检索结果-内蒙古大学图书馆

中华肿瘤防治杂志 2017年第19期24卷 1342-1348页

作者：廖琼孙玉梅姜夏薇李珊王希白艳梅任霞王大本姜国胜济南市第五人民医院血液肿瘤科山东济南250022 济南市第四人民医院检验科山东济南250031 山东省医学科学院基础医学研究所.山东省现代医用药物与技术重点实验室.山东省医药卫生肿瘤免疫与中药免疫重点实验室山东济南250062

目的 DBO(6,8-dichloro-2,3-dihydro-3-hydroxymethyl-1,4-benzoxazine)作为雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)抑制剂,可诱导人脐静脉内皮细胞发生自噬,促进其凋亡,但是DBO对白血病细胞是否亦具有同样的作用却不明确。本研究旨在探讨DBO对人慢性髓系白血病K562细胞的增殖、自噬与凋亡的影响。方法常规方法复苏、传代培养K562细胞,设置对照组(DMSO)、DBO处理组。处理24、48和72h后收集细胞,采用蛋白质印迹法检测LC3蛋白的表达。细胞免疫荧光实验检测LC3斑点的表达;透射电镜观察细胞自噬现象。CCK-8比色法检测K562细胞的活性和增殖能力。细胞周期实验检测K562细胞分裂能力。AnnexinⅤFITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡。结果蛋白质印迹结果显示,K562细胞经雷帕霉素处理后LC3-Ⅱ蛋白水平表达升高,p62蛋白水平表达降低;经50μmol/L DBO处理24、48和72h后,LC3-Ⅱ和p62蛋白水平表达与雷帕霉素处理后结果相似,并呈时间依赖性。K562细胞经10、25和50μmol/L处理后,LC3-Ⅱ蛋白水平表达升高,p62蛋白水平表达降低,呈剂量依赖性,而使用自噬抑制剂3-MA后LC3-Ⅱ蛋白表达降低,P62蛋白表达升高。细胞免疫荧光实验显示,DBO作用72h后,与对照组相比,DBO处理组LC3斑点的表达量增加。透射电镜观察结果显示,与对照组相比,DBO处理组细胞胞质内可见较多自噬小体和自噬溶酶体,细胞核不规则,染色质边缘化。CCK8检测结果显示,DBO对K562细胞的增殖具有明显的抑制作用,并呈现时间-剂量依赖性。DBO经10、25、50和100μmol/L处理24h的细胞增殖抑制率分别为(0.68±0.05)%、(2.76±0.35)%、(12.64±3.90)%和(22.58±2.41)%,F=67.389,P<0.001,处理组与对照组之间差异有统计学意义;48h的增殖抑制率分别为(3.83±1.06)%、(6.23±1.27)%、(15.90±1.10)%和(24.50±2.51)%,F=145.738,P<0.001,处理组与对照组之间差异有统计学意义;72h的增殖抑制率分别为(8.78±1.28)%、(21.38±1.47)%、(32.11±2.01)%和(34.27±2.59)%,F=225.820,P<0.001,处理组与对照组之间差异有统计学意义。流式细胞术分析显示K562细胞经DBO处理72h后,与对照组相比,G2/M期细胞比例增加,χ2=276.706,P<0.001。流式细胞术分析显示,与对照组相比,K562细胞经DBO处理72h后的凋亡率增加,χ2=227.384,P<0.001。结论 DBO可明显抑制K562细胞生长,并与自噬和凋亡的发生有关。

关键词： DBO K562细胞凋亡自噬白血病

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白血病细胞诱导分化过程中nm23-H1表达变化及其分子调控机制

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国际肿瘤学杂志 2017年第4期44卷 246-250页

作者：田静袁小芬韩杨任霞张之勇郭强李莲莲张晓瑜张振李霞姜国胜济南大学山东省医学科学院医学与生命科学学院山东省医学科学院基础医学研究所山东省现代医用药物与技术重点实验室山东省医药卫生肿瘤免疫与中药免疫重点实验室山东中医药大学第二附属医院预防保健中心山东省医学科学院基础医学研究所山东省现代医用药物与技术重点实验室山东省医药卫生肿瘤免疫与中药免疫重点实验室

目的探讨在白血病细胞HL-60分化过程中nm23-H1、c-Myc、粒细胞集落刺激因子（G-CSF）的作用机制及相互关系,为临床治疗提供理论依据和治疗靶点.方法 CCK-8实验测定全反式维甲酸（ATRA）作用下的靶细胞增殖情况,瑞士-吉姆萨染色观察细... 详细信息

