检索结果-内蒙古大学图书馆

核农学报 2012年第1期26卷 43-48页

作者：马敬苏磊袁美纪鸿飞李爱芹王兴军山东省农业科学院高新技术研究中心/山东省作物与畜禽品种改良生物技术重点实验室山东济南250100 山东师范大学生命科学学院山东济南250014 农业部黄淮海作物遗传改良与生物技术重点开放实验室山东济南250100 山东省花生研究所山东青岛266100

通过构建花生未成熟种子cDNA文库,结合大规模EST测序,首次从花生中克隆了原花青素代谢途径上的2个关键酶[肉桂酸-4-羟化酶(C4H)和花青素还原酶(ANR)]基因的全长编码序列。序列分析表明,与其他植物的C4H相比,花生C4H整个编码区高度保守,... 详细信息

通过构建花生未成熟种子cDNA文库,结合大规模EST测序,首次从花生中克隆了原花青素代谢途径上的2个关键酶[肉桂酸-4-羟化酶(C4H)和花青素还原酶(ANR)]基因的全长编码序列。序列分析表明,与其他植物的C4H相比,花生C4H整个编码区高度保守,开放阅读框长度1518bp,编码蛋白长度505个氨基酸,预测的蛋白分子量为57.9kDa,等电点为9.04。花生中ANR开放阅读框长度966bp,编码蛋白长度321个氨基酸,预测的蛋白分子量为35kDa,等电点为8.31。亚细胞定位预测分析表明,C4H定位在线粒体中,ANR则定位在胞外。半定量RT-PCR结果表明,C4H在花生根、茎、叶、花、果针、种子中均有表达,但在茎、叶中表达相对较低,而原花青素合成途径中的关键酶ANR在各个组织中均有表达,其中在果针中表达最强。

关键词：花生 cDNA文库基因克隆基因表达

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微卫星位点BEM06与BEM23鉴别烟粉虱B型与Q型的有效性

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昆虫学报 2009年第12期52卷 1390-1396页

作者：褚栋张友军高长生刘国霞山东省农业科学院高新技术研究中心山东省作物与畜禽品种改良生物技术重点实验室济南250100 农业部黄淮海作物遗传改良与生物技术重点开放实验室济南250100 中国农业科学院蔬菜花卉研究所北京100081 青岛农业大学农学与植物保护学院山东青岛266109

烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)B型与Q型是烟粉虱复合种中入侵性较强、分布较广的2种生物型,当前在许多地区混合发生。这2种生物型的快速鉴别对其种群动态调查及入侵生态学研究具有重要价值。为了验证微卫星位点BEM06与BEM23鉴别B型与... 详细信息

烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)B型与Q型是烟粉虱复合种中入侵性较强、分布较广的2种生物型,当前在许多地区混合发生。这2种生物型的快速鉴别对其种群动态调查及入侵生态学研究具有重要价值。为了验证微卫星位点BEM06与BEM23鉴别B型与Q型烟粉虱的有效性,本研究分析了这2个微卫星位点的等位基因在国内外17个B型、4个Q型、3个非B/Q型烟粉虱种群的分布特点。结果表明:这2个微卫星位点的联合使用可鉴别B型与Q型烟粉虱,但是无法有效地将B型、Q型与一些非B/Q型烟粉虱某些个体区分开来。结果提示:利用微卫星位点BEM06与BEM23鉴别B型与Q型烟粉虱具有一定的局限性,尤其是田间烟粉虱存在其他生物型时需要慎重使用这种鉴别方法。

关键词：烟粉虱微卫星标记生物型快速鉴别生物入侵

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小根蒜对花生田3种主要杂草马唐、稗草和反枝苋的化感作用

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草业学报 2010年第5期19卷 57-62页

作者：张悦丽秦立琴高兴祥李美李新国孟静静万书波山东省农业科学院高新技术研究中心山东济南250100 山东省作物与畜禽品种改良生物技术重点实验室山东济南250100 农业部黄淮海作物遗传改良与生物技术重点开放实验室山东济南250100 山东农业大学生命科学学院山东泰安271018 山东省农业科学院植物保护研究所山东济南250100

