检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病理生理杂志 2015年第8期31卷 1412-1416页

作者：张亚龙张菡菡阎云飞庞敏谢书阳李有杰滨州医学院山东省高校肿瘤分子生物学重点实验室生物化学与分子生物学教研室山东烟台264003

目的:观察千金藤素对人肺腺癌LTEP-a-2细胞生长的影响,探讨细胞中相关微小RNA(miRNA)的表达变化,为明确千金藤素的抗肿瘤机制提供科学依据。方法:在0μmol/L、10μmol/L、20μmol/L和40μmol/L的千金藤素作用后,MTT法检测LTEP-a-2细胞... 详细信息

目的:观察千金藤素对人肺腺癌LTEP-a-2细胞生长的影响,探讨细胞中相关微小RNA(miRNA)的表达变化,为明确千金藤素的抗肿瘤机制提供科学依据。方法:在0μmol/L、10μmol/L、20μmol/L和40μmol/L的千金藤素作用后,MTT法检测LTEP-a-2细胞的生长抑制率;光镜下观察千金藤素作用后LTEP-a-2细胞的形态学变化;流式细胞术分析不同浓度千金藤素对LTEP-a-2细胞凋亡的影响;提取细胞miRNA,real-time PCR检测不同浓度千金藤素作用之后细胞中的let-7c、miR-34a和miR-34b的表达情况。结果:MTT法检测结果表明,千金藤素能够抑制LTEP-a-2细胞活力,呈现剂量依赖性;倒置显微镜下可见,随着千金藤素浓度的升高,细胞固缩的程度逐渐加深;流式细胞术分析发现,不同浓度千金藤素均可导致的LTEP-a-2细胞凋亡率增加;real-time PCR结果表明,千金藤素可以使LTEP-a-2细胞中的let-7c、miR-34a和miR-34b表达升高。结论:千金藤素可以抑制LTEP-a-2细胞生长,诱导细胞凋亡;千金藤素升高细胞中let-7c、miR-34a和miR-34b表达,提示这些miRNA在LTEP-a-2细胞具有抑癌基因的功能。

关键词：千金藤素 LTEP-a-2细胞微小RNA

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医学细胞生物学网络教学平台的建设与实践

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生物学杂志 2015年第3期32卷 104-106页

作者：许聪张道来杨玥滨州医学院细胞生物学教研室山东烟台264003 滨州医学院细胞工程教研室山东烟台264003

网络教学是学生自主学习的重要资源,是推动以学生为中心,培养学生自主学习能力和创新精神的教学改革的重要渠道。网络教学平台以丰富多样的内容和形式促进优质资源共享,强化教学互动,充分调动学生学习的积极性和主动性。介绍了医学细胞... 详细信息

网络教学是学生自主学习的重要资源,是推动以学生为中心,培养学生自主学习能力和创新精神的教学改革的重要渠道。网络教学平台以丰富多样的内容和形式促进优质资源共享,强化教学互动,充分调动学生学习的积极性和主动性。介绍了医学细胞生物学网络教学平台的建设与实践情况,从设计思路、结构板块、教学效果等多方面进行探讨,摸索经验,并不断改进创新。

关键词：医学细胞生物学网络教学平台建设实践

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顺铂对LTEP-a-2细胞中miR-34b及下游分子影响的研究

顺铂对LTEP-a-2细胞中miR-34b及下游分子影响的研究

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华东六省一市生物化学与分子生物学会2015年学术交流会

作者：李有杰谢书阳吕晴郑瑛庞敏宋丹丹赵玮滨州医学院山东省高校肿瘤分子生物学重点实验室生物化学与分子生物学教研室山东烟台264003

目的:探讨顺铂对LTEP-a-2细胞内miR-34b、Bcl-2、Smad3表达的影响,明确顺铂的抗癌机制.方法:体外培养LTEP-a-2细胞,实验组加入不同浓度顺铂,阴性对照组为不加顺铂的细胞;给药组细胞在给予相应浓度顺铂作用36小时后,置于倒置显微镜下观... 详细信息