目的探讨在白血病细胞HL-60分化过程中nm23-H1、c-Myc、粒细胞集落刺激因子（G-CSF）的作用机制及相互关系,为临床治疗提供理论依据和治疗靶点.方法 CCK-8实验测定全反式维甲酸（ATRA）作用下的靶细胞增殖情况,瑞士-吉姆萨染色观察细胞形态学变化.反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）或Western blotting测定nm23-H1、c-Myc和G-CSF的基因、蛋白表达水平.酶联免疫吸附试验（ELISA）测定ATRA诱导HL-60细胞分化过程中培养上清G-CSF水平的变化.结果分别使用药物浓度为0.25、0.50、1.00、2.00和4.00 μmol/L的ATRA诱导HL-60细胞72 h,细胞增殖抑制率分别为（43.00±0.08）%、（49.55±2.30）%、（58.90±6.70）%、（64.60±4.70）%、（72.70±3.20）%,差异有统计学意义（F=69.887,P=0.000）.在ATRA诱导下,细胞形态学证实HL-60细胞向成熟粒细胞方向分化.nm23-H1的mRNA相对表达量由0.79±0.03逐渐降低到0.52±0.09,差异有统计学意义（F=9.679,P=0.002）,蛋白相对表达量由1.54±0.12逐渐降低到0.40±0.04,差异有统计学意义（F=90.140,P=0.000）.c-Myc的mRNA相对表达量由0.95±0.05逐渐降低到0.46±0.05,差异有统计学意义（F=27.900,P=0.000）,蛋白相对表达量由1.12±0.11逐渐降低到0.14±0.03,差异有统计学意义（F=115.500,P=0.000）.而G-CSF的mRNA相对表达量由0.26±0.07逐渐升高到0.55±0.09,差异有统计学意义（F=7.817,P=0.004）,细胞分泌水平由（13.67±7.51）pg/ml逐渐升高到（128.30±25.77）pg/ml,差异有统计学意义（F=28.020,P=0.000）.结论 nm23-H1可能通过与c-Myc和G-CSF相互作用而发挥其诱导白血病HL-60细胞分化的作用.

关键词：白血病细胞分化粒细胞集落刺激因子

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自噬在急性淋巴细胞白血病中的作用

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中国实验血液学杂志 2016年第6期24卷 1905-1908页

作者：廖琼任霞姜国胜济南大学.山东省医学科学院医学与生命科学学院山东济南250062 山东省医学科学院基础医学研究所山东省现代医用药物与技术重点实验室.山东省医药卫生肿瘤免疫与中药免疫重点实验室山东济南250062

自噬是一个进化上高度保守的溶酶体降解途径,与急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)的发生、发展、治疗、耐药、复发等过程密切相关。在急性淋巴细胞白血病中,自噬是充当化疗耐药机制还是起着肿瘤抑制功能的作用,主... 详细信息

自噬是一个进化上高度保守的溶酶体降解途径,与急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)的发生、发展、治疗、耐药、复发等过程密切相关。在急性淋巴细胞白血病中,自噬是充当化疗耐药机制还是起着肿瘤抑制功能的作用,主要取决于细胞自噬所处的环境。明确不同治疗条件下自噬对ALL的不同作用,了解各种自噬信号通路,靶向联合自噬诱导剂或自噬抑制剂,将对ALL的治疗具有重要意义,尤其是有利于难治性复发患者的治疗。本文就自噬对ALL中的发生发展、耐药机制及治疗中的作用做一综述,为ALL治疗开发靶向自噬的新药提供一定的理论指导。

关键词：自噬急性淋巴细胞白血病急性淋巴细胞白血病发生急性淋巴细胞白血病治疗耐药

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全反式维甲酸诱导HL60细胞分化分子机制探讨

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中华肿瘤防治杂志 2015年第12期22卷 924-928页

作者：禹林昌宋冠华张之勇史美燕袁小芬任霞郭强姜国胜济南大学.山东省医学科学院医学与生命科学学院山东省医学科学院基础医学研究所.山东省现代医用药物与技术重点实验室.山东省医药卫生肿瘤免疫与中药免疫重点实验室

目的探讨全反式维甲酸(alltrans retinoic acid,ATRA)诱导HL-60细胞分化过程中PADI4的变化与作用机制。方法 ATRA诱导HL-60细胞24、48、72和96h后,采用Wright-Gimesa染色观察细胞形态学变化;采用流式细胞术检测细胞表面分化抗原CD11b的... 详细信息

