检索结果-内蒙古大学图书馆

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年第1期42卷 48-54页

作者：郑广福刘现兵姜昱竹李新雨胡雪梅张海霞滨州医学院免疫学教研室山东烟台264003 邹平市卫生健康局宣传教育股山东邹平256200

目的探究孕鼠胎盘中性粒细胞和炎性因子白细胞介素17(IL-17)在孕期刚地弓形虫(简称弓形虫)感染致不良妊娠结局中的作用机制。方法将C57BL/6孕鼠随机分为未感染组和感染组(每组6只),感染组孕鼠在孕8 d腹腔注射0.2 ml弓形虫RH株速殖子悬液... 详细信息

目的探究孕鼠胎盘中性粒细胞和炎性因子白细胞介素17(IL-17)在孕期刚地弓形虫(简称弓形虫)感染致不良妊娠结局中的作用机制。方法将C57BL/6孕鼠随机分为未感染组和感染组(每组6只),感染组孕鼠在孕8 d腹腔注射0.2 ml弓形虫RH株速殖子悬液(约400个速殖子),未感染组孕鼠腹腔注射等量灭菌PBS。于孕14 d采用颈椎脱臼法处死孕鼠,解剖观察并记录妊娠结局。取胎盘组织,制备石蜡切片,经苏木苏-伊红(HE)染色后观察胎盘组织学改变和多形核粒细胞的浸润情况,并计算浸润指数。制备胎盘组织单细胞悬液,采用流式细胞术检测胎盘免疫细胞中中性粒细胞。采用免疫组织化学染色检测胎盘组织中弓形虫的分布、定位及IL-17的表达水平(灰度值),采用Spearman相关性分析方法分析IL-17的表达水平与中性粒细胞浸润指数的关系。两组间数据比较采用独立样本Student’s t检验。结果感染组孕鼠出现弓背、耸毛和行动迟缓等症状,胎鼠和胎盘出现明显出血及淤血点,胎鼠发育不良;未感染组孕鼠无异常表现,胎鼠和胎盘发育正常。感染组孕鼠的流产率为82.35%(42/51),高于未感染组的4.08%(2/49)。HE染色结果显示,感染组孕鼠胎盘组织细胞轮廓性增强,并伴有大量的多形核粒细胞浸润,浸润指数为14.500±0.965,高于未感染组的3.917±0.633(t=9.168,P<0.01)。流式细胞术结果显示,感染组孕鼠胎盘组织中中性粒细胞占胎盘细胞的绝对百分数为(13.700±1.790)%,高于未感染组孕鼠的(4.783±0.723)%(t=5.107,P<0.01)。免疫组织化学染色结果显示,感染组孕鼠胎盘组织中检测到大量弓形虫,并且主要集中分布于中性粒细胞内;感染组孕鼠胎盘组织中IL-17的灰度值为17.510±1.372,高于未感染组孕鼠的8.178±1.293(t=4.951,P<0.05)。相关性分析结果显示,孕鼠胎盘组织中IL-17的表达水平与中性粒细胞的浸润指数呈正相关(R2=0.652,P<0.01)。结论刚地弓形虫感染可导致孕鼠胎盘组织出现大量中性粒细胞浸润和高水平IL-17的表达,IL-17表达水平的升高可能与中性粒细胞在母胎界面的募集有关。

关键词：刚地弓形虫不良妊娠结局胎盘中性粒细胞炎症反应 IL-17

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孕期刚地弓形虫感染对滋养层细胞和蜕膜免疫细胞表面CD73表达的影响及其与不良妊娠的关系

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2025年第2期43卷 210-216页

作者：景天宇牟汝涛张帆刘现兵胡雪梅张海霞李志丹滨州医学院免疫学教研室烟台市烟台山医院介入医学科齐鲁医药学院免疫学教研室

目的探讨孕期刚地弓形虫感染对滋养层细胞及蜕膜免疫细胞表面CD73表达的影响，并分析其与不良妊娠结局的关系。方法收集健康早孕期正常流产的蜕膜和绒毛组织4个，采用聚蔗糖-泛影葡胺淋巴细胞分离液分离蜕膜单个核细胞，percoll法分... 详细信息

