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第六届全国免疫学学术大会

作者：唐菁张玲李翠玲顾洪涛杨尚军阴海鹏温培娥山东省医学科学院基础医学研究所山东省医药卫生肿瘤免疫与中药免疫重点实验室山东省现代医用药物与技术重点实验室山东省烟台市高新技术开发区医院

目的:探讨增殖诱导配体APRIL促血管内皮细胞生长的作用及机制;阐明中药单体淫羊藿苷(ICA)、黄芩苷(BAI)联合化疗药多柔比星(ADM)抑制肝癌HepG2细胞APRIL、VEGF的表达,进而抑制血管内皮细胞生长的作用及机制。

关键词：肝癌细胞淫羊藿苷多柔比星 APRIL 黄芩苷

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Effects of Smad Signaling on Leukemia

Effects of Smad Signaling on Leukemia

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第六届全国免疫学学术大会

作者：苏恩裕姜国胜山东省医学科学院基础医学研究所山东省现代医用药物与技术重点实验室山东省医药卫生肿瘤免疫与中药免疫重点实验室山东省医学科学院血液肿瘤防治研究中心

Introduction:Smads are tied to signaling pathways of the TGF-βsuperfamily including TGF-β,BMP and *** growth factor beta(TGF-β)is a secreted protein that controls proliferation,cellular differentiation,and other fu... 详细信息

关键词： TGF Smads Effects of Smad Signaling on Leukemia

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曲古抑菌素A促进As_2O_3诱导HL-60细胞分化与分子机制的研究

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中华肿瘤防治杂志 2007年第9期14卷 653-656页

作者：毕高峰刘佳宁温培娥杨炜华任霞唐天华谢超董伟姜国胜山东省医学科学院基础医学研究所山东省现代医用药物与技术重点实验室山东济南250062

目的:研究曲古抑菌素A能否促进小剂量三氧化二砷(As2O3)诱导HL-60细胞分化并对其机制进行初步探讨。方法:用MTT实验测定药物对细胞增殖的变化;流式细胞仪检测细胞表面CD11b表达率观察药物对细胞的分化作用;RT-PCR方法检测p21和cyclinD3... 详细信息

目的:研究曲古抑菌素A能否促进小剂量三氧化二砷(As2O3)诱导HL-60细胞分化并对其机制进行初步探讨。方法:用MTT实验测定药物对细胞增殖的变化;流式细胞仪检测细胞表面CD11b表达率观察药物对细胞的分化作用;RT-PCR方法检测p21和cyclinD3在mRNA水平的表达变化。结果:HL-60细胞经曲古抑菌素A和(或)小剂量As2O3作用24h后,联合用药组较单用As2O3组能明显抑制细胞增殖,促进细胞分化,p21在mRNA水平表达增加,cyclinD3在mRNA水平表达降低。结论:曲古抑菌素A能促进小剂量As2O3诱导HL-60细胞的分化,其机制可能与细胞周期蛋白cyclinD3和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p21的表达变化有关。

关键词：白血病曲古抑菌素A 砷剂氧化物 HL-60细胞诱导分化协同作用

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蝎毒多肽提取物对肿瘤生长和细胞免疫功能的影响

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山东大学学报（医学版） 2007年第3期45卷 286-289页

作者：张维东张月英王朝霞王兆朋贾青山东省医学科学院基础医学研究所山东现代医用药物与技术重点实验室山东济南250062

目的:观察蝎毒多肽提取物(PESV)对大鼠W256癌肉瘤抑制作用及其对荷瘤大鼠细胞免疫功能的影响。方法:将30只Wistar荷瘤大鼠,随机分为模型组、5-FU治疗组和蝎毒治疗组,连续灌胃给蝎毒多肽提取物7 d,处死,计算各组抑瘤率;流式细胞术(FCM)... 详细信息

