检索结果-内蒙古大学图书馆

不同佐剂伪狂犬病病毒主要抗原决定簇gBb亚单位疫苗免疫小鼠安全性及免疫效力测定

中国兽医学报 2022年第3期42卷 426-431页

作者：郭广君韩强吕素芳王文秀李峰李振伟谢金文张翠花沈志强山东省滨州畜牧兽医研究院山东省畜禽用蜂胶疫苗研究开发推广中心山东滨州256600 山东绿都生物科技有限公司山东滨州256600

为了评价不同佐剂猪伪狂犬病病毒(PRV)SA株gB蛋白主要抗原决定簇gBb亚单位疫苗免疫小鼠的安全性和免疫效力,以PRV SA强毒株基因组为模板扩增gB基因保守区域,连接pET-28a载体构建pET-28a/gB表达质粒,并经基因测序和Western blot鉴定;制... 详细信息

为了评价不同佐剂猪伪狂犬病病毒(PRV)SA株gB蛋白主要抗原决定簇gBb亚单位疫苗免疫小鼠的安全性和免疫效力,以PRV SA强毒株基因组为模板扩增gB基因保守区域,连接pET-28a载体构建pET-28a/gB表达质粒,并经基因测序和Western blot鉴定;制备的抗原与不同佐剂配比分别制备亚单位疫苗,开展不同佐剂gB蛋白主要抗原决定簇gBb亚单位疫苗免疫昆明小鼠免疫效力评估,测定免疫后不同时间体液免疫抗体水平,进行免疫攻毒保护试验,测定免疫保护力。结果表明,不同佐剂gB蛋白主要抗原决定簇gBb亚单位疫苗免疫昆明小鼠后能够产生较高的抗体水平,模式动物昆明小鼠攻毒免疫保护率达到60%,为PRV新型亚单位疫苗的研制提供了依据。

关键词： PRV gB蛋白抗原决定簇gBb亚单位疫苗疫苗佐剂安全性免疫效力

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PCV2多表位靶向性疫苗仔猪免疫应答及疫苗免疫效力评价

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中国兽医学报 2020年第6期40卷 1080-1086,1095页

作者：王艳萍王金良谢金文徐倩倩苗立中董林沈志强山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州256600 山东绿都生物科技有限公司山东滨州256600 山东省滨州畜禽蜂胶疫苗研究开发推广中心山东滨州256600

制备猪圆环病毒2型(PCV2)多表位靶向性疫苗探讨其免疫应答类型及对仔猪免疫效力。用参考疫苗和PCV2多表位疫苗免疫21日龄PCV2和PRRSV抗原、抗体双阴性仔猪,流式细胞仪检测外周血T、B细胞含量和Th1/Th2比值,荧光定量RT-PCR检测IL-17、TGF... 详细信息

制备猪圆环病毒2型(PCV2)多表位靶向性疫苗探讨其免疫应答类型及对仔猪免疫效力。用参考疫苗和PCV2多表位疫苗免疫21日龄PCV2和PRRSV抗原、抗体双阴性仔猪,流式细胞仪检测外周血T、B细胞含量和Th1/Th2比值,荧光定量RT-PCR检测IL-17、TGF-β及IFN-γ基因转录和ELISA测定IL-2、IL-4和IL-10蛋白表达,以期确定免疫应答类型。通过PCV2抗体效价和仔猪免疫攻毒保护试验评价疫苗免疫效力。结果显示,参考疫苗(A组)和PCV2多表位疫苗(B组)T细胞含量于免疫后7,14 d显著升高;Th1细胞在7~28 d显著升高,而Th2细胞含量无明显变化,使得Th1/Th2比值发生明显偏移,其中B组发生偏移程度较A组轻,表明疫苗免疫发生以Th1为主的T细胞免疫应答。A和B组IL-17和IFN-γ转录水平均显著升高,其中B组在7~14 d达到峰值,显著高于A组,显示B组细胞免疫活化和非特异性反应更强。外周血中IL-2蛋白含量A和B组均有所升高,组间差异不明显;IL-4蛋白含量A组在免疫后35 d明显高于B组,说明A组体液免疫强于B组。TGF-β基因转录水平和IL-10蛋白含量在免疫后无明显变化,显示均未导致免疫抑制的发生。A和B组疫苗均能刺激机体产生抗体,保护仔猪抵御PCV2强毒攻击,但B组疫苗免疫效力高于A组。结果表明,PCV2多表位靶向性疫苗主要刺激Th1介导的细胞免疫应答,激活IL-17和IFN-γ基因转录和IL-2、IL-4蛋白表达,有效保护免疫仔猪抵御PCV2强毒的攻击,具有良好的免疫保护效力。该研究为PCV2新型疫苗的研制和推广应用提供了技术和数据支撑。

