检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病理生理杂志 2011年第8期27卷 1623-1628页

作者：张磊赵翠芬李福海王荣夏伟山东大学齐鲁医院儿科山东济南250012 山东大学卫生部教育部心血管功能重塑与功能研究重点实验室山东济南250012

目的:检测不同浓度的肾上腺髓质素(ADM)和肾上腺加压素(ADT)对培养的Wistar大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)Ⅰ、Ⅲ型胶原合成和磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK1/2)表达的影响,探讨PASMCs增殖过程中ERK途径是否被激活。方法:取健康雄性Wis... 详细信息

目的:检测不同浓度的肾上腺髓质素(ADM)和肾上腺加压素(ADT)对培养的Wistar大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)Ⅰ、Ⅲ型胶原合成和磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK1/2)表达的影响,探讨PASMCs增殖过程中ERK途径是否被激活。方法:取健康雄性Wistar大鼠,行大鼠远端PASMCs分离并进行原代培养,采用小鼠抗人平滑肌α-actin单克隆抗体对培养细胞进行鉴定;在培养基内分别加入10-7 mol/L ADM或ADT培养72h后加入兔抗大鼠Ⅰ型、Ⅲ型胶原抗体和兔抗大鼠p-ERK1/2抗体,0.01 mol/L PBS作阴性对照,FITC标记山羊抗兔IgG为Ⅱ抗,免疫荧光法观察PASMCs内Ⅰ、Ⅲ型胶原及p-ERK1/2表达。Western blotting检测10-7mol/L、10-8mol/L和10-9 mol/L ADM或ADT对p-ERK1/2蛋白表达的影响。结果:经平滑肌α-actin单克隆抗体对培养细胞进行鉴定,其纯度达97%。10-7 mol/L ADM可抑制PASMCsⅠ、Ⅲ型胶原及p-ERK1/2的表达(P<0.05,P<0.01);10-7 mol/L的ADT刺激后大鼠PASMCsⅠ、Ⅲ型胶原及p-ERK1/2的表达增强(P<0.05,P<0.01)。West-ern blotting结果显示ADM可呈剂量依赖性抑制p-ERK1/2蛋白表达(P<0.01,P<0.05);而ADT也可呈剂量依赖性促进p-ERK1/2蛋白表达(P<0.01,P<0.05)。结论:ADM可抑制大鼠PASMCsⅠ、Ⅲ型胶原及p-ERK1/2表达,而ADT可促进PASMCsⅠ、Ⅲ型胶原及p-ERK1/2表达,提示PASMCs增殖过程中ERK通路被激活,ADM和ADT可能通过ERK1/2信号通路来调节PASMCs增殖。

关键词：肾上腺髓质素肾上腺加压素细胞外信号调节激酶类肺动脉平滑肌细胞胶原合成

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肾上腺髓质素前体不同活性肽段在肺动脉高压大鼠肺内的变化

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中国病理生理杂志 2008年第4期24卷 655-660页

作者：赵翠芬王丽娟王志宇夏伟王玉玮王荣山东大学齐鲁医院小儿内科山东大学医学院山东济南250012 山东省医药生物技术研究中心山东济南250062 山东大学齐鲁医院卫生部教育部心血管重塑与功能研究重点实验室

目的:检测肾上腺髓质素前体不同活性肽段在左向右分流肺动脉高压中肺内的分布和变化,探讨左向右分流肺动脉高压的发病机制。方法:选择30只雄性Wistar大鼠,随机分为实验组(n=15),对照组(n=15)。用自制套管将实验组大鼠左侧颈外静脉和颈... 详细信息