在室内用离体生测方法测定了小根蒜水浸提液对花生田主要杂草马唐、稗草和反枝苋种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明,小根蒜水浸提液对3种杂草种子的萌发和幼苗生长均有较强的抑制作用。3种受体杂草中,以反枝苋和马唐较为敏感,0.0500g... 详细信息

在室内用离体生测方法测定了小根蒜水浸提液对花生田主要杂草马唐、稗草和反枝苋种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明,小根蒜水浸提液对3种杂草种子的萌发和幼苗生长均有较强的抑制作用。3种受体杂草中,以反枝苋和马唐较为敏感,0.0500g/mL浓度处理下种子均受到完全抑制不能萌发,在0.0250g/mL处理下反枝苋、马唐和稗草种子的萌发率分别为38.46%,50.00%和85.71%。相同浓度处理时,小根蒜水提物对3种杂草根长的生长抑制作用均明显高于对苗高的抑制作用。

关键词：小根蒜化感作用花生田种子萌发幼苗生长

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花生中DREB类转录因子PNDREB1的克隆及鉴定

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作物学报 2009年第11期35卷 1973-1980页

作者：张梅刘炜毕玉平王自章山东省农业科学院高新技术研究中心/山东省作物与畜禽品种改良生物技术重点实验室山东济南250100 农业部黄淮海作物遗传改良与生物技术重点开放实验室山东济南250100 山东师范大学生命科学学院山东济南250014 中国科学院植物研究所北京100093

脱水响应元件结合因子(DREB)是一类对多个抗逆相关基因表达起调控作用的植物特有的转录因子,在植物抗逆能力综合改良方面具有重要作用。本研究通过筛选花生未成熟种子的cDNA文库,分离到一个DREB类基因——PNDREB1(FM955398)。该基因序... 详细信息

脱水响应元件结合因子(DREB)是一类对多个抗逆相关基因表达起调控作用的植物特有的转录因子,在植物抗逆能力综合改良方面具有重要作用。本研究通过筛选花生未成熟种子的cDNA文库,分离到一个DREB类基因——PNDREB1(FM955398)。该基因序列长度为687bp,推测编码蛋白含有229个氨基酸残基,相对分子量为24.7kD,理论等电点为5.97,与其他物种中该类转录因子序列同源性较高。利用酵母单杂交系统,对花生PNDREB1与DRE元件的特异识别和结合能力及其C-末端转录激活活性进行检测,显示,转入含有该基因及阳性对照基因的载体均可使酵母菌株正常生长,且具有显色反应,而转入空载体的酵母菌株不能生长,证明基因PNDREB1中的AP2结构域具有和DRE元件特异性结合的能力;同时,只有转入含有该基因C-末端片段及阳性对照基因的载体可使酵母菌株正常生长,并具有显色反应,而转入空载体的酵母菌株不能生长,说明其C-末端片段具有转录激活活性,该基因为DREB类转录因子。基因表达模式分析显示,PNDREB1为组成型表达,且被低温强烈、迅速诱导表达,并对干旱胁迫也有一定程度的响应,但对高盐和ABA处理没有响应。

关键词：花生 DREB类转录因子 PNDREB1 酵母单杂交表达模式低温干旱

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花生总RNA提取方法比较研究

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中国农学通报 2011年第1期27卷 214-218页

作者：陈高单雷周丽侠唐桂英毕玉平山东师范大学生命科学学院济南250014 山东省农业科学院高新技术研究中心/山东省作物与畜禽品种改良生物技术重点实验室/农业部黄淮海作物遗传改良与生物技术重点开发实验室济南250100

通过对2种RNA提取方法(改良CTAB法和Trizol法)和2种RNA提取试剂盒(AXYGEN总RNA提取试剂盒和TIANDZ总RNA提取试剂盒)进行比较研究,以期获得质量较好的花生不同器官的总RNA,为后续分子生物学实验奠定基础。实验结果表明,与TRIZOL法及2种RN... 详细信息

