检索结果-内蒙古大学图书馆

中华实验和临床病毒学杂志 2011年第4期25卷 241-244页

作者：荆永正浦声波吴国才杨建于学英郭振华张国英高忠华山东省蓬莱市人民医院检验科 265600 山东省蓬莱市中医院青岛大学医学院微生物学教研室山东省烟台市中心血站山东蓬莱市疾病预防控制中心

目的探讨乙型肝炎患者和健康携带者乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）C区基因变异规律及其临床意义。方法采用实时荧光定量PCR检测乙肝患者和HBV健康携带者外周血HBV DNA载量；PCR结合DNA测序对HBV C区基因进行多态性检测，并应用... 详细信息

目的探讨乙型肝炎患者和健康携带者乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）C区基因变异规律及其临床意义。方法采用实时荧光定量PCR检测乙肝患者和HBV健康携带者外周血HBV DNA载量；PCR结合DNA测序对HBV C区基因进行多态性检测，并应用DNAstar软件进行比对和分析。结果①与标准株相比，所有标本C区基因序列均出现变异。在≥2例标本中出现的突变31处，包括PreC基因3处，C基因28处；其中9处为错义突变，1处为终止突变，其余21处均为同义突变。nt 1827 c→a和nt 2221 c→t出现在所有标本，有6处同义突变出现于较多标本中。4例乙肝患者标本在nt1896位发生g→a突变，另有4例乙肝患者在HBcAgCTL识别表位84～101处发生2处突变即S87G和I97F或197L。②DNA扩增及测序的成功与否与HBV的DNA拷贝数密切相关，本次研究DNA扩增及测序成功的标本其DNA拷贝数多大于40 193/ml,DNA拷贝数较低的标本不易获得成功。结论HBV基因组极易发生突变，C区基因有2个位点的突变见于所有扩增成功标本，为此研究标本所特有，提示这些突变热点可能具有地域特异性。C区基因变异可引起HBeAg和HBcAg的结构及功能改变，进而导致病毒逃逸机体对病毒的免疫清除作用，或影响HBeAg的检出。

关键词：肝炎病毒乙型基因多态现象(遗传学) 聚合酶链反应

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活化PPAR-γ对特发性血小板减少性紫癜小鼠NOS的影响

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中国热带医学 2011年第9期11卷 1046-1047,1063页

作者：金呈强董海新刘仿赵元明孙卓祥高岩窦翠云井楠王杰王彤宋丽济宁医学院附属医院医学检验中心山东济宁272029 广东医学院微生物学与免疫学教研室广东湛江524023

目的探讨在特发性血小板减少性紫癜(ITP)模型小鼠体内,过氧化物酶体增生物激活受体γ(PPAR-γ)对一氧化氮合酶(NOS)生成的影响。方法 ITP模型小鼠分成罗格列酮试验组、GW9662对照组和磷酸盐缓冲液(PBS)对照组,罗格列酮试验组用相同浓度(... 详细信息

目的探讨在特发性血小板减少性紫癜(ITP)模型小鼠体内,过氧化物酶体增生物激活受体γ(PPAR-γ)对一氧化氮合酶(NOS)生成的影响。方法 ITP模型小鼠分成罗格列酮试验组、GW9662对照组和磷酸盐缓冲液(PBS)对照组,罗格列酮试验组用相同浓度(20umol/L)的PPAR-γ激活剂噻唑烷二酮(thiazolidinediones,TZD)类药物罗格列酮进行灌肠,同时设立的GW9662对照组使用PPAR-γ特异性拮抗剂GW9662的终浓度为10μmol/L,PBS对照组使用相同体积的磷酸盐缓冲液进行灌肠,用药6、12、18、24和30h后,检测小鼠血清中NOS活性和血液淋巴细胞PPAR-γmRNA表达情况。结果血清中NOS在第6,12,18,24和30h的活性,罗格列酮试验组高于GW9662对照组及PBS对照组(P均<0.05)。在罗格列酮试验组中,NOS活性随着用药时间的延长而升高,各测量时间点NOS活性具有统计学差异(P<0.05),PPAR-γmRNA的表达随着时间的延长而增加(P<0.05),PPAR-γ的表达与NOS活性呈正相关(r=0.82,P<0.05)。结论在ITP小鼠模型内,PPAR-γ活化剂能够以时间依赖的形式增加NOS的活性,PPAR-γ可能通过NOS途径来发挥相应的生理功能。

关键词：血小板减少性紫癜一氧化氮一氧化氮合酶 PPAR-γ

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MDM2基因多态性与鲁西南汉族人群食管鳞状细胞癌风险性关联研究

