检索结果-内蒙古大学图书馆

重庆医科大学学报 2025年第3期50卷 322-330页

作者：张云洁于泳璐万冲徐宁肖培伦谢海刘梅芳徐灵芝山东第二医科大学基础医学院山东省高等学校免疫微环境与炎症性疾病研究特色实验室潍坊261053 山东第二医科大学基础医学院解剖学教研室潍坊261053

目的:研究小建中颗粒对食物过敏(food allergy,FA)的抑制作用,并分析肠道菌群和闭锁连接蛋白-1(zonula occluden-1,ZO-1)、闭锁蛋白(Occludin)探讨相关机制。方法:24只SPF级雌性BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、预防组、治疗组,每组... 详细信息

目的:研究小建中颗粒对食物过敏(food allergy,FA)的抑制作用,并分析肠道菌群和闭锁连接蛋白-1(zonula occluden-1,ZO-1)、闭锁蛋白(Occludin)探讨相关机制。方法:24只SPF级雌性BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、预防组、治疗组,每组6只。首次激发前3 d,预防组以标准剂量[5.85 g(/kg·d)]小建中颗粒灌胃,至末次激发前4 h;治疗组过敏评分后给予2倍剂量小建中颗粒3 d;其他组给予等体积蒸馏水灌胃。实验终点,行过敏评分、测肛温;流式检测肠系膜淋巴结(mesenteric lymph nodes,MLN)嗜酸性粒细胞和肥大细胞,甲苯胺蓝染色空肠组织肥大细胞,免疫组织化学法检测ZO-1、Occludin的表达;16S rRNA测序检测肠内容物菌群,高效液相色谱-质谱法分析空肠灌洗液短链脂肪酸(short-chain fatty acids,SCFAs)含量。结果:与模型组相比,预防组和治疗组过敏评分(P=0.000,P=0.000)和肛温差下降(P=0.002,P=0.000),MLN嗜酸性粒细胞和肥大细胞比例减少(P=0.000,P=0.002;P=0.000,P=0.000),空肠肥大细胞浸润减少(P=0.000,P=0.000)。与正常组相比,模型组厚壁菌门丹毒丝菌科和苏黎世杆菌属相对丰度增加,而预防组和治疗组丹毒丝菌科和苏黎世杆菌属消失,紫单胞菌科相对丰度增加。与正常组相比,模型组空肠灌洗液丙酸盐含量减少(P=0.014),与模型组相比,预防组空肠灌洗液丙酸盐含量增加(P=0.024),治疗组明显增加(P=0.008)。模型组ZO-1表达下调(P=0.010),Occludin表达明显下调(P=0.002),而预防组和治疗组ZO-1、Occludin表达恢复正常(P=0.001,P=0.013;P=0.025,P=0.015)。结论:小建中颗粒可改变肠道菌群组成和丰度,增加短链脂肪酸浓度,上调ZO-1、Occludin的表达,促进肠道屏障修复,抑制FA。

关键词：小建中颗粒食物过敏肠道菌群短链脂肪酸闭锁连接蛋白-1

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FAR、CAR、TyG指数、ALP及CHE联合检测诊断冠心病的效果探究

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延边大学医学学报 2025年第1期48卷 45-47页

作者：梁福燕杨晓平付爱丽薛江楠滨州医学院基础学院免疫学教研室山东烟台264003 联勤保障部队第九七〇医院检验科山东烟台264000

目的:探究纤维蛋白原/白蛋白的比值(FAR)、C反应蛋白/白蛋白比值(CAR)、三酰甘油葡萄糖(Ty G)指数、碱性磷酸酶(ALP)及胆碱酯酶(CHE)联合检测诊断冠心病的效果。方法:选取2020年5月—2022年5月联勤保障部队第九七〇医院收治的160例冠心... 详细信息

目的:探究纤维蛋白原/白蛋白的比值(FAR)、C反应蛋白/白蛋白比值(CAR)、三酰甘油葡萄糖(Ty G)指数、碱性磷酸酶(ALP)及胆碱酯酶(CHE)联合检测诊断冠心病的效果。方法:选取2020年5月—2022年5月联勤保障部队第九七〇医院收治的160例冠心病患者为观察组,选取同时期的40例同龄健康者为对照组。比较两组及观察组不同血管狭窄程度者的FAR、CAR、Ty G指数、ALP及CHE水平,采用ROC分析FAR、CAR、Ty G指数、ALP及CHE联合检测诊断冠心病的效果。结果:观察组的FAR、CAR、Ty G指数、ALP及CHE水平高于对照组(P<0.05),观察组中不同血管狭窄程度者的上述检测结果比较,差异有统计学意义(P<0.05);ROC分析显示,联合检测冠心病的AUC值大于单项检测。结论:FAR、CAR、Ty G指数、ALP及CHE在冠心病患者中的表达相对异常,联合检测对冠心病的诊断价值较高。