目的探讨孕期刚地弓形虫感染对滋养层细胞及蜕膜免疫细胞表面CD73表达的影响，并分析其与不良妊娠结局的关系。方法收集健康早孕期正常流产的蜕膜和绒毛组织4个，采用聚蔗糖-泛影葡胺淋巴细胞分离液分离蜕膜单个核细胞，percoll法分离滋养层细胞，将纯化的蜕膜单个核细胞和滋养层细胞分别分为对照组和感染组，每组1×107个，感染组按细胞与弓形虫3∶1感染，感染后24 h，采用流式细胞术检测滋养层细胞、蜕膜自然杀伤细胞（decidualnaturalkiller,dNK）、蜕膜巨噬细胞（decidualmacrophage,dMφ）和蜕膜树突状细胞（decidualdendriticcell,dDC）表面CD73表达。将分离的滋养层细胞分为对照组和感染组，每组1×10～7个，感染组按细胞与弓形虫1∶1感染，感染后24 h提取蛋白，蛋白质免疫印记（Westernblotting）分析弓形虫感染后滋养层细胞CD73蛋白的相对表达水平。野生型C57BL/6J雌鼠60只与雄鼠30只，CD73基因敲除(CD73-/-)雌鼠60只与雄鼠30只均分别按雌雄比为2∶1随机合笼过夜。孕鼠随机均分为野生型对照组和野生型感染组，CD73-/-对照组和CD73-/-感染组，孕8 d，感染组孕鼠分别经腹腔注射400个弓形虫速殖子，对照组注射等量生理盐水。孕14 d，解剖子宫并观察胎盘、胎鼠情况，计算异常胎率。免疫组化染色检测胎盘组织中CD73的表达。采用GraphPad Prism9.0软件进行统计学分析，组间数据分析采用独立样本Student’st检验。结果流式细胞术结果显示，对照组滋养层细胞表面CD73阳性细胞比例为（39.25±1.43）%，高于感染组的（31.27±2.79）%（t=5.31,P <0.05），对照组dDC、dMφ和dNK细胞表面CD73阳性细胞比例分别为（38.17±7.71）%、（25.80±6.85）%、（9.39±0.75）%，高于感染组的（36.33±7.64）%、（20.58±5.18）%、（7.74±1.08）%（t=4.25、5.24、3.57，均P <0.05）;Westernblotting结果显示，对照组滋养层细胞CD73蛋白相对表达水平为0.79±0.07，较感染组的0.38±0.05显著下调（t=24.80,P <0.01）；免疫组化结果显示，野生型对照组胎盘组织阳性细胞呈棕色集中表达在胎盘侧，尤其近血管处，野生型感染组阳性细胞较对照组少。野生型感染组小鼠胎盘组织CD73表达灰度值为9.79±0.30，较野生型对照组的20.20±4.60显著降低（t=3.89,P <0.05）。野生型对照组和CD73-/-对照组胎盘胎鼠发育良好，有光泽，子宫圆润饱满，野生型感染组和CD73-/-感染组孕鼠明显缺血，伴有严重淤血，胎鼠与胎盘不成形，出现吸收胎鼠现象，胎盘发育不良。野生型感染组小鼠胎盘和胎鼠体质量分别为（0.05±0.01） g和（0.07±0.03） g，低于野生型对照组的（0.07±0.01） g和（0.13±0.08） g （t=3.22、5.36，均P <0.01）;CD73-/-对照组分别为（0.07±0.04） g和（0.12±0.01） g，与野生型对照组差异无统计学意义（t=0.62、 0.13，均P> 0.05）;CD73-/-感染组分别为（0.03±0.00） g和（0.01±0.00） g，较野生型感染组显著减轻（t=3.10、5.08，均P <0.01）。野生型对照组和CD73-/-对照组异常胎率均为0，野生型感染组为（55.73±0.18）%，较野生型对照组显著增加（t=7.79,P <0.01）,CD73-/-感染组为（76.00±0.20）%，较野生型感染组显著增加（t=2.44,P <0.05）。结论孕早期刚地弓形虫感染可显著下调母胎微环境中滋养层细胞及蜕膜免疫细胞（dNK、dMφ和dDC）表面CD73的表达，且CD73表达下调与弓形虫感染致不良妊娠的发生密切相关。