关键词：仔猪 PCV2 多表位靶向性疫苗免疫应答免疫效力

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滑液囊支原体研究进展

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动物医学进展 2020年第5期41卷 116-120页

作者：李书光苗立中程立坤曲光刚张娜赵家磊杨立芳沈志强山东省滨州畜禽蜂胶疫苗研究开发推广中心山东滨州256600 山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州256600 山东绿都生物科技有限公司山东滨州256600

滑液囊支原体感染病是严重危害养禽业的一种重要病原,近年该病在国内发病增多,对养禽业造成了一定程度的危害。论文就滑液囊支原体病的病原学、流行病学、致病机理、临床症状、诊断、综合防控措施等几个方面进行综述,并对其未来发展进... 详细信息

滑液囊支原体感染病是严重危害养禽业的一种重要病原,近年该病在国内发病增多,对养禽业造成了一定程度的危害。论文就滑液囊支原体病的病原学、流行病学、致病机理、临床症状、诊断、综合防控措施等几个方面进行综述,并对其未来发展进行展望,以期为该病的临床诊断、病原学研究、疫苗开发和防治研究提供参考。

关键词：滑液囊支原体病原学流行病学综合防控措施

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不同保存方式对猪伪狂犬活疫苗病毒含量的影响

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黑龙江畜牧兽医 2020年第17期 134-136页

作者：魏凤张培培张文通李振伟李峰沈志强山东省滨州畜禽蜂胶疫苗研究开发推广中心山东滨州256600 山东绿都生物科技有限公司山东滨州256600 山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州256600

为了探究猪伪狂犬(Bartha-K61株)病活疫苗及专用稀释液的最佳保存温度及保存时间,试验取40瓶山东某生物公司生产的猪伪狂犬(Bartha-K61株)病活疫苗(批号为20190801,-20℃保存)进行试验,其中20瓶用专用稀释液稀释,20瓶不稀释,分别在4℃... 详细信息

为了探究猪伪狂犬(Bartha-K61株)病活疫苗及专用稀释液的最佳保存温度及保存时间,试验取40瓶山东某生物公司生产的猪伪狂犬(Bartha-K61株)病活疫苗(批号为20190801,-20℃保存)进行试验,其中20瓶用专用稀释液稀释,20瓶不稀释,分别在4℃、37℃存放,并分别于0小时、2小时、4小时、6小时、8小时测病毒含量;取不同温度(4℃、23℃、38℃)保存的稀释液对-20℃保存的疫苗进行稀释,每个温度稀释2瓶,当稀释后的疫苗温度为37℃时测定病毒含量。同时从-20℃保存的疫苗中取出2瓶作为对照,测定病毒含量。结果表明:疫苗在稀释前低温冷冻保存最好,如果4℃存放,不要超过8 h;稀释后的疫苗要及时使用,若不能及时使用,可于4℃保存,保存时间不超过8 h。室温保存尤其是天气炎热的夏季保存时间不要超过6 h。猪伪狂犬病活疫苗专用稀释液的保存温度以23℃为最佳。

关键词：猪伪狂犬病活疫苗病毒含量稀释液保存条件

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38味中药对猪大肠杆菌的体外抑菌活性

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中国兽医杂志 2020年第5期56卷 66-71页

作者：徐倩倩吕素芳李峰张冉冉王怡晴刘青青王艳萍沈志强山东省滨州畜牧兽医研究院山东省滨州畜禽蜂胶疫苗研究开发推广中心山东滨州256600 山东绿都安特动物药业有限公司山东滨州256600 滨州医学院药学院山东烟台264003

筛选对临床分离多重耐药猪大肠杆菌有抑菌、杀菌作用的中药,并分析部分中药的联合抑菌效果。选用标准菌株ATCC83707作为对照菌株,采用纸片法测定分离菌株对临床常用抗生素的敏感性。微量2倍稀释法和平板法测定各味中药的最小抑菌浓度(M... 详细信息

筛选对临床分离多重耐药猪大肠杆菌有抑菌、杀菌作用的中药,并分析部分中药的联合抑菌效果。选用标准菌株ATCC83707作为对照菌株,采用纸片法测定分离菌株对临床常用抗生素的敏感性。微量2倍稀释法和平板法测定各味中药的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。微量棋盘稀释法测定2种中药的联合抑菌效果。结果表明,临床分离大肠杆菌对阿米卡星、庆大霉素、左氟沙星、青霉素G、链霉素、阿莫西林都耐药,仅对多黏菌素B呈现敏感。临床分离大肠杆菌对黄连等12味中药表现为中度敏感,对其他中药表现为不敏感;ATCC83707对黄连等10味中药中度敏感,对其他药物不敏感。黄连-芦荟、黄连-诃子、山楂-芦荟、山楂-诃子、山楂-诃子、芦荟-乌梅、诃子-白头翁等联合应用时,对临床分离大肠杆菌菌株呈现协同作用;黄连-山楂、黄连-乌梅、黄连-白头翁、山楂-香薷、芦荟-五味子、乌梅-香薷、乌梅-诃子、黄芩-诃子、诃子-五味子等联合应用时,对临床分离大肠杆菌菌株呈现相加作用;黄连-香薷、黄连-五味子等联合应用时,对临床分离大肠杆菌菌株呈现无关作用;其余药物联合应用时,对临床分离大肠杆菌菌株呈现拮抗作用。临床分离大肠杆菌对常用抗生素呈现了多药耐药趋势,但对中药仍然保持一定的敏感性;抗菌方面,中药之间存在着复杂的相互作用,部分中药间有协同作用,临床用药时须谨慎筛选。

