检索结果-内蒙古大学图书馆

WTAP通过m^(6)A修饰增强MAP3K9 mRNA稳定性促进食管鳞状细胞癌细胞的恶性生物学行为

中国肿瘤生物治疗杂志 2025年第2期32卷 140-150页

作者：潘英杰孙姗杨航谭劲松陈巧玲赵全能杨蜜刘康宋桂芹川北医学院基础医学与法医学研究所四川南充637100 川北医学院第二临床医学院暨首都医科大学附属北京安贞医院南充医院暨南充市中心医院组织工程与干细胞研究所四川南充637000

目的:探讨肾母细胞瘤1相关蛋白(WTAP)对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞生物学特性的影响及分子机制。方法:收集2019年9月至2021年4月期间在川北医学院第二临床医学院手术切除的31对ESCC组织及其配对的癌旁组织,常规培养食管癌细胞KYSE30、KYS... 详细信息

目的:探讨肾母细胞瘤1相关蛋白(WTAP)对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞生物学特性的影响及分子机制。方法:收集2019年9月至2021年4月期间在川北医学院第二临床医学院手术切除的31对ESCC组织及其配对的癌旁组织,常规培养食管癌细胞KYSE30、KYSE410、KYSE150、KYSE510、TE-1和正常人食管上皮细胞HET-1A,用转染试剂将si-NC、si-WTAP#1和si-WTAP#2核酸转染至KYSE150和KYSE510细胞中,实验分为si-NC、si-WTAP#1和si-WTAP#2组,用qPCR法检测各组细胞中WTAP和MAP3K9 mRNA的表达,CCK-8法、克隆形成实验、划痕愈合实验、Transwell小室实验检测敲减WTAP表达对ESCC细胞增殖、迁移、侵袭能力和凋亡的影响,WB法检测各组ESCC细胞中WTAP、MAP3K9、EMT及MAPK通路相关蛋白的表达,免疫组化法检测ESCC组织中WTAP蛋白的表达,甲基化RNA免疫共沉淀(MeRIP)-qPCR实验检测ESCC细胞MAP3K9 m^(6)A水平,放线菌素D实验检测MAP3K9的mRNA的稳定性,用数据库数据分析WTAP的表达、靶基因、功能富集和互作RNA。结果:WTAP在ESCC组织和细胞中高表达(P<0.05或P<0.01或P<0.001)且与分化程度有关联(P<0.01);在KYSE150和KYSE510细胞中成功地敲减了WTAP mRNA和蛋白的表达(P<0.01或P<0.001);敲减WTAP可明显抑制KYSE150和KYSE510细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05或P<0.01或P<0.001),促进KYSE150和KYSE510细胞凋亡(P<0.05或P<0.01),敲低WTAP后MAP3K9的m^(6)A水平显著下降(P<0.05),其mRNA表达水平及mRNA稳定性均显著降低(P<0.05);数据库数据分析显示,WTAP靶基因富集于MAPK信号通路;敲减WTAP后KYSE150和KYSE510细胞中MAP3K9、p-ERK、N-cadherin和MMP9表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01),E-cadherin表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:WTAP在ESCC组织和细胞中呈高表达且与其分化相关,其通过m^(6)A修饰促进MAP3K9 mRNA稳定性,激活MAPK通路进而促进ESCC细胞的恶性生物学行为。

关键词：食管鳞状细胞癌肾母细胞瘤1相关蛋白 N^(6)-甲基腺苷增殖迁移侵袭凋亡

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NECTIN1缺失在食管鳞癌发生和发展中的作用及其机制

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基因组学与应用生物学 2025年第1期44卷 92-106页

作者：杨航潘英杰龙元凤张佳怡乔彦刘云杨思芸宋桂芹刘康川北医学院基础医学与法医学研究所南充637100 首都医科大学附属北京安贞医院南充医院南充市中心医院·川北医学院第二临床医学院组织工程与干细胞研究所南充637000

