检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学报 2017年第11期57卷 1735-1746页

作者：郑文韬张友明卞小莹山东大学亥姆霍兹生物技术研究所微生物技术国家重点实验室山东大学生命科学学院山东青岛266237

Red/ET同源重组技术(Red/ET recombineering)是由来源于大肠杆菌λ噬菌体的蛋白对Redα/Redβ或来源于Rac原噬菌体的蛋白对Rec E/Rec T所介导的基于短同源臂(40–50 bp)的同源重组技术,能对宿主DNA序列进行快速、高效、精确的修饰和操... 详细信息

Red/ET同源重组技术(Red/ET recombineering)是由来源于大肠杆菌λ噬菌体的蛋白对Redα/Redβ或来源于Rac原噬菌体的蛋白对Rec E/Rec T所介导的基于短同源臂(40–50 bp)的同源重组技术,能对宿主DNA序列进行快速、高效、精确的修饰和操作。本文主要综述了2010年以来Red/ET同源重组技术在大肠杆菌及其他细菌中的研究进展,同时简要介绍了该技术在微生物基因组挖掘,尤其是在微生物基因簇的异源表达领域的应用进展。

关键词： Red/ET同源重组技术直接克隆遗传工程基因组挖掘次级代谢产物异源表达

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激光诱导中华大蟾蜍尾芽胚双向电泳蛋白质谱变化的研究

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应用激光 2005年第3期25卷 197-199页

作者：时永香白预弘白增亮张少军李丽莉山东大学生命科学学院济南250100 晶体材料国家重点实验室 250100 微生物技术国家重点实验室 250100

目的:研究YAG倍频激光微束对中华大蟾蜍尾芽胚双向电泳蛋白质谱的影响。方法:以中华大蟾蜍为实验对象,以不同能量密度激光照射尾芽胚,0.5h后制备样品进行双向电泳,电泳胶扫描成像后用PDQuest软件进行分析。结果:激光照射后尾芽胚总蛋白... 详细信息

目的:研究YAG倍频激光微束对中华大蟾蜍尾芽胚双向电泳蛋白质谱的影响。方法:以中华大蟾蜍为实验对象,以不同能量密度激光照射尾芽胚,0.5h后制备样品进行双向电泳,电泳胶扫描成像后用PDQuest软件进行分析。结果:激光照射后尾芽胚总蛋白质点数皆比对照组少,100和300μJ/cm2能量密度组总蛋白质点数减少较明显;随着照射能量的增加,新增点数逐渐增多;600μJ/cm2能量密度组消失点数较其他组少,二倍上升点数较其他组多。蛋白质点的分布及密度变化集中在分子量大于20.1kD和等电点大于4.80范围。结论:激光照射对尾芽胚双向电泳蛋白质谱有明显影响,蛋白质点的变化与激光能量密度相关。

关键词：中华大蟾蜍双向电泳质谱激光诱导胚激光照射能量密度蛋白质点激光微束实验对象扫描成像密度变化密度相关激光能量点数 YAG 600 等电点分子量

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酰基高丝氨酸内酯提高小鼠肠道革兰氏阴性菌的分离培养效率

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生物工程学报 2024年

作者：王长钰赵庆华刘畅刘双江中国科学技术大学生命科学与医学部生命科学学院中国科学院微生物研究所微生物资源前期开发国家重点实验室山东大学微生物技术国家重点实验室

十二烷酰-l-高丝氨酸内酯(N-dodecanoyl- l-homoserine lactone， C12-HSL)是介导细菌群感效应的信号分子，调控细菌群体行为。本研究旨在探究 C12-HSL 对肠道微生物分离培养的影响，丰富小鼠肠道微生物可培养菌株资源的种类和数量。利... 详细信息

