体多态性对辅助生殖人群的影响。方法回顾性分析2016年1月至2019年11月在山东大学附属生殖医院行辅助生殖技术的91 908例患者(45 954对夫妇),将夫妇双方染色体核型皆正常的设为对照组(1 189例),根据染色体多态性的不同形... 详细信息

目的分析染色体多态性对辅助生殖人群的影响。方法回顾性分析2016年1月至2019年11月在山东大学附属生殖医院行辅助生殖技术的91 908例患者(45 954对夫妇),将夫妇双方染色体核型皆正常的设为对照组(1 189例),根据染色体多态性的不同形态,将男性染色体多态性患者分为Y组、inv(9)组、D/G组、1qh+组、9/16组,将女性染色体多态性患者分为inv(9)组、D/G组、1/9/16组。对男性染色体多态性患者的精子浓度、精子总活力、促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、睾酮(T)、垂体催乳素(PRL)进行比较,对女性染色体多态性患者的获卵数、FSH、LH、雌激素(E2)、T、PRL、促甲状腺激素(TSH)进行比较。结果 91 908例患者(45 954对夫妇)检出男性染色体多态性4 018例,女性患者染色体多态性3 100例,男性检出率高于女性(P<0.05);与对照组比较,Y组精子浓度和精子总活力降低,FSH和LH水平升高(P<0.05);与对照组比较,Y组中Yqh-、del(Y)患者精子浓度、精子总活力降低,FSH和LH水平升高,Yqh+患者精子浓度、精子总活力降低(P<0.05);与对照组比较,inv(9)组获卵数减少(P<0.05)。结论男性染色体多态性中的Yqh+、Yqh-对精液质量、激素水平有一定的影响,女性染色体多态性中的9号染色体倒位对获卵数有一定的影响。

关键词：辅助生殖技术染色体多态性生殖激素核型分析

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基于辅助生殖人群的复发性流产夫妇染色体核型回顾性分析

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山东大学学报（医学版） 2021年第7期59卷 26-31页

作者：赵冰清高选李江夏山东大学生殖医学研究中心国家辅助生殖与优生工程技术研究中心生殖内分泌教育部重点实验室山东济南250001 山东大学基础医学院医学遗传学系实验畸形学教育部重点实验室山东济南250012

目的分析实施辅助生殖技术夫妇的外周血染色体核型,为临床诊疗和遗传咨询提供理论依据。方法回顾性分析2015年1月至2018年12月山东大学附属生殖医院实施辅助生殖的1438例(719对)复发性流产(RSA)患者及3292例(1646对)自然流产1次患者的... 详细信息

目的分析实施辅助生殖技术夫妇的外周血染色体核型,为临床诊疗和遗传咨询提供理论依据。方法回顾性分析2015年1月至2018年12月山东大学附属生殖医院实施辅助生殖的1438例(719对)复发性流产(RSA)患者及3292例(1646对)自然流产1次患者的外周血染色体核型,比较染色体变异的种类、发生率及其在男性和女性中的比例差异,分析流产次数与染色体核型的关系。结果1438例(719对)RSA患者中检出染色体变异320例,其中男性染色体变异165例,女性染色体变异155例;染色体结构畸变占染色体变异的57.58%,其中相互易位比率最高;不同性别1次流产组与RSA组间染色体互相易位和罗伯逊易位差异均有统计学意义(P<0.001),染色体倒位差异无统计学意义(男:P=0.21;女:P=0.83);随着流产次数的增加,男女性染色体畸变率趋势差异均有统计学意义(P<0.001)。结论实施辅助生殖人群中自然流产1次患者的染色体畸变率低于RSA患者;RSA患者的染色体异常以染色体易位多见,且染色体畸变率与流产次数无关。

关键词：辅助生殖技术复发性流产染色体变异核型分析

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TUBA1A基因新发变异患儿的临床特征及遗传学分析

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国际遗传学杂志 2024年第4期47卷 278-283页