关键词：刚地弓形虫不良妊娠 CD73 滋养层细胞蜕膜免疫细胞免疫微环境

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IL-6通过促进人胎盘间充质干细胞上CD73的表达调节其迁移、黏附和增殖能力

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中华微生物学和免疫学杂志 2022年第12期42卷 940-948页

作者：张恒超赵楠楠张加深韩凯悦赵雅萱戚荣栾希英滨州医学院免疫学教研室烟台264003

目的探讨IL-6影响人胎盘间充质干细胞(human placenta-derived mesenchymal stem cells,hPMSCs)表面CD73的表达,以及调节其迁移、黏附和增殖的作用机制。方法流式细胞术(flow cytometry,FCM)和Western blot分析外源性IL-6和hPMSCs分泌的IL-6对hPMSCs上CD73表达的影响。单克隆抗体阻断和Western blot方法检测IL-6对hPMSCs中信号转导及转录激活蛋白3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)磷酸化的影响。实时无标记动态细胞分析技术(real-time cellular analysis,RTCA)分析慢病毒转染后低表达CD73的hPMSCs和APCP(5′-α,β亚甲基-二磷酸腺苷)预处理后hPMSCs的迁移、黏附和增殖变化。结果FCM与Western blot检测结果显示,外源性和hPMSCs分泌的IL-6均能促进CD73在hPMSCs上的表达(P<0.001,P<0.01)。IL-6R抑制剂处理后,hPMSCs上CD73表达明显下降(P<0.01);IL-6可上调hPMSCs内STAT3磷酸化和CD73水平(P<0.05,P<0.01),而加入STAT3抑制剂后,CD73表达下降(P<0.01)。RTCA分析结果显示,敲低hPMSCs上CD73的表达后,hPMSCs的黏附和增殖能力均明显降低(P<0.01,P<0.05),迁移能力明显上升(P<0.05)。使用APCP抑制hPMSCs上CD73水解酶活性后,hPMSCs同样表现出黏附和增殖能力明显降低,而迁移能力增强(P<0.05)。结论IL-6能够通过JAK/STAT3通路增强hPMSCs上CD73的表达,进而影响其迁移、黏附和增殖能力。

关键词：间充质干细胞胎盘 IL-6 CD73 迁移黏附增殖

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信号肽类型对新布尼亚病毒SFTSV Gn蛋白靶向表达特征影响的研究

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中国病原生物学杂志 2023年第2期18卷 132-135,140页

作者：张凡张娟徐家馨吴玉龙李波清乔媛媛滨州医学院基础医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的研究不同类型信号肽对新布尼亚病毒(SFTSV)包膜蛋白Gn表达的影响。方法以SFTSV(SD4毒株)M段为模板PCR扩增Gn基因,双酶切后分别连接至A16H和pHL表达载体,连接产物转染293T细胞,收集细胞和上清进行Western blot、免疫荧光以及质谱检... 详细信息

目的研究不同类型信号肽对新布尼亚病毒(SFTSV)包膜蛋白Gn表达的影响。方法以SFTSV(SD4毒株)M段为模板PCR扩增Gn基因,双酶切后分别连接至A16H和pHL表达载体,连接产物转染293T细胞,收集细胞和上清进行Western blot、免疫荧光以及质谱检测,分析Gn重组蛋白的表达情况;ELISA检测Gn重组蛋白的结合活性。结果成功构建缺失载体信号肽的pA16H-Gn质粒和包含信号肽的sp-pA16H-Gn质粒,以及携带另一种载体信号肽的pHL-Fc-Gn质粒。缺失载体信号肽的pA16H-Gn质粒在细胞内外均不表达Gn重组蛋白(rGn-Fc),包含A16H载体信号肽的sp-pA16H-Gn质粒在细胞内表达Gn重组蛋白(rGn-Fc),但不能分泌表达,包含pHL载体信号肽的pHL-Fc-Gn质粒可将Gn重组蛋白(rGn-Fc)分泌表达到胞外,且具有结合活性。结论载体本身携带的信号肽会影响SFTSV Gn重组蛋白的表达,不同信号肽影响重组蛋白的表达定位。该研究为SFTSV Gn重组蛋白的开发奠定了基础,同时也为SFTSV重组疫苗的研究提供了新思路。

