检索结果-内蒙古大学图书馆

解剖学报 2022年第3期53卷 302-308页

作者：郭镇洲杨靓彭彬郭洋李阳友黄静杨正伟川北医学院形态学研究所四川南充637000 川北医学院第二附属医院耳鼻喉科四川南充637000 川北医学院实验动物学教研室四川南充637000

目的确定老年大鼠海马神经元的细胞核是否萎缩。方法从1、2和3年龄的正常雄性SD大鼠(每个年龄组5只)的一侧(随机选择)大脑半球,完整剥离海马结构,甲基丙烯酸树脂包埋后作连续切片,厚40μm,等距随机抽选3~4张切片,过碘酸、席夫试剂和苏... 详细信息

目的确定老年大鼠海马神经元的细胞核是否萎缩。方法从1、2和3年龄的正常雄性SD大鼠(每个年龄组5只)的一侧(随机选择)大脑半球,完整剥离海马结构,甲基丙烯酸树脂包埋后作连续切片,厚40μm,等距随机抽选3~4张切片,过碘酸、席夫试剂和苏木精染色。用体视学方法估计海马神经元细胞核的大小:先用光学体视框均匀随机抽选细胞核,然后在其最大轮廓的聚焦平面(光学切片)测其费雷特(Feret)直径作为细胞核直径,然后在其核仁的最清晰聚焦平面用核距测量法测其体积。结果整个海马内,3个年龄组的神经元细胞核平均直径为8.7~9.2μm,平均体积为392~457μm^(3),两者组间差异皆无显著性。海马各区——CA区(海马本部)、齿状回或下托的细胞核平均直径或体积组间差异也无显著性。结论从中年到老年,大鼠整个海马内神经元细胞核的大小未发现明显的年龄相关变化。

关键词：海马结构神经元细胞核体视学直径体积老年大鼠

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从低龄至高龄大鼠海马结构神经元数量和细胞核体积的体视学定量研究

从低龄至高龄大鼠海马结构神经元数量和细胞核体积的体视学定量研...

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第十七届中国体视学与图像分析学术会议

作者：杨靓郭镇洲郭洋李阳友杨正伟彭彬川北医学院第二附属医院川北医学院形态学研究所川北医学院实验动物学教研室

近年来人们普遍认为老年学习与记忆功能减退与海马结构有关,而且常以大鼠作为研究模型。本研究的目的是确定从低龄到高龄大鼠海马结构及其主要亚区神经元数量和细胞核体积的年龄相关变化。分别从同群正常雄性Sprague-Dawley大鼠中随机抽... 详细信息

近年来人们普遍认为老年学习与记忆功能减退与海马结构有关,而且常以大鼠作为研究模型。本研究的目的是确定从低龄到高龄大鼠海马结构及其主要亚区神经元数量和细胞核体积的年龄相关变化。分别从同群正常雄性Sprague-Dawley大鼠中随机抽选15日龄、3、12、24和36月龄动物各5～6只,从每只动物轮流抽选左侧或右侧海马制备连续的甲基丙烯酸树脂包埋切片,从中等距随机抽选3～5张行PAS和苏木精染色后运用分合法和核距测量法等体视学技术估计海马结构及其亚区(CA、DG)内神经元的数量和细胞核的体积。我们的结果显示,整个海马结构内,神经元的数量从15日龄～36月龄无显著变化,神经元的核体积从15日龄至3月龄至12月龄均显著减小(P<0.05),然后在12～36月龄趋于平稳;海马的CA亚区锥体层内,神经元的数量从15日龄～24月龄期间无显著减少,从24～36月龄减少了25%(P>0.05),神经元的核体积15日龄～3月龄无显著变化,3～12月龄显著减小了23%,12～36月龄趋于稳定;海马的DG亚区颗粒层内,神经元的数量从15日龄持续增加至36月龄,36月龄较15日龄增加了42%,但各年龄组间均无显著性差异,神经元的核体积从15日龄至3月龄至12月龄均显著减小,然后在12～36月龄趋于平稳。我们的结果说明,从低龄到高龄,整个海马结构内的神经元数量无显著的年龄相关性改变,海马各区——DG颗粒层内神经元数量持续增加可能是大鼠DG内终生存在神经发生的证据,CA锥体层在衰老晚期存在轻微的神经元丢失;大鼠整个海马结构内神经元的细胞核体积从幼年到成年显著减小,从中年到老年之后趋于平稳。

