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2016第十四届中国北方实验动物科技年会

作者：高继萍李莉红常凯宋国华王春芳陈朝阳山西医科大学实验动物中心实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室山西太原 030001

目的：探讨硒对氟诱导大鼠肾小管上皮(NRK-52E)细胞凋亡及Caspase-3和Caspase-8mRNA表达的影响. 方法：取处于对数生长期的肾小管上皮细胞,分别加入0(对照)、5、20mg/LNaF溶液和(或)17.1、34.2μg/L亚硒酸钠溶液继续培养0、24、48、7... 详细信息

目的：探讨硒对氟诱导大鼠肾小管上皮(NRK-52E)细胞凋亡及Caspase-3和Caspase-8mRNA表达的影响. 方法：取处于对数生长期的肾小管上皮细胞,分别加入0(对照)、5、20mg/LNaF溶液和(或)17.1、34.2μg/L亚硒酸钠溶液继续培养0、24、48、72、96h,采用MTT法检测细胞存活率,采用流式细胞仪和Real-time PCR法分别检测染毒48h时的细胞凋亡率和凋亡相关因子Caspase-3和Caspase-8mRNA的表达水平. 结果：与对照组相比,20mg/L NaF染毒组肾小管上皮细胞存活率均较低,凋亡率较高(P<0.05);与等剂量NaF染毒组比较,硒干预组细胞存活率均较低,5mg/L NaF+17.1μg/L亚硒酸钠组和20mg/L NaF+17.1μg/L亚硒酸钠组细胞凋亡率较低.与对照组相比,NaF染毒组肾小管上皮细胞中Caspase-3和Caspase-8mRNA表达水平均较高(P<0.05);与等剂量NaF染毒组比较,20mg/L NaF+17.1μg/L亚硒酸钠组和20mg/L NaF+34.2μg/L亚硒酸钠组细胞中Caspase-3和Caspase-8mRNA表达水平较低,差异均有统计学意义(P<0.05). 结论：一定浓度的硒可能通过下调凋亡相关因子Caspase-3和Caspase-8的表达来拮抗细胞凋亡.

关键词：肾小管上皮细胞凋亡免疫机制硒元素半胱氨酸蛋白水解酶3 半胱氨酸蛋白水解酶8 基因表达

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硒对氟致大鼠肾小管上皮细胞线粒体膜电位改变的拮抗作用

硒对氟致大鼠肾小管上皮细胞线粒体膜电位改变的拮抗作用

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2016第十四届中国北方实验动物科技年会

作者：常凯庞文彪高继萍陈朝阳宋国华山西医科大学实验动物中心实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室山西太原 030001

目的：探究硒对氟致大鼠肾小管上皮细胞线粒体膜电位改变的拮抗作用. 方法：实验共设4组：染氟组、染硒组、硒干预组和对照组.分别用不同浓度的氟化钠(5mg/L、20mg/L)和亚硒酸钠(0.0171mg/L、0.0342mg/L)干预大鼠肾小管上皮细胞48h.... 详细信息

目的：探究硒对氟致大鼠肾小管上皮细胞线粒体膜电位改变的拮抗作用. 方法：实验共设4组：染氟组、染硒组、硒干预组和对照组.分别用不同浓度的氟化钠(5mg/L、20mg/L)和亚硒酸钠(0.0171mg/L、0.0342mg/L)干预大鼠肾小管上皮细胞48h.流式细胞仪检测线粒体膜电位,SOD、GSH-PX、CAT和T-AOC测试盒测定酶的活性. 结果：与对照组比,随着氟化钠浓度的升高,染氟组大鼠肾小管上皮细胞线粒体膜电位下降(p<0.05或p<0.01)且SOD、T-AOC、GSH-PX和CAT酶活性均降低(p<0.05).与染氟组相比,相对应的硒干预组线粒体膜电位升高(p<0.01).与20mg/L的染氟组比较,相对应硒干预组的SOD、T-AOC、GSH-PX和CAT酶活性均升高(p<0.01). 结论：一定浓度的硒可以拮抗氟诱导大鼠肾小管上皮细胞线粒体膜电位下降,可能通过恢复抗氧化酶活性来实现.

