检索结果-内蒙古大学图书馆

病毒学报 2012年第6期28卷 615-620页

作者：李薛李德庆赵鹏崔治中山东农业大学动物科技学院山东省畜禽疫病防制工程技术研究中心泰安271018

为了研究ELISA和IFA检测鸡血清中ALV-A/B特异性抗体的相关性,将A/B亚群禽白血病病毒接种到DF1细胞上,用ELISA检测过的鸡血清作为一抗进行IFA检测,比较ELISA检测的S/P值与IFA检测的血清效价之间的相关性。结果表明ELISA检测鸡血清中ALV-... 详细信息

为了研究ELISA和IFA检测鸡血清中ALV-A/B特异性抗体的相关性,将A/B亚群禽白血病病毒接种到DF1细胞上,用ELISA检测过的鸡血清作为一抗进行IFA检测,比较ELISA检测的S/P值与IFA检测的血清效价之间的相关性。结果表明ELISA检测鸡血清中ALV-A/B抗体的S/P值与IFA检测ALV-A/B的血清效价之间存在显著正相关(r=0.974 35;P﹤0.001)。由此可推测ELISA检测鸡血清的S/P值与IFA检测的血清效价之间存在显著相关性,且呈正相关。IFA检测血清阳性率与ELISA检测结果完全一致,因此当血清样品数量少时,可用IFA检测替代ELISA检测,既节约检测成本也提高了检测的准确性。

关键词： A B亚群禽白血病病毒 ELISA IFA Pearson相关

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二株B亚群禽白血病病毒全基因组序列及其在细胞上的复制性比较

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病毒学报 2011年第5期27卷 447-455页

作者：武专昌朱美真边晓明马诚太赵鹏崔治中山东农业大学动物科技学院山东省畜禽疫病防制工程技术研究中心山东泰安271018

本研究比较了从山东地方品系鸡群分离到的二株B亚型禽白血病病毒(ALV)SDAU09E3和SDAU09C2的全基因组序列及它们在细胞培养上的复制动态。这二株ALV-B的同源性为95.4%,与GenBank中3株B亚群参考株之间的同源性也均在91.0%～94.9%间,而与... 详细信息

本研究比较了从山东地方品系鸡群分离到的二株B亚型禽白血病病毒(ALV)SDAU09E3和SDAU09C2的全基因组序列及它们在细胞培养上的复制动态。这二株ALV-B的同源性为95.4%,与GenBank中3株B亚群参考株之间的同源性也均在91.0%～94.9%间,而与其它亚群参考株的同源性均低于87.9%。与亚群无关的gag、pol基因和LTR的核苷酸序列比较表明,这二株ALV-Bgp85基因的gag和pol基因与所有比较的参考株的同源性均在93%以上。LTR与其他外源性ALV参考株的LTR间的同源性在72.6%～88.3%范围内,但与E亚群内源性ALV的LTR的同源性只有51.5%。然而,这二个ALV-B的LTR的同源性也只有74.8%,远低于其他基因组部分的同源性,特别是它们的LTR的U3区同源性只有68.8%,二者在二个CAAT分布上也显著不同。对这二株ALV-B在DF-1细胞上的复制动态比较表明,它们在细胞培养上清液中的TCID50值非常类似,但SDAU09E3株核衣壳蛋白p27抗原的含量显著高于SDAU09C2株。这表明,同一亚群的不同毒株在复制过程中,所表达的p27抗原量与所形成的具有传染性的病毒量间没有平行关系。这一差异与LTR-U3区的相关性则有待应用感染性克隆技术来做进一步深入研究。

关键词： B亚型禽白血病病毒全基因组核苷酸序列 LTR比较复制能力

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鸡IL-18cDNA的克隆及在大肠杆菌中的高效表达

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畜牧兽医学报 2005年第3期36卷 264-268页

作者：胡敬东崔治中赵宏坤山东农业大学山东省畜禽疫病防制工程技术研究中心泰安271018

运用RT PCR方法,从经脂多糖(LPS)诱导的鸡马立克氏病成淋巴细胞样细胞系 MDCC MSB1 总 RNA中扩增得到了鸡白细胞介素18(Chicken interleukin 18,ChIL 18)成熟蛋白基因的 cDNA,并将其克隆到 pMD18 T载体上。DNA序列测定表明,克隆得到的Ch... 详细信息

