检索结果-内蒙古大学图书馆

中国免疫学杂志 2009年第7期25卷 613-616页

作者：胡为民唐恩洁敬保迁任碧轩川北医学院微生物学与免疫学教研室南充637007 川北医学院免疫学与分子生物学研究所南充637007

目的:研究FTY720诱导1型1-磷酸鞘氨醇受体(S1P1)内化与后者保守基序之间的关系。方法:以HA-S1P1(WT)-Myc-EGFP-N1融合表达载体为模板,应用重叠PCR的方法,将S1P1保守基序ERY突变为ENY,构建HA-S1P1(R142N)-Myc-EGFP-N1融合表达载体。测序... 详细信息

目的:研究FTY720诱导1型1-磷酸鞘氨醇受体(S1P1)内化与后者保守基序之间的关系。方法:以HA-S1P1(WT)-Myc-EGFP-N1融合表达载体为模板,应用重叠PCR的方法,将S1P1保守基序ERY突变为ENY,构建HA-S1P1(R142N)-Myc-EGFP-N1融合表达载体。测序鉴定后,经Polyfect转染入HEK293细胞。G418筛选出稳定细胞株。100 nmol/LFTY720处理3、6、12小时后,荧光显微镜下观察S1P1在HEK293细胞上的表达情况。结果:HA-S1P1(R142N)-Myc-EGFP-N1载体被成功构建,S1P1(WT)和S1P1(R142N)蛋白表达在HEK293稳定细胞株的表面,FTY720能诱导S1P1(WT)内化,但不能诱导S1P1(R142N)内化。结论:FTY720诱导S1P1内化与ERY保守基序有关。

关键词： FTY720 1型1-磷酸鞘氨醇受体内化荧光显微镜

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靶向HBVs和e抗原基因的shRNA表达载体共转染对HBV抗原表达的抑制作用

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细胞与分子免疫学杂志 2010年第12期26卷 1198-1199,1202页

作者：杨尚君王朝莉李丽唐恩洁川北医学院人体寄生虫学教研室四川南充637007 川北医学院免疫与分子生物学研究所四川南充637007

目的:探索靶向乙型肝炎病毒HBsAg基因的shR-NA表达载体Pgs1、Pgs2、Pgs3及靶向HBeAg基因shRNA表达载体psiHBV4、psiHBV5、psiHBV6共转染,对体外培养HepG2.2.15细胞中的HBV抗原表达的抑制作用。方法:以质粒PTZ为阴性对照,将自行构建的靶... 详细信息

目的:探索靶向乙型肝炎病毒HBsAg基因的shR-NA表达载体Pgs1、Pgs2、Pgs3及靶向HBeAg基因shRNA表达载体psiHBV4、psiHBV5、psiHBV6共转染,对体外培养HepG2.2.15细胞中的HBV抗原表达的抑制作用。方法:以质粒PTZ为阴性对照,将自行构建的靶向HBVs和e抗原基因的shRNA表达载体按不同组合共转染HepG-2.2.15细胞;继续培养24 h后用MEIA分别检测细胞裂解液和培养上清中HBsAg和HBeAg的表达水平。结果:psiHBV4+PgS2、psiH-BV4+PgS3在联合转染时,在细胞上清和裂解液中对HBsAg和HBeAg表达都有显著抑制作用(P<0.05),psiHBV5+PgS1、psiHBV6+PgS3对裂解液HBeAg表达抑制作用不显著(P>0.05)。结论:靶向HBs和HBe基因的两种载体psiH-BV4+PgS2、psiHBV4+PgS3共转染比单个载体转染更能显著减少HBV抗原的表达。

关键词：乙型肝炎病毒抗原 RNA干扰 shRNA表达载体

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小鼠B7-H4慢病毒表达载体的构建及对脾细胞增殖的影响

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中国免疫学杂志 2012年第3期28卷 200-204页

作者：李丽冯俊王朝莉敬保迁胡为民川北医学院病理教研室南充637007 川北医学院耳鼻喉科南充637007 川北医学院免疫学与分子生物学研究所南充637007

目的:构建小鼠B7-H4(mB7-H4)慢病毒表达载体并观察B7-H4蛋白对脾细胞增殖的影响。方法:从BALB/c小鼠肺脏中克隆B7-H4基因,构建表达载体mB7-H4-EGFP,酶切后克隆入慢病毒表达载体pCDH1-MCS1-EF1-Puro中,命名为pCDH1-mB7-H4-EGFP;以包含起... 详细信息