目的探讨全反式维甲酸(alltrans retinoic acid,ATRA)诱导HL-60细胞分化过程中PADI4的变化与作用机制。方法 ATRA诱导HL-60细胞24、48、72和96h后,采用Wright-Gimesa染色观察细胞形态学变化;采用流式细胞术检测细胞表面分化抗原CD11b的表达变化;采用RT-PCR分析PADI4在基因水平的表达趋势,蛋白质印迹法检测PADI4在蛋白水平的表达变化;RNAi技术干扰PADI4后流式细胞仪检测CD11b变化,蛋白质印迹法检测PADI4、p42/44、p65、p105和p55等蛋白水平变化。结果 HL-60细胞经ATRA诱导后与对照组相比,Wright-Gimesa染色显示核质比明显减小,核有凹陷及分叶,杆状核、分叶核现象明显增多。流式细胞术检测结果显示,细胞表面分子CD11b表达由2.1%升高到48.9%,升高了346.8%,t=411.51,P<0.01;RT-PCR结果显示,PADI4在mRNA水平表达随时间延长逐渐升高,F=318.046,P<0.001,r=0.595;PADI4与内参基因GAPDH灰度值的比值从0.122±0.033升高到0.464±0.077,差异有统计学意义,F=16.002,P<0.001。蛋白质印迹法检测结果显示,PADI4在蛋白水平表达随时间延长逐渐升高,F=16.002,P<0.001,r=0.873;PADI4与内参GAPDH灰度值的比值分析从0.077±0.045升高到0.263±0.095,差异有统计学意义,F=221.8,P<0.000 1。蛋白质印迹法检测结果显示,P-p44/42与内参GAPDH灰度值的比值分析从0.470±0.023下降到0.320±0.012,差异有统计学意义,F=92.942,P<0.001。结论 ATRA诱导HL-60细胞定向粒系分化的过程中,PADI4促进HL-60细胞向粒系分化,而且PADI4可能是通过促进MAPK信号通路中的p42/44磷酸化而发挥作用。

关键词： HL-60 分化 PADI4 磷酸化 p42/44 白血病

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异补骨脂素对HL-60细胞增殖和凋亡影响及其机制探讨

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中华肿瘤防治杂志 2015年第21期22卷 1675-1679,1687页

作者：袁小芬孙亚梅张之勇李翠玲郭强宋冠华史美燕禹林昌任霞姜国胜济南大学.山东省医学科学院医学与生命科学学院山东济南250062 山东省医学科学院基础医学研究所.山东省现代医用药物与技术重点实验室.山东省医药卫生肿瘤免疫与中药免疫重点实验室山东济南250062 诸城市人民医院检验科山东诸城262200

目的异补骨脂素可抑制多种肿瘤细胞增殖,并诱导细胞凋亡,但是异补骨脂素对白血病细胞是否亦具有同样的作用却不明确。本研究旨在探讨异补骨脂素对人急性髓系白血病HL-60细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法采用MTT法检测不同浓度异补骨... 详细信息

目的异补骨脂素可抑制多种肿瘤细胞增殖,并诱导细胞凋亡,但是异补骨脂素对白血病细胞是否亦具有同样的作用却不明确。本研究旨在探讨异补骨脂素对人急性髓系白血病HL-60细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法采用MTT法检测不同浓度异补骨脂素(10、20、40、80和160μg/mL)作用于HL-60细胞24和48h后对HL-60细胞的增殖抑制作用;光镜观察细胞形态学变化;Annexin V/PI双染后采用流式细胞术检测细胞凋亡的改变;流式细胞术检测细胞周期的变化;分别采用RT-PCR和蛋白质印迹法检测Bcl-2家族Bcl-2和Bax的mRNA水平和蛋白水平表达变化。结果异补骨脂素对HL-60细胞的增殖具有明显的抑制作用,并呈现时间-剂量依赖性。10、20、40、80和160μg/mL异补骨脂素处理24h后,HL-60细胞的抑制率分别为(5.5±4.5)%、(13.7±3.1)%、(20.4±1.9)%、(35.3±5.5)%和(51.7±2.1)%,F=1 465.33,P<0.001;48h后对HL-60细胞的抑制率分别为(21.7±3.2)%、(34.6±5.6)%、(43.3±1.2)%、(61.4±8.76)%和(84.7±4.4)%,F=146.33,P<0.05,差异均有统计学意义。经异补骨脂素处理的HL-60细胞体积明显变小、且有凋亡小体产生,呈现典型的凋亡形态学改变;40μg/mL异补骨脂素处理HL-60细胞24h后细胞早期凋亡率为(16.6±2.7)%,与对照组的(2.8±1.5)%相比,差异有统计学意义,P<0.05;异补骨脂素不引起细胞周期阻滞,G0/G1期前出现典型亚二倍体凋亡峰。RT-PCR和蛋白质印迹法检测结果表明,异补骨脂素可上调Bax、下调Bcl-2的mRNA水平和蛋白水平表达。结论异补骨脂素可抑制人急性髓系白血病HL-60细胞增殖,并诱导其凋亡,其机制与促进Bax蛋白表达和抑制Bcl-2蛋白表达相关。