十二烷酰-l-高丝氨酸内酯(N-dodecanoyl- l-homoserine lactone， C12-HSL)是介导细菌群感效应的信号分子，调控细菌群体行为。本研究旨在探究 C12-HSL 对肠道微生物分离培养的影响，丰富小鼠肠道微生物可培养菌株资源的种类和数量。利用添加 C12-HSL 的培养基对小鼠肠道内容物进行菌株分离培养，共获得 235 个分离株，通过 16S rRNA 基因初步鉴定出 54 种菌，其中包含 1 个潜在新科，4 个潜在新属，4 个潜在新种；与实验室前期建立的小鼠肠道微生物菌株资源库 mGMB 比较，42 个菌种为本研究的新增物种，丰富了菌库的物种多样性；统计分析发现，通过该方法分离获得的革兰氏阴性菌特别是变形菌门的比例，显著高于未添加 C12-HSL 的普通分离培养方法。随后，对发现的一个新菌种培养实验表明，外源 C12-HSL 在 20 -200 μmol/L 浓度范围内对该菌种生长具有显著促进作用，而高浓度的 C12-HSL 则显著抑制该菌细胞密度。本研究证实了细菌群感效应分子在特定浓度范围内有助于提高肠道中革兰氏阴性菌的生长、分离和培养。尽管群感效应信号分子 C12-HSL 促进肠道菌株生长的机制还有待进一步探究，但本研究的发现为利用细菌群感效应信号分子靶向分离培养和调控肠道菌群提供了新思路。

关键词：肠道微生物群感效应革兰氏阴性菌酰基高丝氨酸内酯

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酵母表达人源化糖蛋白研究进展

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中国生物工程杂志 2007年第4期27卷 120-125页

作者：王黎刘洋陈敏山东大学威海分校海洋学院威海264209 山东大学生命科学学院微生物技术国家重点实验室济南250100

与人体天然复杂型糖蛋白相比,使用酵母生产的药用蛋白带有高甘露糖型N-糖链。这一差异在临床应用中产生了许多不良影响。目前,可以通过消除酵母特有的内源糖基化反应,引入哺乳动物细胞中的一系列糖基转移酶及转运蛋白对酵母糖基化路径... 详细信息

与人体天然复杂型糖蛋白相比,使用酵母生产的药用蛋白带有高甘露糖型N-糖链。这一差异在临床应用中产生了许多不良影响。目前,可以通过消除酵母特有的内源糖基化反应,引入哺乳动物细胞中的一系列糖基转移酶及转运蛋白对酵母糖基化路径进行改造,从而使其表达出人源化的复杂型N-聚糖。介绍酵母N-糖基化特点、糖基化不均一性;综述近年来利用基因工程改造酵母N-糖基化路径获得特定的人源N-连接糖蛋白以及使用内切糖苷酶生产人源糖蛋白的研究进展;对存在的问题及今后的发展前景进行讨论。

关键词：酵母糖基化人源化糖蛋白基因工程

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含α-乙酰乳酸脱羧酶基因重组酿酒酵母的啤酒发酵

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山东大学学报（自然科学版） 2000年第2期35卷 235-240页

作者：秦玉静刘巍峰高东鲍晓明郑华军山东大学生命科学学院微生物系微生物技术国家重点实验室山东济南250100

利用E .coli和酿酒酵母的穿梭质粒pYES2为载体 ,将地衣芽孢杆菌α 乙酰乳酸脱羧酶基因导入酿酒酵母中 ,构建了重组质粒pYEA ,实现了α 乙酰乳酸脱羧酶基因在酵母菌中的表达 .α 乙酰乳酸脱羧酶基因在酵母菌中的表达与菌体生长有关 .pYE... 详细信息

利用E .coli和酿酒酵母的穿梭质粒pYES2为载体 ,将地衣芽孢杆菌α 乙酰乳酸脱羧酶基因导入酿酒酵母中 ,构建了重组质粒pYEA ,实现了α 乙酰乳酸脱羧酶基因在酵母菌中的表达 .α 乙酰乳酸脱羧酶基因在酵母菌中的表达与菌体生长有关 .pYEA质粒在无选择压力的发酵条件下 ,仅能保持一定的稳定性 ,并具有降解α 乙酰乳酸的能力 ,但丢失率比较高 .

关键词：重组酿酒酵母 α-乙酰乳酸脱羧酶基因啤酒发酵

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基于杨木(Populus sp.)的二代燃料乙醇技术研究进展

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生物技术通报 2023年第9期39卷 27-39页

作者：徐发迪徐康孙东明李萌蕾赵建志鲍晓明齐鲁工业大学(山东省科学院)生物工程学院生物基材料与绿色造纸国家重点实验室济南250353 山东大学生命科学学院微生物技术国家重点实验室(微生物技术研究院) 青岛266237