关键词：大鼠海马海马结构颗粒层体视学细胞核定量研究

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S1P/S1PR1通路调节LAMB3的表达对食管鳞癌细胞迁移、黏附和转移的影响

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中国细胞生物学学报 2022年第8期44卷 1579-1591页

作者：蒙春梅任玲唐茂林徐凤敏项涛刘露李丽胡为民川北医学院免疫学教研室南充637100 南充市中心医院检验科南充637100 川北医学院实验动物学教研室南充637100 川北医学院机能中心南充637100 川北医学院附属医院病理科南充637100 川北医学院免疫学与分子生物学研究所南充637007

该文主要探讨1-磷酸鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)/1型1-磷酸鞘氨醇受体(sphingosine 1-phosphate receptor 1,S1PR1)通路调节层黏连蛋白亚基β3(laminin subunit beta 3,LAMB3)的表达对食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)细胞增殖、迁移、黏附及转移的影响。使用GEO数据库分析LAMB3在ESCC癌组织与癌旁正常组织中的表达差异情况;用Western blot检测人食管上皮细胞HEEC及人食管鳞癌Eca109、TE-1、KYSE-150细胞中LAMB3的表达量;用S1P处理TE-1细胞,或在Eca109细胞中敲低或过表达S1PR1,采用Western blot检测LAMB3的表达情况;S1PR1-EGFP过表达载体和LAMB3小干扰RNA(siRNA)共转染Eca109细胞,采用划痕实验检测迁移能力;采用LAMB3 siRNA或LAMB3短发夹RNA(shRNA)下调ESCC细胞LAMB3的表达,过表达LAMB3的慢病毒上调ESCC细胞LAMB3的表达,通过CCK8法、划痕实验、细胞–基质黏附实验分别检测ESCC细胞的增殖、迁移和黏附能力,Western blot检测上皮–间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白及基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)的表达情况;裸鼠尾静脉注射LAMB3 shRNA敲低的Eca109细胞,观察其转移能力及生存期。结果显示,LAMB3在ESCC癌组织及ESCC细胞中的表达均高于癌旁正常组织及正常食管上皮细胞;S1P作用后的TE-1细胞LAMB3表达水平增高;在Eca109细胞中敲低S1PR1,LAMB3表达下调;在Eca109细胞中过表达S1PR1,LAMB3表达上调,促进细胞迁移,并且干扰LAMB3表达可抑制上述作用;敲低LAMB3的表达,Eca109、TE-1细胞增殖无显著变化,而迁移、黏附受到明显抑制,过表达LAMB3后,Eca109细胞增殖无显著变化,而迁移、黏附增强;LAMB3 shRNA敲低的Eca109细胞EMT过程被抑制,MMP9表达降低,过表达LAMB3则出现相反的效应;与NC shRNA组相比,注射LAMB3 shRNA敲低的Eca109细胞的裸鼠生存期明显延长,肿瘤体内转移灶减少。该研究得出,LAMB3在ESCC细胞及组织中表达上调,S1P/S1PR1通路能诱导LAMB3的表达,促进ESCC细胞的体外迁移、黏附和体内转移。

