检索结果-内蒙古大学图书馆

PRRSV GP5和PCV2 ORF2双基因共表达重组腺病毒的构建及鉴定

中国预防兽医学报 2009年第9期31卷 667-670页

作者：于新友沈志强管宇南松剑王金良肖跃强唐娜山东省畜禽用蜂胶疫苗工程技术研究中心山东滨州256600 山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州256600

为构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5基因和猪圆环病毒2(PCV2)ORF2双基因共表达重组腺病毒。将扩增的PRRSV GP5基因和PCV2 ORF2基因通过IRES元件串联,构建重组腺病毒穿梭质粒。PmeⅠ酶切线性化后,转化含有腺病毒骨架载体pAdeasy-1... 详细信息

为构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5基因和猪圆环病毒2(PCV2)ORF2双基因共表达重组腺病毒。将扩增的PRRSV GP5基因和PCV2 ORF2基因通过IRES元件串联,构建重组腺病毒穿梭质粒。PmeⅠ酶切线性化后,转化含有腺病毒骨架载体pAdeasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞,同源重组后筛选重组腺病毒质粒,经PacⅠ酶切后转染293A细胞进行包装,获得重组腺病毒。PCR鉴定表明重组腺病毒含有GP5和ORF2基因,western blot检测结果表明GP5基因和ORF2基因在293A细胞内获得表达。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) GP5基因猪圆环病毒2型(PCV2) ORF2基因重组腺病毒

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪细小病毒PPV-SD1株VP2全基因原核表达及间接ELISA检测方法的建立

引用

中国兽医杂志 2008年第7期44卷 22-24页

作者：王金良沈志强唐娜曲光刚魏凤任艳玲肖跃强管宇山东省滨州畜牧兽医研究院山东省畜禽用蜂胶疫苗工程技术研究中心山东滨州256600

猪细小病毒(PPV)是引起母猪繁殖障碍的重要病原之一,初产母猪感染PPV后,可引起流产、不孕、产死胎、木乃伊胎等,而母猪本身并不表现临床症状,其他猪感染后也无明显的临床症状,给养猪业造成巨大的经济损失。血清学试验证实,VP2蛋白可以... 详细信息

猪细小病毒(PPV)是引起母猪繁殖障碍的重要病原之一,初产母猪感染PPV后,可引起流产、不孕、产死胎、木乃伊胎等,而母猪本身并不表现临床症状,其他猪感染后也无明显的临床症状,给养猪业造成巨大的经济损失。血清学试验证实,VP2蛋白可以诱导产生血凝抑制及中和抗体。本实验室对猪细小病毒PPV-SD1分离株的VP2基因进行了原核表达,利用纯化的蛋白建立了间接ELISA抗体检测方法,为PPV流行病学调查提供了物质基础。[第一段]

关键词：间接ELISA 猪细小病毒 VP2蛋白 ELISA检测方法原核表达 PPV 全基因母猪繁殖障碍

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪细小病毒PPV-SD1株VP2全基因的克隆及原核表达

引用

畜牧与兽医 2007年第12期39卷 14-17页

作者：王金良沈志强谢金文南松剑管宇郝静庄金秋刘吉山山东省滨州畜牧兽医研究院山东省畜禽用蜂胶疫苗工程技术研究中心山东滨州256600

为研究猪细小病毒PPV—SD1分离株的VP2蛋白的结构与功能，自行设计引物，通过PCR扩增的方法，获得VP2全基因，克隆到pMD18-T载体中进行测序，然后亚克隆到pET30a（＋）表达载体中，构建并筛选出阳性重组子，标记为pET30a—VP2。将阳性... 详细信息

为研究猪细小病毒PPV—SD1分离株的VP2蛋白的结构与功能，自行设计引物，通过PCR扩增的方法，获得VP2全基因，克隆到pMD18-T载体中进行测序，然后亚克隆到pET30a（＋）表达载体中，构建并筛选出阳性重组子，标记为pET30a—VP2。将阳性重组质粒转化进Rosetta^TM主菌中，通过改变IPTG浓度、诱导温度和诱导时间，使重组蛋白获得表达，并确定最佳诱导条件为：IPTG终浓度1．0amol/L、诱导温度37℃、诱导时间为3—4h。经SDS—PAGE和Western—blotting分析表明该重组蛋白相对分子量约为68ku，具有良好的免疫学活性。