运用RT PCR方法,从经脂多糖(LPS)诱导的鸡马立克氏病成淋巴细胞样细胞系 MDCC MSB1 总 RNA中扩增得到了鸡白细胞介素18(Chicken interleukin 18,ChIL 18)成熟蛋白基因的 cDNA,并将其克隆到 pMD18 T载体上。DNA序列测定表明,克隆得到的ChIL 18 cDNA与国外报道的完全一致,包括终止密码子在内其编码区的长度为510bp,编码169个氨基酸残基的蛋白质。将ChIL 18 成熟肽段编码区定向克隆到原核表达载体 pGEX 6P 1中谷胱甘肽转移酶(GST)基因的下游,构建成原核表达质粒 pGEX ChIL18。该质粒的 BL21(DE3)LysS转化菌在 IPTG的诱导下可高效表达GST ChIL18基因融合蛋白,表达量约占菌体总蛋白的32%。

关键词： IL-18 克隆 DNA GST 诱导编码区白细胞介素18 高效表达原核表达质粒 IPTG

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鸡白细胞介素18成熟蛋白全长基因的克隆与序列测定

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中国兽医学报 2004年第2期24卷 119-121页

作者：胡敬东崔治中范伟兴刘文强赵宏坤山东农业大学山东省畜禽疫病防制工程技术研究中心山东泰安271018

根据已发表的鸡白细胞介素 18(IL- 18)成熟蛋白的 c DNA序列 ,设计 1对特异性引物 ,应用 RT- PCR从脂多糖(L PS)刺激 10 h活化的 MDCC- MSB1细胞中克隆到编码鸡 IL - 18成熟活性蛋白的完整基因片段 ,其大小为 5 10 bp。经序列测定证实 ... 详细信息

根据已发表的鸡白细胞介素 18(IL- 18)成熟蛋白的 c DNA序列 ,设计 1对特异性引物 ,应用 RT- PCR从脂多糖(L PS)刺激 10 h活化的 MDCC- MSB1细胞中克隆到编码鸡 IL - 18成熟活性蛋白的完整基因片段 ,其大小为 5 10 bp。经序列测定证实 ,所获得的 c DNA基因序列与文献报道的结果完全一致 ,从而为进一步研究鸡 IL- 18的基因表达、生物学活性以及应用奠定了基础。

关键词：鸡白细胞介素18 基因克隆序列测定

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禽白血病/肉瘤病毒肿瘤基因及其与致肿瘤机制的关系

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畜牧兽医学报 2012年第3期43卷 336-342页

作者：陈浩王一新赵鹏李建亮李德庆崔治中山东农业大学动物医学院/山东省畜禽疫病防制工程技术研究中心泰安271018

根据致瘤机制的差异,禽白血病/肉瘤病毒可以分为两大类,其差异主要在于所表达肿瘤基因的不同。慢性转化型病毒通过插入启动机制间接激活细胞原癌基因,肿瘤形成速度缓慢;急性转化型病毒则是直接转录表达病毒自身基因组中的病毒肿瘤基因,... 详细信息

根据致瘤机制的差异,禽白血病/肉瘤病毒可以分为两大类,其差异主要在于所表达肿瘤基因的不同。慢性转化型病毒通过插入启动机制间接激活细胞原癌基因,肿瘤形成速度缓慢;急性转化型病毒则是直接转录表达病毒自身基因组中的病毒肿瘤基因,从而诱导肿瘤的快速形成。作者拟对禽白血病/肉瘤病毒肿瘤基因及其与致肿瘤机制的关系进行综述。

关键词：细胞原癌基因病毒肿瘤基因插入启动急性转化型病毒

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免疫抑制性病毒多重感染在鸡群疫病发生和流行中的作用

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畜牧兽医学报 2003年第5期34卷 417-421页

作者：崔治中山东农业大学动物科技学院山东省畜禽疫病防制工程技术研究中心泰安271018

根据近几年各地大型鸡场不同类型病鸡的实验室鉴别诊断结果,结合国内外的研究进展,本文对不同免疫抑制性病毒多重感染在鸡群疫病发生和流行中的作用做了全面的分析和探索。现有资料表明,不同的免疫抑制性病毒的亚临床感染在规模化畜禽... 详细信息

根据近几年各地大型鸡场不同类型病鸡的实验室鉴别诊断结果,结合国内外的研究进展,本文对不同免疫抑制性病毒多重感染在鸡群疫病发生和流行中的作用做了全面的分析和探索。现有资料表明,不同的免疫抑制性病毒的亚临床感染在规模化畜禽群体中是非常普遍的,但往往只有在同一个体发生二重或多重感染时,在它们的相互作用下对个体和群体造成的免疫抑制和其它病理反应才比较明显。在此基础上,本文提出了"条件致病性病毒"的概念,并对其含义和内涵作了讨论。这一观念的引入,可能有助于理解和解释高密度饲养鸡群中疫病的复杂性及其控制的艰难性。鸡群中的免疫抑制性病毒的多重感染造成一部分个体处于"不完全免疫状态",使许多已经多次强化免疫的鸡场中仍有部分个体成为A类病病毒侵袭的对象并成为新的传染源,也容易造成在"免疫选择压"作用下病毒的抗原变异。此外,同一个个体的多重病毒感染,为病毒间通过基因重组产生新病毒创造了条件。

