检索结果-内蒙古大学图书馆

慢性肾功能不全幼鼠胫骨生长板软骨细胞甲状旁腺激素相关蛋白受体低表达对细胞增殖的影响

中华医学杂志 2019年第38期99卷 3008-3013页

作者：王小健张志华杨烜陈韬予魏垒余建平安雪军贾中伟苏云星李荣山山西省人民医院骨科太原030012 山西省卫生健康职业学院太原030012 山西省医科大学第二医院骨与软组织损伤修复山西省重点实验室太原030009 山西省人民医院肾内科太原030012

目的观察慢性肾功能不全(CRI)幼鼠胫骨生长板软骨细胞甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrp)受体表达对细胞增殖的影响.方法雄性2周龄SD幼鼠12只,分为假手术组(暴露左侧输尿管)和CRI组(左侧输尿管结扎),每组6只.术后2周处死幼鼠,检测血PTHrp浓... 详细信息

目的观察慢性肾功能不全(CRI)幼鼠胫骨生长板软骨细胞甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrp)受体表达对细胞增殖的影响.方法雄性2周龄SD幼鼠12只,分为假手术组(暴露左侧输尿管)和CRI组(左侧输尿管结扎),每组6只.术后2周处死幼鼠,检测血PTHrp浓度,分别提取两组幼鼠胫骨生长板软骨细胞进行体外培养至P3代,检测细胞内PTHrp受体表达情况并应用Western印迹定量分析.5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EDU)技术检测两组细胞24 h增殖率.体外构建PTHrp受体mRNA过表达质粒、空载体、敲低质粒干预CRI组软骨细胞,24 h后观测PTHrp受体mRNA表达并定量分析,48 h后观测PTHrp受体表达并定量分析.EDU技术检测3种质粒干预后细胞24 h增殖率.结果与假手术组相比,CRI组血PTHrp浓度增高[(1.36±0.42)ng/L比(0.77±0.21)ng/L,t=3.913,P=0.001],Western印迹定量分析结果显示,生长板软骨细胞内PTHrp受体表达减少(0.15±0.07比0.41±0.13,t=5.569,P<0.001),24 h细胞增殖率降低[(11.3±3.1)%比(24.6±5.7)%,t=6.482,P<0.001].PTHrp受体mRNA过表达后CRI组软骨细胞内PTHrp受体mRNA和蛋白表达均增高,细胞24 h增殖率升高,而敲低组PTHrp受体mRNA和蛋白表达均降低,24 h细胞增殖率减低[过表达组(22.8±6.5)%,空载体组(10.2±4.3)%,敲低组(5.6±2.1)%,F=29.840,P<0.001].结论肾功能不全幼鼠血PTHrp浓度增高,胫骨生长板软骨细胞内PTHrp受体减少,导致PTHrp促细胞增殖作用减弱,细胞增殖率降低.

关键词：肾机能不全受体,甲状旁腺激素细胞增殖生长板

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癌相关成纤维细胞来源的外泌体在促骨肉瘤侵袭转移中作用的实验研究

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中华解剖与临床杂志 2019年第4期24卷 332-340页

作者：陈成龙孙雪娇李志慧孙晓娟韩鹏飞张龙吕智山西医科大学第二临床医学院骨科太原030001 山西医科大学第二医院骨科山西骨与软组织损伤修复重点实验室太原030001 山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系太原030001 山西医科大学第二临床医学院临床医学系太原030001 山西医科大学第二医院骨科太原030001

目的探讨癌相关成纤维细胞(CAFs)来源的外泌体对骨肉瘤侵袭及转移的影响。方法利用人源骨肉瘤细胞株Saos-2采用差速贴壁法分离、培养CAFs,显微镜下观察CAFs的形态,免疫组织化学观察α-SMA蛋白表达对CAFs进行鉴定。培养CAFs,采用ExoQuick... 详细信息