关键词：急性髓系白血病异补骨脂素细胞增殖细胞周期细胞凋亡 HL-60细胞流式细胞术

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PMA诱导K562细胞向单核细胞分化机制探讨

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中华肿瘤防治杂志 2014年第14期21卷 1049-1053页

作者：潘素飞任霞史美燕禹林昌张之勇姜国胜济南大学.山东省医学科学院医学与生命科学学院山东济南250062 山东省医学科学院基础医学研究所.山东省现代医用药物与技术重点实验室.山东省医药卫生肿瘤免疫与中药免疫重点实验室山东济南250062

目的:探讨佛波酯(phorbol-12-myristate-13-ace-tate,PMA)诱导K562细胞向单核/巨噬细胞分化的作用机制。方法:采用CCK8法检测0、6.25、12.5、25、50、100和200nmol/L PMA对K562细胞增殖的影响,应用Wright-Gimesa染色观察细胞形态学变化,采用流式细胞术检测细胞表面分化抗原CD11b和CD14的表达变化,采用RT-PCR分析TGF-β1及其下游基因SMAD3和SMAD4在基因水平的表达趋势,并采用蛋白质印迹法检测TGF-β1在蛋白水平的表达变化。结果:K562细胞经6.25nmol/L PMA处理后72h增殖抑制率为(22.03±2.7)%,12.5nmol/L为(31.04±4.3)%,25nmol/L为(35.03±3.5)%,50nmol/L为(47.01±4.1)%,100nmol/L为(55.06±5.2)%,200nmol/L为(76.72±5.4)%,差异有统计学意义,F=2.24,P<0.05。PMA能抑制K562细胞的增殖并能促进其分化,作用效果随剂量的加大逐渐增强;细胞形态学上趋向于成熟分化;细胞表面分子CD11b和CD14的表达量升高。在mRNA水平,TGF-β/SMAD信号通路因子TGF-β1的表达量随时间的延长逐渐升高其下游因子SMAD3和SMAD4的表达也呈上升趋势;在蛋白水平,TGF-β1的表达亦呈上升趋势。结论:PMA可通过促进TGF-β/SMAD信号的传导诱导白血病细胞株K562细胞向单核/巨噬细胞分化。

关键词：佛波酯 K562 分化 TGF-β SMAD 细胞增殖

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千金子甾醇诱导HL-60细胞凋亡机制研究

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中华肿瘤防治杂志 2014年第23期21卷 1865-1870页

作者：王杰伟郭菲张超任霞史美燕张洪海李霞姜国胜山东省医学科学院基础医学研究所.山东省现代医用药物与技术重点实验室.山东省医药卫生肿瘤免疫与中药免疫重点实验室山东济南250062 济南大学.山东省医学科学院医学与生命科学学院山东济南250022 章丘市妇幼保健院检验科山东济南250200 山东中医药大学附属医院山东济南250014 山东中医药大学药学院山东济南250014

目的探讨Bcl-2/Bax信号通路在千金子甾醇诱导HL-60白血病细胞发生凋亡中的作用及其分子机制研究。方法HL-60细胞培养体系中分别加入大、中、小剂量千金子甾醇溶液,甾醇溶液作用细胞24h后,采用CCK-8法检测千金子甾醇对HL-60细胞增殖的抑... 详细信息