关键词：中药大肠杆菌最小抑菌浓度最小杀菌浓度微量棋盘稀释法

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国内部分省市肉兔及蜱虫携带土拉杆菌的流行病学调查

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中国畜牧兽医 2020年第12期47卷 4069-4075页

作者：李书光王艺晖曲光刚孙翠平杨丽芳林初文沈志强何诚山东省滨州畜牧兽医研究院滨州256600 中国农业大学动物医学院北京100193 山东省滨州畜禽蜂胶疫苗研究开发推广中心滨州256600 山东绿都生物科技有限公司滨州256600

本调查旨在探明土拉杆菌在国内部分省份的流行情况。利用本实验室建立的土拉杆菌通用及亚种PCR检测研究方法,对国内肉兔饲养密度比较大的省份和牛羊存栏的部分省市开展了肉兔和蜱虫中土拉杆菌的检测,并对阳性样本进行了土拉杆菌亚种的... 详细信息

本调查旨在探明土拉杆菌在国内部分省份的流行情况。利用本实验室建立的土拉杆菌通用及亚种PCR检测研究方法,对国内肉兔饲养密度比较大的省份和牛羊存栏的部分省市开展了肉兔和蜱虫中土拉杆菌的检测,并对阳性样本进行了土拉杆菌亚种的鉴定和基因测序验证。研究结果表明,肉兔肝脏组织和牛羊携带蜱虫中土拉杆菌DNA检测阳性,其中218份肉兔样本中12份阳性(阳性率5.5%),490份蜱虫样本中15份阳性(阳性率3.1%);从地区分布来看,山东、河南、四川肉兔病料检测阳性,云南、山东蜱虫阳性率高;PCR检测显示其亚种为F.h,为土拉杆菌毒力较强的亚种。本次调查显示土拉杆菌在肉兔、蜱虫中存在,山东、云南地区存在土拉杆菌病公共卫生安全风险,应引起有关科研院校、医疗单位和政府部门的高度重视。

关键词：土拉杆菌肉兔蜱虫流行病学调查

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羊场布鲁氏菌病监测净化血清学检测方法选择与优化研究

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中国草食动物科学 2021年第6期41卷 45-49页

作者：吕素芳王建军董炳梅李玲任洪林胡莉萍李峰山东省滨州畜牧兽医研究院山东省畜禽用蜂胶疫苗研究开发推广中心滨州256600 山东绿都生物科技有限公司滨州256600 吉林大学人兽共患病研究所长春130062 山东省动物疫病预防与控制中心济南250022

为比较GICA与RBT方法用于布病初筛检测,iELISA、cELISA与SAT等方法用于布病确诊检测符合情况,统计比较以RBT、iELISA、GICA作为初筛试验方法,以SAT、cELISA、iELISA作为确诊检测方法不同组合阳性判断结果符合程度,遴选适合基层布病血清... 详细信息

为比较GICA与RBT方法用于布病初筛检测,iELISA、cELISA与SAT等方法用于布病确诊检测符合情况,统计比较以RBT、iELISA、GICA作为初筛试验方法,以SAT、cELISA、iELISA作为确诊检测方法不同组合阳性判断结果符合程度,遴选适合基层布病血清学检测方法的组合。同时采用RBT、GICA、iELISA与cELISA方法,对滨州某羊场151只绵羊进行布病抗体检测,选择RBT检测阳性样品,应用SAT复检,并对以上初筛方法和确诊方法进行不同组合分析,与RBT初筛、cELISA方法确诊方法判定结果进行符合程度比较。结果显示:以确定RBT法初筛、cELISA法确诊,GICA法初筛、cELISA法确诊,RBT法初筛、iELISA法确诊等组合可作为布病监测净化的优先选择血清学检测方法。

关键词：羊场布鲁氏菌病 RBT GICA iELISA cELISA SAT

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猪圆环病毒3型SYBR greenⅠ荧光定量PCR方法建立及初步应用

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中国兽医学报 2019年第7期39卷 1250-1255页