关键词：冠心病纤维蛋白原/白蛋白的比值 C反应蛋白/白蛋白比值三酰甘油葡萄糖指数碱性磷酸酶胆碱酯酶联合检测

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抗ssDNA单抗免疫组化法用于检测肿瘤细胞株对化疗药物敏感性的研究

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细胞与分子免疫学杂志 2003年第5期19卷 456-458页

作者：吴晓燕徐志伟吴国庆苗乃法冯永堂潍坊医学院免疫学教研室山东潍坊261042

目的 :应用本室制备的抗单链DNA (ssDNA)单克隆抗体(mAb) ,检测多种化疗药物对不同肿瘤细胞株凋亡的诱导作用 ,并根据凋亡率判断肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。方法 :用血浆峰值浓度 (PPC)的 9种化疗药物 ,分别诱导肿瘤细胞株K5 6 2和He... 详细信息

目的 :应用本室制备的抗单链DNA (ssDNA)单克隆抗体(mAb) ,检测多种化疗药物对不同肿瘤细胞株凋亡的诱导作用 ,并根据凋亡率判断肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。方法 :用血浆峰值浓度 (PPC)的 9种化疗药物 ,分别诱导肿瘤细胞株K5 6 2和Hep 2的凋亡。用抗ssDNAmAb免疫组化染色法 ,检测肿瘤细胞株的凋亡并计算调亡率。结果 :以抗ssDNAmAb建立的检测细胞凋亡的免疫组化法 ,能够区分凋亡细胞和非凋亡细胞。该法检测证明 ,化疗药物可诱导敏感肿瘤细胞株凋亡 ,但不同化疗药物诱导同一肿瘤细胞株或不同肿瘤细胞株凋亡的程度不同。结论 :抗ssDNAmAb免疫组化法 ,可用于检测肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。

关键词：单克隆抗体细胞凋亡化疗药物敏感性抗ssDNA单抗免疫组化法检测肿瘤细胞株

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核自身抗原精子蛋白(NASP)基因突变加重诱导型狼疮模型小鼠自身免疫应答

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细胞与分子免疫学杂志 2019年第9期35卷 776-782页

作者：战倩张建业王惠吴雪激朱耀强徐志伟鞠吉雨潍坊医学院免疫学教研室山东潍坊261053

目的制备诱导型狼疮模型小鼠,探讨核自身抗原精子蛋白(NASP)基因突变对诱导型系统性红斑狼疮(SLE)模型小鼠自身免疫应答的影响。方法3月龄野生型B6(B6-WT)小鼠为对照组、NASP基因突变B6(B6-NASPM)小鼠为实验组。用伴刀豆球蛋白A(ConA)... 详细信息

目的制备诱导型狼疮模型小鼠,探讨核自身抗原精子蛋白(NASP)基因突变对诱导型系统性红斑狼疮(SLE)模型小鼠自身免疫应答的影响。方法3月龄野生型B6(B6-WT)小鼠为对照组、NASP基因突变B6(B6-NASPM)小鼠为实验组。用伴刀豆球蛋白A(ConA)活化小鼠的脾脏淋巴细胞,提取其DNA为自身抗原,分别免疫B6-WT小鼠和B6-NASPM小鼠3次。EUSA检测血清抗双链DNA(dsDNA)IgG水平,HE染色检测肾脏病变情况,免疫荧光组织化学染色检测肾组织IgG和补体C3的沉积情况。流式细胞术比较B6-WT小鼠和B6-NASP^M小鼠的脾脏淋巴细胞亚群变化,从而探讨NASP基因突变影响小鼠免疫应答的机制。结果与B6-WT小鼠相比,B6-NASP^M小鼠体质量、肾脏指数和脾脏指数均无明显变化,其血清抗dsDNA IgG水平明显升高,肾小球细胞增生明显、IgG以及C3的沉积增加。脾脏CD3+T细胞、自然杀伤(NK)细胞比例降低、CD19+B细胞、调节性B细胞(Breg)比例增加。结论NASP基因突变促进小鼠产生更高水平的抗dsDNA IgG,促进肾脏肾小球内细胞增生、IgG及C3的沉积,并改变小鼠脾脏的免疫细胞的比例,加重狼疮模型小鼠的自身免疫应答。

