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《医林改错》之益气活血法浅析

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山西大同大学学报（自然科学版） 2021年第1期37卷 77-79页

作者：任思思郭文娟韩庆贤张赞宋丽娟王青柴智李俊莲马存根山西中医药大学国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点研究室山西晋中030619 大同市第三人民医院山西大同037009 山西大同大学脑科学研究所山西大同037009

“人之所有者,血与气耳”,气血是构成人体重要的物质基础,历代医家辨证论治皆不离气血。王清任在《医林改错》中以气血关系为基,创立了一系列有关活血化瘀的方剂,完善了益气活血的理法方药,为后世医家论治疾病提供了新思路。

关键词：王清任医林改错气虚血瘀益气活血

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枸杞多糖通过抑制TLR4/NF-κB信号通路促进LPS诱导的BV2小胶质细胞M2型极化

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细胞与分子免疫学杂志 2021年第12期37卷 1066-1072页

作者：王玉银魏文悦郭敏芳李苏垚柴智马存根降雨强宋丽娟尉杰忠山西中医药大学神经生物学研究中心国家中医药管理局益气活血法治疗多发性硬化重点研究室山西晋中030619 山西大同大学脑科学研究所炎性神经退行性疾病山西省重点实验室山西大同037009 山西医科大学第一临床医学院神经内科山西太原030001 中国科学院遗传与发育生物学研究所北京100101 大同市第五人民医院神经内科山西大同037009

目的探讨枸杞多糖(LBP)对脂多糖(LPS)诱导的BV2小胶质细胞由M1型向M2型极化的作用及其机制。方法实验分为对照组、LPS组、(0.6、0.9、1.2)g/L LBP处理组。噻唑蓝(MTT)法检测LBP对BV2细胞活性的影响,Griess法检测细胞一氧化氮(NO)释放量,... 详细信息

目的探讨枸杞多糖(LBP)对脂多糖(LPS)诱导的BV2小胶质细胞由M1型向M2型极化的作用及其机制。方法实验分为对照组、LPS组、(0.6、0.9、1.2)g/L LBP处理组。噻唑蓝(MTT)法检测LBP对BV2细胞活性的影响,Griess法检测细胞一氧化氮(NO)释放量,ELISA检测细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)的分泌,免疫荧光细胞化学染色法检测Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)、一氧化氮合酶(iNOS)和精氨酸酶1(Arg1)的表达,Western blot法检测钙离子结合接头蛋白分子1(Iba-1)、TLR4、NF-κB、iNOS和Arg1的蛋白水平。结果不同剂量LBP处理后,细胞存活率无明显变化。与正常组相比,LPS组小胶质细胞活化明显,呈阿米巴样,NO释放量增加;Iba-1、TLR4、NF-κB、iNOS、TNF-α、IL-1β、IL-6含量增加,Arg1和IL-10含量降低。LBP组Iba-1、TLR4、NF-κB、iNOS、TNF-α、IL-1β、IL-6含量降低,与剂量呈负相关,Arg1和IL-10含量增加,与剂量呈正相关。结论LBP可能通过阻断TLR4/NF-κB信号通路抑制LPS诱导的BV2细胞活化并促进激活的BV2细胞由M1型向M2型极化。

关键词：枸杞多糖(LBP) 脂多糖(LPS) BV2细胞 M2型极化 Toll样受体4(TLR4) 核因子κB(NF-κB)

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Mdivi-1对cuprizone诱导的脱髓鞘性病变小鼠少突胶质细胞的保护作用

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中国病理生理杂志 2020年第6期36卷 1115-1121页

作者：李艳花刘晓琴牛春红黄芳薛秀花徐芳张晓娟尉杰忠马存根山西大同大学脑科学研究所神经炎症及变性疾病基础与应用研究山西省重点实验室山西大同037009 北京师范大学细胞增殖及调控生物学教育部重点实验室北京100875 山西中医药大学神经生物学研究中心国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点研究室山西晋中030619