关键词：免疫抑制性病毒多重感染鸡群疫病发生流行特点临床感染规模养殖免疫抑制病理反应

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对鸡群A／B亚群禽白血病病毒抗体ELISA检测阳性率的可靠性评估

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中国畜牧兽医 2014年第6期41卷 197-203页

作者：段伦涛赵鹏董宣王一新崔治中山农农业大学动物科技学院山东省畜禽疫病防制工程技术研究中心山东泰安271018

为了评估某些批次的禽白血病病毒(ALV)抗体商品化ELISA检测试剂盒在检测鸡群中A/B亚群禽白血病病毒(ALV-A/B)抗体阳性率的可靠性,使用同一批次试剂盒,对往年ALV-A/B抗体检测阳性率达标(1%)的B类鸡场所送检样品进行初检,在A类鸡场初检阳... 详细信息

为了评估某些批次的禽白血病病毒(ALV)抗体商品化ELISA检测试剂盒在检测鸡群中A/B亚群禽白血病病毒(ALV-A/B)抗体阳性率的可靠性,使用同一批次试剂盒,对往年ALV-A/B抗体检测阳性率达标(<1%)的A类鸡场及往年ALV-A/B抗体检测阳性率不达标(>1%)的B类鸡场所送检样品进行初检,在A类鸡场初检阳性样品中挑选S/P值最高的8份阳性样品,在B类鸡场初检阳性样品中挑选S/P值最高的40份样品,再使用相同批次的试剂盒将每个初检阳性样品做3个孔的重复检测,并以上述48份样品为一抗同时做间接免疫荧光试验(IFA),系统比较了IFA和ELISA 2种方法检测结果的一致性。结果发现,A类鸡场初检为阳性的8份样品经复检和IFA检测均变为阴性;B类鸡场4份样品(4/40)ELISA复检和IFA结果均变为阴性,36份样品(36/40)ELISA复检仍为阳性,但其中20份呈IFA阳性,16份呈IFA阴性,结果表明某些批次的试剂盒在特异性和稳定性方面存在一定问题。提示,相关企业在进行大批量样本检测时,ELISA阳性样品需结合IFA进行结果判定,以提高检测的准确性。

关键词： A B亚群禽白血病毒间接免疫荧光 ELISA 稳定性特异性

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24株鸡源丁酸梭菌的分离鉴定及耐药基因与毒力基因携带情况

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微生物学报 2021年第1期61卷 115-126页

作者：范伟祥曹艳丽崔璐璐逯晓寒林海孙淑红山东农业大学动物科技学院山东泰安271000 山东省动物生物工程与疾病防治重点实验室山东泰安271000 山东省畜禽疫病防制工程技术研究中心山东泰安271000

【目的】旨在对鸡源丁酸梭菌进行分离鉴定与安全性评估。【方法】利用厌氧培养方法对源自汶上芦花鸡与SPF鸡粪便样品进行丁酸梭菌的分离与纯化,挑选可疑菌落进行微生物质谱鉴定,进一步通过16S rRNA基因测序进行鉴定,16S rRNA测序结果与N... 详细信息

【目的】旨在对鸡源丁酸梭菌进行分离鉴定与安全性评估。【方法】利用厌氧培养方法对源自汶上芦花鸡与SPF鸡粪便样品进行丁酸梭菌的分离与纯化,挑选可疑菌落进行微生物质谱鉴定,进一步通过16S rRNA基因测序进行鉴定,16S rRNA测序结果与NCBI核苷酸数据库中丁酸梭菌的16S rRNA序列进行同源性分析;同时,进行所有分离株对氧氟沙星、头孢吡肟等9种药物的药敏试验,利用PCR方法进行mefA等23种耐药基因扩增,基于益生菌安全要求对样品进行alpha等4种梭菌毒素基因以及typeA等4种肉毒毒素基因的测定。【结果】共分离鉴定了24株丁酸梭菌。24株均对氧氟沙星等7种抗生素表现为敏感,L-1、L-6、L-12仅对新霉素表现为中介,L-19仅对头孢吡肟表现为中介。全部菌株的mefA等16种耐药基因结果全部为阴性,sul2、flor、blaTEM 3种耐药基因全部呈阳性,tetC携带率为79.2%,cmlA携带率为45.8%,blaOXA携带率为37.5%,aadB携带率为12.5%,qnrA携带率为4.2%。PCR结果显示所有分离菌株的alpha、beta、epsilon、iota等4种梭菌毒素基因携带率0%。全部分离菌株均未携带typeA、typeB、typeE、typeF 4种肉毒毒素基因。【结论】结果表明,从未饲喂抗生素和丁酸梭菌的汶上芦花鸡与SPF鸡群中获得的24株丁酸梭菌分离株达到预期的安全性要求,可作为益生添加菌的筛选参考株。