关键词：系统性红斑狼疮核自身抗原精子蛋白(NASP) 自身免疫

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截断型线粒体凋亡诱导因子相互作用蛋白质的筛选与鉴定

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生物化学与生物物理进展 2009年第1期36卷 42-48页

作者：付玉荣伊正君李猛邵丽军宋淑亚山东省潍坊医学院基础医学教学部病原生物学教研室潍坊261053 山东省潍坊医学院临床学院临床免疫学教研室潍坊261042 山东省潍坊医学院预防医学系潍坊261042

线粒体凋亡诱导因子(AIF)是一类存在于线粒体内外膜之间保守的黄素蛋白,它从线粒体到细胞核的转位可诱导细胞凋亡.AIF诱导细胞凋亡的确切机制还不是很清楚.为了筛选可能与截断型AIF存在相互作用的蛋白质,探讨截断型AIF诱导细胞凋亡的机... 详细信息

线粒体凋亡诱导因子(AIF)是一类存在于线粒体内外膜之间保守的黄素蛋白,它从线粒体到细胞核的转位可诱导细胞凋亡.AIF诱导细胞凋亡的确切机制还不是很清楚.为了筛选可能与截断型AIF存在相互作用的蛋白质,探讨截断型AIF诱导细胞凋亡的机制,用逆转录PCR扩增剪切掉线粒体定位信号的人AIF基因片段并克隆入pcDNA3.1载体,导入肝癌HepG2细胞.成功检测到截断型在转录与翻译水平上的表达.提取转染截断型AIF基因的细胞的蛋白质,用免疫沉淀方法分离与截断型可能存在相互作用的蛋白质,用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱对分离得到的蛋白质进行鉴定,其中一蛋白质条带经鉴定为β-actin.再次用反向免疫共沉淀法与Western blot法对筛选出的可能相互作用蛋白质进行验证.结果表明,截断型AIF与β-actin之间可能存在相互作用.

关键词：凋亡诱导因子细胞基质辅助激光解析电离飞行时间质谱免疫共沉淀

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AFP启动子调控的小鼠IL-1β重组载体的构建及其在肝癌H22细胞中的表达

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细胞与分子免疫学杂志 2009年第7期25卷 603-605页

作者：李青春梁淑娟王雪净刘艳艳王焕芹张素华潍坊医学院免疫学教研室山东省高校免疫学重点实验室山东潍坊261042

目的:构建小鼠甲胎蛋白(AFP)启动子调控的小鼠IL-1β(mIL-1β)重组真核表达载体pafpIRES2-EGFP-mIL-1β,并检测其在真核细胞内的表达。方法:重叠延伸PCR技术(SOE-PCR)获得含小鼠AFP最小启动子及巨细胞病毒(CMV)增强子区(ECMV)的嵌合基因... 详细信息

目的:构建小鼠甲胎蛋白(AFP)启动子调控的小鼠IL-1β(mIL-1β)重组真核表达载体pafpIRES2-EGFP-mIL-1β,并检测其在真核细胞内的表达。方法:重叠延伸PCR技术(SOE-PCR)获得含小鼠AFP最小启动子及巨细胞病毒(CMV)增强子区(ECMV)的嵌合基因,将其克隆至pIRES2-EGFP载体,构建肝癌细胞特异性表达载体pafpIRES2-EGFP。RT-PCR扩增小鼠IL-1β基因,克隆至pafpIRES2-EGFP,进行酶谱分析及DNA序列测定。利用jetPEI法将其分别转染H22细胞和YAC-1细胞,倒置相差荧光显微镜下观察,RT-PCR分析mIL-1β表达水平的变化。结果:SOE-PCR方法获得长度为537bp的AFP和ECMV嵌合基因,克隆后经限制性酶切和DNA序列分析确认成功构建了小鼠肝癌细胞特异性表达载体pafpIRES2-EGFP。PCR扩增小鼠IL-1β基因后将其克隆至pafpIRES2-EGFP,获得AFP启动子调控的小鼠IL-1β重组真核表达载体pafpIRES2-EGFP-mIL-1β,细胞转染分析证实,该载体能够在小鼠肝癌细胞中特异性高效表达,RT-PCR检测可见转染细胞中mIL-1β水平明显升高。结论:成功构建真核表达载体pafpIRES2-EGFP-mIL-1β,该载体能够在小鼠肝癌细胞中特异性表达IL-1β。

关键词： IL-1β AFP启动子组织特异性肝癌

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抗人乳腺癌候选抑制蛋白1单克隆抗体的制备及鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2010年第12期26卷 1226-1228,1231页