目的:探讨顺铂对LTEP-a-2细胞内miR-34b、Bcl-2、Smad3表达的影响,明确顺铂的抗癌机制.方法:体外培养LTEP-a-2细胞,实验组加入不同浓度顺铂,阴性对照组为不加顺铂的细胞;给药组细胞在给予相应浓度顺铂作用36小时后,置于倒置显微镜下观察药物处理前后LTEP-a-2细胞的形态变化;收集细胞,加入培养液吹打混匀成细胞重悬液,吸取100μl细胞重悬液Trypan Blue stain染色3分钟,倒置显微镜下观察计数,计算各实验组细胞存活率台盼蓝染色法计算细胞存活率;加药36小时后,每孔加入10μl 0.5％MTT溶液,培养4小时后,置酶标仪上测490nm处各孔OD值,并计算各组细胞抑制率;应用miRNA提取试剂盒按说明提取小RNA,为小RNA加poly A尾后进行反转录,得到cDNA后进行实时荧光定量PCR检测细胞内miR-34b的含量;将收集的各加药组细胞进行SDS-PAGE蛋白电泳,电泳结束后,加入Bcl-2及Smad3蛋白一抗4℃摇床过夜后用TBST洗膜,加入HRP标记的二抗置振荡器孵育,于暗室内曝光并拍照.

关键词： miR-34b Bcl-2 Smad3 肺癌顺铂

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慢病毒介导的RASSF1A表达抑制小细胞肺癌H446细胞的生长~

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中国病理生理杂志 2014年第7期30卷 1209-1213页

作者：孔丽君张立霞栾希英张丽沙王绪菡于恒运张月芝滨州医学院山东省肿瘤分子生物学重点实验室生物化学与分子生物学教研室山东烟台264003 滨州医学院烟台附属医院山东烟台264003

目的:探讨Ras相关结构域家族1A(Ras-association domain family 1A,RASSF1A)抑制小细胞肺癌细胞生长的机制。方法:构建含有RASSFlA基因的慢病毒表达载体,包装成病毒颗粒,感染H446小细胞肺癌细胞。MTT测细胞生长曲线;流式细胞术测细胞周... 详细信息

目的:探讨Ras相关结构域家族1A(Ras-association domain family 1A,RASSF1A)抑制小细胞肺癌细胞生长的机制。方法:构建含有RASSFlA基因的慢病毒表达载体,包装成病毒颗粒,感染H446小细胞肺癌细胞。MTT测细胞生长曲线;流式细胞术测细胞周期;real-time PCR和Western blotting分别检测细胞周期相关蛋白mRNA和蛋白水平的表达。结果:成功获取稳定表达RASSF1A的H446细胞(RASSF1A-H446)。RASSF1A-H446细胞生长缓慢,细胞周期阻滞在G_1期。Real-time PCR和Western blotting结果显示在RASSF1A-H446细胞中,p21和p27的表达明显升高,E2F1的表达明显降低。结论:RASSF1A通过升高p21、p27和降低E2F1的表达,抑制H446细胞的生长。

关键词：慢病毒肺肿瘤细胞周期

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芹菜素对脂多糖致小鼠急性肺损伤的作用机制研究

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中国中西医结合急救杂志 2014年第3期21卷 170-174页

作者：马明明李岩朱委委张小强李君刘向勇王晓芝滨州医学院附属医院重症医学科山东滨州256603 德州市人民医院重症医学科山东德州253014 滨州医学院细胞生物学教研室山东烟台264003

目的观察芹菜素对脂多糖（LPS）诱导小鼠急性肺损伤（ALI）的影响，探讨其可能的作用机制。方法将40只健康雄性昆明小鼠按随机数字表法分为对照组、模型组及芹菜素低、中、高剂量组，每组8只。采用腹腔注射LPS 5mg／kg制备ALI模型；芹... 详细信息