本研究旨在探究黏连蛋白细胞黏附分子1(nectin cell adhesion molecule 1,NECTIN1)缺失对食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)细胞发生和发展的影响及其分子作用机制。利用UCSC数据库分析食管癌(esophageal carcinoma,ESCA)中NECTIN1基因的线性拷贝数,通过Western blot和免疫组化染色分析NECTIN1在食管鳞癌细胞、食管鳞癌组织和癌旁组织中的蛋白水平。利用TISIDB数据库分析NECTIN1表达与食管癌临床特征的相关性。采用shRNA敲低NECTIN1在KYSE150和KYSE510细胞中的表达,利用CCK-8实验、克隆形成实验、细胞划痕和Transwell实验以及流式细胞术检测敲低NECTIN1对细胞功能的影响。对敲低NECTIN1的KYSE510细胞进行转录组测序,筛选差异表达基因;通过GO、KEGG富集分析,探讨NECTIN1可能影响的信号调控网络。结果表明,NECTIN1在部分食管癌患者中拷贝数减少,蛋白水平显著低于癌旁组织的(P<0.0001),NECTIN1低表达的食管鳞癌患者分化较差(P<0.0001),与临床晚期分期呈负相关。敲低NECTIN1基因后KYSE150和KYSE510细胞增殖、迁移和侵袭能力均增强(P<0.05),细胞S期增多,并使细胞凋亡减少(P<0.01)。在KYSE150细胞中敲低NECTIN1,进行转录组测序分析后发现115个基因显著上调、209个基因显著下调。KEGG分析表明,差异表达基因富集于肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)信号通路(P<0.01),通过GEPIA数据库分析发现,在ESCA患者中,该通路中的3个基因(IL1B、TNFAIP3、CSF2)的表达水平与NECTIN1呈显著正相关(P<0.05),与转录组测序结果相符。NECTIN1的缺失促进了ESCC细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能是通过TNF信号通路发挥抑癌作用,调控ESCC的发生与发展。

关键词：黏连蛋白细胞黏附分子1(NECTIN1) 食管鳞癌(ESCC) 增殖侵袭肿瘤坏死因子(TNF)信号通路

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钛表面多酚介导铜离子涂层制备及抗菌抗氧化性能

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中国组织工程研究 2025年第10期29卷 1997-2005页

作者：官振菊谢永林向守刚张成栋李小龙李兴平蒲超张波罗栩伟肖东琴川北医学院第二临床学院·南充市中心医院组织工程与干细胞研究所四川省南充市637000 川北医学院第二临床学院·南充市中心医院口腔科四川省南充市637000 成飞医院骨科四川省成都市610031 川北医学院第二临床学院·南充市中心医院骨科四川省南充市637000

背景:钛植入体因比强度高及良好的生物相容性被广泛应用于临床,然而在植入手术过程中,细菌感染及组织受损环境产生大量活性氧物质易导致组织延迟愈合与手术失败,因此开发具有抗菌和抗氧化性能的钛植入体极为重要。目的:鉴于铜离子良好... 详细信息

背景:钛植入体因比强度高及良好的生物相容性被广泛应用于临床,然而在植入手术过程中,细菌感染及组织受损环境产生大量活性氧物质易导致组织延迟愈合与手术失败,因此开发具有抗菌和抗氧化性能的钛植入体极为重要。目的:鉴于铜离子良好的抗菌性能及多酚类物质优良的抗氧化性能,拟在钛表面制备多酚介导的铜离子涂层,评价其体外抗菌及抗氧化性能。方法:利用碱热法在钛表面制备纳米结构,然后将钛片置于单宁酸及铜离子溶液中,获得多酚介导的铜离子涂层,检测样品的表面形貌与水接触角,利用原子吸收光谱法检测铜离子的携载及释放。将金黄色葡萄球菌分别接种于纯钛片(空白组)、碱热处理钛片(对照组)、多酚介导的铜离子修饰钛片(实验组)表面,观察细菌存活状态。将成骨前体细胞MC3T3-E1分别接种于3组钛片表面,评价材料的抗氧化性能及生物活性。结果与结论:(1)扫描电镜下可见多酚介导的铜离子修饰钛片表面存在棒状纳米结构,并且涂层无裂纹;多酚介导的铜离子修饰钛片表面亲水性接近纯钛片;原子吸收光谱结果显示,多酚介导后钛片表面铜离子的携载量增加了51%,铜离子呈均匀释放。(2)空白组、对照组、实验组钛片的抗菌率为0%,21.65%,93.75%;活死染色与CTC染色显示,空白组钛片表面的活细菌最多,实验组钛片表面的活细菌最少。(3)活死染色与CCK-8检测结果显示,3组钛片均具有良好的细胞相容性,并且实验组钛片更有利于MC3T3-E1细胞增殖;活性氧荧光探针检测显示,相较于其他两组,实验组钛片表面活性氧荧光强度明显减弱;碱性磷酸酶与茜素红S染色结果显示,相较于其他两组,实验组钛片表面MC3T3-E1细胞的成骨分化与细胞外基质矿化能力更强。(4)结果表明,多酚介导的铜离子涂层具有较强的抗菌、抗氧化及促成骨分化性能。