关键词：发热伴血小板减少综合征病毒信号肽分泌重组蛋白

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大鼠脂肪间充质干细胞的分离、培养及其向少突胶质前体细胞的诱导分化

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解剖学报 2022年第5期53卷 557-562页

作者：张雅群付丽任译延乔妍梓赵冬梅滨州医学院人体解剖学教研室山东烟台264003

目的改良酶消化法提取脂肪间充质干细胞(ADSCs),并探讨诱导其分化为少突胶质前体细胞(OPCs)的可行性,为脱髓鞘疾病治疗种子细胞来源提供有效途径。方法取SD大鼠腹股沟区脂肪,Ⅰ型胶原酶和胰蛋白酶联合消化法分离培养ADSCs,Ⅰ型胶原酶组... 详细信息

目的改良酶消化法提取脂肪间充质干细胞(ADSCs),并探讨诱导其分化为少突胶质前体细胞(OPCs)的可行性,为脱髓鞘疾病治疗种子细胞来源提供有效途径。方法取SD大鼠腹股沟区脂肪,Ⅰ型胶原酶和胰蛋白酶联合消化法分离培养ADSCs,Ⅰ型胶原酶组作为对照,细胞计数,观察细胞形态。取第3代细胞,流式细胞术检测细胞的表面标志物CD29、CD90和CD45;成脂诱导,油红O染色;利用干细胞分化培养液及OPCs培养液将ADSCs诱导为OPCs,免疫荧光检测α-N-乙酰基神经氨酸α-2、8-唾液酸转移酶1(A2B5)、NG2;利用OPCs培养液继续培养OPCs分化为少突胶质细胞(OLs)。结果Ⅰ型胶原酶组分离的ADSCs为(9.143±0.5084)×10^(7)/L,联合酶组为(13.43±0.4809)×10^(7)/L,联合酶组较Ⅰ型胶原酶组ADSCs数量多,差异有统计学意义(P<0.05,n=7);细胞形态观察显示,ADSCs贴壁生长,呈长梭形;流式细胞术检测CD29阳性率为99.8%,CD90阳性率为99.4%,CD45阳性率为0.35%;成脂诱导后倒置光学显微镜下可见脂滴,油红O染色脂滴呈红染;ADSCs向OPCs诱导第16天,A2B5和NG2表达阳性,A2B5阳性率为(87.03±0.94)%,NG2阳性率为(90.07±0.96)%;继续培养OPCs 3 d,其分化为OLs,髓鞘碱性蛋白(MBP)表达阳性。结论联合酶消化较单独胶原酶消化获取的细胞数量多,分离培养的细胞符合ADSCs的特征,体外可诱导分化为OPCs。

关键词：脂肪间充质干细胞分离培养诱导分化少突胶质前体细胞神经脱髓鞘疾病流式细胞术大鼠

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脂肪间充质干细胞外泌体可减轻过氧化氢诱导PC12细胞的凋亡

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中国组织工程研究 2024年第19期28卷 2988-2995页

作者：谷成旭张乃丽孟永春刘卿郭绮萱付丽张璐萍黄飞滨州医学院基础医学院人体解剖学教研室山东省烟台市264003 滨州医学院烟台附属医院山东省烟台市264100 山东大学齐鲁医学院基础医学院人体解剖学教研室山东省济南市250021 康复大学健康与生命科学学院山东省青岛市266071

背景:间充质干细胞外泌体在组织损伤修复中可能发挥关键作用,而miRNA是外泌体发挥治疗作用的重要成分,其中miR-29b-3p具有减少细胞凋亡、促进轴突再生和血管生成的作用。目的:研究脂肪间充质干细胞外泌体通过miR-29b-3p对过氧化氢诱导P... 详细信息

