目的探讨硒对氟诱导NRK-52E细胞凋亡的拮抗作用。方法实验设对照组、染氟组、染硒组、硒干预组,培养NRK-52E细胞,染毒72 h,采用流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测AMPK及线粒体通路相关蛋白表达水平。结果与对照组[(5.97±0.09)%]比较,5、20 mg/L Na F组细胞凋亡率[分别为(7.92±0.24)%、(11.06±0.17)%]明显升高(P<0.05);与20 mg/L Na F组比较,17.1、34.2μg/L硒干预组细胞凋亡率[分别为(8.46±0.09)%、(9.88±0.08)%]明显降低(P<0.05);与对照组比较,20 mg/L Na F组细胞AMPK磷酸化蛋白、bax、Cyt-C蛋白表达[分别为(0.73±0.16)、(0.99±0.16)、(0.73±0.08)]、活性caspase-9和caspase-3蛋白表达[分别为(1.17±0.17)、(1.51±0.42)]均升高(P<0.05);与20 mg/L Na F组比较,17.1、34.2 g/L硒干预组AM PK磷酸化蛋白表达量[分别为(0.46±0.12)、(0.48±0.15)]、bax、Cyt-C蛋白表达量[分别为(0.55±0.09)、(0.61±0.16)与(0.30±0.06)、(0.34±0.05)]及活性caspase-9、caspase-3蛋白表达量[分别为(0.76±0.11)、(0.40±0.12)与(0.35±0.12)、(0.27±0.04)]均降低(P<0.05)。结论 AMPK介导的线粒体通路参与了硒拮抗氟诱导NRK-52E细胞凋亡过程。
目的改进制备小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)的方法。方法动物分为3组,第1组和第2组采用传统方法:使用静脉留置针对小鼠全肺进行支气管肺泡灌洗术;第3组采用改进方法:使用自制注射器对小鼠全肺进行支气管肺泡灌洗术。每只动物灌洗3次,每次0.5 m L,并计时。支气管肺泡灌洗液离心,分离上清液准确测量其体积。结果灌洗液收集时间比较,第1组和第2组每只小鼠用时约10 min,第3组每只小鼠用时约4 min,差异有显著性(P<0.05);小鼠支气管肺泡灌洗液体积测量比较,第3组分别多于第1组和第2组,差异有显著性(P<0.05)。结论改进后的方法可简便、经济、高效地收集支气管肺泡灌洗液,特别适合初学研究者使用。
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