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新乡医学院学报 2011年第4期28卷 437-439,442页

作者：李睿张林刘湛侯翠萍张业霞王宗军朱树国菏泽医学专科学校免疫学与微生物学教研室山东菏泽274030 新乡医学院法医物证学教研室河南新乡453003 菏泽市立医院山东菏泽274031

目的研究MDM2基因多态性在鲁西南汉族人群中的分布并分析其与食管鳞状细胞癌的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)技术分析检测132例食管鳞状细胞癌患者(病例组)和132例健康人群(对照组)MDM2 SNP309的... 详细信息

目的研究MDM2基因多态性在鲁西南汉族人群中的分布并分析其与食管鳞状细胞癌的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)技术分析检测132例食管鳞状细胞癌患者(病例组)和132例健康人群(对照组)MDM2 SNP309的基因多态性,并比较不同基因型与食管鳞状细胞癌发病风险的关系。结果 MDM2 SNP309位点在鲁西南汉族群体中的基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律。对照组和病例组MDM2 SNP309基因座位上突变等位基因频率分别为37.50%和45.45%,差别无统计学意义(P>0.05);SNP309基因座中突变等位基因G的纯合子G/G基因型频率分别为10.61%和18.94%,差别具有统计学意义(P<0.05);MDM2 SNP309的G/G基因型可增加食管鳞状细胞癌的发病风险(OR=2.27;95%CI:1.04～4.97)。结论 MDM2基因SNP309位点的G/G基因型可能与鲁西南地区食管鳞状细胞癌的发病风险增高具有相关性。

关键词： MDM2 SNP309 基因多态性食管鳞状细胞癌

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BHRF1基因对丝裂霉素诱导胃癌细胞SGC7901凋亡影响

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齐鲁医学杂志 2011年第5期26卷 377-380页

作者：孔祥硕李欣罗兵孙萍青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院肿瘤内二科山东烟台264000 青岛大学医学院微生物学教研室

目的探讨EB病毒早期基因BHRF1的表达对丝裂霉素诱发胃癌细胞SGC7901凋亡的影响。方法构建pcDNA3.1-BHRF1表达载体,应用脂质体转染法将BHRF1表达载体转染胃癌细胞系SGC7901,MTT法检测细胞生长情况。实验分为细胞对照组、空载体对照组和... 详细信息

目的探讨EB病毒早期基因BHRF1的表达对丝裂霉素诱发胃癌细胞SGC7901凋亡的影响。方法构建pcDNA3.1-BHRF1表达载体,应用脂质体转染法将BHRF1表达载体转染胃癌细胞系SGC7901,MTT法检测细胞生长情况。实验分为细胞对照组、空载体对照组和目的基因转染组,细胞对照组仅接种SGC7901细胞,空载体对照组将pcDNA3.1空载体转染入SGC7901细胞中,目的基因转染组将重组质粒pcDNA3.1-BHRF1转染入SGC7901细胞中。分别培养24、48和72 h后,用浓度为30 mg/L的丝裂霉素处理,流式细胞术检测细胞凋亡率,Hoechst33258荧光染色方法检测凋亡小体。结果 pcDNA3.1-BHRF1重组质粒构建成功。MTT实验显示目的基因转染能明显拮抗由于丝裂霉素作用导致的细胞生长抑制;BHRF1转染+丝裂霉素处理组凋亡小体明显少于对照组,细胞凋亡率明显低于对照组,差异均有统计学意义(F=6 250.510,q=56.992、51.613,P<0.01)。结论 BHRF1基因具有明显拮抗丝裂霉素诱导胃癌SGC7901细胞凋亡的作用。

关键词：疱疹病毒4型,人基因,BHRF1 丝裂霉素细胞凋亡

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CMV感染新生儿尿DNA含量和血T细胞亚群变化

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青岛大学医学院学报 2011年第3期47卷 235-236,239页

作者：牟文凤苏乃伦李海峰蒋玉红王斌青岛市妇女儿童医疗保健中心检验科山东青岛266011 青岛大学医学院微生物学教研室

目的探讨巨细胞病毒（CMV）感染新生儿尿DNA含量和血T细胞亚群的变化及意义。方法选择CMV症状性感染新生儿20例,CMV无症状性感染新生儿23例,健康查体新生儿16例,检测各组尿DNA含量和血T细胞亚群的水平,并对CMV感染病儿进行随访。结果 CM... 详细信息