目的观察芹菜素对脂多糖（LPS）诱导小鼠急性肺损伤（ALI）的影响，探讨其可能的作用机制。方法将40只健康雄性昆明小鼠按随机数字表法分为对照组、模型组及芹菜素低、中、高剂量组，每组8只。采用腹腔注射LPS 5mg／kg制备ALI模型；芹菜素低、中、高剂量组分别于制模前1h腹腔注射芹菜素10、25、50mg／kg进行干预。制模后6h进行指标检测，取右肺上叶行苏木素-伊红（HE）染色观察肺组织病理改变并对其进行病理评分，取右肺下叶称重测湿／干质量（W／D）比值，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清及支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量，逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测p38丝裂素活化蛋白激酶（p38MAPK）、ICAM-1和TNF-α的mRNA表达。结果与对照组比较，模型组肺W／D比值增高（17．79±2．89比5．56±0．37，P〈0．05），肺组织病理评分增加（分：10．32±0．23比1．87±0．54，P〈0．05），血清及BALF中ICAM-1、TNF-α含量升高[血清中ICAM-1（ng／L）：21．4±2．7比14．3±3．5，TNF—α（ng／L）：254．8±10．6比1423±13．7；BALF中ICAM-1（ng／L）：20．3±2．4比11．5±3．2，TNF—α（ng／L）：230.3±5．8比110．5±11．2，均P〈0．05]，且p38MAPK、ICAM-1和TNF—α的mRNA表达亦明显升高（以对照组为1，p38MAPK、ICAM-1、TNF-α的相对表达量分别为4．42±0．37、4．89±0．27、3．28±0．13，均P〈0．05）；不同剂量芹菜素可减轻上述损伤效应，以中剂量组改善最为明显，肺W／D比值为13．28±1．21，血清中ICAM-1为（18．5±4．3）ng／L，TNF—α为（169．4±20．8）ng／L，BALF中ICAM-1为（17．8±3．5）ng／L，TNF-α为（150．4±7．1）ng／L，肺组织p38MAPK、ICAM-1、TNF—α的mRNA表达分别为2．99±0．28、3．97±0．17、2．87±0．27，与模型组比较差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论芹菜素可不同程度的拮抗LPS引起的小鼠ALI，以中剂量组改善效果最好，其保护作用可能与抑制p38MAPK信号通路活化、减少TNF—α和ICAM—1等炎症因子表达有关。

关键词：芹菜素脂多糖急性肺损伤肿瘤坏死因子-α 细胞间黏附分子-1 p38丝裂素活化蛋白激酶

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血管生成素4对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的影响

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中国病理生理杂志 2013年第11期29卷 2088-2091页

作者：李岩马明明张小强潘雯菲刘向勇王晓芝滨州医学院附属医院重症医学科山东滨州256603 德州市人民医院重症医学科山东德州253014 滨州医学院细胞生物学教研室山东烟台264003

目的:观察血管生成素4(Ang-4)对脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:EnVision法免疫组化鉴定HUVECs。LPS诱导细胞损伤,不同剂量的Ang-4干预。显微镜下观察细胞形态,MTT法检测细胞活力,E... 详细信息

目的:观察血管生成素4(Ang-4)对脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:EnVision法免疫组化鉴定HUVECs。LPS诱导细胞损伤,不同剂量的Ang-4干预。显微镜下观察细胞形态,MTT法检测细胞活力,ELISA法检测von Willebrand因子(vWF)和肿瘤坏死因子(TNF-α)含量,real-time PCR检测Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)p65和TNF-αmRNA含量变化。结果:免疫组化示胞浆内人Ⅷ因子相关抗原呈阳性;与正常组比,LPS组细胞增殖活力降低(P<0.01),vWF及TNF-α分泌增多(P<0.01),且TLR4、NF-κB p65和TNF-αmRNA表达升高(P<0.01);Ang-4(100μg/L)组可恢复细胞活力,降低vWF及TNF-α含量(P<0.01),抑制LPS所致TLR4、NF-κB p65和TNF-αmRNA的表达(P<0.01)。结论:Ang-4可拮抗LPS诱导的HUVECs损伤,这可能与抑制TLR4-NF-κB p65-TNF-α信号通路的活化有关。

关键词：血管生成素4 脂多糖类人脐静脉内皮细胞 von Willebrand因子

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胶原蛋白及其相关疾病

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生物学教学 2013年第4期38卷 4-5页

作者：单长民孙业盈杨军厚刘向勇武玉永山东省滨州医学院细胞生物学教研室医学遗传学教研室

胶原蛋白是由α1、α2和α3三条肽链呈螺旋形缠绕而成的绳索状分子,有27种不同类型,广泛存在于皮、骨和结缔组织中。不同的胶原蛋白基因定位于不同的染色体部位,其突变可以引起脑血管和遗传疾病。

关键词：胶原蛋白疾病基因

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结缔组织遗传病及其发生

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中国优生与遗传杂志 2013年第7期21卷 1-2页

作者：单长民孙业盈杨军厚刘向勇武玉永山东省滨州医学院细胞生物学教研室医学遗传学教研室滨州256603

结缔组织遗传性疾病又称胶原蛋白病,由基因突变引起。决定不同胶原蛋白肽链基因定位于不同的染色体部位。胶原蛋白是由三条肽链(α1、α2、α3)呈螺旋形缠绕而成的绳索状分子,可以组合许多种类型,广泛存在于皮、骨和结缔组织中。

关键词：结缔组织病胶原蛋白基因

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转录因子Dlx1和Dlx2在成釉细胞中调控MMP20启动子转录活性的研究

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牙体牙髓牙周病学杂志 2013年第6期23卷 355-361页