目的探讨癌相关成纤维细胞(CAFs)来源的外泌体对骨肉瘤侵袭及转移的影响。方法利用人源骨肉瘤细胞株Saos-2采用差速贴壁法分离、培养CAFs,显微镜下观察CAFs的形态,免疫组织化学观察α-SMA蛋白表达对CAFs进行鉴定。培养CAFs,采用ExoQuick-TC外泌体提取试剂盒分离外泌体。通过透射电镜观察外泌体形态,Western blot检测外泌体特异性标记蛋白β-actin、CD63表达情况对外泌体进行鉴定。培养人源骨肉瘤细胞株Saos-2,分为外泌体组和对照组,采用细胞划痕及Transwell小室实验观察外泌体对Saos-2细胞迁移和侵袭能力的影响。选取一级5周龄BALB/c-nu雌性裸鼠12只,按编号随机分为外泌体组和对照组,每组6只。两组均采用皮下移植成瘤法在裸鼠右侧背部皮下接种人骨肉瘤Saos-2细胞与Matrigel基质胶混合悬液,建立裸鼠骨肉瘤肿瘤模型。造模结束后即刻进行尾静脉注射:外泌体组每只裸鼠通过尾静脉注射浓度为0.1μg/μL的外泌体悬液30μL,对照组裸鼠尾静脉注射等量生理盐水,两组均1次/周,共注射6次。第1次注射后每日观察裸鼠成瘤情况,从裸鼠右侧背部皮下可触及肿块开始,测量两组裸鼠肿块的最长径和最长径的最大垂直短径,计算肿瘤体积,此后每周测量1次,共测量6次。完成最后一次测量后腹腔麻醉断椎法处死裸鼠,完整取出肿块并称重。取裸鼠肺组织进行切片HE染色观察两组裸鼠肺转移情况。结果显微镜下观察CAFs呈长梭形,排列杂乱,无方向性;细胞免疫组织化学染色结果显示:CAFs的α-SMA蛋白表达阳性,提示CAFs提取成功。电镜观察外泌体呈70~100 nm圆形或椭圆形膜性囊泡状结构;Western blot结果显示外泌体中CD63蛋白呈高表达,β-actin蛋白表达较弱,提示成功分离CAFs来源外泌体。细胞划痕实验、侵袭实验结果显示:外泌体组细胞迁移距离、迁移率、侵袭细胞数目分别为(0.19±0.02)mm、0.81%±0.11%、(53.67±5.69)个,均高于对照组的(0.81±0.11)mm、0.32%±0.11%、(31.67±8.08)个,差异均有统计学意义(t=6.209、6.209、3.856,P值均<0.01)。外泌体组和对照组12只裸鼠采用皮下移植成瘤法接种人骨肉瘤Saos-2细胞与Matrigel基质胶混合悬液,均造模成功,实验过程中无一例动物死亡。两组裸鼠均于第1次注射肿瘤细胞后1周触及肿块,肿瘤体积均随着时间的延长明显增大,差异均有统计学意义(F=49.428、8.477,P值均<0.05)。两组间比较,第1、2次测量肿瘤体积,差异均无统计学意义(P值均>0.05);而第3~6次测量肿瘤体积,外泌体组均大于对照组,差异均有统计学意义(t=4.697、4.825、3.516、2.706,P值均<0.05)。测量6次后处死裸鼠,剥除肿瘤,外泌体组肿瘤质量(1.62±0.29)g大于对照组(1.00±0.43)g,差异有统计学意义(t=2.929,P<0.05)。肺组织切片HE染色结果显示,两组裸鼠均发生肺转移,外泌体组肺组织转移灶数量为6.63(3,17)个,多于对照组的1.17(0,3)个,差异有统计学意义(W=36.000,P<0.01)。结论CAFs来源的外泌体可增加骨肉瘤细胞株Saos-2的迁移及侵袭能力,同时促进骨肉瘤的生长和肺转移的形成。

关键词：骨肉瘤外泌体癌相关成纤维细胞肺转移肿瘤微环境

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机器人辅助与传统手法行单髁置换效果的Meta分析

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中国组织工程研究 2019年第36期23卷 5889-5895页

