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中国比较医学杂志 2024年第5期34卷 134-143页

作者：马云辉王晓堂高继萍宋国华山西医科大学实验动物中心实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室太原030001

免疫缺陷动物模型在临床前研究中发挥重要作用,是现代生物医学研究领域的重要实验工具,广泛应用于免疫学、遗传学、肿瘤学与微生物学等研究领域。基因编辑是针对生物体基因组进行靶向修饰的技术,从出现到应用,极大推动了生物医学研究领... 详细信息

免疫缺陷动物模型在临床前研究中发挥重要作用,是现代生物医学研究领域的重要实验工具,广泛应用于免疫学、遗传学、肿瘤学与微生物学等研究领域。基因编辑是针对生物体基因组进行靶向修饰的技术,从出现到应用,极大推动了生物医学研究领域的发展。基因编辑技术主要包括HEs、ZFNs、TALENs与CRISPR/Cas9系统。目前,研究者已利用该技术建立了多种类型的免疫缺陷动物模型,各有其优势和局限性。近年来,大量研究证实人源化免疫缺陷动物模型能够精准模拟癌细胞、药物以及免疫系统在人体内的作用,可以更好地模拟人类疾病,广泛用于研究人类免疫生物学及人类复杂疾病的潜在机制。本文对利用基因编辑技术构建免疫缺陷动物模型的研究应用进展进行综述,对基因编辑技术在免疫缺陷动物模型制备中存在的问题及优化策略深入探讨,并对其未来发展前景进行了展望,以期为研究者选用和建立免疫缺陷动物模型提供参考。

关键词：免疫缺陷动物模型基因编辑技术锌指核酸酶转录激活因子样效应核酸酶 CRISPR/Cas9

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过表达miR-31及其下游靶基因Sfn、SuFu在银屑病动物模型中的作用

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重庆医科大学学报 2024年第11期49卷 1394-1401页

作者：景志杰付明阳王春芳山西医科大学实验动物中心/实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室太原030001

目的:研究内在过表达miR-31及其下游靶基因Sfn、SuFu在咪喹莫特诱导的小鼠银屑病模型发生发展中的作用。方法:从文献及PubMed收集与银屑病相关基因,使用Target Scan Human数据库预测miR-31靶基因。使用咪喹莫特乳膏对野生型FVB小鼠和miR... 详细信息

目的:研究内在过表达miR-31及其下游靶基因Sfn、SuFu在咪喹莫特诱导的小鼠银屑病模型发生发展中的作用。方法:从文献及PubMed收集与银屑病相关基因,使用Target Scan Human数据库预测miR-31靶基因。使用咪喹莫特乳膏对野生型FVB小鼠和miR-31转基因小鼠进行银屑病造模,每日采集造模小鼠背部变化图像,随后使用PASI评分评价小鼠银屑病样情况。HE染色观察组织形态学变化。取0 d、3 d、7 d模型小鼠的背部皮肤,随后进行RT-PCR检测miR-31及其下游靶基因mRNAs的表达,筛选出2个miR-31靶基因,并对筛选靶基因进行免疫荧光及Western blot检测分析。结果:Target Scan Human数据库预测出8个miR-31下游靶基因,经荧光定量PCR筛选出2个与银屑病相关靶基因Sfn、SuFu。咪喹莫特诱导小鼠产生银屑病样症状,表现为背部出现红斑、银白鳞屑,表皮增厚等,实验结果显示miR-31实验组较野生型FVB实验组银屑病样症状轻,HE染色切片同样证实此情况。RT-PCR检测3 d、7 d时miR-31,Sfn和SuFu的表达,结果显示野生型FVB小鼠miR-31的表达均升高,而miR-31转基因小鼠miR-31的表达却降低,其靶基因Sfn、SuFu均出现相反情况,免疫荧光及western blot结果均与PCR结果一致。结论:在银屑病动物模型中,内在过表达miR-31的皮肤,其银屑病样症状较弱,它可能联合机体内与银屑病相关的器官通过内在过表达miR-31的调控作用而减弱银屑病严重程度。Sfn、SuFu作为miR-31下游靶基因,可能在银屑病的发病过程中起抑制作用。