目的:构建小鼠B7-H4(mB7-H4)慢病毒表达载体并观察B7-H4蛋白对脾细胞增殖的影响。方法:从BALB/c小鼠肺脏中克隆B7-H4基因,构建表达载体mB7-H4-EGFP,酶切后克隆入慢病毒表达载体pCDH1-MCS1-EF1-Puro中,命名为pCDH1-mB7-H4-EGFP;以包含起始密码和多克隆位点的寡核苷酸取代mB7-H4作为对照载体pCDH1-Control-EGFP。分别与包装载体混合物一起经LipofectamineTM2000转染入293T细胞包装成病毒颗粒,感染293T细胞。pCDH1-mB7-H4-EGFP重组慢病毒感染的293T细胞分别与BALB/c、C57BL/6、BALB/c∶C57BL/6(1∶1)小鼠脾细胞混合培养,用MTT法检测其对脾细胞增殖的影响,对照为pCDH1-Con-trol-EGFP重组慢病毒感染的293T细胞进行的相同处理。结果:mB7-H4被成功克隆,测序证实与GenBank的mRNA核酸序列2个核苷酸有差异,但与其编码的氨基酸一致。pCDH1-mB7-H4-EGFP慢病毒表达载体被成功构建。mB7-H4蛋白表达在293T细胞表面,与对照相比,对BALB/c、C57BL/6、BALB/c∶C57BL/6(1∶1)小鼠脾细胞增殖均具有明显抑制作用。结论:成功构建小鼠B7-H4慢病毒表达载体,感染293T细胞后表达出对脾细胞增殖具有抑制活性的mB7-H4膜表面蛋白。

关键词： B7-H4 慢病毒载体 293T细胞

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表皮生长因子对食管鳞癌细胞Eca109细胞周期及其调控因子的影响

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中国免疫学杂志 2015年第12期31卷 1616-1620页

作者：李倩倩朱红王朝莉黎仕娟胡为民川北医学院微生物学与免疫学教研室南充637100 川北医学院免疫学与分子生物学研究所南充637007

目的:探讨表皮生长因子(EGF)对食管鳞癌细胞Eca109细胞周期及相关调控因子的影响。方法:20 ng/ml重组人EGF(rh EGF)作用于血清饥饿的Eca109细胞24 h,采用流式细胞术检测EGF对Eca109细胞周期的影响,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-P... 详细信息

目的:探讨表皮生长因子(EGF)对食管鳞癌细胞Eca109细胞周期及相关调控因子的影响。方法:20 ng/ml重组人EGF(rh EGF)作用于血清饥饿的Eca109细胞24 h,采用流式细胞术检测EGF对Eca109细胞周期的影响,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测p21CIP1/WAF1(p21)、p27KIP1(p27)mRNA的表达情况,Western blot检测p21、p27蛋白的表达情况。结果:EGF组和对照组G1期细胞所占比例分别为(54.90±0.82)%和(65.94±0.74)%(P<0.01);qRTPCR结果显示p21 mRNA表达水平EGF组明显高于对照组,p27 mRNA表达水平EGF组明显低于对照组(P<0.01);Western blot结果显示,p21蛋白表达水平EGF组明显高于对照组,p27蛋白表达水平EGF组明显低于对照组(P<0.01)。结论:EGF有利于Eca109细胞从G1期过渡到S期,促进细胞增殖,可能与调节p21、p27的mRNA和蛋白的表达相关。

关键词：表皮生长因子食管鳞癌 Eca109细胞细胞周期 p21CIP1/WAF1 p27KIP1

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MOOC理念在学习医学免疫学中的探讨

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中国免疫学杂志 2015年第6期31卷 840-841页

作者：黎仕娟胡为民川北医学院基础医学院微生物学与免疫学教研室南充637000

随着科学技术的飞速发展,医学免疫学在医学发展中的重要性日渐明显,作为当前医学中的前沿学科,在揭示感染、肿瘤、自身免疫性疾病、移植排斥的发生机制及其诊断和防治中发挥着重要作用[1]。由于学科本身的特点,医学免疫学在内容上涵盖... 详细信息

随着科学技术的飞速发展,医学免疫学在医学发展中的重要性日渐明显,作为当前医学中的前沿学科,在揭示感染、肿瘤、自身免疫性疾病、移植排斥的发生机制及其诊断和防治中发挥着重要作用[1]。由于学科本身的特点,医学免疫学在内容上涵盖了组织器官、细胞、分子及基因四个层面,理论性强,各章节间联系广泛[2],因此导致了学习医学免疫学的相对困难。