关键词：丁酸梭菌药敏试验耐药基因梭菌毒素基因肉毒毒素基因

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检测鸡TRIM25蛋白的免疫组化方法

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畜牧兽医学报 2018年第4期49卷 865-870页

作者：禇颖马文杰胡卫国陈茹邱建华郭慧君李宏梅山东农业大学动物科技学院山东省动物生物工程与疾病防治重点实验室山东省畜禽疫病防制工程技术研究中心泰安271018

为建立检测鸡TRIM25蛋白表达的免疫组化方法,根据发表的鸡TRIM25基因序列,设计引物,从海兰褐鸡脾中扩增TRIM25基因,构建重组原核表达质粒,通过诱导表达获得重组TRIM25蛋白,经纯化后免疫接种兔和小鼠,获得高效价血清抗体,用该抗体建立免... 详细信息

为建立检测鸡TRIM25蛋白表达的免疫组化方法,根据发表的鸡TRIM25基因序列,设计引物,从海兰褐鸡脾中扩增TRIM25基因,构建重组原核表达质粒,通过诱导表达获得重组TRIM25蛋白,经纯化后免疫接种兔和小鼠,获得高效价血清抗体,用该抗体建立免疫组化方法,对鸡肺、脾、肝组织中TRIM25蛋白进行检测。结果显示,克隆的鸡TRIM25抗原基因大小为1 012bp,构建的重组表达质粒能够在大肠杆菌中稳定表达,经纯化后的重组蛋白质能够诱导兔和小鼠产生效价为1∶106以上的血清抗体,该血清抗体免疫组化检测发现鸡肺、脾和肝组织中均有不同程度的TRIM25蛋白表达,在肺组织中主要存在肺泡周围的内皮细胞、淋巴细胞等的细胞质内;脾组织主要出现在脾淋巴细胞和血管内皮细胞等的细胞质中;肝组织中主要出现在肝小叶肝细胞、淋巴细胞以及血管内皮细胞细胞质中。该研究为深入研究鸡TRIM25蛋白的组织分布、动态表达和生物学活性提供物质基础和方法依据。

关键词：鸡 TRIM25 多克隆抗体免疫组化

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盐碱地苜蓿对伊拉肉兔内脏器官发育及血液生化指标的影响

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经济动物学报 2020年第2期24卷 63-67+77页

作者：姚红梅李鹏庄梦晖李家军吴振宇刘公言郭慧君邱建华山东农业大学动物科学技术学院山东省动物生物工程与疾病防治重点实验室山东省畜禽疫病防制工程技术研究中心

为研究盐碱地种植苜蓿饲喂肉兔,对其内脏及生殖器官、胃肠道发育和血液生化指标的影响,分别以盐碱地种植苜蓿、常规苜蓿、常规花生秧为日粮中草粉来源,制成肉兔颗粒料,设计3组,每组20只断奶伊拉肉兔,正式试验期40 d。结果表明:与其他两... 详细信息

为研究盐碱地种植苜蓿饲喂肉兔,对其内脏及生殖器官、胃肠道发育和血液生化指标的影响,分别以盐碱地种植苜蓿、常规苜蓿、常规花生秧为日粮中草粉来源,制成肉兔颗粒料,设计3组,每组20只断奶伊拉肉兔,正式试验期40 d。结果表明:与其他两组相比,盐碱地苜蓿组肉兔的心、脾、胸腺、睾丸和小肠发育影响不显著(P>0.05),肝质量显著高于普通苜蓿组(P<0. 05),肝、肺发育指数显著高于普通花生秧组(P<0. 05),卵巢质量及发育指数低于普通苜蓿组(P<0. 05);胃、盲肠质量,盐碱地苜蓿组>普通花生秧组>普通苜蓿组;高密度脂蛋白、血糖、球蛋白、甘油三酯水平与其他两组相比差异不显著(P>0.05),总胆固醇、低密度脂蛋白水平显著低于普通普通苜蓿组(P<0. 05);血清总蛋白、白蛋白水平显著低于普通花生秧组(P<0. 05);尿素氮水平显著高于其他两组(P<0. 05)。说明通过科学设计饲料配方,结合高效养殖技术,盐碱地种植苜蓿可以作为生长期肉兔日粮的草粉来源,不影响心、脾、胸腺、睾丸、小肠的发育以及血糖、甘油三酯、高密度脂蛋白和球蛋白水平。

关键词：盐碱地苜蓿伊拉肉兔内脏器官发育血液生化指标生殖腺

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