目的:观察蝎毒多肽提取物(PESV)对大鼠W256癌肉瘤抑制作用及其对荷瘤大鼠细胞免疫功能的影响。方法:将30只Wistar荷瘤大鼠,随机分为模型组、5-FU治疗组和蝎毒治疗组,连续灌胃给蝎毒多肽提取物7 d,处死,计算各组抑瘤率;流式细胞术(FCM)检测外周血T淋巴细胞亚群变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清中细胞因子INF-γ和IL-4含量。结果:蝎毒治疗组抑瘤率为55.21%。与模型组相比较,蝎毒治疗组荷瘤大鼠外周血中CD4+T细胞比例明显提高,CD8+T细胞明显降低,CD4+T/CD8+T值明显增高,差异均具有统计学意义(P<0.05);血清中细胞因子INF-γ含量明显升高,而IL-4含量显著降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:蝎毒多肽提取物对W256荷瘤大鼠肿瘤有明显抑制作用,通过提高细胞免疫功能,逆转荷瘤机体Th1/Th2漂移,改变荷瘤机体免疫抑制状态,发挥抗肿瘤作用。

关键词：蝎毒液类免疫活性 CD4+T/CD8+T Th1/Th2漂移

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中药淫羊藿苷逆转肝癌HepG2.2.15细胞恶性表型及诱导分化研究

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世界华人消化杂志 2007年第19期15卷 2087-2092页

作者：王谦张玲毛海婷顾洪涛温培娥李翠玲杨尚军夏武青山东省医学科学院基础医学研究所山东省医药卫生肿瘤免疫与中药免疫重点实验室山东省现代医用药物与技术重点实验室山东省济南市250062 山东省医学科学院药物研究所山东省济南市250062 山东省千佛山医院山东省济南市250014

目的:探讨淫羊藿苷(ICA)诱导HepG2.2.15细胞分化凋亡的作用机制.方法:MTT法检测细胞增殖;流式细胞术(FACS)检测细胞周期分布;RT-PCR方法检测P27基因、FLIP基因mRNA表达水平的变化;AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测ICA处理后HepG2.2.15细胞... 详细信息

目的:探讨淫羊藿苷(ICA)诱导HepG2.2.15细胞分化凋亡的作用机制.方法:MTT法检测细胞增殖;流式细胞术(FACS)检测细胞周期分布;RT-PCR方法检测P27基因、FLIP基因mRNA表达水平的变化;AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测ICA处理后HepG2.2.15细胞凋亡的变化;电化学发光法和速率散射比浊法分别检测ICA处理后HepG2.2.15细胞上清液中甲胎蛋白(AFP)和转铁蛋白(Tf)水平变化.结果:ICA作用HepG2.2.15细胞增殖呈抑制作用,具有时间依赖性.ICA处理后,HepG2.2.15细胞周期各时相分布与对照组相比发生变化,G0/G1期升高,S期减小,与对照组相比有显著性差异(56.26±1.56%vs49.68±1.34%,19.95±1.24%vs28.02±1.03%;P<0.01).ICA分别上调HepG2.2.15细胞P27和下调FLIP基因mRNA的表达水平(0.78vs0.27,0.54vs0.90);HepG2.2.15细胞凋亡率增加,AFP下降,Tf水平升高,与对照组相比均有显著性意义(7.09%vs0.59%,156±46mg/Lvs285±58mg/L,152.1±26mg/Lvs67.1±24mg/L;P<0.05).结论:ICA可能通过升高G0/G1期,减少S期抑制HepG2.2.15细胞的增殖;上调P27mRNA和Tf水平,下调FLIPmRNA的表达和AFP合成的水平来诱导细胞分化.

关键词：淫羊藿苷 HepG2.2.15 P27 甲胎蛋白转铁蛋白 FLIP

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中药淫羊藿苷抑制肝癌HepG2.2.15细胞增殖和免疫逃逸作用研究

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中国免疫学杂志 2007年第10期23卷 908-911页

作者：王谦张玲毛海婷顾洪涛夏武青温培娥李翠玲杨尚军山东省千佛山医院济南250014 山东省医学科学院基础医学研究所山东省医药卫生肿瘤免疫与中药免疫重点实验室山东省现代医用药物与技术重点实验室济南250062 山东省医学科学院药物研究所济南250062

目的:观察中药淫羊藿苷(ICA)对HepG2.2.15细胞增殖及对CD3AK细胞杀伤活性的影响,探讨ICA对肝癌细胞Fas/FasL途径免疫逃逸的逆转作用,为ICA的开发应用提供新的理论和实验依据。方法:MTT法检测细胞增殖和细胞杀伤活性;流式细胞术检测细胞... 详细信息