目的:检测肾上腺髓质素前体不同活性肽段在左向右分流肺动脉高压中肺内的分布和变化,探讨左向右分流肺动脉高压的发病机制。方法:选择30只雄性Wistar大鼠,随机分为实验组(n=15),对照组(n=15)。用自制套管将实验组大鼠左侧颈外静脉和颈总动脉连接,术后8周测定大鼠肺动脉收缩压(sPAP,用右心室收缩压来代替)、右心室与(左心室+室间隔)重量比[RV/(LV+SP)]、肺组织中等血管中膜厚度占血管直径百分比(MT%)。免疫组化法测定肺组织ADM、ADT、PAMP的分布,RT-PCR法测定肺组织PAMP、ADM、ADT、proADM45-92mRNA的表达。结果:①实验组大鼠肺动脉压高于对照组(P<0.05)。②ADM与ADT在肺内的分布较一致,但是2者相对含量的变化却相反。PAMP在大鼠肺内的分布与前2者差异显著。③左向右分流大鼠肺组织ADMmRNA表达水平高于对照组(P<0.01),ADTmRNA表达低于对照组(P<0.01)。结论:肾上腺髓质素前体不同活性肽段在左向右分流肺动脉高压大鼠肺组织中的变化为其分子内调控学说提供了有力的证据。

关键词：肾上腺髓质素前体肺动脉高压

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RhoA/Rho激酶在高肺血流肺血管结构重构中的表达及其活性研究

引用

中华儿科杂志 2007年第5期45卷 387-392页

作者：李福海夏伟孙若鹏山东大学齐鲁医院小儿科卫生部教育部心血管重塑与功能研究重点实验室济南250012

目的探讨 RhA/Rho 激酶在高肺血流所致肺血管结构重构过程中所起的作用。方法108只4周龄 Wistar 大鼠随机分到4个分流组、4个对照组,分流组大鼠接受左侧颈总动脉-颈外静脉分流术,对照组大鼠作假手术。在术后1、2、4、8周,分别测量右心... 详细信息

目的探讨 RhA/Rho 激酶在高肺血流所致肺血管结构重构过程中所起的作用。方法108只4周龄 Wistar 大鼠随机分到4个分流组、4个对照组,分流组大鼠接受左侧颈总动脉-颈外静脉分流术,对照组大鼠作假手术。在术后1、2、4、8周,分别测量右心室收缩压,作血气分析计算 Qp/Qs。肺组织切片 HE 染色光镜下观察肺血管形态学改变,测量并计算中等血管中膜厚度所占管径百分比(MT%)。免疫组化增殖细胞核抗原(PCNA)染色分析平滑肌细胞增生情况。用 TUNEL 细胞凋亡标记分析平滑肌细胞凋亡状况。pull down assay 分析 RhoA 活性,Western blot 检测 RhoA、Rho 激酶(ROCK2)的蛋白表达以及 MYPT1磷酸化程度量化分析 Rho 激酶活性。结果颈总动脉-颈外静脉分流导致肺循环血流量增加,Qp/Qs 平均值为2.26±0.35。分流组 RVSP 在术后1周和8周较对照组高(t=8.799,t=5.332,P<0.01)。与对照组相比,分流组以平滑肌细胞过度增生和肥大为特征的中等肺动脉中膜增厚,MT%升高在第4周开始出现,到第8周更为明显(t=9.192,t=11.185,P<0.01)。分流组 PCNA 阳性平滑肌细胞在第1周显著升高,第2周达最高值,与对照组相比,差异有统计学意义(t=7.213,P<0.01),到第4周下降到显著低于对照组(t=4.183,P<0.01),并持续降低,到第8周几乎观察不到增生的平滑肌细胞(t=6.152,P<0.01)。TUNEL 阳性平滑肌细胞在第2周较对照组低(t=2.418,P<0.05),并持续降低,到第8周几乎观察不到凋亡的平滑肌细胞(t=4.582,P<0.01)。RhoA 和 ROCK2 表达在第1周即高于对照组(t=6.056,t=8.411,P<0.01),第2周达高峰(t=9.342,t=10.437,P<0.01)。到第4开始下降,但是到第8周仍然显著高于对照组(t=4.743,t=4.455,P<0.01)。RhoA 和 Rho 激酶活性在第1周也显著高于对照组(t=10.246,t=19.110,P<0.01),到第4周达高峰(t=24.984,t=16.124,P<0.01),然后开始降低,但是二者到第8周仍然显著高于对照组水平(t=4.934,t=10.426,P<0.01)。结论在高肺血流所致的大鼠肺血管收缩和结构重构与 RhoA/Rho 激酶的表达和活性增强有关。

关键词：高血压肺性蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶胞间信号肽类和蛋白质类肺循环

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