目的:探讨线粒体分裂抑制剂1(Mdivi-1)对cuprizone诱导的脱髓鞘性病变模型小鼠少突胶质细胞损伤的作用及其机制。方法:将8周龄雄性C57BL/6小鼠用含0. 2%cuprizone的饲料饲喂,制备脱髓鞘性病变模型。将小鼠随机分为DMSO正常组(腹腔注射DM... 详细信息

目的:探讨线粒体分裂抑制剂1(Mdivi-1)对cuprizone诱导的脱髓鞘性病变模型小鼠少突胶质细胞损伤的作用及其机制。方法:将8周龄雄性C57BL/6小鼠用含0. 2%cuprizone的饲料饲喂,制备脱髓鞘性病变模型。将小鼠随机分为DMSO正常组(腹腔注射DMSO+饲喂正常饲料)、cuprizone模型组(饲喂含cuprizone的饲料)、DMSO+cuprizone模型组(腹腔注射DMSO+饲喂含cuprizone的饲料)和Mdivi-1干预组(腹腔注射Mdivi-1+饲喂含cuprizone的饲料)。通过固蓝染色及PLP、p-Drp1(Ser616)、CFB、C1q、C3b和C5b-9的免疫荧光染色实验检测Mdivi-1对髓鞘和少突胶质细胞的保护作用。结果:饲喂含cuprizone的饲料42 d可成功诱导小鼠脱髓鞘性病变模型,导致大脑胼胝体区髓鞘丢失,诱导Drp1磷酸化水平升高及C1q和CFB补体途径激活,并导致攻膜复合体在少突胶质细胞上组装。给予Mdivi-1可明显减少髓鞘丢失,抑制补体激活和攻膜复合体在少突胶质细胞的组装。结论:Mdivi-1干预可缓解cuprizone诱导的小鼠脱髓鞘病理学改变,其机制可能与抑制补体激活替代途径有关。

关键词： Cuprizone 脱髓鞘性病变线粒体分裂抑制剂1 少突胶质细胞补体

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基于生物信息学技术筛选缺血性脑卒中相关转录因子及中药活性成分研究

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实用心脑肺血管病杂志 2023年第3期31卷 74-80,86页

作者：魏汝恒苗珠月戴瑶瑶刘可心韩光远张海飞宋丽娟马东马存根山西中医药大学神经生物学研究中心国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点研究室山西省晋中市030619 山西大同大学脑科学研究所大同市第五人民医院大同大学附属第一临床医院神经科山西省大同市037009 国药同煤集团总医院神经外科山西省卫生健康委员会神经疾病防治重点实验室山西省大同市037003 山西医科大学细胞生理学省部共建教育部重点实验室山西省太原市030001

目的基于生物信息学技术筛选缺血性脑卒中(IS)相关转录因子(TF)及中药活性成分。方法在基因表达综合数据库(GEO)中选择GSE16561、GSE58294、GSE162955芯片数据集,使用R 4.0.5软件对GSE16561、GSE58294数据集进行预处理并筛选差异表达基... 详细信息