关键词：微小RNA-31 银屑病丝氨酸/苏氨酸激酶Fused抑制物分层蛋白

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近交系自发性2型糖尿病中国地鼠山医群体血液生理生化指标的检测分析

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中国比较医学杂志 2024年第9期34卷 19-23页

作者：杨钰婷杨依纯卫兵艳武剑琴张瑞虎陈朝阳山西医科大学实验动物中心太原030001 山西省实验动物与人类疾病动物模型重点实验室太原030001

目的对课题组前期建立的近交系自发性2型糖尿病(T2DM)中国地鼠山医群体的血液生理生化指标进行检测并分析。方法选取12月龄近交系自发性T2DM中国地鼠山医群体及正常地鼠各10只,进行空腹采血,应用Sysmex XT自动血液分析仪及Hitachi全自... 详细信息

目的对课题组前期建立的近交系自发性2型糖尿病(T2DM)中国地鼠山医群体的血液生理生化指标进行检测并分析。方法选取12月龄近交系自发性T2DM中国地鼠山医群体及正常地鼠各10只,进行空腹采血,应用Sysmex XT自动血液分析仪及Hitachi全自动生化仪对血液15项生理指标及16项生化指标进行测定并进行统计分析。结果与对照组相比,糖尿病组白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血小板(PLT)、血红蛋白(HGB)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血糖(GLU)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、尿酸(UA)等指标差异具有统计学意义(P<0.05)。结论对课题组前期建立的近交系中国地鼠自发性T2DM模型进行血液生理生化指标检测分析,其变化符合人类T2DM发病的趋势,为该模型的应用及发展提供了基础数据。

关键词：中国地鼠 2型糖尿病生理指标生化指标

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生物信息学和孟德尔随机化分析口腔鳞状细胞癌差异表达基因与患者预后的相关性

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肿瘤防治研究 2025年第2期52卷 133-141页

作者：刘茂林宋晓娜刘雅琪史舒瑄宋国华山西医科大学资产管理部太原030001 山西医科大学实验动物中心实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室太原030001

目的通过生物信息学和孟德尔随机化分析口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的差异表达基因,探讨其与OSCC预后的相关性。方法TCGA数据库和数据集GSE138206筛选OSCC共同的差异基因,并利用孟德尔随机化分析它们之间的关系,进一步通过Cox风险回归分析... 详细信息

目的通过生物信息学和孟德尔随机化分析口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的差异表达基因,探讨其与OSCC预后的相关性。方法TCGA数据库和数据集GSE138206筛选OSCC共同的差异基因,并利用孟德尔随机化分析它们之间的关系,进一步通过Cox风险回归分析差异基因的预后价值,对预后价值高的基因进行单基因差异分析后进一步评估其生物学功能。结果两个数据库共筛选出147个共同差异基因,双样本孟德尔随机化结果显示GREM2与口腔鳞状细胞癌风险增加有关,SH3BGRL2与其风险减小有关,此外DKK1、CCL11和HOXC6是OSCC预后的独立标志基因,而DKK1的预测结果与实际结果的一致性最好。KEGG富集通路显示DKK1可能参与花生四烯酸代谢与亚油酸代谢。此外,DKK1与Tgd和Th2细胞呈正相关,与PDC、Cytotoxic、Mast、CD8 T、TFH、B、T和Th17细胞呈负相关。结论GREM2与OSCC风险增加有关、DKK1在OSCC中高表达且与不良预后相关,其可能参与调控OSCC中花生四烯酸与亚油酸代谢及免疫细胞浸润进程,为后续研究奠定了基础。

关键词：生物信息孟德尔随机化口腔鳞状细胞癌 Cox风险回归分析

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miR-181a-5p过表达慢病毒载体构建及其对OSCC细胞侵袭和迁移的影响

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实用口腔医学杂志 2025年第2期41卷 193-199页

