检索结果-内蒙古大学图书馆

人脑髓鞘碱性蛋白对H_2O_2诱导人肺癌细胞YTLMC-90凋亡的抑制作用

癌症 2006年第2期25卷 170-174页

作者：陈建业王晓明刘戟陈璟歆王若菡彭文珍程汉华陈俊杰四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学研究所四川成都610041 川北医学院神经电生理研究所四川南充637007 川北医学院生物化学教研室四川南充637007

背景与目的:人脑髓鞘碱性蛋白(myelinbasicprotein,MBP)广泛分布于神经系统及多种非神经组织之中,而且在肺癌、乳腺癌、神经胶质瘤等多种肿瘤细胞中均检查到MBP的表达。但MBP与癌细胞侵犯神经组织的活性是否相关、与肺癌细胞的生物学行... 详细信息

背景与目的:人脑髓鞘碱性蛋白(myelinbasicprotein,MBP)广泛分布于神经系统及多种非神经组织之中,而且在肺癌、乳腺癌、神经胶质瘤等多种肿瘤细胞中均检查到MBP的表达。但MBP与癌细胞侵犯神经组织的活性是否相关、与肺癌细胞的生物学行为是否相关尚未见报道。本研究主要探讨MBP对过氧化氢(H2O2)诱导人肺癌细胞YTLMC-90凋亡的影响。方法:实验分为MBPcDNA微基因pSVCEPMBPCAT转染组(试验组)、空质粒pSVCEPCAT转染组和未转染组(对照组)。将含人Ⅰ型胶原a1链(COLⅠA1)基因启动子和增强子元件、并在其3′端接MBPcDNA的微基因,转染YTLMC-90细胞,并驱动MBP异位表达;采用MTT法检测细胞增殖,吖啶橙荧光染色显微镜和电镜观察细胞形态及其超微结构的改变;琼脂糖凝胶电泳检测染色质DNA断裂。结果:200μmol/LH2O2作用24h后,转染组、未转染组和空载体pSVCEPCAT转染组YTLMC-90细胞的生长抑制率分别为36.67%、84.00%和78.67%(P<0.001);对照组YTLMC-90细胞普遍可见凋亡细胞特有的形态学及生物化学改变,如胞核固缩、染色质断裂,DNA电泳呈梯状条带;而MBPcDNA微基因转染的YTLMC-90细胞未发现上述凋亡特征。结论:MBP促进YTLMC-90细胞增殖和拮抗H2O2诱导的凋亡,明显减少H2O2对YTLMC-90的细胞毒作用。

关键词：髓鞘碱性蛋白微基因过氧化氢肺肿瘤 YTLMC-90细胞系凋亡

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干细胞因子研究进展

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川北医学院学报 2006年第1期21卷 91-95页

作者：张小丽朱道银唐恩洁重庆医科大学疫微生物教研室四川重庆400016 川北医学院免疫学与分子生物学研究所四川南充637000

人干细胞因子(hSCF)是新近发现的重要造血细胞因子,它是酪氨酸激酶受体c-K it的配体。SCF主要作用于早期造血干细胞、原始造血祖细胞,并且诱导这些细胞的存活、增殖和分化。SCF单独使用生物学作用低,但它与其它细胞因子具有强的协同作用... 详细信息

人干细胞因子(hSCF)是新近发现的重要造血细胞因子,它是酪氨酸激酶受体c-K it的配体。SCF主要作用于早期造血干细胞、原始造血祖细胞,并且诱导这些细胞的存活、增殖和分化。SCF单独使用生物学作用低,但它与其它细胞因子具有强的协同作用。SCF临床应用,包括体内干细胞扩增治疗、用于基因治疗的体外培养造血干细胞及肿瘤放疗化疗后的辅助治疗。SCF与G-CSF联合使用刺激扩增外周血干/祖细胞(PBPCs),可用于干/祖细胞移植,以增加患者所需PBPCs的比例,减少收集PBPCs的次数。本综述主要介绍了人SCF的发现、结构、功能及临床应用。