作者：李成林魏娜杨礼刘奇迹谭冰玲周林付佳朱龙云崔迪孙雪晶聊城市东昌府区妇幼保健院康复科聊城聊城市东昌府区妇幼保健院检验科聊城山东大学基础医学院实验畸形学教育部重点实验室与医学遗传系济南北京智因东方转化医学研究中心有限公司北京

目的分析1例全面性发育迟缓、多次抽搐患儿的遗传学病因及影像学特征。方法对在聊城市东昌府区妇幼保健院遗传康复科就诊的1例全面发育迟缓、多次抽搐的患儿运用全外显子测序技术和脑功能成像技术探讨其致病原因, 分析其临床表型、影像... 详细信息

目的分析1例全面性发育迟缓、多次抽搐患儿的遗传学病因及影像学特征。方法对在聊城市东昌府区妇幼保健院遗传康复科就诊的1例全面发育迟缓、多次抽搐的患儿运用全外显子测序技术和脑功能成像技术探讨其致病原因, 分析其临床表型、影像学特征及遗传学特点。结果全外显子测序结果显示患儿携带TUBA1A基因c.518C>T (p.P173L)杂合变异, 该突变在其临床表型正常的父母中未检测到, 为新发突变。颅脑MRI结果显示胼胝体发育略薄, 脑沟和脑回未见明显异常, 进一步行脑功能成像检查发现胼胝体体部小部分纤维束显示稀疏, 左侧毯部纤维较右侧稀疏, 右侧额枕下束较左侧明显稀疏, 双侧弓状纤维额颞部稀疏, 结果提示大脑发育和部分脑功能区受损。结论本研究采用全外显子测序技术发现1例TUBA1A基因c.518C>T(p.P173L)的杂合变异患者, 通过磁共振脑功能成像(functional magenetic resonance imaging, fMRI)发现患儿大脑功能发育和部分脑功能区受损, 补充了TUBA1A基因致病的临床表型数据库。

关键词：全外显子测序无脑回-巨脑回畸形3型 TUBA1A fMRI

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类器官在发育与再生中的研究进展

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中国细胞生物学学报 2021年第6期43卷 1111-1119页

作者：郭贝贝胡慧丽山东大学基础医学院遗传学系实验畸形学教育部重点实验室山东大学干细胞与再生医学研究中心济南250012

类器官(organoid)作为体外模拟器官结构和功能的三维培养体系,已经广泛应用于发育研究、疾病建模和药物筛选。类器官在再生医学中具有重要的应用前景。胚胎干细胞、诱导多能性干细胞和多组织成体干/祖细胞来源的类器官再现了发育分化、... 详细信息

类器官(organoid)作为体外模拟器官结构和功能的三维培养体系,已经广泛应用于发育研究、疾病建模和药物筛选。类器官在再生医学中具有重要的应用前景。胚胎干细胞、诱导多能性干细胞和多组织成体干/祖细胞来源的类器官再现了发育分化、稳态自我更新和组织损伤再生过程,为揭示发育和再生调控机制、明确生理病理进程提供了可能。近年来,多细胞类型的新型培养模式和单细胞测序等技术的应用促进了类器官的发展。该文总结了类器官在发育与再生中的最新研究成果,并就前沿技术在类器官研究中的应用进行了综述与展望。

关键词：类器官干细胞分化损伤再生细胞可塑性

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EBF3基因杂合突变导致1例神经发育障碍综合征

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山东大学学报（医学版） 2020年第4期58卷 105-109,117页

作者：刘娜刘奇迹牟凯程翠云淄博市妇幼保健院产前诊断中心山东淄博255000 山东大学基础医学院实验畸形学教育部重点实验室与医学遗传系山东济南250012

目的对一例体格发育迟缓、智力低下、共济失调及肌张力低下等神经发育障碍患儿的临床特点及致病基因进行分析。方法详细分析患儿的临床表型,分别采集患儿及父母的抗凝外周血,对患儿样本进行外周血淋巴细胞G显带核型分析和SNP-array检测... 详细信息