目的探讨巨细胞病毒（CMV）感染新生儿尿DNA含量和血T细胞亚群的变化及意义。方法选择CMV症状性感染新生儿20例,CMV无症状性感染新生儿23例,健康查体新生儿16例,检测各组尿DNA含量和血T细胞亚群的水平,并对CMV感染病儿进行随访。结果 CMV症状性感染组尿DNA含量明显高于CMV无症状性感染组,差异有显著性（t=3.698,P〈0.01）。CMV症状性感染组CD3＋、CD4＋的水平和CD4＋/CD8＋的比值较无症状性感染组和健康对照组均降低,CD8＋水平较其他组升高,差异有显著性（F=3.74~42.34,q=3.21~11.76,P〈0.05、0.01）。随访显示CMV症状性感染组病儿中6例T细胞亚群的检测结果持续异常,并且肝功能反复,其中4例病人尿CMV DNA含量升高并维持在较高水平。结论 CMV症状性感染组尿DNA含量和血T细胞亚群较无症状性感染组有明显变化,此在判断预后和指导临床治疗方面有一定意义。

关键词：婴儿,新生巨细胞病毒感染 T淋巴细胞亚群

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重组腺病毒Ad5-RbAp48调控HPV感染的宫颈癌放射敏感性的研究

重组腺病毒Ad5-RbAp48调控HPV感染的宫颈癌放射敏感性的研究

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第九届全国病毒学学术研讨会

作者：郑琳魏凡华王红唐伟齐眉程玉峰于修平赵蔚明山东大学医学院微生物学教研室济南250012 山东大学齐鲁医院肿瘤防治中心济南250012

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ICU产ESBLs大肠埃希菌耐药性及基因型分析

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青岛大学医学院学报 2011年第5期47卷 413-415页

作者：扈新花陈维忠许成芳吴仕杰罗兵青岛大学医学院微生物学教研室山东青岛266021 莒县中医医院检验科莒县人民医院城阳分院

目的了解医院重症监护病房（ICU）产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌的耐药性及β-内酰胺酶基因型分布特点。方法采用BD Phoenix 100全自动微生物分析仪进行细菌鉴定和药物敏感试验,聚合酶链反应检测β-内酰胺类耐药相关基因,包括... 详细信息

目的了解医院重症监护病房（ICU）产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌的耐药性及β-内酰胺酶基因型分布特点。方法采用BD Phoenix 100全自动微生物分析仪进行细菌鉴定和药物敏感试验,聚合酶链反应检测β-内酰胺类耐药相关基因,包括TEM、CTX-M-1群、DHA、SHV、oprD2、GES、OXA和VIM。结果 51株产ESBLs大肠埃希菌呈现多重耐药,对亚胺培南、哌拉西林-他唑巴坦和阿米卡星的耐药率分别为2.0%、8.0%和11.8%,其余14种抗生素的耐药率为54.9%~100.0%。51株产ESBLs大肠埃希菌共检出TEM、CTX-M-1群、SHV和oprD2等4种β-内酰胺酶基因,其阳性率分别为76.50%、37.3%、5.9%和31.4%。结论 ICU分离的产ESBLs大肠埃希菌多重耐药严重,携带的β-内酰胺酶基因以TEM为主。

关键词：重症监护病房大肠埃希菌耐药基因 β内酰胺酶类

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EB病毒早期基因BHRF1转基因模型鼠的建立

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青岛大学医学院学报 2011年第1期47卷 14-17,22页

作者：李欣贾玉平王笑峰王云罗兵青岛大学医学院微生物学教研室山东青岛266021 上海市松江区疾病预防控制中心

目的构建稳定表达EB病毒早期基因BHRF1蛋白的重组载体,通过显微注射法建立BHRF1转基因鼠模型。方法自EBV阳性细胞系B95-8提取总RNA,应用RT-PCR扩增BHRF1基因,然后与pcDNA3.1(+)连接,构建pcDNA3.1-BHRF1重组载体。重组载体用NruⅠ和Dra... 详细信息