木质纤维素类生物质作为一种廉价且储量丰富的可再生原料,可通过预处理、酶解和微生物发酵等过程转化为纤维素燃料乙醇,近几十年来受到世界各国的广泛关注。杨木是一种人工广泛种植的速生硬木,主要用于造纸工业,而伴随产生大量枝桠等废... 详细信息

木质纤维素类生物质作为一种廉价且储量丰富的可再生原料,可通过预处理、酶解和微生物发酵等过程转化为纤维素燃料乙醇,近几十年来受到世界各国的广泛关注。杨木是一种人工广泛种植的速生硬木,主要用于造纸工业,而伴随产生大量枝桠等废弃物。因其富含纤维素和半纤维素组分,被认为是纤维素乙醇生产的优良木质纤维素原料。聚焦于杨木在纤维素乙醇生产中的应用,介绍了杨木的组成及结构特点,重点综述了杨木在预处理技术、预处理原料的酶解、微生物发酵等方面的研究进展。最后,归纳总结了限制杨木在纤维素乙醇应用中的技术障碍及困难,进而分析提出了相应解决对策并展望了其应用前景。

关键词：杨木组分预处理酶解混合糖发酵酿酒酵母

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对虾等甲壳类动物肠道与血淋巴菌群的组成、功能与动态平衡调控

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微生物学报 2018年第5期58卷 760-772页

作者：王金星山东大学生命科学学院山东省动物细胞与发育生物学重点实验室山东济南250100 山东大学微生物技术国家重点实验室山东济南250100

对虾等甲壳类动物体内存在2个菌群:肠道菌群和血淋巴菌群。肠道菌群的种类和数量较多,而血淋巴菌群较少。两种菌群均包含益生菌和致病菌,在宿主体内代谢、营养和免疫反应中发挥重要功能。肠道菌群动态平衡的调控主要通过双氧化酶产生的... 详细信息

对虾等甲壳类动物体内存在2个菌群:肠道菌群和血淋巴菌群。肠道菌群的种类和数量较多,而血淋巴菌群较少。两种菌群均包含益生菌和致病菌,在宿主体内代谢、营养和免疫反应中发挥重要功能。肠道菌群动态平衡的调控主要通过双氧化酶产生的活性氧来完成;血淋巴菌群通过C-型凝集素调控的抗菌肽表达及酚氧化酶原激活系统来维持其动态平衡。阐明对虾等甲壳类体内菌群的组成、功能和动态平衡调控的机理,可以为对虾等经济甲壳类健康养殖的微生态制剂开发和疾病控制提供指导。

关键词：体内菌群动态平衡活性氧抗菌肽甲壳类

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胡萝卜与川西獐牙菜不对称体细胞杂种的核/质基因组特征

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植物生理与分子生物学学报 2005年第3期31卷 254-260页

作者：李子东邵菲蔡云飞向凤宁夏光敏山东大学生命科学学院济南250100 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室北京100094

胡萝卜(***)原生质体与经260μW/cm2紫外线照射的川西獐牙菜(Swertiamussotii)原生质体用PEG法诱导融合。对融合再生的克隆的5SrDNA间隔序列和RAPD分析结果得知,各再生克隆均存在双亲的核DNA及重组DNA。杂种的核基因组组成以胡萝卜(受体... 详细信息

胡萝卜(***)原生质体与经260μW/cm2紫外线照射的川西獐牙菜(Swertiamussotii)原生质体用PEG法诱导融合。对融合再生的克隆的5SrDNA间隔序列和RAPD分析结果得知,各再生克隆均存在双亲的核DNA及重组DNA。杂种的核基因组组成以胡萝卜(受体)为主,供体川西獐牙菜DNA谱带较少;UV照射剂量对体细胞杂种核基因组组成没有明显的影响。进一步对再生克隆叶绿体DNA的SSR分析表明,杂种细胞中双亲叶绿体基因组随机分离并发生重组。

关键词：胡萝卜川西獐牙菜紫外线处理不对称体细胞杂交核/质基因组

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香坊肠球菌和罗伊氏乳杆菌在无菌猪肠道中的定殖

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微生物学报 2022年第10期62卷 3981-3996页

作者：韩姗姗杜梦璇刘畅牛鹏霞冯婕张志刚刘双江中国科学院微生物研究所微生物资源前期开发国家重点实验室和环境微生物与生物技术中心北京100101 中国科学技术大学生命科学与医学部安徽合肥230026 山东大学微生物技术国家重点实验室山东青岛250002 云南大学生命科学学院云南昆明650091