作者：薛瑞续国强杨钧婷杨一言吴学海宋国华山西医科大学实验动物中心实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室太原030000 山西医科大学口腔医学院口腔疾病防治与新材料山西省重点实验室

目的:构建过表达miR-181a-5p的口腔鳞状细胞癌(OSCC)稳转细胞株,观察miR-181a-5p对OSCC细胞生物学行为的影响并探讨其潜在机制。方法:构建miR-181a-5p和对照慢病毒载体,分别转染CAL-27细胞,嘌呤霉素筛选获得稳定转染miR-181a-5p的细胞株... 详细信息

目的:构建过表达miR-181a-5p的口腔鳞状细胞癌(OSCC)稳转细胞株,观察miR-181a-5p对OSCC细胞生物学行为的影响并探讨其潜在机制。方法:构建miR-181a-5p和对照慢病毒载体,分别转染CAL-27细胞,嘌呤霉素筛选获得稳定转染miR-181a-5p的细胞株(OE)和对照细胞株(NC);运用激光共聚焦显微镜观察稳转细胞株荧光;qRT-PCR检测稳转株中miR-181a-5p和Bcl-2的表达、Western blot检测靶蛋白Bcl-2的表达;运用细胞划痕、Transwell实验和克隆形成实验检测稳转株的侵袭、迁移和增殖能力;使用qRT-PCR检测细胞侵袭和迁移关键因子的表达。结果:OE细胞中miR-181a-5p的表达量显著高于NC和未转染的空白对照组(Control)(P<0.01),OE组中Bcl-2的表达显著降低;同时,OE细胞的侵袭、迁移和增殖能力降低。此外,OE细胞中MMP2、MMP9、Vimentin和Ki67表达水平降低,而E-cadherin升高(P<0.01)。结论:miR-181a-5p过表达可显著抑制口腔癌的增殖、侵袭和迁移。

关键词： miR-181a-5p 稳转细胞株口腔癌侵袭迁移

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Gli2调控Hedgehog通路活化对Tca8113细胞增殖、转移和上皮间充质转化的影响

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中国比较医学杂志 2024年第3期34卷 1-9页

作者：刘茂林王晓堂宋晓娜马云辉常潇琪宋国华山西医科大学资产管理部太原030001 山西医科大学实验动物中心实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室太原030001

目的本研究通过在细胞水平检测Gli2对口腔癌细胞Tca8113增殖、生长、迁移和侵袭的影响,明确Gli2调控口腔癌细胞迁移和侵袭的分子机制。方法本研究利用siRNA抑制Tca8113细胞中Gli2的表达,通过CCK-8、平板克隆以及transwell小室实验分... 详细信息

目的本研究通过在细胞水平检测Gli2对口腔癌细胞Tca8113增殖、生长、迁移和侵袭的影响,明确Gli2调控口腔癌细胞迁移和侵袭的分子机制。方法本研究利用siRNA抑制Tca8113细胞中Gli2的表达,通过CCK-8、平板克隆以及transwell小室实验分别检测Gli2对Tca8113细胞增殖、生长、迁移与侵袭的影响。进一步利用qRT-PCR与Western blot实验探究Gli2调控Tca8113细胞恶性增殖和转移机制。结果口腔癌细胞Tca8113中Gli2的mRNA和蛋白表达升高。干扰Gli2表达可抑制Tca8113细胞增殖、生长、迁移及侵袭。进一步研究发现干扰Gli2表达可抑制Hedgehog(Hh)通路关键因子的mRNA与蛋白表达。此外,干扰Gli2表达可显著影响上皮间充质转化(epithelial mesenchymal transformation, EMT)通路关键因子的mRNA与蛋白表达。结论口腔癌病变过程中Gli2被异常激活,干扰Gli2表达显著抑制口腔癌细胞的增殖、生长、迁移和侵袭。Gli2通过调控Hh通路与EMT通路,进而影响口腔癌细胞的迁移和侵袭。本研究为阐明口腔癌的发病机制提供新思路,并为口腔癌的临床治疗提供新视角。