目的构建稳定表达EB病毒早期基因BHRF1蛋白的重组载体,通过显微注射法建立BHRF1转基因鼠模型。方法自EBV阳性细胞系B95-8提取总RNA,应用RT-PCR扩增BHRF1基因,然后与pcDNA3.1(+)连接,构建pcDNA3.1-BHRF1重组载体。重组载体用NruⅠ和DraⅢ双酶切,电泳后纯化回收长约2000 bp的目的片段溶于显微注射缓冲液。从超排小鼠取健康受精卵,通过显微注射技术,将纯化的CMV+BHRF1+polyA DNA片段注射入小鼠受精卵,短暂培养后选择健康受精卵移入假孕母鼠输卵管内。采用PCR检测子鼠鼠尾组织DNA,鉴定筛选BHRF1阳性首建鼠。结果经PCR、限制性内切酶鉴定及测序证实pcDNA3.1-BHRF1重组载体构建成功,DraⅢ和NruⅠ双酶切获得长约2 000 bp的CMV+BHRF1+polyA DNA片段。自18只见栓超排小鼠获取健康受精卵480枚,分别注入纯化的目的片段,经短暂培养后390枚受精卵仍健康,移入14只假孕母鼠输卵管内,11只受孕,产下74只子鼠。PCR检测子鼠鼠尾DNA获得16只阳性首建鼠,阳性率为21.6%(16/74)。结论本实验首次建立了BHRF1转基因鼠模型,为深入研究BHRF1的生物学特性及其在EBV相关肿瘤发生发展中的作用提供了理想的动物模型。

关键词：疱疹病毒4型,人早期基因BHRF1 小鼠,转基因

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医院内铜绿假单胞菌耐药基因分布特点的研究

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青岛大学医学院学报 2011年第3期47卷 216-218页

作者：李岩岩晁艳李慧何宏曲彦青岛大学医学院微生物学教研室山东青岛266021 淄博市中心医院检验科青岛大学医学院附属医院检验科青岛大学医学院附属青岛市市立医院

目的分析山东省两所三级甲等医院铜绿假单胞菌药物敏感性以及耐药基因分布特点。方法采用ATB系统进行细菌分离鉴定及药物敏感试验;聚合酶链反应检测三类耐药基因分布情况。结果 A医院菌株对哌拉西林-他唑巴坦和亚胺培南耐药性较高,B医... 详细信息

目的分析山东省两所三级甲等医院铜绿假单胞菌药物敏感性以及耐药基因分布特点。方法采用ATB系统进行细菌分离鉴定及药物敏感试验;聚合酶链反应检测三类耐药基因分布情况。结果 A医院菌株对哌拉西林-他唑巴坦和亚胺培南耐药性较高,B医院菌株对阿米卡星和妥布霉素耐药性较高。两所医院铜绿假单胞菌aac（3）-Ⅱa、ac（6′）-Ⅰa、ac（6′）-Ⅱ和parC耐药基因检出率差异有显著性（χ2=7.57~10.27,P〈0.05）;oprD2耐药基因缺失率均较高,差异无显著性（P〉0.05）。黏液型和非黏液型菌株耐药基因检出率差异无显著性（P〉0.05）。结论不同医院铜绿假单胞菌临床分离菌株均表现出多重耐药,但其耐药基因分布以及耐药情况有所不同。

关键词：假单胞菌感染抗药性,细菌基因,细菌微生物敏感性试验

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D2蛋白酶双抗体夹心ELISA定量检测方法的建立

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细胞与分子免疫学杂志 2010年第3期26卷 278-280页

作者：苏洁王斌鲁晓晴赵巍闫志勇钱冬萌丁守怡宋旭霞杨丽青岛大学医学院微生物学教研室山东青岛266071

目的：建立一种定量测定D2蛋白酶的双抗体夹心ELISA方法。方法：用棋盘滴定法确定捕获抗体、检测抗体的最佳工作浓度;绘制标准曲线,确定线性范围、检测限和定量限;检测该方法的准确性（回收率）、精密性和特异性,并与Bradford法检测结... 详细信息

目的：建立一种定量测定D2蛋白酶的双抗体夹心ELISA方法。方法：用棋盘滴定法确定捕获抗体、检测抗体的最佳工作浓度;绘制标准曲线,确定线性范围、检测限和定量限;检测该方法的准确性（回收率）、精密性和特异性,并与Bradford法检测结果进行比较。结果：包被抗体和捕获抗体的最佳包被效价分别为1∶4 000和1∶5 000;检测的线性范围为（28~1 180）μg/L,检测限为4.6μg/L。经方法学考核,批内、批间变异系数分别为5.64%和7.17%,回收率为92.44%~105.26%,与碱性蛋白酶、蛋白酶K等其他蛋白无交叉反应,与Bradford法检测结果具有良好的相关性。结论：该方法灵敏度高,重复性好,为后期D2蛋白酶规模发酵优化、分离纯化研究提供了定量检测的方法,并为后期药代动力学、临床研究提供了思路和备选方法。

关键词： D2蛋白酶 ELISA双抗体夹心法定量检测

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