关键词：猪细小病毒 VP2基因基因克隆原核表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

微载体技术在动物细胞培养中的应用进展

引用

黑龙江畜牧兽医 2013年第9期 34-36页

作者：魏凤管宇肖跃强吕素芳张文通沈志强山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州256600 山东省畜禽用蜂胶疫苗工程技术研究中心山东滨州256600

荷兰学者***于1967年首先创立了微载体培养动物细胞技术，为贴壁依赖性细胞的高产培养提出了“微载体”培养系统的新技术概念。在微载体表面，培养细胞可以在较短时间内得到大量的细胞，且细胞传代只需要添加新的微载体，基本上可避免... 详细信息

荷兰学者***于1967年首先创立了微载体培养动物细胞技术，为贴壁依赖性细胞的高产培养提出了“微载体”培养系统的新技术概念。在微载体表面，培养细胞可以在较短时间内得到大量的细胞，且细胞传代只需要添加新的微载体，基本上可避免细胞在胰酶消化过程中受到的损伤，因此微载体培养细胞技术是非常方便和有意义的。经过几十年的研究改进，微载体培养技术现已广泛地应用于动物细胞的培养。本文将对近年来微载体技术的研究进展作一综述。

关键词：动物细胞培养载体技术应用微载体培养细胞技术培养系统载体表面培养细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

PRRSV HN25株ORF5基因的克隆和重组腺病毒的构建

引用

畜牧与兽医 2010年第1期42卷 61-63页

作者：于新友沈志强管宇南松剑王金良肖跃强唐娜山东省畜禽用蜂胶疫苗工程技术研究中心山东滨州256600 山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州256600

克隆PRRSV HN25株ORF5基因,测序并进行序列分析。结果显示ORF5基因编码区长603bp,编码200个氨基酸,与国内外VR-2332株、LV株和CH-1a株ORF5基因的核酸序列同源性分别为99.0%,63.8%和91.4%,而推导的氨基酸序列同源性分别为98.0%,58.8%和90... 详细信息

克隆PRRSV HN25株ORF5基因,测序并进行序列分析。结果显示ORF5基因编码区长603bp,编码200个氨基酸,与国内外VR-2332株、LV株和CH-1a株ORF5基因的核酸序列同源性分别为99.0%,63.8%和91.4%,而推导的氨基酸序列同源性分别为98.0%,58.8%和90.5%。构建含ORF5基因的重组腺病毒穿梭质粒,PmeI酶切线性化后,转化含有腺病毒骨架载体pAdeasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞,同源重组后筛选重组腺病毒质粒,经PacI酶切后转染293A细胞进行包装,获得重组腺病毒。通过PCR鉴定重组腺病毒含有ORF5基因,Western blot检测的结果表明PRRSV ORF5基因在293A细胞内获得表达。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF5基因重组腺病毒

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

犬瘟热病毒在不同组织细胞上增殖特性的研究

引用

动物医学进展 2010年第2期31卷 83-86页

作者：魏凤管宇王金良祖立闯沈志强山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州256600 山东省畜禽用蜂胶疫苗工程技术研究中心山东滨州256600

将犬瘟热病毒(CDV)分别接种于长满单层的鸡胚成纤维细胞(CEF)、非洲绿猴肾细胞系(Ve-ro)、犬肾细胞系(MDCK),观察其病变时间、病变特征,并对其进行RT-PCR鉴定和TCID50测定。结果表明,CDV在这3种细胞上均能增殖,并产生明显的细胞病变(CP... 详细信息

将犬瘟热病毒(CDV)分别接种于长满单层的鸡胚成纤维细胞(CEF)、非洲绿猴肾细胞系(Ve-ro)、犬肾细胞系(MDCK),观察其病变时间、病变特征,并对其进行RT-PCR鉴定和TCID50测定。结果表明,CDV在这3种细胞上均能增殖,并产生明显的细胞病变(CPE),但在Vero细胞上产生病变的时间短,病变明显,且TCID50最高;RT-PCR检测CDV在不同细胞上的病毒培养液,均能扩增出337bp的片段;CDV在Vero细胞上的增殖滴度明显高于在CEF、MDCK细胞上的增殖滴度。表明本试验所选用的3种细胞中,Vero细胞最适宜培养CDV,所获得的CDV的毒价最高,病变最明显。

关键词：犬瘟热病毒增殖特性细胞病变

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

核酸疫苗的免疫机制及其在禽病防治中的应用

引用

湖北农业科学 2010年第4期49卷 985-988页

作者：魏凤沈志强山东省畜禽用蜂胶疫苗工程技术研究中心山东滨州256600 山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州256600