目的探讨Bcl-2/Bax信号通路在千金子甾醇诱导HL-60白血病细胞发生凋亡中的作用及其分子机制研究。方法HL-60细胞培养体系中分别加入大、中、小剂量千金子甾醇溶液,甾醇溶液作用细胞24h后,采用CCK-8法检测千金子甾醇对HL-60细胞增殖的抑制作用,光镜下观察细胞形态学变化,AnnexinⅤ/PI流式细胞术检测细胞凋亡,RT-PCR法检测Bcl-2/Bax、Caspase-9和Caspase-3mRNA转录水平,ELISA法检测Caspase-9和Caspase-3蛋白活性。结果 CCK-8法检测结果显示,与对照组比较,千金子甾醇能明显抑制HL-60细胞增殖(F=42.97,P<0.001),各个浓度之间进行比较,差异有统计学意义,P<0.05。流式细胞术检测细胞凋亡率显著增加(F=56.74,P<0.001),经10、20和40μg/mL千金子甾醇处理24h后,HL-60细胞早期凋亡率分别为(23.4±3.1)%、(35.7±4.3)%和(53.2±3.9)%,细胞呈典型凋亡形态学改变。千金子甾醇作用后,Bax mRNA转录水平显著升高,Bcl-2mRNA转录水平显著降低,且呈化合物剂量依赖性(F=53.45,P<0.001),Caspase-9和Caspase-3 mRNA转录水平升高,且呈化合物剂量依赖性(F=34.21,P<0.001),千金子甾醇对HL-60细胞作用24h后Caspase-9和Caspase-3蛋白活性显著升高(F=54.33,P<0.001),且随着千金子甾醇浓度增加蛋白活性逐渐升高。结论千金子甾醇通过调节Bcl-2/Bax凋亡信号通路,诱导HL-60细胞凋亡,其作用呈明显剂量依赖性。

关键词：千金子甾醇白血病 HL-60细胞细胞凋亡 Bcl-2/Bax

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生化汤逆转甲氨蝶呤诱导的干扰素-γ免疫抑制作用

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中国中西医结合杂志 2011年第3期31卷 363-367页

作者：李霞迟学芝王丽周宪宾郭钰琪王彬郝钰姚成芳山东省医学科学院基础医学研究所山东省医药卫生中药免疫与肿瘤免疫重点实验室、山东省现代医用药物与技术重点实验室、免疫药理学实验室、山东省罕少见疾病重点实验室济南250062 山东警察学院济南250014 山东中医药大学附属医院济南250011

目的观察生化汤对甲氨蝶呤(MTX)诱导的干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)免疫抑制的逆转作用。方法 Balb/C孕鼠40只,随机分为对照组、生化汤组、MTX组、联合组,自妊娠第10天起分别给予生理盐水、生化汤、MTX、MTX联合生化汤处理,连续用... 详细信息

目的观察生化汤对甲氨蝶呤(MTX)诱导的干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)免疫抑制的逆转作用。方法 Balb/C孕鼠40只,随机分为对照组、生化汤组、MTX组、联合组,自妊娠第10天起分别给予生理盐水、生化汤、MTX、MTX联合生化汤处理,连续用药7天,末次给药后1h处死小鼠。计数各组孕鼠活胎数与死胎数,借以评价母胎排斥状态;采用流式细胞术胞内外因子双染色法检测孕鼠脾脏淋巴细胞中的IFN-γ+及CD3+CD4+IFN-γ+细胞比例,反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测脾脏单个核细胞中IFN-γ信使核糖核酸(mRNA)表达水平。结果与对照组比较,生化汤组死胎数略有增加(P>0.05),脾脏中IFN-γ+及CD3+CD4+IFN-γ+细胞阳性率分别升高了28.81%和35.61%(P<0.05),IFN-γmRNA表达升高(P<0.05);MTX处理后,死胎数明显增加,脾脏中IFN-γ+、CD3+CD4+IFN-γ+细胞比例较对照组分别降低了24.23%和26.77%,IFN-γmRNA表达明显降低(P<0.05)。MTX联合生化汤处理后,死胎数进一步增加,IFN-γ+、CD3+CD4+IFN-γ+细胞比例明显升高,较MTX组分别增加了64.96%、71.38%,IFN-γmRNA表达明显上调(P<0.05)。结论生化汤通过促进IFN-γ+Th1亚群分化,上调IFN-γ表达,逆转MTX对IFN-γ的抑制作用,进而促进母胎免疫排斥。

关键词：生化汤甲氨蝶呤干扰素-γ 免疫抑制母胎免疫排斥

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双酚A对人卵巢癌3AO细胞、前列腺癌DU145细胞及子宫内膜癌HHUA细胞增殖活性的影响