目的基于生物信息学技术筛选缺血性脑卒中(IS)相关转录因子(TF)及中药活性成分。方法在基因表达综合数据库(GEO)中选择GSE16561、GSE58294、GSE162955芯片数据集,使用R 4.0.5软件对GSE16561、GSE58294数据集进行预处理并筛选差异表达基因(DEGs),然后进行基因集富集分析(GSEA)。通过STRING平台构建DEG的蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络并筛选关键DEG,通过GSE162955数据集绘制ROC曲线,以评估关键DEG对IS的诊断价值;然后通过TRRUST平台构建TF-miRNA-核心DEG调控网络,筛选枢纽TF、主要miRNA及核心DEG。通过Coremine Medical及Uniprot平台预测并筛选IS相关中药活性成分。结果韦恩图结果显示,GSE16561数据集和GSE58294数据集的交集DGEs共220个,包括130个上调DGEs和90个下调DEGs。GSEA结果显示,KEGG通路主要富集在MAPK信号通路、神经营养因子信号通路和趋化因子信号通路;GO功能生物过程主要富集在中心粒细胞外渗,细胞成分主要富集在细胞器内膜,分子功能主要富集在电子传递活动。通过PPI网络共筛选出10个关键DEG,其中Janus激酶(JAK)2〔AUC=0.944,95%CI(0.816,1.000)〕、Toll样受体(TLR)4〔AUC=0.833,95%CI(0.580,1.000)〕、CD247〔AUC=0.667,95%CI(0.309,1.000)〕、CC趋化因子受体(CCR)7〔AUC=0.639,95%CI(0.273,1.000)〕、基质金属蛋白酶(MMP)9〔AUC=0.861,95%CI(0.641,1.000)〕、FCGR2A〔AUC=0.722,95%CI(0.361,1.000)〕对IS具有一定诊断价值。TF-miRNA-核心DEG调控网络分析结果显示,枢纽TF为SPI1、信号转导因子和转录激活因子(STAT)3、缺氧诱导因子(HIF)1A、RELA,主要miRNA为hsa-miR-8085、hsamiR-183、hsa-miR-324-3p,核心DEG为JAK2、TLR4、CCR7、MMP9。通过Coremine Medical及Uniprot平台筛选出的IS相关主要中药活性成分为槲皮素、山柰酚、β-谷甾醇、豆甾醇、黄芩苷、人参皂甙rh2。结论IS相关的枢纽TF为RELA、SPI1、HIF1A和STAT3,主要miRNA为hsa-miR-8085、hsa-miR-183-5p和hsa-miR-324-3p,核心DEG为JAK2、TLR4、CCR7、MMP9,中药活性成分为槲皮素、山柰酚、β-谷甾醇、豆甾醇、黄芩苷、人参皂甙rh2。

关键词：卒中缺血性脑卒中生物信息学转录因子中药

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脂多糖诱导星形胶质细胞炎性反应的机制研究

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山西大同大学学报（自然科学版） 2021年第2期37卷 47-50,73页

作者：郭敏芳张慧宇穆秉桃尉杰忠马存根山西大同大学脑科学研究所山西大同037009 大同市第五人民医院神经科山西大同037009 国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点研究室/神经生物学研究中心山西中医药大学山西晋中030619

目的探讨脂多糖(LPS)诱导星形胶质细胞产生炎性反应及其可能机制。方法原代培养并鉴定C57BL/6小鼠大脑皮质星形胶质细胞,GFAP免疫荧光染色进行鉴定,1μg/mL LPS刺激第2代星形胶质细胞,正常组细胞作为对照,Griess法检测NO的释放,ELISA检... 详细信息

目的探讨脂多糖(LPS)诱导星形胶质细胞产生炎性反应及其可能机制。方法原代培养并鉴定C57BL/6小鼠大脑皮质星形胶质细胞,GFAP免疫荧光染色进行鉴定,1μg/mL LPS刺激第2代星形胶质细胞,正常组细胞作为对照,Griess法检测NO的释放,ELISA检测细胞因子IL-6、IL-1β和TNF-α的水平,免疫荧光法和Western blot法检测iNOS和NF-κB的表达。结果 GFAP免疫荧光染色结果显示星形胶质细胞纯度可达95%以上;与正常组比较,LPS刺激星形胶质细胞后,NO、IL-6、IL-1β和TNF-α的分泌显著增加,免疫荧光和Western blot结果均显示iNOS和NF-κB的表达明显升高。结论 LPS可以通过NF-κB信号途径,引发星形胶质细胞产生炎性反应。

关键词：脂多糖星形胶质细胞炎性反应

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中医药治疗多发性硬化的优势

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辽宁中医杂志 2021年第1期48卷 61-63页

作者：张赞任思思陈棒李娟朱建华张晓雪李艳彦于婧文马存根李俊莲山西中医药大学国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点研究室/基础医学院山西愉次030619 山西大同大学脑科学研究所/中枢神经炎症变性疾病新药创制省市共建山西省重点实验室培育基地山西大同037009