作者：高阳阳车先达韩鹏飞梁斌李鹏翠山西医科大学第二临床医学院山西省太原市030001 长治市第二人民医院山西省长治市046000 山西省汾阳医院山西省吕梁市033000 山西医科大学第二医院骨与软组织损伤修复重点实验室山西省太原市030001

背景:以往骨关节炎临床上终末期的主要治疗方式是关节置换,近年来随着保膝理念的盛行以及内固定材料和手术技术的不断发展,单髁置换这一微创技术在单间室骨关节炎的治疗中得到了广泛应用。目的:通过Meta分析的方法系统比较机器人辅助技... 详细信息

背景:以往骨关节炎临床上终末期的主要治疗方式是关节置换,近年来随着保膝理念的盛行以及内固定材料和手术技术的不断发展,单髁置换这一微创技术在单间室骨关节炎的治疗中得到了广泛应用。目的:通过Meta分析的方法系统比较机器人辅助技术与传统手法行骨关节炎单髁置换效果的差异。方法:检索包括国内外于1999年至2019年3月已发表的临床对照研究,所检索的数据库包括Embase、PubMed、Central、Cinahl、PQDT、中国知网、维普、万方、CochraneLibrary、CBM等。选择胫骨组件置入准确度、股骨组件置入准确度、胫股骨组件安全区、手术时间及并发症等作为结局指标,力求全面细致地比较机器人辅助技术与传统手法单髁置换的疗效差异。结果与结论:①依据以上检索策略,最终纳入8篇外文文献;②通过比较,发现机器人辅助单髁置换技术在胫骨组件置入准确度[95%CI(-2.13,-0.63),P=0.0003]、股骨组件置入准确度[95%CI(-2.49,-0.32),P=0.01]、胫股骨组件安全区[95%CI(1.05,17.57),P=0.04]等方面均优于传统手法,差异有显著性意义;③虽然机器人辅助技术需时更长[95%CI(12.58,42.33),P=0.0003],但是并不增加手术并发症的发生[95%CI(0.75,3.71),P=0.21];④提示在行单髁置换时,机器人辅助技术的假体定位准确率更高,且并未增加并发症的发生率,是一种较传统手法更为理想的手术方式。以上结论尚需更大样本、更高质量的随机对照研究加以验证。

关键词：机器人传统手法单髁置换股骨组件胫骨组件 Meta分析国家自然科学基金

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骨关节炎基因治疗的研究进展

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中华骨与关节外科杂志 2019年第5期12卷 396-400页

作者：顾晓东车先达李鹏翠卫小春山西医科大学第二医院骨科太原030001 骨与软组织损伤修复山西省重点实验室太原030001

骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一种中老年人常见的骨关节疾病,早期OA可采用理疗、药物等治疗方式,在基础治疗和药物治疗无效时,可选择手术治疗。随着基因治疗技术的发展与成熟,越来越多的基因被应用到OA治疗的研究中。本文从骨关节炎... 详细信息

骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一种中老年人常见的骨关节疾病,早期OA可采用理疗、药物等治疗方式,在基础治疗和药物治疗无效时,可选择手术治疗。随着基因治疗技术的发展与成熟,越来越多的基因被应用到OA治疗的研究中。本文从骨关节炎基因治疗策略、基因递送系统及微小RNA等方面对骨关节炎基因治疗的研究做一综述,阐述目前骨关节炎基因治疗的研究进展及未来研究方向。

关键词：骨关节炎基因治疗微小RNAs

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中青年股骨颈骨折术后内固定物去留与股骨头坏死关系的Meta分析

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中国组织工程研究 2018年第35期22卷 5724-5729页

作者：周新杨彦飞牛文杰卫小春段王平山西医科大学第二医院骨科骨与软组织损伤修复山西省重点实验室山西省太原市030001

背景:目前临床上对于中青年股骨颈骨折患者主要采取闭合复位空心钉治疗,骨折愈合后关于空心钉的处理尚存在争议。目的:探讨股骨颈骨折术后内固定物的取出和保留与股骨头坏死的关系,为中青年股骨颈骨折术后内固定物的处理提供参考。方法... 详细信息