关键词：医学免疫学 MOOC 学习过程自身免疫性疾病开放式网络在线教育 courses 移植排斥自身免疫应答阿萨巴斯卡大学

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烟草糖基转移酶基因NtGT5a的克隆及原核表达

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烟草科技 2014年第7期47卷 69-74,84页

作者：钟晓武付强邹颉赵杰宏林世锋郭玉双任学良贵州省烟草科学研究院烟草行业烟草分子遗传重点实验室川北医学院附属医院医学研究中心川北医学院基础医学院生物学教研室

为揭示烟草糖基转移酶的活性及生物学功能,从烟草栽培品种中克隆了烟草糖基转移酶基因NtGT5a,基于GenBank的烟草糖基转移酶基因NtGT5a的核苷酸序列(GenBank登录号AB176523),设计并合成特异性引物,以红花大金元叶片总RNA为模板,通过RT-PC... 详细信息

为揭示烟草糖基转移酶的活性及生物学功能,从烟草栽培品种中克隆了烟草糖基转移酶基因NtGT5a,基于GenBank的烟草糖基转移酶基因NtGT5a的核苷酸序列(GenBank登录号AB176523),设计并合成特异性引物,以红花大金元叶片总RNA为模板,通过RT-PCR方法获得了烟草糖基转移酶基因NtGT5a的cDNA片段。序列分析表明,该基因编码区为1458 bp,编码485个氨基酸残基,推测的蛋白分子量为54.21 kDa,理论等电点为5.41。通过构建重组表达载体pCold-SUMO-NtGT5a,并转化大肠杆菌BL21(DE3),在15Ⅲ下经0.2 mmol/L IPTG诱导22 h表达产生了SUMO-NtGT5a重组蛋白。重组蛋白部分以包涵体形式存在,部分以可溶性蛋白形式存在。将重组蛋白的可溶性组分经过Ni-NTA柱层析纯化和凝胶过滤层析,用SUMO蛋白酶切除SUMO标签,再用镍柱纯化获得了高纯度的NtGT5重组蛋白。

关键词：烟草糖基转移酶基因蛋白酶

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肝左静脉的解剖学类型及其临床意义

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解剖学杂志 2004年第4期27卷 425-427页

作者：丁家明李惠君川北医学院解剖学教研室南充637007

目的 :为肝移植和肝部分切除术提供解剖学资料。方法 :在 40例成人尸体肝膈面沿肝左肝静脉切除肝实质 ,显露肝左静脉 ;对肝左静脉及其属支进行了观测。结果 :肝左静脉长度 ( 3 0 .3± 1 .1 )mm ;主干直径 ( 1 1 .3±0 .2 6)mm ... 详细信息

目的 :为肝移植和肝部分切除术提供解剖学资料。方法 :在 40例成人尸体肝膈面沿肝左肝静脉切除肝实质 ,显露肝左静脉 ;对肝左静脉及其属支进行了观测。结果 :肝左静脉长度 ( 3 0 .3± 1 .1 )mm ;主干直径 ( 1 1 .3±0 .2 6)mm ;主要属支直径为 ( 6.0± 0 .5 2 )mm ;肝左静脉主干在膈面距离下腔静脉汇入口 1 0、2 0、3 0mm处的深度分别是 ( 1 1 .5± 0 .49)、( 1 6± 0 .5 9)和 ( 1 9.1± 0 .64)mm ;肝左静脉在膈面与肝镰状韧带呈 ( 3 0 .2 9± 1 2 .3 3 )°角 ;肝左、中静脉共干的出现率仅为 3 0 % ;肝左静脉按其属支多少分为 6型。结论 :肝左静脉在肝实质内的位置和属支数目不恒定 ,以 3～ 4支最多。所观测的资料 ,对肝外科手术具有重要意义。

关键词：肝左静脉解剖学类型肝移植肝部分切除术

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含Schiff碱芳香氮芥香豆素衍生物的设计、合成及抗肿瘤增殖活性

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药学学报 2014年第2期49卷 217-224页

作者：刘文虎王仕宝常晋霞刘毅川北医学院药理学教研室四川南充637007 汉中职业技术学院药理学教研室陕西汉中723000 川北医学院微生物学与免疫学教研室四川南充637007

基于生物电子等排及活性单元拼接原理,将Schiff碱、芳香氮芥药效基团N,N-二(2-氯乙基)胺基拼接到香豆素结构中,设计合成了系列新型含Schiff碱芳香氮芥的香豆素衍生物(7a^7v),结构经1H NMR、MS及元素分析确证。采用MTT法评价了化合物对He... 详细信息