关键词：人干细胞因子 c—kit受体功能临床应用

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外源性P_(53)基因转染的人肝癌细胞化疗药物敏感性的研究

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免疫学杂志 2005年第2期21卷 148-149页

作者：杨晓红唐恩洁任碧轩川北医学院免疫学与分子生物学研究室四川南充637007

目的　探讨外源性P53基因转染对人肝癌细胞系HepG 2化疗敏感性的影响。方法　将人野生型P53基因表达载体导入HepG 2细胞中,经筛选和鉴定后,采用MTT法观察其对甲氨蝶呤(MTX)和足叶乙甙(VP16 )作用后的HepG 2细胞生长抑制及凋亡的影响。... 详细信息

目的　探讨外源性P53基因转染对人肝癌细胞系HepG 2化疗敏感性的影响。方法　将人野生型P53基因表达载体导入HepG 2细胞中,经筛选和鉴定后,采用MTT法观察其对甲氨蝶呤(MTX)和足叶乙甙(VP16 )作用后的HepG 2细胞生长抑制及凋亡的影响。结果　外源性P53基因在转染细胞中有效表达。增强了MTX和VP16对HepG 2细胞生长抑制并促进了药物诱导的细胞凋亡。结论　外源性P53基因能增加肝癌细胞对化疗药物的敏感性。

关键词：野生型P53基因人肝癌细胞系化疗敏感性

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不同种株利什曼原虫毒力基因表达谱的初步研究

不同种株利什曼原虫毒力基因表达谱的初步研究

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2005年寄生虫学国际学术研讨会暨中国动物学会寄生虫专业委员会第十次学术研讨会

作者：敬保迁张仁刚张洁川北医学院分子生物学研究所川北医学院分子生物学研究所川北医学院分子生物学研究所

利什曼原虫为一复杂的种团结构,不同种株的利什曼原虫引起皮肤局部损害、黏膜损害及致死性的内脏利什曼病。为了分析利什曼原虫毒力基因表达的种株期异质性,我们以含10%新生小牛血清的M199 复合培养液体外培养硕大利什曼原虫人株(MHOM/S... 详细信息

利什曼原虫为一复杂的种团结构,不同种株的利什曼原虫引起皮肤局部损害、黏膜损害及致死性的内脏利什曼病。为了分析利什曼原虫毒力基因表达的种株期异质性,我们以含10%新生小牛血清的M199 复合培养液体外培养硕大利什曼原虫人株(MHOM/SU/73/5ASKH)、热带利什曼原虫人株(MHOM/SU/74/K27)、杜氏利什曼原虫四川人株(MHOM/CN/86/SC6)、婴儿利什曼原虫人株(MHOM/TN/80/IPTI(LEM235))、婴儿利什曼原虫新疆人分离株(MHOM/CN/93/KXG-Liu)、墨西哥利

关键词：利什曼原虫毒力基因异质性

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哺乳动物shRNA表达载体的构建及鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2005年第6期21卷 786-788页

作者：杨健唐恩洁朱道银川北医学院分子生物学研究所四川南充637007 重庆医科大学微生物学教研室重庆410000

目的:构建带有绿色荧光蛋白报告基因的哺乳动物shRNA表达载体。方法:用PCR方法从含有人U6启动子的载体PTZU6+1中扩增U6启动子,将其克隆到pEGFP-C1载体中,通过限制性内切酶、PCR及测序对构建的载体进行鉴定,以其转染HepG2细胞后,在倒置... 详细信息

目的:构建带有绿色荧光蛋白报告基因的哺乳动物shRNA表达载体。方法:用PCR方法从含有人U6启动子的载体PTZU6+1中扩增U6启动子,将其克隆到pEGFP-C1载体中,通过限制性内切酶、PCR及测序对构建的载体进行鉴定,以其转染HepG2细胞后,在倒置荧光显微镜下初步观察绿色荧光蛋白的表达。结果:经限制性内切酶、PCR及测序证实,成功地构建哺乳动物shRNA表达载体。以其转染HepG2细胞后可以表达绿色荧光蛋白。结论:构建了带有绿色荧光蛋白报告基因的哺乳动物shRNA表达载体,为以后运用该载体进行RNAi相关研究奠定了一定的基础。