背景:目前临床上对于中青年股骨颈骨折患者主要采取闭合复位空心钉治疗,骨折愈合后关于空心钉的处理尚存在争议。目的:探讨股骨颈骨折术后内固定物的取出和保留与股骨头坏死的关系,为中青年股骨颈骨折术后内固定物的处理提供参考。方法:利用检索EMBASE、Cochrane数据库、PubMed数据库、万方数据库、CNKI中国期刊全文数据库,并辅助手工检索、文献追溯相关文献,收集2000年1月至2018年1月国内外刊物上公开发表的有关股骨颈骨折术后内固定物是否取出对股骨头坏死影响的中英文文献,严格评价纳入研究的文献质量及提取相关资料,运用RevMan 5.3软件统计分析相关数据。对相关数据进行异质性检验,用Meta分析方法对数据进行处理,评估其比值比(OR)和95%可信区间(CI)。结果与结论:(1)通过检索词共检索出中英文文献418篇,最终共纳入满足条件的文献20篇,共6 271例患者;(2)随机效应模型分析结果显示,与内固定保留组相比,股骨颈骨折术后内固定取出组股骨头坏死率更高,差异有显著性意义[OR=2.49,95%CI(1.47,4.22),P=0.0007];(3)共3篇文献提及股骨颈骨折术后内固定物是否取出对股骨头血运的影响。其中1篇文献认为股骨颈骨折术后骨愈合后取钉会破坏股骨头的血运,不利于股骨头的重建修复;另外2篇文献认为骨折术后间断取钉能改善股骨头血运;(4)有文献认为股骨颈骨折术后骨愈合后是否取钉对股骨头最大压应力无明显变化,但内固定物长期存留在体内会增加患者局部滑囊炎的发生,影响患肢功能;(5)结果提示,中青年股骨颈骨折术后骨愈合后,与内固定物保留相比,内固定物取出更容易破坏股骨头血运,导致股骨头坏死,临床上应积极探索中青年股骨颈骨折术后内固定的取出方式及防治股骨头坏死的相关措施。

关键词：股骨颈骨折股骨头坏死内固定物内植物取出 Meta分析国家自然科学基金股骨骨折股骨头坏死,Meta分析组织工程

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非金属与金属材料对髌骨骨折内固定术后临床疗效影响的Meta分析

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中国骨伤 2018年第10期31卷 927-932页

作者：任广宗张芝良韩鹏飞陈韬予李鹏翠卫小春山西医科大学第二医院骨科骨与软组织损伤修复山西省重点实验室山西太原030001

目的 :系统评价髌骨骨折内固定术中应用金属与非金属材料的临床疗效。方法 :计算机搜索PubMed、EMBASE、Web of science、中国知网(CNKI)和万方数据期刊全文数据库(Wanfang data)发表的对于金属和非金属材料在髌骨骨折术中应用进行比较... 详细信息

目的 :系统评价髌骨骨折内固定术中应用金属与非金属材料的临床疗效。方法 :计算机搜索PubMed、EMBASE、Web of science、中国知网(CNKI)和万方数据期刊全文数据库(Wanfang data)发表的对于金属和非金属材料在髌骨骨折术中应用进行比较的病例对照研究,检索时间从建库至2018年6月。由2名研究员按照纳入和排除标准独立筛选文献,提取资料,采用非随机干预性试验偏倚风险评估工具(risk of bias in non-randomised studies of interventions,ROBINS-I)进行文献质量评价。采用RevMan 5.3软件对两种方法术后再手术率、术后临床康复优良率、术后并发症发生率进行Meta分析。结果:最终纳入9个符合条件的回顾性队列研究,共493例。Meta分析结果显示:非金属植入物和金属植入物之间内固定失败再手术率无显著差异[OR=0.52,95%CI(0.25,1.08),P=0.08]。接受非金属植入物后,患者术后临床康复优良率高于接受金属植入物[OR=3.34,95%CI(1.67,6.71),P=0.000 7],总并发症发生率低于接受金属植入物[OR=0.21,95%CI(0.07,0.60),P=0.003]。当去除钢丝克氏针断裂及其产生的皮肤刺激症状并发症后,非金属相关并发症发生率比较,差异无统计学意义[OR=1.08,95%CI(0.45,2.56),P=0.86]。结论:非金属植物可提供与金属植物相同的内固定成功率,且可通过降低金属植物相关并发症的产生,提高患者术后康复优良率。