多发性硬化目前病因及发病机制尚不明确。西医给予免疫治疗、激素冲击,虽能短效控制,但长期应用费用昂贵且不良反应大。联合中医药分期治疗、辨证论治、审因论治等不仅可以控制病情,减少发作,并且可以弥补西药产生的不良反应。

关键词：分期治疗辨证论治审因论治特殊疗法

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黄芪甲苷对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的防治作用

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中华中医药杂志 2020年第6期35卷 3119-3122页

作者：刘建春张红珍郭文娟柴智尉杰忠于婧文肖保国马存根山西中医药大学神经生物学研究中心国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点实验室晋中030619 山西大同大学脑科学研究所大同037009 复旦大学附属华山医院神经病学研究所上海200025

目的:探讨黄芪甲苷(AST-Ⅳ)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠的防治作用及作用机制。方法:C57BL/6雌性小鼠18只,采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白多肽35-55(MOG35-55)诱导建立EAE模型,随机分为EAE对照组,AST-Ⅳ高、低剂量组。造模的第3天... 详细信息

目的:探讨黄芪甲苷(AST-Ⅳ)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠的防治作用及作用机制。方法:C57BL/6雌性小鼠18只,采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白多肽35-55(MOG35-55)诱导建立EAE模型,随机分为EAE对照组,AST-Ⅳ高、低剂量组。造模的第3天起,进行注射用药,持续25d。EAE对照组腹腔注射PBS;AST-Ⅳ高、低剂量组分别腹腔注射AST-Ⅳ溶液30、15mg·kg^-1·d^-1;各组小鼠每次给药0.2mL/只,隔天记录体质量变化。HE染色检测脊髓炎细胞浸润。流式细胞术检测脾中CD_4^+T淋巴细胞表型的表达情况。Western Blot法检测脊髓TLR4、Myd88、NF-κB/p65的表达变化。结果:与EAE对照组比较,AST-Ⅳ高剂量组可显著降低平均最高临床评分(P<0.01),减轻EAE临床症状;抑制脊髓炎性细胞浸润;显著增加CD_(25)^+和TGF-β^+的CD_4^+T细胞亚群的比例(P<0.01),降低CD_4^+IL-17^+的比例(P<0.01),明显抑制TLR4、Myd88、NF-κB/p65在脊髓的表达(P<0.05,P<0.01)。结论:AST-Ⅳ可能通过调节Th17细胞与Treg细胞两者之间的平衡和调节炎性通路减轻EAE的发病程度。

关键词：多发性硬化黄芪甲苷实验性自身免疫性脑脊髓炎 CD4+T细胞 TLR4 Myd88 NF-κB/p65

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二氢丹参酮Ⅰ(DHTS1)通过抑制双环己酮草酰二腙诱导的小鼠小胶质细胞激活减轻髓鞘损伤

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细胞与分子免疫学杂志 2020年第5期36卷 404-412页

作者：徐芳张晓娟刘晓琴张伟佘晓岚薛秀花边疆郭敏芳尉杰忠马存根李艳花山西中医药大学国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点研究室神经生物学研究中心山西晋中030619 山西大同大学脑科学研究所神经炎症及变性疾病基础与应用研究山西省重点实验室山西大同037009 北京师范大学细胞增殖及调控生物学教育部重点实验室北京100875

目的探讨二氢丹参酮I(DHTS1)对双环己酮草酰二腙(cuprizone)诱导脱髓鞘保护作用的机制。方法DHTS1溶解于5 g/L羧甲基纤维素钠(CMC-Na)中,饲喂小鼠含2 g/L cuprizone的饲料制备脱髓鞘模型,给予DHTS1处理,实验动物随机分为CMC-Na正常组、C... 详细信息