关键词： shRNA RNA 哺乳动物

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乙型肝炎病毒前S2/S与重组人GM-CSF融合基因的分子克隆及鉴定

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四川医学 2005年第4期26卷 367-369页

作者：郭晓兰唐恩洁邓健康川北医学院附属医院四川南充637000 川北医学院免疫学与分子生物学研究所四川南充637000

目的　为探讨乙型肝炎病毒前S2 (preS2 )和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM -CSF)对乙型肝炎疫苗的免疫增强作用,构建S2 /S(preS2 +HBsAg)与GM -CSF融合基因真核表达载体。方法　采用PCR技术分别扩增出S2 /S大小约846bp的编码基因片段... 详细信息

目的　为探讨乙型肝炎病毒前S2 (preS2 )和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM -CSF)对乙型肝炎疫苗的免疫增强作用,构建S2 /S(preS2 +HBsAg)与GM -CSF融合基因真核表达载体。方法　采用PCR技术分别扩增出S2 /S大小约846bp的编码基因片段和带有15个甘氨酸接头序列的GM CSF约45 0bp编码基因片段,经T A克隆后分布克隆至载体PcDNA3 .1中,获得PcDNA3 .1 S2 /S GM CSF融合基因表达载体,利用酶切、PCR和DNA序列测定进行鉴定插入片段的大小和方向。结果　经过鉴定该融合基因全长约13 0 0bp ,证实为S2 /S GM- CSF融合基因。结论　乙型肝炎病毒(HBV)S2 /S和GM- CSF融合基因真核表达载体构建成功,为进一步研究其表达和生物学活性奠定了一定基础。

关键词：乙型肝炎病毒前S2/S 重组人GM-CSF融合基因分子克隆鉴定

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基因组免疫系统

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国外医学（免疫学分册） 2005年第1期28卷 31-37页

作者：唐恩洁杨健朱道银川北医学院免疫与分子生物学研究所，四川南充637000 重庆医科大学

随着对RNAi现象及其功能的深入研究 ,揭示dsRNA/siRNA具靶向降解特异性mRNA、抑制相应基因表达作用 ,有抵抗病毒和转座子入侵基因组的重要功能 ,故被称为“基因组免疫系统”。本文综述了该系统的发现、功能、作用机制和应用前景。

关键词：基因组免疫系统 RNAi siRNA dsRNA

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用bcl-2反义mRNA和dsRNA抑制SP_2/O生长的比较研究

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实用肿瘤学杂志 2005年第1期19卷 52-55页

作者：唐恩洁任碧轩冯莉杜冰王朝莉巫幸福杨健李仁四川省南充市川北医学院免疫学与分子生物学研究所南充637000 川北医学院组织胚胎学教研室川北医学院生物教研室川北医学院卫生学教研室泸州医学院病理学教研室

目的　本研究旨在比较靶向bcl- 2基因的反义mRNA和dsRNA对SP2 O细胞生长的抑制作用。方法　采用MTT法,免疫荧光和免疫细胞化学技术,克隆形成试验及分光光度计测定细胞总蛋白含量等方法,分析比较了经体外转录获得的bcl- 2反义mRNA利Lds... 详细信息

目的　本研究旨在比较靶向bcl- 2基因的反义mRNA和dsRNA对SP2 O细胞生长的抑制作用。方法　采用MTT法,免疫荧光和免疫细胞化学技术,克隆形成试验及分光光度计测定细胞总蛋白含量等方法,分析比较了经体外转录获得的bcl- 2反义mRNA利LdsRNA抑制SP2 O细胞生长、bcl- 2特异性蛋白和总蛋白表达及其克隆原性的作用。结果　检测结果证实bcl- 2反义mRNA和dsRNA对上述指标均有抑制作用,两者比较dsRNA的抑制作用更强,持续时间也较长,作为对照的bcl- 2正义RNA对上述指标无显著增强作用。提示LdsRNA对bcl- 2高表达的肿瘤细胞有更强的抑制和杀伤作用,因此有可能用于这些肿瘤的临床治疗。