【背景】已有研究表明,微生物在宿主肠道中的定殖受宿主、肠道环境、微生物物种特性和菌株来源等多个因素的影响。一般认为,来源于同类宿主的微生物菌株,在该类宿主肠道中具有定殖优势,但缺乏在物种和菌株水平上研究微生物自身特性在宿... 详细信息

【背景】已有研究表明,微生物在宿主肠道中的定殖受宿主、肠道环境、微生物物种特性和菌株来源等多个因素的影响。一般认为,来源于同类宿主的微生物菌株,在该类宿主肠道中具有定殖优势,但缺乏在物种和菌株水平上研究微生物自身特性在宿主肠道中定殖的研究报道。【目的】将不同来源(同类宿主肠道、非同类宿主肠道和非肠道环境)、具有不同生物学特性的3株香坊肠球菌(Enterococcus xiangfangensis)和4株罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)对无菌猪肠道进行定殖,在物种和菌株2个水平上探究物种特性和菌株来源对宿主肠道定殖的偏好性,揭示影响微生物定殖效率的关键因素。【方法】在本项研究中,将从藏猪(Tibetan pigs)、小鼠(ob/ob mice)、食蟹猴(Macaca fascicularis)和发酵食品中分离得到的多株香坊肠球菌和罗伊氏乳杆菌,制成混合菌剂对无菌巴马香猪(Bama miniature pig)进行为期4周的饲喂,并通过实时荧光定量PCR方法检测这7株菌在无菌猪肠道中的定殖情况。【结果】在物种水平上,香坊肠球菌和罗伊氏乳杆菌在无菌猪体内具有相近的定殖细胞数目。但是在菌株水平上,小鼠来源的香坊肠球菌(EX-MS)和罗伊氏乳杆菌(LR-MS)定殖的细胞数目显著高于其他5株菌,表明小鼠来源的菌株具有定殖优势。在体外混合培养中,将3株香坊肠球菌和4株罗伊氏乳杆菌分别等比例混合培养72 h后,发现香坊肠球菌EX-MS菌株的细胞数目高于香坊肠球菌EX-MK和EX-PG菌株;在罗伊氏乳杆菌中,4株菌的细胞数目相近。7株菌相互作用表明,EX-MS菌株对EX-MK和EX-PG菌株均有明显的抑制作用,但对4株罗伊氏乳杆菌无抑制作用。【结论】本次定殖实验的结果表明,在物种水平上,香坊肠球菌和罗伊氏乳杆菌均具有在无菌猪肠道中良好的定殖能力;但在菌株水平上,小鼠来源的香坊肠球菌EX-MS菌株和罗伊氏乳杆菌LR-MS菌株具有定殖优势;同时发现,小鼠来源的香坊肠球菌EX-MS菌株通过抑制同物种的EX-PG和EX-MK菌株,获得了在宿主肠道中的定殖优势。

关键词：肠道微生物香坊肠球菌罗伊氏乳杆菌无菌猪定殖偏好性

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乳酸菌胞外多糖的研究进展

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中国生物工程杂志 2015年第11期35卷 85-91页

作者：童良琴曲亚军陈敏山东大学生命科学学院微生物技术国家重点实验室国家糖工程技术研究中心济南250100

乳酸菌胞外多糖是乳酸菌生长代谢过程中产生并分泌到细胞外的一种天然高分子聚合物。作为一种新型的天然食品添加剂,乳酸菌胞外多糖因其独特的生理功能和产业潜力而备受研究者青睐。但由于乳酸菌胞外多糖结构组分、功能效用的不同,很难... 详细信息

乳酸菌胞外多糖是乳酸菌生长代谢过程中产生并分泌到细胞外的一种天然高分子聚合物。作为一种新型的天然食品添加剂,乳酸菌胞外多糖因其独特的生理功能和产业潜力而备受研究者青睐。但由于乳酸菌胞外多糖结构组分、功能效用的不同,很难建立一个通用的生产方法和检测标准。另外,如何提高胞外多糖产量也是未来要面临的一大挑战。从乳酸菌胞外多糖的遗传研究、结构修饰、构效关系、生物学活性几个方面进行综述,并对未来研究方向进行展望。

关键词：乳酸菌胞外多糖结构分析构效关系生物学活性

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