背景:间充质干细胞外泌体在组织损伤修复中可能发挥关键作用,而miRNA是外泌体发挥治疗作用的重要成分,其中miR-29b-3p具有减少细胞凋亡、促进轴突再生和血管生成的作用。目的:研究脂肪间充质干细胞外泌体通过miR-29b-3p对过氧化氢诱导PC12细胞损伤模型的保护作用,并探讨相关机制。方法:①首先采用胶原酶消化法提取大鼠脂肪间充质干细胞,通过miR-29b-3p模拟物及抑制物转染脂肪间充质干细胞,采用超速离心法从培养上清中提取外泌体并进行鉴定,从而构建高表达和敲低miR-29b-3p的脂肪间充质干细胞外泌体;②通过过氧化氢诱导PC12细胞模拟神经细胞损伤模型,研究脂肪间充质干细胞外泌体通过miR-29b-3p对神经元细胞损伤模型发挥保护作用的相关机制。结果与结论:①脂肪间充质干细胞外泌体具有典型的杯状形态,直径分布在50-140 nm范围内,表达外泌体表面特异性标志膜蛋白Alix、CD63及TSG101,并可被PC12细胞成功摄取;②脂肪间充质干细胞外泌体预处理可减轻过氧化氢诱导PC12细胞的凋亡,并且这种保护作用随着外泌体中miR-29b-3p表达的增加而增强,随着外泌体中miR-29b-3p表达的降低而减弱,其发挥作用的机制与脂肪间充质干细胞外泌体通过miR-29b-3p促进抗凋亡蛋白Bcl-2的表达及抑制凋亡蛋白Bax的表达相关。

关键词：脂肪间充质干细胞外泌体 miR-29b-3p PC12细胞凋亡 miRNA

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汉黄芩苷对大鼠脊髓损伤的修复效果

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解剖学报 2022年第2期53卷 173-182页

作者：王笑刘卿谷成旭李希凯张璐萍滨州医学院基础医学院人体解剖学教研室山东烟台264003

目的通过观察不同剂量汉黄芩苷对大鼠脊髓损伤后介导的炎症反应的干预情况,探讨汉黄芩苷对脊髓损伤的影响。方法建立大鼠脊髓横断损伤模型(n=95),随机分成5组:正常组(N)、生理盐水组(NS)、汉黄芩苷低剂量组(WG12.5)、汉黄芩苷中剂量组... 详细信息

目的通过观察不同剂量汉黄芩苷对大鼠脊髓损伤后介导的炎症反应的干预情况,探讨汉黄芩苷对脊髓损伤的影响。方法建立大鼠脊髓横断损伤模型(n=95),随机分成5组:正常组(N)、生理盐水组(NS)、汉黄芩苷低剂量组(WG12.5)、汉黄芩苷中剂量组(WG25)及汉黄芩苷高剂量组(WG50)。采用ELISA检测炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白细胞介素1(IL-1)的表达水平;静态脚印分析脚趾扩张(TS)和中间脚趾扩张(ITS)的变化;HE染色观察脊髓损伤大鼠组织学情况;尼氏染色观察脊髓损伤大鼠神经元数目变化;透射电子显微镜观察轴突形态及再生现象;劳克坚牢蓝(LFB)髓鞘染色观察脱髓鞘现象;免疫组织化学观察胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经生长相关蛋白43(GAP43)的表达变化。结果 NS组与N组相比,TNF-α及IL-1表达明显升高(P<0.01),TS和ITS明显减少(P<0.01),脊髓形态显著异常,神经元严重丢失,髓鞘形态异常,髓鞘严重脱色(P<0.01),GFAP表达明显增多,GAP43表达稍有增加;WG组与NS组相比,TNF-α和IL-1表达明显降低(P<0.01),TS和ITS增加(P<0.01),脊髓形态有所恢复,神经元丢失减少,髓鞘形态趋于正常且有新生轴突出现,髓鞘脱色减少(P<0.01),GFAP表达明显减少,GAP43表达明显增多,且呈现剂量依赖性。结论汉黄芩苷能改善脊髓损伤局部微环境,减少胶质瘢痕形成,促进轴突再生,减少局部神经元丢失、空洞形成等,进而促进脊髓损伤的修复。

关键词：汉黄芩苷脊髓损伤炎性反应胶质纤维酸性蛋白神经生长相关蛋白43 透射电子显微术免疫组织化学大鼠

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线粒体靶向抗氧化剂SKQ1对糖尿病小鼠肾损伤的治疗作用与机制