通过对2种RNA提取方法(改良CTAB法和Trizol法)和2种RNA提取试剂盒(AXYGEN总RNA提取试剂盒和TIANDZ总RNA提取试剂盒)进行比较研究,以期获得质量较好的花生不同器官的总RNA,为后续分子生物学实验奠定基础。实验结果表明,与TRIZOL法及2种RNA提取试剂盒相比,改良CTAB法提取的花生总RNA完整性好,得率高,稳定性好,并且无DNA污染,可以进一步满足半定量RT-PCR等实验需要。

关键词：花生总RNA提取改良CTAB法

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番茄果实特异性启动子的克隆与遗传转化研究

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生物技术通报 2012年第1期28卷 74-78页

作者：姜娜娜赵传志赵光敬李长生夏晗王兴军山东省农业科学院高新技术研究中心山东省作物与畜禽品种改良生物技术重点实验室济南250100 农业部黄淮海作物遗传改良与生物技术重点开放实验室济南250100 山东现代职业学院济南250100 山东省青州市实验中学青州262500

为了实现外源基因在番茄果实中的高效和特异表达,克隆了番茄果实特异基因多聚半乳糖醛酸酶基因(Poly-galacturonase,PG)的启动子。以中蔬四号番茄为材料,建立并优化了以子叶为外植体的番茄高效再生和遗传转化体系;以GUS为报告基因,构建P... 详细信息

为了实现外源基因在番茄果实中的高效和特异表达,克隆了番茄果实特异基因多聚半乳糖醛酸酶基因(Poly-galacturonase,PG)的启动子。以中蔬四号番茄为材料,建立并优化了以子叶为外植体的番茄高效再生和遗传转化体系;以GUS为报告基因,构建PG GUS植物表达载体,转化番茄。结果表明,在1.0 mg/L ZT的MS分化培养中,番茄子叶的发芽率最高,芽的诱导率高达91%,且发生畸态芽和褐化的外植体最少;通过抗生素浓度对农杆菌的抑制效果试验发现,当头孢霉素的浓度为200 mg/L时,抑制农杆菌的效果最好;成功克隆了番茄PG启动子,将PG启动子驱动的GUS基因转入番茄,对转基因后代果实的GUS染色表明,PG启动子驱动的外源基因在果实中特异表达。

关键词：番茄多聚半乳糖醛酸酶果实特异启动子遗传转化体系

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花生生长素原初响应基因PNIAAs的表达模式分析

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中国油料作物学报 2012年第5期34卷 467-472页

作者：任怡怡戴绍军刘炜山东省农业科学院高新技术研究中心山东省作物与畜禽品种改良生物技术重点实验室山东济南250100 农业部黄淮海作物遗传改良与生物技术重点开放实验室山东济南250100 东北林业大学盐碱地生物资源环境研究中心东北油田盐碱植被恢复与重建教育部重点实验室黑龙江哈尔滨150040

Aux/IAA基因能够在生长素诱导的早期做出响应。本研究通过筛选花生未成熟种子的cDNA文库,分离并获得了4个可能的Aux/IAA基因,分别命名为PNIAA1、PNIAA2、PNIAA3和PNIAA4。RT-PCR对表达模式的研究显示,四个基因在花生各组织中为组成型表... 详细信息

Aux/IAA基因能够在生长素诱导的早期做出响应。本研究通过筛选花生未成熟种子的cDNA文库,分离并获得了4个可能的Aux/IAA基因,分别命名为PNIAA1、PNIAA2、PNIAA3和PNIAA4。RT-PCR对表达模式的研究显示,四个基因在花生各组织中为组成型表达,且具有不同的时空表达模式和特征,PNIAA1、PNIAA2和PNIAA4主要在叶中表达,而PNIAA3在种子中表达量较高,推测其可能在种子发育过程中行使功能;IAA对花生诱导表达模式分析显示,四个基因经IAA诱导后在根部的表达模式均有变化,其中PNIAA1、PNIAA2和PNIAA3能被生长素迅速诱导。