目的:观察中药淫羊藿苷(ICA)对HepG2.2.15细胞增殖及对CD3AK细胞杀伤活性的影响,探讨ICA对肝癌细胞Fas/FasL途径免疫逃逸的逆转作用,为ICA的开发应用提供新的理论和实验依据。方法:MTT法检测细胞增殖和细胞杀伤活性;流式细胞术检测细胞表面分子表达水平和细胞凋亡率。结果:50μg/mlICA作用HepG2.2.15细胞48、72小时的增殖抑制作用明显,抑制率分别为22.04%、29.68%(P<0.05),呈时间依赖效应。HepG2.2.15细胞经ICA处理后,FasL的表达率由16.22%显著下降至8.29%,Fas表达率由0.79%提高到1.70%(P>0.05)。ICA可明显抑制HepG2.2.15细胞诱导Jurkat细胞凋亡,凋亡率从46.66%下降为18.20%。ICA处理HepG2.2.15细胞后,不同效靶比的CD3AK细胞的杀伤活性,可分别由对照组的15.81%、35.04%、42.85%显著提高至42.58%、67.55%、88.93%(P<0.05,P<0.01),呈效靶比依赖效应。结论:ICA能有效地抑制HepG2.2.15细胞增殖,并有一定时间依赖效应;ICA可下调FasL的表达,上调细胞表面Fas的表达,对HepG2.2.15细胞诱导的T淋巴细胞凋亡作用有一定阻断,逆转肿瘤细胞的免疫逃逸作用;ICA显著增强HepG2.2.15细胞对CD3AK细胞杀伤的敏感性。

关键词：淫羊藿苷 HepG2.2.15 Jurkat细胞 Fas/FasL CD3AK 免疫逃逸

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山东省潍坊东部地区精神分裂症1号染色体基因扫描研究

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中华医学遗传学杂志 2007年第3期24卷 288-292页

作者：陈刚温晓燕朱海宁魏然周鹏栾萌高春义朱建平翁正山东省医学科学院基础医学研究所医学遗传学与基因工程重点实验室山东省现代医用药物与技术重点实验室济南250062 山东省潍坊市精神卫生中心山东省精神卫生中心

目的对精神分裂症患者及正常对照者的1号染色体进行扫描,查找精神分裂症的关联位点。方法在1号染色体上间隔10cM（厘摩）遗传距离,选择了31个微卫星遗传位点,用DNA混合池的方法对119例精神分裂症患者与119名正常对照者的DNA样本分别混... 详细信息

目的对精神分裂症患者及正常对照者的1号染色体进行扫描,查找精神分裂症的关联位点。方法在1号染色体上间隔10cM（厘摩）遗传距离,选择了31个微卫星遗传位点,用DNA混合池的方法对119例精神分裂症患者与119名正常对照者的DNA样本分别混合后进行基因组扫描。经卡方检验分析,对比患者组与对照组的等位基因峰型比率的差异。结果在D1S2878遗传位点患者组与对照组的等位基因频率差异有统计学意义,P〈0.01。结论山东省潍坊东部地区精神分裂症患者群体中存在与1号染色体的关联区域。

关键词：精神分裂症染色体遗传基因组基因池

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凋亡抑制因子FAP-1与肿瘤的关系

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生命的化学 2007年第6期27卷 506-508页

作者：唐菁张玲山东省医学科学院基础医学研究所山东省医药卫生肿瘤免疫与中药免疫重点实验室山东现代医用药物与技术重点实验室济南250062

在肿瘤细胞抵抗凋亡的研究中发现,FAP-1是Fas诱导凋亡的抑制因子,在多种肿瘤细胞中表达。通过对FAP-1基因、蛋白质结构等方面的研究发现,FAP-1以PDZ3结构域介导,与Fas在细胞内强结合,将Fas限制于高尔基体内,不表达于癌细胞表面,从而降低... 详细信息