作者：袁芳鞠吉雨刘艳菲王丽娜邸大琳梁淑娟潍坊医学院免疫学教研室山东省高校免疫学重点实验室山东潍坊261053

目的:制备抗人乳腺癌候选抑制蛋白1(BCSC-1)蛋白单克隆抗体(mAb),并对其特异性进行鉴定。方法:构建原核表达载体pET-30a-BCSC-1,在原核表达系统***21(DE3)中表达重组人BCSC-1蛋白。超声洗涤纯化重组蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫... 详细信息

目的:制备抗人乳腺癌候选抑制蛋白1(BCSC-1)蛋白单克隆抗体(mAb),并对其特异性进行鉴定。方法:构建原核表达载体pET-30a-BCSC-1,在原核表达系统***21(DE3)中表达重组人BCSC-1蛋白。超声洗涤纯化重组蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞和同系小鼠的骨髓瘤细胞Sp2/0进行常规融合,通过有限稀释法进行克隆和间接ELISA筛选,获得分泌小鼠抗人BCSC-1蛋白mAb的杂交瘤细胞株,通过ELISA、Western blot等方法检测其特异性。将真核重组表达载体pcDNA3.1/v5-HisB-BCSC-1转染入乳腺癌MCF-7细胞,通过免疫组化确定了人BCSC-1蛋白的表达。结果:成功构建了原核表达载体pET-30a-BCSC-1,经IPTG诱导表达出了重组人BCSC-1蛋白,主要以包涵体的形式存在沉淀中。用纯化的重组BCSC-1蛋白免疫小鼠后经融合筛选得到1株稳定分泌抗BCSC-1的mAb杂交瘤细胞株。通过ELISA、Western blot、免疫组化等方法鉴定,抗BC-SC-1的mAb能与BCSC-1蛋白特异性结合。结论:成功制备了小鼠抗人BCSC-1的mAb。

关键词： BCSC-1蛋白原核表达单克隆抗体

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带有人红细胞生成素信号肽序列的IL-1β基因在HepG2细胞中的表达

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细胞与分子免疫学杂志 2014年第5期30卷 493-496页

作者：李娜邸大琳肖伟玲付晓燕梁淑娟山东省高校免疫学重点实验室潍坊医学院免疫学教研室山东潍坊261053

目的构建由经典分泌途径和非经典途径表达人IL-1β的慢病毒载体,制备慢病毒后,感染HepG2肝癌细胞,比较肝癌细胞中IL-1β表达的水平。方法分别以表达人IL-1β前体蛋白基因和人红细胞生成素(EPO)信号肽序列与IL-1β成熟蛋白融合基因的pIRE... 详细信息

目的构建由经典分泌途径和非经典途径表达人IL-1β的慢病毒载体,制备慢病毒后,感染HepG2肝癌细胞,比较肝癌细胞中IL-1β表达的水平。方法分别以表达人IL-1β前体蛋白基因和人红细胞生成素(EPO)信号肽序列与IL-1β成熟蛋白融合基因的pIRES2-EGFP-proIL-1β和pIRES2-EGFP-epoIL-1β质粒为模板,PCR扩增获得人IL-1β全长基因和含有EPO信号肽与IL-1β成熟蛋白融合基因的序列,将其分别克隆入pLenti6/V5慢病毒载体中,构建由非经典途径和经典途径分泌IL-1β的pLenti6/V5-proIL-1β和pLenti6/V5-epoIL-1β慢病毒表达载体。利用三质粒包装体系在HEK293T细胞中包装生产慢病毒,随后感染HepG2肝癌细胞,双抗体夹心ELISA和Western blot法检测细胞质和培养上清中IL-1β的表达水平。结果构建了含有人IL-1β全长基因和含有EPO信号肽与IL-1β成熟蛋白融合基因的pLenti6/V5-proIL-1β和pLenti6/V5-epoIL-1β慢病毒载体,经双酶切和DNA测序证实与基因库中登录的人IL-1β以及EPO信号肽序列一致。利用三质粒系统包装制备经不同途径表达IL-1β的慢病毒,研究证实经由2条不同途径分泌表达人IL-1β的慢病毒感染HepG2细胞后,与转染空载体的对照细胞相比,细胞培养液上清和胞质中IL-1β的水平均显著升高(P<0.01),其中HepG2/epoIL-1β细胞培养液上清中成熟蛋白IL-1β的水平明显高于HepG2/proIL-1β细胞,而胞质中总IL-1β的水平HepG2/proIL-1β高于HepG2/epoIL-1β。结论构建的带有EPO信号肽序列的IL-1β基因的慢病毒载体,在HepG2细胞表达后,分泌成熟IL-1β的水平明显高于非经典途径分泌的表达载体。