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环境与健康杂志 2011年第1期28卷 29-32页

作者：阴海鹏张玲李翠玲顾洪涛刘文敏许强赵勇山东省医学科学院基础医学研究所国家中医药管理局免疫药理学实验室山东省医药卫生肿瘤免疫与中药免疫重点实验室山东省现代医用药物与技术重点实验室山东济南250062 山东省医学科学院基础医学研究所卫生检验中心

目的研究环境雌激素双酚A(bisphenol A,BPA)对3种激素相关肿瘤细胞株———人卵巢癌3AO细胞、前列腺癌DU145细胞及子宫内膜癌HHUA细胞增殖活性的影响。方法分别用1‰无水乙醇(溶剂对照)、BPA(终浓度为10-9mol/L)和β-雌二醇(终浓度为10-... 详细信息

目的研究环境雌激素双酚A(bisphenol A,BPA)对3种激素相关肿瘤细胞株———人卵巢癌3AO细胞、前列腺癌DU145细胞及子宫内膜癌HHUA细胞增殖活性的影响。方法分别用1‰无水乙醇(溶剂对照)、BPA(终浓度为10-9mol/L)和β-雌二醇(终浓度为10-7 mol/L)染毒3AO、DU145及HHUA细胞。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞(细胞密度分别为1 000、3 000、5 000个/孔)的增殖活性,并采用逆转录-聚合酶链反应检测细胞增殖因子Ki67、增殖细胞核抗原(PCNA)的mRNA表达;采用电化学发光法检测糖类抗原15-3(CA15-3)在HHUA细胞培养上清液中的含量。结果与溶剂对照组比较,BPA组3AO、DU145及HHUA细胞的吸光度(A)值较高,差异均有统计学意义(P<0.05);对3AO、DU145及HHUA细胞的促增殖率分别为10.15%,14.04%及21.31%。β-雌二醇对DU145及HHUA细胞的促增殖率分别为14.91%及9.07%,而对3AO细胞未呈现促增殖活性(P>0.05)。与溶剂对照组比较,BPA染毒组3种细胞Ki67、PCNA mRNA的表达均较高,差异有统计学意义(P<0.05);β-雌二醇染毒组DU145、HHUA细胞Ki67、PCNA mRNA的表达均较高,差异有统计学意义(P<0.05),而3AO细胞Ki67、PCNA mRNA的表达与溶剂对照组比较,差异无统计学意义。与溶剂对照组比较,BPA染毒组和雌激素对照组HHUA细胞CA15-3分泌量均较高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 BPA可以促进3AO、DU145及HHUA细胞的增殖活性。

关键词：双酚A 细胞增殖环境雌激素细胞增殖抗原

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A23187诱导K562细胞分化为树突细胞的实验研究

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国际肿瘤学杂志 2011年第4期38卷 307-310页

作者：袁长金温培娥任霞姜国胜山东省医学科学院基础医学研究所国家中医药管理局免疫药理实验室山东省现代医用药物与技术重点实验室山东省医药卫生肿瘤免疫与中药免疫重点实验室济南250062

目的体外探讨A23187快速将人慢性白血病K562细胞定向诱导分化为树突细胞（DC）的实验方法.方法 K562细胞在含有A23187或细胞因子的条件下诱导分化为DC,倒置显微镜下观察细胞形态的变化,流式细胞术检测DC表面标志的改变,逆转录-聚合酶... 详细信息

目的体外探讨A23187快速将人慢性白血病K562细胞定向诱导分化为树突细胞（DC）的实验方法.方法 K562细胞在含有A23187或细胞因子的条件下诱导分化为DC,倒置显微镜下观察细胞形态的变化,流式细胞术检测DC表面标志的改变,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测各表面标志mRNA水平的变化,四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测其刺激淋巴细胞增殖的能力.结果 A23187以385 ng/ml的浓度诱导4 d后,倒置显微镜下可见部分K562细胞形态具有典型的树突样特征,DC标志CD1a、CD83、人类白细胞抗原（HLA）-DR、CD86、CD80在A23187组的表达较阴性对照组均有明显升高,其中A23187组分别为6.65±2.70、7.37±2.40、6.24±4.29、21.60±3.84、18.52±4.48,阴性对照组分别为2.80±0.52、1.85±0.56、2.25±0.47、6.69±0.83、9.%±3.53,差异均有统计学意义（P〈0.05）.K562细胞来源的DC具有刺激淋巴细胞增殖的能力.结论 A23187可以快速诱导人白血病细胞分化为有活性的DC.

关键词：白血病树突细胞 K562细胞离子载体

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