关键词： 1-磷酸鞘氨醇 1型1-磷酸鞘氨醇受体层黏连蛋白亚基β-3 食管鳞癌上皮–间质转化迁移黏附

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从低龄至高龄大鼠肾脏主要组织结构的体视学定量研究

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解剖学杂志 2021年第S1期44卷 172-173页

作者：王丹郭洋李阳友文晓红杨正伟川北医学院组织胚胎学教研室南充637000 川北医学院形态定量研究室川北医学院医学实验动物学教研室

从低龄至高龄大鼠肾脏内各种组织结构(尤其是肾小管和间质)的总量或尺寸,缺乏全面的定量研究,因此人们对大鼠肾脏组织学的老年(老化或衰老)改变并没有清晰的认识。本项研究从同群正常雄性Sprague-Dawley大鼠中,在其不同生长阶段随机抽选... 详细信息

从低龄至高龄大鼠肾脏内各种组织结构(尤其是肾小管和间质)的总量或尺寸,缺乏全面的定量研究,因此人们对大鼠肾脏组织学的老年(老化或衰老)改变并没有清晰的认识。本项研究从同群正常雄性Sprague-Dawley大鼠中,在其不同生长阶段随机抽选3、6、12、24月龄和36月龄动物各8~9只,从每只动物随机获取一侧肾脏,从每个肾脏随机切取4个组织块、4张切片(甲基丙烯酸树脂包埋),采用过碘酸-席夫试剂和苏木精染色后,根据体视学方法估计肾内各种主要组织结构的总体积以及肾小体轮廓的平均直径和肾小管(除外髓袢细段的近端和远端小管以及集合小管)的长度。结果显示,从3月龄开始,大鼠体重持续增长至24月龄,到36月龄时显著下降。

关键词：体视学方法甲基丙烯酸树脂过碘酸苏木精染色远端小管一侧肾脏随机抽选髓袢

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从低龄至高龄大鼠肾脏主要组织结构的体视学定量研究

从低龄至高龄大鼠肾脏主要组织结构的体视学定量研究

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中国解剖学会2021年年会

作者：王丹郭洋李阳友文晓红杨正伟川北医学院组织胚胎学教研室川北医学院形态定量研究室川北医学院医学实验动物学教研室

从低龄至高龄大鼠肾脏内各种组织结构(尤其是肾小管和间质)的总量或尺寸,缺乏全面的定量研究,因此人们对大鼠肾脏组织学的老年(老化或衰老)改变并没有清晰的认识。本项研究从同群正常雄性Sprague-Dawley大鼠中,在其不同生长阶段随机抽选3、6、12、24月龄和36月龄动物各8～9只,从每只动物随机获取一侧肾脏,从每个肾脏随机切取4个组织块、4张切片(甲基丙烯酸树脂包埋),采用过碘酸-席夫试剂和苏木精染色后,

关键词：大鼠肾脏定量研究体视学

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利用CRISPR/CAS9技术介导LoxP序列靶向引入小鼠SM22α基因

利用CRISPR/CAS9技术介导LoxP序列靶向引入小鼠SM22α基因

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第十二届中国实验动物科学年会

作者：刘超董伟李冰谢英苏利波张力韩梅河北省实验动物重点实验室河北医科大学实验动物学部北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所河北省实验动物重点实验室河北医科大学实验动物学部北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所河北医科大学生物化学与分子生物学教研室河北省医学生物技术重点实验室

目的平滑肌22α(SM22α)是平滑肌细胞(VSMC)骨架相关蛋白,参与VSMC骨架重构,与动脉粥样硬化、高血压等血管重塑性疾病与关.本研究旨在在SM22α基因内部引入LoxP序列,制备基于Cre/LoxP系统的SM22α条件性基因敲除小鼠,研究其在VSMC骨架... 详细信息