关键词： Tca8113细胞口腔癌 Gli2 细胞迁移细胞侵袭 Hedgehog通路上皮间充质转化

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莲心碱通过抑制NF-κB激活Nrf2/HO-1通路发挥抗炎抗氧化作用

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中国实验动物学报 2022年第2期30卷 191-197页

作者：张锐虎姚茹史泽雅郭民霍怡彤侯佳楠陈朝阳山西医科大学实验动物中心太原030001 山西省实验动物与人类疾病动物模型重点实验室太原030001

目的探讨莲心碱(liensinine, lie)在脂多糖(lipid polysaccharides, lPS)诱导的RAW264.7细胞炎症模型中的抗炎抗氧化作用机制。方法将细胞分为对照组(Control group),LPS组(LPS group),莲心碱(0.5、1、2μmol/L)组。采用CCK-8法筛选莲心碱的无细胞毒性浓度,Griess法检测一氧化氮(NO)的浓度,酶联免疫法(ELISA)检测前列腺素2(PGE2)的浓度以及促炎因子(TNF-α、IL-6和IL-1β)的含量、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测COX-2和iNOS mRNA的表达,DCFH-DA探针检测细胞中活性氧(ROS)含量,试剂盒检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)的活性以及谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的含量,蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测NF-κB、MAPK和Nrf2/HO-1通路中关键蛋白的表达情况。结果 0~4μmol/L莲心碱对细胞活力无影响,与LPS组相比,莲心碱组(0.5、1、2μmol/L)细胞中的促炎因子含量下降(P<0.05),NO和PGE2浓度下降(P<0.05),COX-2和iNOS mRNA表达降低(P<0.05),NF-κB和MAPK通路被抑制(P<0.05),且具有剂量依赖性,莲心碱处理后ROS和MDA的含量显著低于LPS组(P<0.01),SOD的活性和GSH的含量显著高于LPS组(P<0.01),Nrf2/HO-1通路活性也较于LPS组显著增加(P<0.05)。结论莲心碱通过抑制NF-κB和MAPK通路与激活Nrf2/HO-1通路发挥抗炎抗氧化作用。

关键词：莲心碱脂多糖 RAW264.7巨噬细胞炎症氧化应激

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冬凌草甲素对急性肺损伤小鼠肺组织炎症的抑制作用及相关机制研究

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中药新药与临床药理 2022年第4期33卷 441-445页

作者：郭民高继萍张瑞虎景志杰史泽雅侯佳楠霍怡彤陈朝阳山西医科大学实验动物中心实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室山西太原030001

目的研究冬凌草甲素(oridonin)对急性肺损伤(ALI)小鼠的抗炎作用及其机制。方法将24只Balb/c雄性小鼠随机分为4组:对照组、模型组、冬凌草甲素组和地塞米松(DEX)组,每组6只。小鼠腹腔注射冬凌草甲素(10 mg·kg^(-1))或地塞米松(5 mg... 详细信息

目的研究冬凌草甲素(oridonin)对急性肺损伤(ALI)小鼠的抗炎作用及其机制。方法将24只Balb/c雄性小鼠随机分为4组:对照组、模型组、冬凌草甲素组和地塞米松(DEX)组,每组6只。小鼠腹腔注射冬凌草甲素(10 mg·kg^(-1))或地塞米松(5 mg·kg^(-1))1 h后,鼻内滴注脂多糖(0.5 mg·kg^(-1))作用12 h诱导急性肺损伤,设为冬凌草甲素组和地塞米松组;模型组小鼠仅鼻内滴注脂多糖作用12 h,建立急性肺损伤模型;对照组仅鼻内滴注等剂量生理盐水。采用HE染色检测肺组织病理损伤;酶联免疫吸附(ELISA)法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6;Western Blot法检测肺组织核因子κB(NF-κB)p65、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)相关蛋白质(ERK、p38和JNK)磷酸化。结果与对照组比较,模型组肺组织出现明显病理损伤,中性粒细胞和巨噬细胞浸润增多(P<0.01);与模型组比较,冬凌草甲素组和地塞米松组小鼠肺组织中性粒细胞和巨噬细胞浸润减少(P<0.05)。与对照组比较,模型组支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β和IL-6含量增加(P<0.01);与模型组比较,冬凌草甲素组和地塞米松组小鼠支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β和IL-6含量减少(P<0.01)。与对照组比较,模型组肺组织磷酸化的p65、ERK、p38和JNK增多(P<0.01);与模型组比较,冬凌草甲素组和地塞米松组肺组织磷酸化的p65、ERK、p38和JNK减弱(P<0.05,P<0.01)。结论冬凌草甲素可减轻急性肺损伤小鼠肺组织炎症反应,其作用机制与抑制NF-κB和MAPK信号通路有关。