关键词：钛植入体抗菌抗氧化多酚铜离子涂层

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脂肪间充质干细胞外泌体促进微血管内皮细胞增殖、迁移和血管生成

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西部医学 2025年第2期37卷 198-204页

作者：尹海林刘翔宇贺红林田超李均丁娜袁怡君刘康彭海涛川北医学院第二临床医学院·南充市中心医院烧伤整形美容外科四川南充637000 川北医学院第二临床医学院·南充市中心医院妇科四川南充637000 川北医学院第二临床医学院·南充市中心医院组织工程与干细胞研究所四川南充637000

目的探讨人脂肪间充质干细胞外泌体(ADSCs-Exo)对微血管内皮细胞(HMEC-1)增殖、迁移和血管生成的影响。方法通过分离纯化离体脂肪获取人脂肪间充质干细胞(ADSCs)并进行体外培养,收集其上清液,分离提取ADSCs-Exo。体外培养HMEC-1,分为... 详细信息

目的探讨人脂肪间充质干细胞外泌体(ADSCs-Exo)对微血管内皮细胞(HMEC-1)增殖、迁移和血管生成的影响。方法通过分离纯化离体脂肪获取人脂肪间充质干细胞(ADSCs)并进行体外培养,收集其上清液,分离提取ADSCs-Exo。体外培养HMEC-1,分为实验组(含ADSCs-Exo)和对照组。通过CCK8评估ADSCs-Exo对HMEC-1增殖的影响。通过划痕试验、Transwell实验,评估ADSCs-Exo对HMEC-1迁移能力的影响。通过ELISA法评估ADSCs-Exo对HMEC-1细胞外液血管内皮生长因子(VEGF)的影响。通过小管形成实验评估ADSCs-Exo对HMEC-1血管生成的影响。通过Western blot法评估ADSCs-Exo对HMEC-1 Ras、Raf、ERK1/2及VEGF相关蛋白表达的影响。结果分离提取的ADSCs-Exo符合外泌体特征,体外实验发现,与ADSCs-Exo共培养,能显著促进HMEC-1增殖、迁移和血管生成能力,提高VEGF水平(P<0.05);相较于对照组,实验组细胞RAS/RAF/ERK信号通路相关蛋白表达量上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 ADSCs-Exo可促进HMEC-1的增殖、迁移以及血管化,其机制可能与RAS/RAF/ERK信号通路有关。

关键词：脂肪间充质干细胞外泌体微血管内皮细胞增殖血管生成

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铁过载诱导成骨前体细胞铁死亡并抑制成骨分化

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中国组织工程研究 2025年第30期29卷 6381-6390页

作者：潘玉赵刃峰李兴平张成栋匙峰蒲超罗栩伟肖东琴川北医学院基础医学与法医研究所四川省南充市637000 川北医学院第二临床学院南充市中心医院组织工程与干细胞研究所四川省南充市637000 通用医疗成飞医院骨科四川省成都市610091 西华师范大学组织修复材料工程技术协同创新中心四川省南充市637002

背景:铁过载作为诱发骨质疏松的独立因素,其作用机制目前尚不清楚,因此探讨铁过载对成骨相关细胞的影响,有助于深入理解骨质疏松发病机制并为骨质疏松治疗提供潜在策略。目的:探讨铁过载环境对成骨前体细胞活性、铁死亡及成骨分化的影... 详细信息