关键词：髌骨骨折骨折固定术,内 Meta分析

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机器人辅助椎弓根置钉治疗老年脊柱退行性疾病的Meta分析

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中华老年骨科与康复电子杂志 2019年第1期5卷 39-47页

作者：韩鹏飞张芝良陈成龙陈韬予李晓东李鹏翠魏垒吕智卫小春山西省长治市第二人民医院骨科 046000 山西医科大学第二医院骨与软组织损伤修复重点实验室太原030001

目的通过Meta分析比较机器人辅助与透视引导椎弓根置钉在治疗老年脊柱退行性疾病时的准确性及安全性差异。方法检索2008年04月至2018年04月国内外已发表的临床对照研究。所检索的数据库包括Embase、Pubmed、中国知网、维普、万方等数据... 详细信息

目的通过Meta分析比较机器人辅助与透视引导椎弓根置钉在治疗老年脊柱退行性疾病时的准确性及安全性差异。方法检索2008年04月至2018年04月国内外已发表的临床对照研究。所检索的数据库包括Embase、Pubmed、中国知网、维普、万方等数据库。依据检索策略,共检索到相关文献377篇,并最终纳入10篇外文文献,1篇中文文献。提取数据后,采用Review Manager 5.3软件进行数据分析。结果椎弓根置钉治疗老年脊柱退行性疾病时,机器人辅助组的置钉准确度优于透视引导组(95%CI:1.38～2.43,P<0.001),机器人辅助组的不良事件发生率(95%CI:0.22～0.90,P=0.02)及翻修率(95%CI:0.17～0.91,P=0.03)均少于透视引导组,而透视引导组术中辐射强度要少于机器人辅助组(95%CI:0.09～0.89,P=0.02),余结局指标两组差异均无统计学意义。结论在治疗老年脊柱退行性疾病时,机器人辅助椎弓根螺钉置入较传统透视引导置入具有更高的置钉准确度、更低的不良事件发生率。虽然术中辐射强度略高于透视引导组,但是机器人辅助技术仍不失为是一种安全可靠的治疗选择。

关键词：脊柱疾病外科手术,计算机辅助椎弓根钉机器人辅助

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COL12A1?rs970547位点基因多态性与前交叉韧带损伤相关性的Meta分析

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中华生物医学工程杂志 2019年第2期25卷 148-154页

作者：杨磊波段广斌卫小春张志伟郭鹏张发元山西医科大学附属晋城市人民医院骨科山西晋城048000 国家临床重点专科山西医科大学第二医院骨科骨与软组织损伤修复山西省重点实验室太原030001

目的利用Meta分析方法对COL12A1?rs970547位点基因多态性与前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)损伤相关性进行系统评价.方法对2018年3月之前发表的关于COL12A1?rs970547位点基因与ACL损伤的文献进行检索、收集和整理,用Meta... 详细信息