关键词：氟中毒肾小管上皮细胞线粒体膜电位硒元素免疫机制抗氧化酶活性

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中国地鼠口腔颊黏膜癌模型的建立及癌变的动态观察

中国地鼠口腔颊黏膜癌模型的建立及癌变的动态观察

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第十二届中国实验动物科学年会

作者：皇甫冰李莉红常凯田晓琳陈朝阳庞文彪张锐虎郭民高继萍宋国华山西医科大学实验动物中心、实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室山西太原030001

目的利用二甲基苯并蒽(DMBA)涂抹法建立中国地鼠颊黏膜癌的实验动物模型,观察癌变不同时期的组织学动态变化过程.方法：将60只雄性中国地鼠随机分为3组,分别为模型组(24只)、溶剂对照组(12只)、空白对照组(24只);溶剂对照组仅涂丙酮液... 详细信息

目的利用二甲基苯并蒽(DMBA)涂抹法建立中国地鼠颊黏膜癌的实验动物模型,观察癌变不同时期的组织学动态变化过程.方法：将60只雄性中国地鼠随机分为3组,分别为模型组(24只)、溶剂对照组(12只)、空白对照组(24只);溶剂对照组仅涂丙酮液,空白对照组不作任何处理,模型组以0.5％ DMBA涂抹中国地鼠两侧颊囊,每周3次,共15周.分别于第6、9、12、15周将模型组和空白对照组随机处死6只,溶剂对照组处死3只,在肉眼及光镜下动态观察颊黏膜癌变全过程的形态学和显微组织学改变.结果：与对照组比较,DMBA长时间处理后模型组地鼠相继出现口腔内黏膜充血、增厚、溃烂化脓、白斑及菜花状赘生物等变化3067,经历了单纯上皮增生(6～9周)、不同程度上皮异常增生(9～12周)、原位癌及鳞状细胞癌(12～15周)等阶段.结论：DMBA涂抹法可成功建立中国地鼠颊黏膜癌前病变、鳞状细胞癌模型,发病过程与人类口腔鳞状细胞癌相似,为口腔鳞癌的多阶段、多步骤研究提供了一个较为理想的动物模型.

关键词：中国地鼠颊囊黏膜口腔鳞状细胞癌二甲基苯并蒽

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microRNA与肿瘤的相关研究进展

microRNA与肿瘤的相关研究进展

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第十二届中国实验动物科学年会

作者：李莉红常凯田晓琳皇甫冰宋国华山西医科大学实验动物中心、实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室山西太原030001

目的肿瘤是一种复杂的多基因疾病，在其发生发展、侵入转移的过程中一直存在DNA和RNA水平遗传学变异的累积。近年来，大量研究表明多种肿瘤中均存在miRNA的突变或表达异常，并且作用于靶基因而调控相关信号转导通路的改变，提示miRNA... 详细信息

目的肿瘤是一种复杂的多基因疾病，在其发生发展、侵入转移的过程中一直存在DNA和RNA水平遗传学变异的累积。近年来，大量研究表明多种肿瘤中均存在miRNA的突变或表达异常，并且作用于靶基因而调控相关信号转导通路的改变，提示miRNA与肿瘤的发生发展存在紧密关系。本文就miRNA与肿瘤的关系及相关信号通路作一综述。

关键词： miRNA 肿瘤信号通路

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氧化应激与肾脏细胞凋亡

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中国比较医学杂志 2015年第2期25卷 54-60页

作者：皇甫冰高继萍杨霞王裕宋国华山西医科大学实验动物中心实验动物与人类疾病动物模型山西重点实验室山西太原030001

氧化应激产生的活性氧(ROS)与细胞凋亡存在密切的关系。ROS可通过激活线粒体、Bcl-2家族、NF-κB及MAPKS家族、Caspase家族等途径引起细胞凋亡,细胞凋亡在肾脏疾病的发病过程中起着重要作用。本文就氧化应激在肾脏疾病发生发展中的作用... 详细信息

氧化应激产生的活性氧(ROS)与细胞凋亡存在密切的关系。ROS可通过激活线粒体、Bcl-2家族、NF-κB及MAPKS家族、Caspase家族等途径引起细胞凋亡,细胞凋亡在肾脏疾病的发病过程中起着重要作用。本文就氧化应激在肾脏疾病发生发展中的作用及其诱导细胞凋亡的机制进行了综述。

关键词：氧化应激活性氧肾细胞细胞凋亡

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miR-31促进脊髓损伤后Nestin和NSE表达

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中国组织化学与细胞化学杂志 2015年第6期23卷 533-541页

作者：田峰景志杰李鹏飞闫肖卿李宵王春芳山西医科大学实验动物中心实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室太原030001

目的对脊髓损伤的miR-31转基因小鼠继发性损伤的恢复状况进行了解,进一步了解和探究miR-31在脊髓损伤修复中起到的促进作用。方法使用Impactor M-Ⅲ脊髓撞击器分别对FVB小鼠和miR-31转基因小鼠进行击打,成功建立小鼠脊髓损伤模型。术后... 详细信息