目的平滑肌22α(SM22α)是平滑肌细胞(VSMC)骨架相关蛋白,参与VSMC骨架重构,与动脉粥样硬化、高血压等血管重塑性疾病与关.本研究旨在在SM22α基因内部引入LoxP序列,制备基于Cre/LoxP系统的SM22α条件性基因敲除小鼠,研究其在VSMC骨架重构中的作用机制.方法利用CRISPR/Cas9技术编辑小鼠SM22α基因.在外显子1～2和3～4的非编码区各设计sgRNA位点并将其定向克隆至pUC57-sgRNA.设计包含外显子2、3及2个LoxP序列且两侧各带有700bp同源臂的环状供体载体.Cas9的mRNA使用mMESSAGE mMACHINE(R) T7Ultra Kit进行体外转录,sgRNA使用线性化的spUC57-sgRNA重组质粒作为模板用MEGAshortscriptTM Kit体外转录合成.将制备好Cas9 mRNA、sgRNA和供体质粒进行混合,其浓度分别为Cas9 mRNA 25 ng/μl,sgRNA 10 ng/μl,供体质粒4 ng/μl.水平显微注射法将其导入170枚C57BL/6×B6D2F1受精卵原核.将注射后存活的约140枚受精卵移植入5只当日见栓的假孕KM雌鼠输卵管中,得到17只子代小鼠,经PCR和测序筛选目标小鼠.结果有一只小鼠等位基因的特定位点插入了LoxP序列,三只小鼠删除了SM22α基因的第2第3外显子.结论借助CRISPR/Cas9技术得到了SM22α基因内部引入LoxP序列的小鼠和SM22α基因敲除小鼠,为研究SM22α在VSMC中的作用机制提供了重要实验条件.

关键词： SM22α VSMC骨架重构 CRISPR/CAS9

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利用CRISPR/CAS9技术介导LoxP序列靶向引入小鼠SM22α基因

利用CRISPR/CAS9技术介导LoxP序列靶向引入小鼠SM22α基因

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第十二届中国实验动物科学年会（2016.南宁）

作者：刘超董伟李冰谢英苏利波张力韩梅河北省实验动物重点实验室河北医科大学实验动物学部北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所河北医科大学生物化学与分子生物学教研室河北省医学生物技术重点实验室

目的平滑肌22α（SM22α）是平滑肌细胞（VSMC）骨架相关蛋白,参与VSMC骨架重构,与动脉粥样硬化、高血压等血管重塑性疾病与关。本研究旨在在SM22α基因内部引入LoxP序列,制备基于Cre/L0xP系统的SM22α条件性基因敲除小鼠,研究其在VSMC... 详细信息

目的平滑肌22α（SM22α）是平滑肌细胞（VSMC）骨架相关蛋白,参与VSMC骨架重构,与动脉粥样硬化、高血压等血管重塑性疾病与关。本研究旨在在SM22α基因内部引入LoxP序列,制备基于Cre/L0xP系统的SM22α条件性基因敲除小鼠,研究其在VSMC骨架重构中的作用机制。方法利用CRISPR/Cas9技术编辑小鼠SM22α基因。在外显子1～2和3～4的非编码区各设计sgRNA位点并将其定向克隆至pUC57-sgRNA。设计包含外显子2、3及2个LoxP序列且两侧各带有700bp同源臂的环状供体载体。Cas9的mRNA使用mMESSAGE mMACHINE（?）T7Ultra Kit进行体外转录,sgRNA使用线性化的spUC57-sgRNA重组质粒作为模板用MEGAshortscriptKit体外转录合成。将制备好Cas9 mRNA、sgRNA和供体质粒进行混合,其浓度分别为Cas9 mRNA 25 ng/μl,sgRNA 10 ng/μl,供体质粒4 ng/μl。水平显微注射法将其导入170枚C57BL/6×B6D2F1受精卵原核。将注射后存活的约140枚受精卵移植入5只当日见栓的假孕KM雌鼠输卵管中,得到17只子代小鼠,经PCR和测序筛选目标小鼠。结果有一只小鼠等位基因的特定位点插入了LoxP序列,三只小鼠删除了SM22α基因的第2第3外显子。结论借助CRISPR/Cas9技术得到了SM22α基因内部引入LoxP序列的小鼠和SM22α基因敲除小鼠,为研究SM22α在VSMC中的作用机制提供了重要实验条件。

关键词： SM22a VSMC骨架重构 CRISPR/CAS9

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