作者：吕素芳李峰郭广君魏凤张文通沈志强山东省滨州畜牧兽医研究院山东省畜禽用蜂胶疫苗研究开发推广中心山东滨州256600 山东绿都生物科技有限公司山东滨州256600

为建立一种快速、特异、敏感的SYBR greenⅠ实时定量PCR方法,检测猪圆环病毒3型(PCV3)在感染猪体内的分布情况和病毒含量,本研究根据PCV3的cap基因序列设计1对引物,对反应条件、反应体系进行优化,建立了检测PCV3 cap基因的SYBR greenⅠ... 详细信息

为建立一种快速、特异、敏感的SYBR greenⅠ实时定量PCR方法,检测猪圆环病毒3型(PCV3)在感染猪体内的分布情况和病毒含量,本研究根据PCV3的cap基因序列设计1对引物,对反应条件、反应体系进行优化,建立了检测PCV3 cap基因的SYBR greenⅠ实时定量PCR方法,并对动物回归试验后剖检的病料组织进行了检测。结果,该方法比传统PCR方法灵敏度高100倍,可达3.04×10^2拷贝/μL,且具有良好的特异性和重复性。在不同病料组织中均可检测到PCV3,但不同感染猪、不同组织病毒检出及含量有差异,其中肝脏、肺脏、颌下淋巴结中病毒含量显著高于心脏、心包肌、肾脏等;肝中病毒拷贝数最高,达1.16×10^6拷贝/μL,表明PCV3具有一定的组织嗜性。该方法可用于PCV3的病原学监测、流行病学调查及定量研究。

关键词：猪圆环病毒3型 cap基因实时定量PCR反应

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紫花地丁-芦荟紫花地丁-双花连翘提取物对大肠杆菌O2的联合抑制作用研究

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中国兽医杂志 2019年第4期55卷 69-71页

作者：郭时金董林唐世云徐倩倩王艳萍杨丽梅付石军沈志强山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州256600 山东绿都安特动物药业有限公司山东滨州2566004 山东省滨州畜禽蜂胶疫苗研究开发推广中心山东滨州256600

为了研究紫花地丁-芦荟、紫花地丁-双花连翘提取物两个药物对大肠杆菌的联合抑制作用,采用微量棋盘法对已知血清型大肠杆菌O2进行了单独与联合抑菌对比试验。结果显示,紫花地丁、芦荟、双花连翘提取物,MIC分别为1/4原液、原液和1/4原液... 详细信息

为了研究紫花地丁-芦荟、紫花地丁-双花连翘提取物两个药物对大肠杆菌的联合抑制作用,采用微量棋盘法对已知血清型大肠杆菌O2进行了单独与联合抑菌对比试验。结果显示,紫花地丁、芦荟、双花连翘提取物,MIC分别为1/4原液、原液和1/4原液;当紫花地丁-芦荟、紫花地丁-双花连翘提取物两两相互配伍时,紫花地丁的MIC分别为单用时的1/16倍和1倍,芦荟和双花连翘提取物的MIC分别降为单用时的1/32倍和1/4。结论:紫花地丁与芦荟和双花连翘提取物分别联合应用时,FIC值分别为0.09375和1.25,相互作用分别为协同作用和无关作用。

关键词：紫花地丁芦荟双花连翘联合抑菌 FIC

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肠致病性大肠杆菌改变肠道上皮细胞极性的研究进展

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中国人兽共患病学报 2019年第4期35卷 350-354页

作者：王玉波徐倩倩郭时金王艳萍张颖杨丽梅沈志强滨州医学院附属医院胸外科滨州256600 山东省滨州畜牧兽医研究院山东省滨州畜禽蜂胶疫苗研究开发推广中心滨州256600 山东绿都安特动物药业有限公司滨州256600

上皮细胞构成了宿主阻止病原微生物入侵机体的生理屏障。细胞间连接,主要是紧密连接,将上皮细胞特殊的顶端和基底外侧膜位点分开,形成极化的上皮细胞,用于维持顶端-基底极性。肠致病性大肠杆菌通过破坏感染位点多种因素导致顶端-基底极... 详细信息

上皮细胞构成了宿主阻止病原微生物入侵机体的生理屏障。细胞间连接,主要是紧密连接,将上皮细胞特殊的顶端和基底外侧膜位点分开,形成极化的上皮细胞,用于维持顶端-基底极性。肠致病性大肠杆菌通过破坏感染位点多种因素导致顶端-基底极性消失,包括上皮细胞屏障结构、黏附和极性蛋白的分布,以及极性复合物。本文主要阐述了紧密连接在维持上皮细胞极性中的作用、肠致病性大肠杆菌对紧密连接的破坏作用、肠致病性大肠杆菌对上皮细胞极性的影响及其作用机制,为肠致病性大肠杆菌作用机制的研究和防御措施提供参考。

关键词：肠致病性大肠杆菌肠道上皮细胞极性紧密连接

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