目的利用Meta分析方法对COL12A1?rs970547位点基因多态性与前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)损伤相关性进行系统评价.方法对2018年3月之前发表的关于COL12A1?rs970547位点基因与ACL损伤的文献进行检索、收集和整理,用Meta分析的方法分析等位基因G vs A、显性模型(AG+GG)vs AA、隐性模型GG vs(AA+AG)、共显性模型AA vs GG和AA vs GA在ACL损伤组与对照组中是否有差异,以期深入揭示COL12A1?rs970547位点基因多态性与ACL损伤的联系.结果本研究在5个团队的5份独立样本(包括患者686例和健康对照890例)的Meta分析发现,总体人群中,COL12A1?rs970547位点基因多态性与ACL损伤在等位基因G vs A[OR=1.29,95% CI (1.05,1.60),P=0. 02]、显性模型(AG+GG)vs AA[OR=1.49,95% CI(1.17,1.89),P=0. 001]、共显性模型AA vs GA[OR=1.57,95% CI(1.23,2.01),P=0. 0003]方面差异有统计学意义,可认为COL12A1?rs970547位点基因多态性与ACL损伤存在一定的关联性.单独对欧洲?高加索人种、亚洲人种进行亚组Meta分析,结果显示欧洲?高加索人种中,等位基因G vs A、各基因模型在ACL损伤组与对照组中的差别无统计学意义(P>0. 05),尚不能认为欧洲?高加索人种中COL12A1?rs970547位点基因多态性与ACL损伤存在关联性.在亚洲人种中等位基因G vs A[OR=1.76,95% CI(1.20,2.57),P=0.004]、显性模型(AG+GG)vs AA[OR=2.93,95% CI(1.58,5.44),P=0. 0007]、共显性模型AA vs GG[OR=3.92, 95% CI(1.46,10.47),P=0.000 7]和AA vs GA[OR=2.83,95% CI(1.50,5.34),P=0. 001]在ACL损伤组与对照组中的差异有统计学意义,可认为亚洲人种中COL12A1?rs970547位点基因多态性与ACL损伤存在关联性.结论本次Meta分析显示至少在亚洲人种中,COL12A1?rs970547位点基因多态性与ACL损伤存在关联性,利用这种基因有助于发现ACL损伤新的预防及治疗策略.

关键词： COL12A1 rs970547 多态性,单核苷酸前交叉韧带损伤 Meta分析

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膝关节液中骨膜蛋白表达对骨关节炎发生和进展的意义

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中华风湿病学杂志 2018年第9期22卷 586-589,I0001,I0002页

作者：王小健冯毅冯江峰陈韬予李璐苏云星卫小春魏垒山西省人民医院骨科太原030012 山西医科大学第二医院骨科骨与软组织损伤修复山西省重点实验室

目的研究膝关节液中骨膜蛋白表达对OA发生、进展的意义。方法检测健康人群及OA不同阶段人群关节液中骨膜蛋白的表达浓度。制作模拟OA大鼠模型：SD大鼠60只，分为2组，假手术对照组和OA模型组，假手术组只实施切开缝合术，OA模型组随机... 详细信息

目的研究膝关节液中骨膜蛋白表达对OA发生、进展的意义。方法检测健康人群及OA不同阶段人群关节液中骨膜蛋白的表达浓度。制作模拟OA大鼠模型：SD大鼠60只，分为2组，假手术对照组和OA模型组，假手术组只实施切开缝合术，OA模型组随机制作一侧前交叉韧带切断。于术后1、2、4、8、12周检测2组大鼠关节灌洗液中骨膜蛋白的表达浓度。所有大鼠施术关节分别于术后4、8、12周使用荧光分子断层成像（FMT）检测。术后4、8、12周分别处死部分大鼠，部分标本行膝关节胫骨平台印度墨水染色、甲苯胺蓝染色、并进行软骨层渗透实验以判断软骨层的退变情况，膝关节滑膜组织行苏木精-伊红（HE）染色、使用免疫组织化学检测滑膜组织中骨膜蛋白的表达。计量资料组间比较采用单因素方差分析。结果骨膜蛋白在人正常膝关节液中表达较低，而在膝关节OA早期及中期表达升高、OA晚期降低（F=19.35，P〈0.01）。大鼠模型FMT检测结果显示，慢性炎症程度假手术组随着时间延长未见明显信号改变，OA模型组慢性炎症程度逐渐加重。印度墨水染色、甲苯胺蓝染色、渗透试验结果均显示，OA模型组关节软骨随时间延长关节退变逐渐加重。大鼠关节灌洗液中骨膜蛋白对照组间差异无统计学意义（F=0.67，P=0.53），实验组随着OA进展呈现先升高后降低的趋势（F=11.0，P〈0.05）。滑膜组织HE染色显示滑膜增生程度与关节退变程度相符，随着时间的延长，滑膜组织中骨膜蛋白表达逐渐增多。结论人关节液中骨膜蛋白表达在正常膝关节液中表达较低，OA早期及中期表达增高，晚期降低。大鼠模型提示随着OA的进展，关节灌洗液中骨膜蛋白表达先增高后降低，但滑膜组织随着OA的发展该蛋白表达逐渐增多。关节液中骨膜蛋白的表达升高可能作为OA开始的早期诊断标志，后表达下降可能作为OA晚期开始的参考指标。