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滨州医学院学报 2024年第1期47卷 1-7页

作者：高治巩永凤王明霞滨州医学院基础医学院生理学教研室山东烟台264003

目的本文旨在研究线粒体靶向抗氧化剂SKQ1对糖尿病(DM)小鼠肾损伤的影响,以阐明SKQ1对肾脏的保护作用及机制。方法选取野生型雄性C57BL/6小鼠30只,行右侧肾切除术后注射诱导DM模型,分成对照组、DM组、SKQ1组各10只。用药组每天饮用SKQ1... 详细信息

目的本文旨在研究线粒体靶向抗氧化剂SKQ1对糖尿病(DM)小鼠肾损伤的影响,以阐明SKQ1对肾脏的保护作用及机制。方法选取野生型雄性C57BL/6小鼠30只,行右侧肾切除术后注射诱导DM模型,分成对照组、DM组、SKQ1组各10只。用药组每天饮用SKQ1水溶液,对照组和DM组正常饮水。连续饲养28周后,收集尿液测尿微量白蛋白的变化;通过HE和PAS染色法观察小鼠肾脏病理结构和肾脏纤维化的变化;通过q-PCR和免疫荧光法检测小鼠NPHS2、WT1、Podxl、desmin、α-SMA表达情况。结果与对照组比较,DM组小鼠尿微量白蛋白明显增加;与DM组小鼠比较,SKQ1组小鼠尿微量白蛋白降低。HE和PAS染色结果显示,与对照组比较,DM组小鼠肾小球系膜细胞增多,细胞外基质增生,有明显的胶原纤维沉积;与DM组比较,SKQ1组小鼠肾小球系膜细胞数量减少,细胞外基质增生减轻,胶原纤维沉积明显减轻。q-PCR和免疫荧光结果显示,与对照组比较,DM组小鼠足细胞相关分子NPHS2、WT1、Podxl明显降低,desmin、α-SMA表达量增加;与DM组比较,SKQ1组小鼠足细胞相关分子NPHS2、WT1、Podxl表达明显增加,但desmin、α-SMA表达量下降。结论SKQ1可上调NPHS2、WT1、Podxl的表达及下调desmin、α-SMA的表达来减轻足细胞损伤,改善小鼠尿微量白蛋白排泄和肾小球纤维化,进而延缓糖尿病肾病(DN)的进展。

关键词： SKQ1 糖尿病肾病足细胞

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肾周白色脂肪组织源外泌体远距调控大鼠血压

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中国比较医学杂志 2023年第3期33卷 51-58页

作者：张培森梁沥文施真滨州医学院生理学教研室山东烟台264003 威海市中心血站山东威海264200

目的研究肾周白色脂肪组织作为内分泌器官是否以外泌体囊泡作为运载体调控大鼠动脉血压。方法采用成年自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)和正常血压的Wistar-Kyoto(WKY)大鼠。将WKY大鼠和SHR的肾周白色脂肪置于无血... 详细信息