关键词： bcl-2 反义 RNA 抑制作用肿瘤细胞生长靶向克隆细胞总蛋白体外转录

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乙型肝炎病毒S与GM—CSF融合基因在HepG2细胞中的表达

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世界感染杂志 2005年第1期5卷 34-37页

作者：郭晓兰唐恩洁邓健康四川省川北医学院附属医院检验科，四川南充637000 四川省川北医学院附属医院免疫学与分子生物学研究所，四川南充637000

目的研究粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSF)对乙型肝炎DNA疫苗的免疫增强作用。方法采用PCR方法，扩增乙型肝炎S基因约680bp的片段和GM—CSF(包括甘氨酸接头)基因450bp的片段。通过基因定向克隆技术，构建融合基因真核表达质粒pcDNA... 详细信息

目的研究粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSF)对乙型肝炎DNA疫苗的免疫增强作用。方法采用PCR方法，扩增乙型肝炎S基因约680bp的片段和GM—CSF(包括甘氨酸接头)基因450bp的片段。通过基因定向克隆技术，构建融合基因真核表达质粒pcDNA3．1-S-GM-CSF，并在HepG2细胞中表达。结果经酶切、PCR及DNA测序鉴定，融合基因表达质粒pcDNA3．1-S-GM-CSF成功构建。将其转染HepG2细胞后，RT-PCR检测目的基因的转录，表达的融合蛋白能与抗-HBs、抗-GM-CSF单克隆抗体(mAbs)均产生特异性反应。结论融合基因表达载体pcDNA3．1-s-GM-CSF的成功构建并表达，为进一步研究乙型肝炎融合基因疫苗奠定了一定实验基础。

关键词：融合基因 GM—CSF GM-CSF HepG2细胞表达载体乙型肝炎 pcDNA3 目的基因定向克隆转录

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HBV preS2S-rhGM-CSF融合基因表达质粒的构建和表达

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细胞与分子免疫学杂志 2004年第5期20卷 548-551页

作者：郭晓兰邓健康朱道银唐恩洁川北医学院附属医院检验科四川南充637000 重庆医科大学微生物学与免疫学教研室重庆400016 川北医学院免疫学与分子生物学研究所四川南充637007

目的 :研究GM CSF和preS2对乙肝DNA疫苗的免疫增强作用。方法 :采用PCR方法 ,扩增HBVpreS2 +S基因约 84 6bp的片段和rhGM CSF(包括甘氨酸接头 )基因 4 5 0bp的片段。通过T A克隆技术和基因定向克隆 ,构建融合基因的真核表达质粒pcDNA3.1... 详细信息

目的 :研究GM CSF和preS2对乙肝DNA疫苗的免疫增强作用。方法 :采用PCR方法 ,扩增HBVpreS2 +S基因约 84 6bp的片段和rhGM CSF(包括甘氨酸接头 )基因 4 5 0bp的片段。通过T A克隆技术和基因定向克隆 ,构建融合基因的真核表达质粒pcDNA3.1 S2S rhGM CSF ,并在HepG2细胞中表达。结果 :经酶切、PCR及DNA测序鉴定 ,融合基因表达质粒HB VpreS2S rhGM CSF成功地构建。将其转染HepG2细胞后 ,目的基因的转录通过RT PCR得到证实 ,而且表达的融合蛋白能与抗 HBs、抗 preS2和抗 GM CSF单克隆抗体 (mAb)均产生特异性反应。结论 :融合基因表达载体pcDNA3.1 S2S rhGM CSF的成功构建并表达。

关键词： HBV preS2 GM-CSF 融合基因

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