基于生物电子等排及活性单元拼接原理,将Schiff碱、芳香氮芥药效基团N,N-二(2-氯乙基)胺基拼接到香豆素结构中,设计合成了系列新型含Schiff碱芳香氮芥的香豆素衍生物(7a^7v),结构经1H NMR、MS及元素分析确证。采用MTT法评价了化合物对HepG2、DU145及MCF7肿瘤细胞的抗增殖作用。结果表明,部分化合物对肿瘤细胞的增殖具有较好的抑制作用,其中化合物7c、7f、7g、7h和7q对DU145和MCF7的抑制作用优于或相当于阳性对照,值得进一步研究。

关键词：香豆素 Schiff碱芳香氮芥合成抗增殖

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根据肾小管轮廓计数和直径估计肾小管长度的两种体视学方法对比

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解剖学报 2020年第6期51卷 967-975页

作者：王丹文晓红郭洋向宇杨正伟川北医学院组织学与胚胎学教研室四川南充637000 川北医学院形态学定量研究室四川南充637000

目的对比估计肾小管长度的两种体视学方法:轮廓计数法和直径法。方法从2月龄正常雄性SD大鼠获取9个肾脏,采用定向法制作等向随机切片(甲基丙烯酸树脂包埋),用过碘酸-雪夫(PAS)试剂和苏木素染色后进行体视学测量:计数切片上各段肾小管(... 详细信息

目的对比估计肾小管长度的两种体视学方法:轮廓计数法和直径法。方法从2月龄正常雄性SD大鼠获取9个肾脏,采用定向法制作等向随机切片(甲基丙烯酸树脂包埋),用过碘酸-雪夫(PAS)试剂和苏木素染色后进行体视学测量:计数切片上各段肾小管(包括集合管,不包括髓袢细段)轮廓(切面)中心管腔的数量,由此估计肾小管的长度;抽选近似圆形、椭圆形、有明显管腔的肾小管轮廓,测其直径(圆形轮廓)或短径(椭圆形轮廓),据其平方的平均计算肾小管(假设为圆柱结构)横断面积,然后结合肾小管的体积估计其长度。结果据轮廓直径估计的各个肾脏内肾小管的总长与据轮廓计数估计的结果之比,平均为1. 43(变异系数7. 2%),即轮廓直径法高估了大于40%的肾小管长度。结论用肾小管的短径来估计其长度的方法不可靠。

关键词：肾脏肾小管长度组织学体视学大鼠

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载脂蛋白CⅢ基因多态性对不同体质量指数青少年血脂水平的影响

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四川大学学报（医学版） 2015年第1期46卷 65-70,74页

作者：宋永砚龚仁蓉张珍李元昊樊梅胡敏珊方定志四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室成都610041 川北医学院基础医学院生物化学教研室南充637007

目的探讨载脂蛋白CⅢ基因(APOC3)SstⅠ和-482C>T多态性与不同体质量指数(BMI)健康青少年血脂水平的相关性。方法根据BMI将723例青少年按四分位数分为4组,从低到高依次为1组〔BMI=(17.80±0.75)kg/m2,n=180〕、2组〔BMI=(19.39... 详细信息

目的探讨载脂蛋白CⅢ基因(APOC3)SstⅠ和-482C>T多态性与不同体质量指数(BMI)健康青少年血脂水平的相关性。方法根据BMI将723例青少年按四分位数分为4组,从低到高依次为1组〔BMI=(17.80±0.75)kg/m2,n=180〕、2组〔BMI=(19.39±0.32)kg/m2,n=182〕、3组〔BMI=(20.68±0.43)kg/m2,n=181〕和4组〔BMI=(23.40±2.05)kg/m2,n=180〕。抽取空腹静脉血5mL,测定血脂,提取基因组DNA并采用PCR-RFLP法对APOC3 SstⅠ和-482C>T多态性位点进行分型。结果随着BMI增加,身高和高密度脂蛋白胆固醇降低(P<0.001);体质量、腰围、臀围、腰臀比、甘油三酯(TG)、总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇升高(P<0.001)。SstⅠ多态性不同基因型青少年的血脂水平在1组、2组和3组中差异无统计学意义;在第4组中,血浆TG水平在不同基因型之间差异有统计学意义(P=0.022),S2等位基因携带者的TG水平高于S1S1基因型青少年。-482C>T多态性不同基因型青少年的血脂水平在各组中差异无统计学意义。结论在健康青少年中,APOC3 SstⅠ多态性S2等位基因对血浆TG的升高作用与BMI有关,降低体质量或可改善S2等位基因对血浆TG的增高作用。

关键词：载脂蛋白CⅢ基因体质量指数血脂多态性

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