关键词：滑液骨关节炎生物学标记骨膜蛋白

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动态拉伸对兔膝软骨细胞糖胺多糖合成的影响

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中华实验外科杂志 2018年第1期35卷 11-14页

作者：边森刘贵艳李凯卫小春徐刚邵越峰山西医科大学第二医院骨科山西省骨与软组织损伤修复重点实验室太原030001 山西医科大学第二医院风湿科太原030001

目的观察不同强度的循环动态拉伸（CTS）对原代培养的兔膝关节软骨细胞糖胺多糖（GAG）合成的影响。方法1个月龄新西兰兔6只，无菌手术切取双膝关节软骨，采用0.4% Pronase酶和0.025% Ⅱ型胶原酶消化分离得到关节软骨细胞，来源于同一... 详细信息

目的观察不同强度的循环动态拉伸（CTS）对原代培养的兔膝关节软骨细胞糖胺多糖（GAG）合成的影响。方法1个月龄新西兰兔6只，无菌手术切取双膝关节软骨，采用0.4% Pronase酶和0.025% Ⅱ型胶原酶消化分离得到关节软骨细胞，来源于同一只兔的软骨细胞分为3部分，分别接种在3块BioFlex培养板上，通过Flexercell 5000系统对单层培养的兔膝软骨细胞施加CTS刺激，加载条件为0.3 Hz正弦波形，时长为6 h/d，加载强度分别为0%、5%、15%的CTS刺激。于加载后24、36、48和60 h用倒置显微镜观察细胞形态，并分别抽取上清用阿尔新蓝染色沉淀法测量GAG浓度。采用重复测量资料的单因素方差分析比较不同强度CTS刺激组上清液中GAG浓度的差异。结果细胞力学加载后可见周边部软骨细胞由多角形变为纺锤形，沿培养皿半径垂直方向排列。随拉伸强度的增加，上清中GAG浓度依次上升，各组总平均浓度分别为[（4.7±1.3）比（6.3±1.1）比（8.0±1.8） ng/ml]，差异有统计学意义（F＝15.970，P＝0.000）；同一时间点，随CTS拉伸强度的增大，上清液中GAG的含量逐渐增高，各时间点3组浓度分别为[24 h：（2.3±0.5）比（3.3±0.6）比（3.9±0.6） ng/ml；36 h：（4.0±0.7）比（4.6±0.8）比（6.8±0.2） ng/ml；48 h：（5.5±0.7）比（6.8±0.7）比（8.5±0.8） ng/ml；60 h：（6.9±1.2）比（10.8±1.3）比（13.0±1.1） ng/ml]，且差异有统计学意义（F＝6.062，P＝0.036；F＝16.720，P＝0.004；F＝12.570，P＝0.007；F＝19.790，P＝0.002），同一采样时间采用组间LSD法两两比较差异均有统计学意义。随加载总时间增加，上清中GAG浓度逐渐增加，各组分别为[0% CTS组：（2.3±0.5）比（4.0±0.7）比（5.5±0.7）比（6.9±1.2） ng/ml；5% CTS组：（3.3±0.6）比（4.6±0.8）比（6.8±0.7）比（10.8±1.3） ng/ml；15% CTS组：（3.9±0.6）比（6.8±0.2）比（8.5±0.8）比（13.0±1.1） ng/ml]，且差异有统计学意义（0% CTS组：F＝4.640，P＝0.037；5% CTS组：F＝23.580，P＝0.000；15% CTS组：F＝9.638，P＝0.005）。且加载总时间与加载强度之间存在交互效应，时间越长，加载组上清中GAG浓度越大。结论CTS可促进单层贴壁兔膝关节软骨细胞合成GAG，作用效果随拉伸强度和时间的增加而增大。

关键词：软骨细胞循环动态拉伸糖胺多糖兔关节软骨

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