核酸疫苗是当今疫苗研究的最前沿领域,就核酸疫苗的免疫机制以及在家禽疾病防治中的应用进行了综述。

关键词：核酸疫苗免疫机制家禽应用

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

禽多杀性巴氏杆菌交叉保护因子的研究进展

引用

中国家禽 2010年第10期32卷 40-44页

作者：张文通魏凤肖跃强沈志强山东省畜禽用蜂胶疫苗工程技术研究中心山东滨州256600 山东绿都生物科技有限公司山东滨州256600 山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州256600

禽霍乱是危害养禽业的重要传染病之一。疫苗免疫接种是防制该病的重要措施,传统疫苗因禽多杀性巴氏杆菌血清型众多且无交叉保护能力而不能有效控制该病。禽多杀性巴氏杆菌交叉保护因子的发现为研制适合各种血清型禽多杀性巴氏杆菌引起... 详细信息

禽霍乱是危害养禽业的重要传染病之一。疫苗免疫接种是防制该病的重要措施,传统疫苗因禽多杀性巴氏杆菌血清型众多且无交叉保护能力而不能有效控制该病。禽多杀性巴氏杆菌交叉保护因子的发现为研制适合各种血清型禽多杀性巴氏杆菌引起感染的广谱疫苗展现了诱人的前景。本文就禽多杀性巴氏杆菌交叉保护因子研究进展进行了综述。

关键词：禽多杀性巴氏杆菌交叉保护因子

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

动物胚胎生物技术研究进展

引用

上海畜牧兽医通讯 2008年第1期 6-7页

作者：魏凤吕素芳郭广君沈志强扈俊波山东省畜禽用蜂胶疫苗工程技术研究中心山东省滨州畜牧兽医研究院 256600

胚胎生物技术是在胚胎移植技术的基础上,对哺乳动物的胚胎进行人为的工程技术操作,然后让它继续发育,获得人们所需要的成体动物的新技术.主要包括:超数排卵、卵母细胞体外成熟培养、体外受精、胚胎移植、胚胎冷冻保存、性别控制、胚胎... 详细信息

胚胎生物技术是在胚胎移植技术的基础上,对哺乳动物的胚胎进行人为的工程技术操作,然后让它继续发育,获得人们所需要的成体动物的新技术.主要包括:超数排卵、卵母细胞体外成熟培养、体外受精、胚胎移植、胚胎冷冻保存、性别控制、胚胎克隆等一系列有关胚胎体外操作和改造的技术.本文就这些技术的发展及其应用作一综述.

关键词：胚胎生物技术哺乳动物胚胎移植技术体外成熟培养胚胎冷冻保存技术操作超数排卵卵母细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

犬瘟热病毒在不同组织细胞上增殖特性的试验

犬瘟热病毒在不同组织细胞上增殖特性的试验

引用

中国畜牧兽医学会生物制品学分会、中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2010年学术年会暨第三届中国兽药大会

作者：魏凤管宇王金良祖立闯沈志强山东省滨州畜牧兽医研究院山东省畜禽用蜂胶疫苗工程技术研究中心山东滨州 256600 山东省畜禽用蜂胶疫苗工程技术研究中心山东滨州 256600

瘟热病毒(Canine distemper virus，CDV)分别接种长满单层的鸡胚成纤维细胞(CEF)、非洲绿猴肾细胞系(Vero)、犬肾细胞系(MDCK)，观察其病变时间，病变特征，并对其进行RT-PCR鉴定和TCID50的测定。结果表明：CDV在这三种细胞上均能增殖...

瘟热病毒(Canine distemper virus，CDV)分别接种长满单层的鸡胚成纤维细胞(CEF)、非洲绿猴肾细胞系(Vero)、犬肾细胞系(MDCK)，观察其病变时间，病变特征，并对其进行RT-PCR鉴定和TCID50的测定。结果表明：CDV在这三种细胞上均能增殖，并产生明显的细胞病变(CPE)，但以在Vero细胞上产生的病变时间短，病变明显，且TCID50最高；RT-PCR结果表明，CDV在不同细胞上的病毒细胞培养液，均能扩增出337bp的片段。结论：所选用的三种细胞来说，Vero细胞最适宜培养CDV，所获得的CDV的毒价最高，病变最明显。

关键词：

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：