目的对脊髓损伤的miR-31转基因小鼠继发性损伤的恢复状况进行了解,进一步了解和探究miR-31在脊髓损伤修复中起到的促进作用。方法使用Impactor M-Ⅲ脊髓撞击器分别对FVB小鼠和miR-31转基因小鼠进行击打,成功建立小鼠脊髓损伤模型。术后于3d、7d、14d、21d进行BBB评分、H E染色、免疫荧光检测和荧光定量PCR检测。结果两组小鼠在制作脊髓损伤模型后,HE染色结果恢复趋势虽大体相同,但BBB评分显示在7d、14d,miR-31转基因小鼠的脊髓损伤恢复状况优于FVB小鼠。免疫荧光和PCR检测显示:Nestin在14d、21d两个时间点上miR-31转基因小鼠高于FVB小鼠;miR-31转基因小鼠NSE的表达量高于FVB小鼠。结论 miR-31在脊髓损伤后可能发挥着促进神经干细胞再生,改善脊髓损伤模型脊髓内微环境,促进脊髓损伤的恢复的作用。

关键词：脊髓损伤模型 miR-31 小鼠

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两种构建小鼠脊髓击打损伤模型仪器的比较和探讨

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中国组织化学与细胞化学杂志 2015年第2A期23卷 164-170页

作者：田峰王春芳李鹏飞李宵闫肖卿景志杰山西医科大学实验动物中心实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室太原030001

目的通过比较两种构建小鼠脊髓击打损伤模型仪器各自的特点和优势,以期探索脊髓击打损伤模型建立的标准化。方法 40只小鼠随机分为两组,分别采用自制Allen脊髓打击器(A组,n=20)和Impactor M-Ⅲ脊髓撞击器(B组,n=20)进行击打,建立小鼠脊... 详细信息

目的通过比较两种构建小鼠脊髓击打损伤模型仪器各自的特点和优势,以期探索脊髓击打损伤模型建立的标准化。方法 40只小鼠随机分为两组,分别采用自制Allen脊髓打击器(A组,n=20)和Impactor M-Ⅲ脊髓撞击器(B组,n=20)进行击打,建立小鼠脊髓损伤模型。术后,于1d、3d、5d、7d、14d、21d六个时间节点,采用BBB运动功能评分对小鼠下肢恢复情况进行评估,记录数据。并在3d、7d、14d、21d四个时间节点取实验小鼠脊髓损伤处进行HE染色。结果两组脊髓损伤模型在1d、3d、5d、21d四个时间节点恢复情况无明显差异(P>0.05)。而在7d、14d,B组小鼠的脊髓损伤恢复状况明显优于A组,差异具有统计学意义(P<0.05)。在组织形态切片上差异不大。结论两种击打脊髓的实验仪器均可成功建立小鼠的脊髓损伤模型,采用Impactor M-Ⅲ脊髓撞击器构建的脊髓击打损伤模型小鼠恢复较自制Allen脊髓打击器更快速、稳定。

关键词：脊髓损伤模型小鼠

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硒对氟诱导大鼠肾小管上皮细胞凋亡及caspase-3和caspase-8 mRNA表达的影响

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环境与健康杂志 2015年第5期32卷 397-400,F0003页

作者：王裕杨霞高继萍皇甫冰宋国华山西医科大学实验动物中心实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室山西太原030001

目的探讨硒对氟诱导大鼠肾小管上皮(NRK-52E)细胞凋亡及caspase-3和caspase-8 mRNA表达的影响。方法取处于对数生长期的肾小管上皮细胞,分别加入0(对照)、5、20 mg/L Na F溶液和(或)17.1、34.2μg/L亚硒酸钠溶液继续培养0、24、48、72、... 详细信息

目的探讨硒对氟诱导大鼠肾小管上皮(NRK-52E)细胞凋亡及caspase-3和caspase-8 mRNA表达的影响。方法取处于对数生长期的肾小管上皮细胞,分别加入0(对照)、5、20 mg/L Na F溶液和(或)17.1、34.2μg/L亚硒酸钠溶液继续培养0、24、48、72、96 h,采用MTT法检测细胞存活率,采用流式细胞仪和Real-time PCR法分别检测染毒48 h时的细胞凋亡率和凋亡相关因子caspase-3和caspase-8 mRNA的表达水平。结果与对照组相比,20 mg/L Na F染毒肾小管上皮细胞存活率均较低,凋亡率较高;与相同剂量Na F染毒组比较,硒干预组细胞存活率均较高,各浓度Na F+17.1μg/L亚硒酸钠染毒组的细胞凋亡率较低。与对照组相比,Na F染毒组肾小管上皮细胞中caspase-3和caspase-8 mRNA的表达水平均较高;与相同剂量Na F染毒组比较,20 mg/L Na F+各浓度亚硒酸钠组细胞中caspase-3和caspase-8 mRNA的表达水平较低。结论一定浓度的硒可能通过下调凋亡相关因子caspase-3和caspase-8的表达来拮抗细胞凋亡。