作者：袁杰刘晓影曲政孙岩张娟娟高玉光潍坊医学院口腔医学研究所潍坊医学院细胞生物学教研室山东潍坊261042 滨州医学院附属医院口腔科山东滨州256603

目的:观察Dlx家族转录因子Dlx1和Dlx2对小鼠成釉细胞基质金属蛋白酶20(matrix metallo proteinase20,MMP20)基因的调控作用,初步确定Dlx家族在釉质发育中的作用。方法:构建Dlx1和Dlx2真核表达载体重组质粒,用双荧光素酶报告基因检测系... 详细信息

目的:观察Dlx家族转录因子Dlx1和Dlx2对小鼠成釉细胞基质金属蛋白酶20(matrix metallo proteinase20,MMP20)基因的调控作用,初步确定Dlx家族在釉质发育中的作用。方法:构建Dlx1和Dlx2真核表达载体重组质粒,用双荧光素酶报告基因检测系统分析不同剂量的Dlx1和Dlx2对MMP20基因启动子转录活性的影响;确定Dlx1和Dlx2有明显作用的启动子区段,用基因定点突变和双荧光素酶报告基因检测系统分析Dlx1、Dlx2对MMP20基因启动子转录活性的影响,以及Dlx1、Dlx2在调控MMP20基因时的相互作用;最后观察Dlx1与Dlx2共转染时MMP20基因活性表达的变化。结果:Dlx1转染小鼠成釉细胞后MMP20启动子活性表达上调,Dlx2转染小鼠成釉细胞后MMP20启动子活性表达抑制;突变MMP20启动子的Dlx结合位点后,MMP20启动子的转录活性下降,而且Dlx1失去上调MMP20启动子转录活性的作用;当Dlx1与Dlx2共转染后,在Dlx1转染剂量不变的前提下,随着Dlx2转染量的增加,小鼠成釉细胞MMP20启动子转录活性显著增加。结论:Dlx1和Dlx2在釉质发育过程中有重要的生物学意义,对MMP20基因表达具有重要的调节作用。

关键词： Dlx 基质金属蛋白酶20 基因定点突变双荧光素酶基因检测

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PLK1基因RNAi慢病毒载体的构建及对食管鳞癌细胞侵袭转移的影响

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世界华人消化杂志 2013年第22期21卷 2128-2135页

作者：于文静张宝刚陈丽梅王守训冯卫国杜长青刘顺梅赵春玲潍坊医学院细胞生物学教研室山东省潍坊市261053 潍坊医学院病理学教研室山东省潍坊市261053 潍坊医学院生物化学教研室山东省潍坊市261053

目的:研究慢病毒介导的PLK1(Polo-like kinase1)基因RNAi对食管鳞癌细胞侵袭转移的影响.方法:利用RT-PCR和Western blot检测不同食管鳞癌细胞中PLK1的表达.根据人PLK1mRNA序列设计干扰片段,Western blot检测干扰效率;利用划痕愈合实验及... 详细信息

目的:研究慢病毒介导的PLK1(Polo-like kinase1)基因RNAi对食管鳞癌细胞侵袭转移的影响.方法:利用RT-PCR和Western blot检测不同食管鳞癌细胞中PLK1的表达.根据人PLK1mRNA序列设计干扰片段,Western blot检测干扰效率;利用划痕愈合实验及Transwell实验研究靶向PLK1的RNAi对食管鳞癌细胞体外侵袭转移能力的影响.将有效干扰序列构建至慢病毒干扰载体pGLV/H1/GFP+Puro中,测序鉴定.重组慢病毒载体与包装质粒共转染293T细胞包装病毒,制备的重组病毒感染食管鳞癌细胞,利用荧光定量PCR和Western blot检测干扰效率;利用裸鼠肺转移模型实验研究慢病毒介导的PLK1基因RNAi对食管鳞癌细胞在体内侵袭转移能力的影响.结果:筛选出一种高表达PLK1的食管鳞癌细胞株TE-8用于实验研究;筛选出有效的干扰片段,并成功构建靶向干扰PLK1基因的慢病毒载体,制备重组病毒颗粒用于感染食管鳞癌细胞;靶向PLK1的RNAi在体内外均能明显抑制食管鳞癌细胞的侵袭与转移.结论:靶向干扰PLK1基因的重组慢病毒能够抑制食管鳞癌细胞的侵袭与转移,PLK1基因影响着食管鳞癌的恶性进展.

关键词： PLK1 侵袭转移慢病毒载体 RNAi 食管鳞癌

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