关键词：花生生长素原初响应基因 Aux IAA 表达模式

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植物花青素生物代谢调控

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生命科学 2011年第10期23卷 938-944页

作者：郭凤丹王效忠刘学英夏晗王兴军山东师范大学生命科学院济南250014 山东省农业科学院高新技术研究中心山东省作物与畜禽品种改良生物技术重点实验室农业部黄淮海作物遗传改良与生物技术重点开放实验室济南250100 潍坊学院生物工程学院潍坊261061

花青素是一类重要的天然色素物质,是植物的主要呈色物质之一,近年来花青素在保健方面的作用越来越受到人们的重视,利用基因工程改造植物花青素相关基因,提高花青素含量已成为研究的热点领域。综述花青素的合成途径、调控机理及转基因方... 详细信息

花青素是一类重要的天然色素物质,是植物的主要呈色物质之一,近年来花青素在保健方面的作用越来越受到人们的重视,利用基因工程改造植物花青素相关基因,提高花青素含量已成为研究的热点领域。综述花青素的合成途径、调控机理及转基因方面的研究,重点介绍近年来影响花青素合成的分子因素及外部环境因素的研究现状。

关键词：花青素结构基因调控基因调控机制

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油体蛋白与人成骨蛋白-1基因融合植物表达载体的构建及融合蛋白性质预测

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西南农业学报 2009年第5期22卷 1257-1261页

作者：赵传志苏磊李爱芹夏晗李长生王兴军山东省农业科学院高新技术研究中心山东省作物与畜禽品种改良生物重点实验室农业部黄淮海作物遗传改良与生物技术重点开放实验室山东济南250100 山东师范大学生命科学学院山东济南250014

克隆大豆油体蛋白特异启动子及油体蛋白基因的全长序列,利用连接PCR的方法,通过一个肠肽酶位点将人成骨蛋白成熟肽编码序列连接到油体蛋白基因3’端并克隆到表达载体pCAMB IA1302中,构建"油体蛋白-肠肽酶-人成骨蛋白"植物表... 详细信息

克隆大豆油体蛋白特异启动子及油体蛋白基因的全长序列,利用连接PCR的方法,通过一个肠肽酶位点将人成骨蛋白成熟肽编码序列连接到油体蛋白基因3’端并克隆到表达载体pCAMB IA1302中,构建"油体蛋白-肠肽酶-人成骨蛋白"植物表达载体。通过酶切、PCR和测序鉴定,证明表达载体构建成功,将其命名为pCAM-oleo-Bmp7。通过蛋白分析软件DNAstar、S ignalP3.0和ProtComp v8.0等软件对重组蛋白的理化性质、二级结构、信号肽和细胞定位进行了分析和预测,证明融合蛋白很好的保留了原来两个蛋白的二级结构和理化性质。

关键词：油体蛋白成骨蛋白生物反应器植物表达载体

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利用基因工程改良植物类胡萝卜素的合成

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生物技术通报 2011年第1期27卷 8-13页

作者：马敬姜娜娜王兴军山东师范大学生命科学学院济南250014 山东省农业科学院高新技术研究中心山东省作物与畜禽品种改良生物技术重点实验室农业部黄淮海作物遗传改良与生物技术重点开放实验室济南250100 山东现代职业学院济南250100

类胡萝卜素(carotenoids)是植物体内存在的一类重要天然色素物质的总称,其生物功能广泛。类胡萝卜素是人类饮食结构中重要的组成部分,并且在医药、化妆品及食品与饲料工业等方面扮演着重要的角色。类胡萝卜素还是一些维生素合成的前体,... 详细信息

类胡萝卜素(carotenoids)是植物体内存在的一类重要天然色素物质的总称,其生物功能广泛。类胡萝卜素是人类饮食结构中重要的组成部分,并且在医药、化妆品及食品与饲料工业等方面扮演着重要的角色。类胡萝卜素还是一些维生素合成的前体,具有多种保健功能,可以提高人体免疫力,并具有抗癌的功效。目前有大量关于提高植物体内类胡萝卜素含量及定向改变其种类的研究,对类胡萝卜素代谢途径及其调控的理解是这些研究的基础。主要阐述植物天然类胡萝卜素的生物合成及利用基因工程对类胡萝卜素改良的研究进展。

关键词：类胡萝卜素生物合成基因克隆基因工程

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