关键词：硒氟细胞凋亡 Caspase-3 Caspase-8

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EGFP转基因小鼠建系及其脊髓源神经干细胞应用前景的探讨

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中国组织化学与细胞化学杂志 2015年第2A期23卷 113-119页

作者：李宵王春芳李鹏飞王晶闫肖卿田峰山西医科大学实验动物中心实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室山西医科大学科研实验中心太原030001

目的构建EGFP转基因小鼠及建系,并观察转基因小鼠的细胞及组织荧光发出状况。方法使用Gateway clone技术构建eEGFP载体,通过DNA显微注射法将构建好的EGFP载体注入受精卵内,转移至假孕母鼠内生出转基因小鼠。将转基因小鼠后代中的阳性小... 详细信息

目的构建EGFP转基因小鼠及建系,并观察转基因小鼠的细胞及组织荧光发出状况。方法使用Gateway clone技术构建eEGFP载体,通过DNA显微注射法将构建好的EGFP载体注入受精卵内,转移至假孕母鼠内生出转基因小鼠。将转基因小鼠后代中的阳性小鼠互交,逐步淘汰杂合子小鼠。饲养过程测量小鼠的基本数据。培养转基因小鼠的脊髓源神经干细胞,并取部分常用组织石蜡切边,在荧光显微镜下观察。结果成功构建了EGFP转基因小鼠,并在屏障环境下饲养繁殖至7代。与野生型小鼠相比,EGFP转基因小鼠基本数据无明显差异。各常用组织切片在荧光显微镜下均可观察到绿色荧光,从脊髓中培养获得的神经干细胞也可观察到绿色荧光。结论 EGFP小鼠组织在常规处理后可观察到发出绿色荧光的细胞;小鼠脊髓源神经干细胞在体外培养3代仍可观察到绿色荧光,可利用这种自然标记的细胞研究神经干细胞在脊髓损伤修复中所产生的作用。

关键词：转基因小鼠 EGFP 细胞标记工具鼠脊髓损伤神经干细胞移植

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周脂素和ADRP在糖代谢异常大鼠肝脏组织中的表达

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中国病理生理杂志 2015年第3期31卷 534-538页

作者：樊林花刘茂林卫兵艳刘田福王春芳庞文彪郭永昌刘建新山西医科大学实验动物中心实验动物和人类疾病动物模型山西省重点实验室山西太原030001 山西省一〇九医院山西太原030006

目的:探讨脂滴相关蛋白周脂素(perilipin)和脂肪分化相关蛋白(ADRP)在糖尿病发生发展过程中的变化情况以及在糖代谢异常合并非酒精性脂肪肝中的作用。方法:分别用高脂饲料喂养和高脂饲料喂养加小剂量链脲佐菌素建立糖耐量受损(IGT)和2... 详细信息

目的:探讨脂滴相关蛋白周脂素(perilipin)和脂肪分化相关蛋白(ADRP)在糖尿病发生发展过程中的变化情况以及在糖代谢异常合并非酒精性脂肪肝中的作用。方法:分别用高脂饲料喂养和高脂饲料喂养加小剂量链脲佐菌素建立糖耐量受损(IGT)和2型糖尿病大鼠模型(T2DM),采用光镜观察各组大鼠肝组织的形态学改变;用ELISA法测定血清周脂素perilipin和ADRP含量;real-time PCR技术检测肝脏组织中perilipin和ADRP mRNA的表达;用Western blotting法检测肝脏组织中ADRP蛋白的表达。结果:HE结果显示,IGT组和T2DM组大鼠均有肝细胞脂肪变性,IGT组变性更严重;各模型组的生化指标与临床相关疾病的表现一致;血清perilipin水平各组之间无差异,但IGT组和T2DM组肝组织perilipin mRNA表达明显升高(P<0.01);与IGT组相比,T2DM组perilipin mRNA表达显著增加(P<0.05)。T2DM组血清ADRP含量较其对照组明显降低(P<0.01);模型组肝组织ADRP mRNA表达明显降低(P<0.01);ADRP蛋白表达较其对照组也明显降低(P<0.01);与IGT组相比,T2DM组ADRP mRNA表达明显降低(P<0.01)。结论:血清ADRP含量在T2DM的形成中起一定的作用,与胰岛素抵抗指数呈明显负相关;高脂喂养后能导致大鼠糖代谢异常,并伴有非酒精性脂肪肝的发生;糖代谢异常合并非酒精性脂肪肝的发生可能与肝组织perilipin表达升高和ADRP表达降低有关。

关键词：周脂素脂肪分化相关蛋白糖耐量受损 2型糖尿病

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