目的探讨二氢丹参酮I(DHTS1)对双环己酮草酰二腙(cuprizone)诱导脱髓鞘保护作用的机制。方法DHTS1溶解于5 g/L羧甲基纤维素钠(CMC-Na)中,饲喂小鼠含2 g/L cuprizone的饲料制备脱髓鞘模型,给予DHTS1处理,实验动物随机分为CMC-Na正常组、CMC-Na联合cuprizone处理组、DHTS1联合cuprizone处理组。通过固蓝(LFB)组织化学染色、免疫荧光组织化学染色检测髓鞘碱性蛋白(MBP)和髓鞘蛋白脂(PLP)的表达判断髓鞘完整性,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡;免疫荧光组织化学染色检测小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白钙离子结合接头蛋白分子1(Iba-1)、CD86、CD163的表达确定小胶质细胞极化情况。脂多糖(LPS)极化SIM-A9小胶质细胞,DHTS1处理,实验分为CMC-Na对照组、DHTS1对照组、CMC-Na联合LPS处理组和DHTS1联合LPS处理组。流式细胞术检测CD16/32、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)阳性细胞比例。结果与CMC-Na联合cuprizone模型组比较,DHTS1处理明显减少cuprizone诱导的小鼠大脑胼胝体区髓鞘脱失,减少细胞凋亡,减少Iba-1^+阿米巴样小胶质细胞的面积,减少CD86^+细胞数目,增加CD163^+细胞数目。与CMC-Na联合LPS处理组相比,DHTS1明显减少CD16/32^+、TNF-α^+、iNOS^+小胶质细胞的百分比。结论DHTS1可以抑制cuprizone诱导的脱髓鞘和细胞凋亡,可能与DHTS1调节小胶质细胞极化,减轻中枢神经系统炎症反应有关。

关键词：二氢丹参酮I(DHTS1) 双环己酮草酰二腙脱髓鞘小胶质细胞

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从瘀血致病到益气活血之思想发展探析

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山西大同大学学报（自然科学版） 2021年第6期37卷 71-74页

作者：任思思宋丽娟韩庆贤张赞李晓慧李俊莲马存根山西中医药大学国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点研究室/基础医学院山西晋中030619 大同市第三人民医院山西大同037009 山西大同大学脑科学研究所/中枢神经炎症变性疾病新药创制省市共建山西省重点实验室培育基地山西大同037009

瘀血学说起源于《内经》,瘀血理论在张仲景《伤寒杂病论》中得到发展,从“瘀血”二字的提出,到相关病因、症状、脉象、诊断、治法方药,至今应用广泛。受仲景瘀血论的启发,王清任在其基础上,重释气血,将气虚作为瘀血之因,细致瘀血症状,... 详细信息

瘀血学说起源于《内经》,瘀血理论在张仲景《伤寒杂病论》中得到发展,从“瘀血”二字的提出,到相关病因、症状、脉象、诊断、治法方药,至今应用广泛。受仲景瘀血论的启发,王清任在其基础上,重释气血,将气虚作为瘀血之因,细致瘀血症状,再次拓宽致病范畴;并对《伤寒杂病论》中活血化瘀用药配伍规律加以运用、升华,最终形成益气活血法则,为临床诊治提供了思路。

关键词：张仲景瘀血王清任益气活血

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论“天地合气”嬗变为“肺脾合化”在人体气血生成中的作用

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山西中医药大学学报 2020年第2期21卷 89-91页

作者：郭文娟任思思张红珍李俊莲马存根山西中医药大学神经生物学研究中心国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点研究室山西晋中030619 山西大同大学脑科学研究所山西大同037009

"天地合气命之曰人","人之所有者,血与气耳"。人生存于天地之间,天食人以五气,地食人以五味,用取象比类的中医思维,将人体"天地"嬗变为肺、脾,"天地合气"嬗变为"肺脾合化"。通过梳... 详细信息

"天地合气命之曰人","人之所有者,血与气耳"。人生存于天地之间,天食人以五气,地食人以五味,用取象比类的中医思维,将人体"天地"嬗变为肺、脾,"天地合气"嬗变为"肺脾合化"。通过梳理《内经》气血生成的理论,认识"肺脾合化"在人体气血生成过程中的重要性,对于丰富中医气血理论内涵,指导中医气血辨证,拓宽相关疾病的治疗思路等,都具有重要的意义。

关键词：天地合气肺脾合化取象比类气血生成守正创新

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