目的研究肾周白色脂肪组织作为内分泌器官是否以外泌体囊泡作为运载体调控大鼠动脉血压。方法采用成年自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)和正常血压的Wistar-Kyoto(WKY)大鼠。将WKY大鼠和SHR的肾周白色脂肪置于无血清(无外泌体)培养基中培养,使用外泌体分离提取试剂盒(exoEasy Maxi Kit)分离分泌囊泡。经纳米粒径测定、透射电镜和表面标志物鉴定符合外泌体囊泡(Exosomes,Exo)特征后用于后续实验。SHR或WKY大鼠各随机分为两组,分别尾静脉注射SHR大鼠外泌体(Exo-SHR)或WKY大鼠外泌体(Exo-WKY),每周1次,连续6周。在清醒状态下使用无创尾动脉加压系统测量动脉血压,每周1次。注射后第6周末进行急性实验。采用颈动脉插管法进行动脉血压直接测定,采用HE染色和Masson染色观察心血管病理重构。外周交感神经张力(peripheral sympathetic tone,PST)高低以静脉注射盐酸六烃季铵引起的降压反应与Exo-WKY处理的WKY大鼠的降压反应的比值大小表示。另外,PKH67绿色荧光染料标记外泌体后尾静脉注射进行体内示踪,与原代培养的神经元孵育进行体外示踪。结果肾周白色脂肪组织分泌的外泌体囊泡经透射电镜观察到典型外泌体半托杯状囊泡结构,纳米粒径检测平均直径集中在100 nm左右,且具有表面特异标志物肿瘤易感基因101(tumor susceptibility gene,TSG101)和白细胞分化9(cluster of differentiation 9,CD9)表达。SHR组收缩压(Systolic blood pressure,SBP)在注射Exo-WKY后的第2周开始下降,并在整个干预过程中保持低于注射前的水平(P<0.05)。应用Exo-WKY可减少SHR心肌细胞横截面积、主动脉中膜厚度及降低PST(P<0.05)。而WKY大鼠应用Exo-SHR后,SBP、心肌细胞横截面积、主动脉中膜厚度及PST均未见明显变化(P>0.05)。在体示踪发现PKH67标记外泌体囊泡经尾静脉注射24 h后,在下丘脑室旁核(paraventricular nucleus,PVH)、孤束核(nucleus tracts solitary,NTS)、延髓头端腹外侧部(rostral ventrolateral medulla,RVLM)可见绿色荧光。体外示踪发现培养神经元也可见绿色荧光。结论这些结果表明,肾周白色脂肪组织源外泌体可作为运载体发挥远距离调控动脉血压的作用。Exo-SHR缺乏抑制血压升高的内容物,补充Exo-WKY可降低动脉血压和交感紧张,并改善心血管重构。

关键词：自发性高血压肾周白色脂肪外泌体交感神经活动

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糖皮质激素受体在缺血再灌注肾损伤中的作用

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首都医科大学学报 2022年第2期43卷 260-268页

作者：王向东姜敏王鑫巩永凤滨州医学院生理学教研室山东烟台264000 滨州医学院药理学教研室山东烟台264000 青岛大学病理生理学教研室山东青岛266000

目的探究糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)在缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)诱导的小鼠肾损伤过程中的变化及作用。方法使用微血管夹夹闭小鼠左侧肾蒂45 min诱导小鼠缺血再灌注肾损伤模型,分别于第5、15、30和80天收... 详细信息

目的探究糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)在缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)诱导的小鼠肾损伤过程中的变化及作用。方法使用微血管夹夹闭小鼠左侧肾蒂45 min诱导小鼠缺血再灌注肾损伤模型,分别于第5、15、30和80天收集小鼠血液,通过试剂盒检测血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和血肌酐(serum creatinine,Scr)的浓度。采用过碘酸希夫染色法(periodic acid-Schiff staining,PAS)和苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)观察肾组织炎性细胞浸润情况;通过免疫荧光(immunofluorescence,IF)法检测肾损伤分子-1(kidney injury molecular-1,Kim-1)、炎症细胞标志物F4/80和CD3的表达变化;通过实时荧光定量PCR(real time quantitative PCR,RT-qPCR)、IF和蛋白质印迹技术(Western blotting,WB)检测GR的表达。选取8周龄雌性小鼠肾脏单侧IR后进行腹腔注射米非司酮(mifepristone,MF,50 mg·kg^(-1)·d^(-1)),检测实验组和对照组的BUN和Scr浓度,IF检测Kim-1和F4/80的蛋白水平。结果与未处理组相比,小鼠缺血再灌注肾损伤后,第5天小鼠血清BUN升高4.9倍,Scr升高8.3倍;RT-qPCR结果显示,IR组小鼠炎症分子的mRNA较未处理空白组升高3~5倍,GR的mRNA较空白组下降3.5倍。IF和WB结果显示,GR的蛋白质水平显著下调;IR处理的同时,注射MF阻断GR后,BUN和Scr较注射玉米油的对照组均增高,表明阻断GR会导致IR后肾功能损伤加重,IF结果显示Kim-1和F4/80表达明显升高,说明炎性反应增强,肾损伤加重。结论GR的表达和IR诱导肾损伤存在显著的相关性,同时阻断GR会进一步加重IR诱导的肾损伤。

关键词：肾损伤糖皮质激素受体缺血再灌注炎症反应米非司酮

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