关键词：冬凌草甲素急性肺损伤抑制炎症因子核因子κB(NF-κB) 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK) 小鼠

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中国地鼠口腔颊囊鳞癌组织的非靶代谢组学分析

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实用口腔医学杂志 2024年第5期40卷 608-613页

作者：张锐虎王渊续国强高继萍宋国华陈朝阳轩瑞晶实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室山西医科大学实验动物中心太原030001 山西医科大学基础医学院微生物与免疫学教研室

目的:探讨口腔鳞状细胞癌(OSCC)发病的代谢基础及相关分子机制。方法:将20只中国地鼠分为模型组和对照组(n=10),采用化学诱导法建立颊囊黏膜鳞癌模型;色谱-质谱联用鉴定2组鼠颊囊的代谢物,以正交偏最小二乘判别分析模型的变量权重值>... 详细信息

目的:探讨口腔鳞状细胞癌(OSCC)发病的代谢基础及相关分子机制。方法:将20只中国地鼠分为模型组和对照组(n=10),采用化学诱导法建立颊囊黏膜鳞癌模型;色谱-质谱联用鉴定2组鼠颊囊的代谢物,以正交偏最小二乘判别分析模型的变量权重值>1和P<0.05为标准,筛选两组样本中的差异代谢物,进行KEGG通路富集分析。结果:二甲基苯并蒽-石蜡油溶液涂抹18周,模型组地鼠颊囊有弥漫性白斑分布、乳头状突起明显,病理学诊断为高分化鳞癌;脂类和类脂质分子是癌变组织和正常组织的主要差异代谢物;不饱和脂肪酸生物合成重编程、胆固醇积累、色氨酸分解代谢增强、天冬氨酸上调、嘧啶和嘌呤合成增加等是OSCC发生发展中的重要代谢特征。结论:靶向相关代谢途径的分子干预,有望抑制OSCC发病和进展。

关键词：中国地鼠口腔颊囊鳞癌组织非靶代谢组

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非编码RNA调控口腔鳞状细胞癌葡萄糖代谢重编程的研究进展

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中国比较医学杂志 2022年第3期32卷 91-97页

作者：杨一言高继萍续国强王晓堂宋国华山西医科大学实验动物中心实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室太原030001

口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)是头颈部最常见的恶性肿瘤之一,其发病率在全球范围内逐年上升。葡萄糖代谢重编程是肿瘤中最具代表的代谢特征,具有独特能量代谢特点,在氧气充足的情况下,肿瘤细胞仍会优先选择糖酵解... 详细信息

口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)是头颈部最常见的恶性肿瘤之一,其发病率在全球范围内逐年上升。葡萄糖代谢重编程是肿瘤中最具代表的代谢特征,具有独特能量代谢特点,在氧气充足的情况下,肿瘤细胞仍会优先选择糖酵解,而不是选择能够高效产能的线粒体氧化磷酸化(oxidative phosphorylation,OXPHOS)。当前研究表明在口腔鳞状细胞癌的发生发展过程中非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)可以直接靶向葡萄糖转运蛋白及关键酶来改变葡萄糖代谢,或者通过调节癌症相关信号通路间接改变葡萄糖代谢。本文对ncRNA调控口腔鳞状细胞癌有氧糖酵解的有关机制进行综述。

关键词：非编码RNA 口腔鳞状细胞癌葡萄糖代谢有氧糖酵解

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