在肿瘤细胞抵抗凋亡的研究中发现,FAP-1是Fas诱导凋亡的抑制因子,在多种肿瘤细胞中表达。通过对FAP-1基因、蛋白质结构等方面的研究发现,FAP-1以PDZ3结构域介导,与Fas在细胞内强结合,将Fas限制于高尔基体内,不表达于癌细胞表面,从而降低Fas的功能。另外FAP-1会通过磷酸酯酶活性的发挥、NF-κB等途径来抵抗Fas诱导的肿瘤细胞的凋亡。因此,从其作用机制出发,抑制FAP-1mRNA的表达、阻断FAP-1与Fas的结合及其信号转导通路,可以诱导肿瘤细胞的凋亡从而为肿瘤的诊治提供新途径。

关键词：肿瘤细胞凋亡抑制因子

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柞蚕雄蛾提取液改善W256荷瘤大鼠放疗后免疫功能的实验研究

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山东大学学报（医学版） 2007年第11期45卷 1085-1087,1091页

作者：张维东张月英王朝霞贾青王兆朋于金明山东省医学科学院基础医学研究所山东省现代医用药物与技术重点实验室济南250062 山东省肿瘤防治研究院济南250117

目的观察柞蚕雄蛾提取液对荷W256癌肉瘤大鼠放疗后免疫功能的影响。方法60只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、单纯放疗组和实验组(放疗与柞蚕蛾提取液联合治疗组),每组15只。建立W256荷瘤大鼠模型,分离脾脏和胸腺,并计算脏器指数... 详细信息

目的观察柞蚕雄蛾提取液对荷W256癌肉瘤大鼠放疗后免疫功能的影响。方法60只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、单纯放疗组和实验组(放疗与柞蚕蛾提取液联合治疗组),每组15只。建立W256荷瘤大鼠模型,分离脾脏和胸腺,并计算脏器指数;采用流式细胞术(FCM)及酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测外周血T淋巴细胞亚群变化和血清中细胞因子INF-γ和IL-4含量。结果与放疗组相比较,柞蚕雄蛾提取液可以升高放疗后荷瘤大鼠脾脏和胸腺指数,增加放疗后荷瘤大鼠外周血中CD4+T细胞比例与CD4+T/CD8+T值(P<0.05);实验组荷瘤大鼠血清中细胞因子INF-γ含量明显升高,而IL-4含量显著降低(P<0.05)。结论柞蚕雄蛾提取液可以逆转荷瘤大鼠放疗后免疫功能抑制状态,改变荷瘤机体免疫功能,可作为恶性肿瘤传统放疗中的辅助用药。

关键词：柞蚕 Th1/Th2漂移 T淋巴细胞亚群大鼠,Wistar

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重组hKGF2原核表达载体的构建及其蛋白质的纯化

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中国生物工程杂志 2007年第2期27卷 9-13页

作者：余德荣游力王郡甫许晓群赵跃然高春义山东省医学科学院基础医学研究所山东省肿瘤免疫与基因工程重点实验室山东省现代医用药物与技术重点实验室济南250062 山东大学山东省立医院生殖医学研究中心济南250021

角质细胞生长因子2(keratinocyte growth factor2,KGF2)是新近发现的成纤维细胞生长因子家族中的一员,又称FGF10,是上皮细胞特异性的促有丝分裂剂,具有广泛的应用前景。为构建其高效原核表达体系,用RT-PCR法从培养的人胚胎肺成纤维细胞... 详细信息

角质细胞生长因子2(keratinocyte growth factor2,KGF2)是新近发现的成纤维细胞生长因子家族中的一员,又称FGF10,是上皮细胞特异性的促有丝分裂剂,具有广泛的应用前景。为构建其高效原核表达体系,用RT-PCR法从培养的人胚胎肺成纤维细胞中提取成熟hKGF2cDNA,进行T-A克隆;经测序后,构建pET-30a(+)-hKGF2重组表达载体,将其转入大肠杆菌BL21(DE3)菌株。IPTG诱导表达后,重组蛋白经SDS-PAGE及Western blot鉴定为高效可溶性表达。镍亲和层析(Ni+-NTA)一步法纯化后获得纯度达95%以上的目的蛋白,生物活性研究表明,重组hKGF2能有效促进人胚胎肾上皮细胞的增殖。

关键词：重组hKGF2 克隆原核表达镍亲和层析

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