关键词：慢病毒人IL-1β HepG2细胞经典和非经典分泌途径

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分泌型小鼠IL-1β表达载体促进Hepa1-6肝癌细胞的增殖和迁移

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第5期28卷 488-491页

作者：田叶林志娟孙萍刘艳菲鞠吉雨梁淑娟山东省高校免疫学重点实验室潍坊医学院免疫学教研室山东潍坊261053

目的:构建小鼠经典途径分泌型IL-1β真核表达载体,转染Hepa1-6细胞后,检测胞质及上清中IL-1β分泌表达水平,并考察其对肝癌细胞体外增殖活性、迁移能力的影响。方法:利用特异性上下游引物将小鼠AFP信号肽序列和小鼠IL-1β成熟蛋白编码... 详细信息

目的:构建小鼠经典途径分泌型IL-1β真核表达载体,转染Hepa1-6细胞后,检测胞质及上清中IL-1β分泌表达水平,并考察其对肝癌细胞体外增殖活性、迁移能力的影响。方法:利用特异性上下游引物将小鼠AFP信号肽序列和小鼠IL-1β成熟蛋白编码基因进行拼接后,再与pLIVETM载体进行连接,DNA测序鉴定阳性克隆;jetPEI法将重组载体、pLIVETM空载体、pLIVE-lacZ转染小鼠肝癌细胞株Hepa1-6后,经β-gal染色监测转染效率;各转染组经LPS及monesin处理后双抗体夹心ELISA法分析细胞培养上清及细胞裂解液中IL-1β的表达水平;通过MTT方法分析经典途径分泌型IL-1β对细胞体外增殖活性的影响。结果:成功构建出了小鼠分泌型IL-1β真核重组表达载体pLIVE-smIL-1β;β-gal染色后,显示外源基因在3 d左右时转染效率最高;双抗体夹心ELISA法表明转染后与Hepa1-6/mock组细胞相比,Hepa1-6/smIL-1β组细胞胞质和上清中IL-1β的表达明显增高;MTT及细胞迁移实验分析证实,转染Hepa1-6/smIL-1β组细胞体外增殖速度明显加快。结论:该表达载体可以通过经典途径分泌促炎性因子IL-1β且高效表达成熟肽IL-1β,并能够显著促进肿瘤细胞的体外增殖和迁移能力。

关键词： IL-1β 肝癌细胞信号肽经典分泌途径迁移

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IL-1β对Hepa1-6细胞增殖、迁移及IFN应答的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2011年第2期27卷 139-142页

作者：林志娟梁淑娟王焕芹李艳平肖伟玲潍坊医学院免疫学教研室山东省高校免疫学重点实验室山东潍坊261053

目的:构建应用于小鼠肝脏内表达和研究的IL-1β肝癌细胞特异性表达载体,观察其对小鼠Hepa1-6细胞体外增殖活性、迁移能力及干扰素增殖抑制效应等体外生物学行为的影响。方法:由C57BL/6小鼠腹腔液巨噬细胞扩增IL-1β基因,构建肝脏特异性p... 详细信息

目的:构建应用于小鼠肝脏内表达和研究的IL-1β肝癌细胞特异性表达载体,观察其对小鼠Hepa1-6细胞体外增殖活性、迁移能力及干扰素增殖抑制效应等体外生物学行为的影响。方法:由C57BL/6小鼠腹腔液巨噬细胞扩增IL-1β基因,构建肝脏特异性pLIVE-IL-1β重组表达载体。利用transIT-LT1将鉴定后的pLIVE-IL-1β转染至Hepa1-6肝癌细胞,RT-PCR及双抗体夹心ELISA法分析转染前后IL-1表达水平,MTT法分析IL-1对细胞体外增殖活性的影响;利用细胞划痕实验分析对其迁移能力的影响,并确定对IFN-α诱导的细胞增殖抑制效应的作用。结果:重组载体经限制性酶谱分析酶解出822bp的条带,其序列与GenBank登录的小鼠IL-1β基因一致;转染后的Hepa1-6细胞培养上清中IL-1β的表达明显增高,细胞体外增殖速度明显加快;给予IFN-α作用后,IL-1β的表达使细胞对干扰素的抵抗性明显增强。结论:小鼠IL-1β肝癌组织特异性表达载体pLIVE-IL-1β能够在小鼠肝癌细胞中高效表达IL-1β,并能够显著促进肿瘤的体外增殖和迁移能力,削弱IFN-α对Hepa1-6细胞的增殖抑制作用。

关键词： IL-1β 肝癌 NK细胞促炎性细胞因子干扰素

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