目的对一例体格发育迟缓、智力低下、共济失调及肌张力低下等神经发育障碍患儿的临床特点及致病基因进行分析。方法详细分析患儿的临床表型,分别采集患儿及父母的抗凝外周血,对患儿样本进行外周血淋巴细胞G显带核型分析和SNP-array检测,对患儿及父母的外周血DNA进行全外显子组测序,生物信息学分析突变位点的致病性。结果患儿外周血染色体核型分析及SNP-array未发现致病突变,全外显子组测序结果表明患儿存在EBF3基因杂合突变c.626G>A(***209Gln),利用Sanger测序进行突变位点验证,结果证实患儿存在该位点突变,而父母没有该位点突变。结论该患儿的发病原因为EBF3基因新发杂合突变c.626G>A(***209Gln),该突变位点国内尚无报道。

关键词：肌张力减退、共济失调和发育迟缓综合征全外显子组测序 EBF3基因基因突变

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基于JAK-STAT3通路探讨清热利湿饮治疗银屑病的分子机制

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中华中医药杂志 2020年第5期35卷 2389-2395页

作者：张芳孙淑娜邹永新李伟宁李娜于小平白文哲张晓杰山东中医药大学第一临床医学院济南250014 山东中医药大学附属医院皮肤科济南250014 山东大学分子基础医学院遗传学系实验畸形学教育重点实验室济南250012

目的:探讨清热利湿饮对角质形成细胞HaCaT细胞及咪喹莫特诱导的银屑病小鼠模型酪氨酸激酶蛋白JAK-STAT3信号通路的分子机制。方法:含不同浓度清热利湿饮的完全培养基培养HaCaT细胞48h后,Western Blot检测JAK1、JAK2及P-STAT3的蛋白表达... 详细信息

目的:探讨清热利湿饮对角质形成细胞HaCaT细胞及咪喹莫特诱导的银屑病小鼠模型酪氨酸激酶蛋白JAK-STAT3信号通路的分子机制。方法:含不同浓度清热利湿饮的完全培养基培养HaCaT细胞48h后,Western Blot检测JAK1、JAK2及P-STAT3的蛋白表达。另将50只BALB/c雄性小鼠随机分为空白对照组、模型组、清热利湿高、中、低剂量组,每组10只,利用PASI评分及HE染色评价银屑病小鼠皮损情况,免疫组化测定皮损中增殖细胞核抗原Ki67及信号通路中P-STAT3表达情况,Western Blot检测JAK1、JAK2、SAT3及P-STAT3蛋白表达情况,实时荧光定量检测组织中IL-6、TNF-α、IL-1β、VEGF mRNA的表达。结果:清热利湿饮可以使HaCaT细胞内JAK1、JAK2及P-STAT3的表达明显降低。与空白对照组比较,模型组小鼠皮损、红斑、鳞屑、浸润程度严重,清热利湿各剂量组较模型组显著减轻,PASI评分降低、表皮厚度减少(P<0.01)。与空白对照组比较,模型组皮损角质形成细胞中Ki67、P-STAT3着色细胞层数及数量显著增多且于细胞核中沉积(P<0.01),清热利湿各剂量组比模型组减少(P<0.01,P<0.05),高剂量组减少更加显著。模型组中STAT3、P-STAT3、JAK1、JAK2蛋白表达较空白对照组均增高(P<0.01),清热利湿高、中剂量组均较模型组低(P<0.01,P<0.05)。模型组与空白对照组比较,IL-6、TNF-α、IL-1β、VEGF mRNA表达均上调(P<0.01),清热利湿高、中剂量组较模型组的表达均下调(P<0.01,P<0.05)。结论:清热利湿饮可以抑制表皮角质形成细胞中JAK-STAT3通路中相关蛋白的表达,且有效减少IL-6、TNF-α、IL-1β、VEGF mRNA表达,从而发挥治疗银屑病的作用。

关键词：银屑病清热利湿饮 JAK-STAT3通路咪喹莫特机制角质形成细胞

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