背景:铁过载作为诱发骨质疏松的独立因素,其作用机制目前尚不清楚,因此探讨铁过载对成骨相关细胞的影响,有助于深入理解骨质疏松发病机制并为骨质疏松治疗提供潜在策略。目的:探讨铁过载环境对成骨前体细胞活性、铁死亡及成骨分化的影响。方法:①将成骨前体细胞(MC3T3-E1细胞)分为空白组、铁过载组、fer-1组和去铁胺组,铁过载组在培养基中添加300μmol/L柠檬酸铁铵作用48 h模拟铁过载微环境,fer-1组和去铁胺组细胞采用5μmol/L抗氧化剂fer-1与5μmol/L去铁胺分别预处理8 h,然后加入300μmol/L柠檬酸铁铵作用48 h,采用CCK-8法测定细胞活力,采用活性氧荧光探针检测细胞内活性氧水平,采用线粒体膜电位荧光探针检测细胞内线粒体膜电位变化,使用透射电镜观察线粒体形态变化,采用还原型谷胱甘肽比色法试剂盒检测细胞谷胱甘肽水平,采用丙二醛比色法试剂盒检测细胞内脂质氧化水平,采用亚铁离子比色法试剂盒检测细胞亚铁离子水平,采用碱性磷酸酶染色、茜素红染色验证细胞成骨及矿化能力,采用天狼星红染色检测胶原分泌能力,采用RT-qPCR及Western blot检测成骨/铁死亡相关基因及蛋白的表达。结果与结论:①铁过载环境下,细胞线粒体膜电位下降且结构受损,细胞内脂质过氧化水平升高,铁死亡抵抗相关基因与蛋白表达均降低;而fer-1与去铁胺预处理后,细胞内线粒体膜电位升高且形态部分恢复,细胞内脂质过氧化水平降低,铁死亡抵抗相关基因与蛋白表达均升高。②铁过载环境下,细胞碱性磷酸酶含量、矿化结节形成与胶原纤维生成均降低,fer-1与去铁胺预处理均能逆转此现象。③综上所述,铁过载会上调细胞内氧化应激水平,介导MC3T3-E1细胞发生铁死亡并抑制成骨分化,进而诱导骨质疏松。因此,维持铁稳态及抑制成骨相关细胞铁死亡可能是预防或治疗骨质疏松症的潜在策略。

关键词：铁过载骨质疏松铁死亡柠檬酸铁铵成骨前体细胞线粒体功能:成骨分化脂质过氧化

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椎间盘纤维环组织工程研究进展

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生物医学工程学杂志 2011年第3期28卷 627-631页

作者：易强英刘康冯刚南充市中心医院川北医学院第二临床医学院组织工程与干细胞研究所南充637000

椎间盘退行性变疾病(DDD)是一类具有高发病率及高致残率的疾病,是临床上引起下腰痛的最主要病因,导致了重大的社会问题和经济问题。目前临床应用的各种治疗手段还不能完全解决椎间盘退行性变导致的脊柱结构和功能不全,尤其是针对已经发... 详细信息

椎间盘退行性变疾病(DDD)是一类具有高发病率及高致残率的疾病,是临床上引起下腰痛的最主要病因,导致了重大的社会问题和经济问题。目前临床应用的各种治疗手段还不能完全解决椎间盘退行性变导致的脊柱结构和功能不全,尤其是针对已经发生了纤维环变性甚至破裂的患者。利用组织工程学方法构建一个完整的具有生物学功能的组织工程纤维环成为最终构建组织工程化椎间盘的重要环节。本文重点介绍了近年来椎间盘纤维环组织工程的研究进展和发展方向。

关键词：纤维环种子细胞生物活性因子支架组织工程

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壳聚糖水凝胶复合脂肪间充质干细胞修复兔关节软骨缺损

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中华创伤杂志 2016年第4期32卷 357-362页

作者：林涛陈竹袁德超刘康向小聪周玉川冯刚南充市中心医院川北医学院第二临床医学院骨科组织工程与干细胞研究所637000

目的探讨利用脂肪间充质干细胞（ADSCs）复合壳聚糖水凝胶支架构建的组织工程软骨修复兔关节软骨缺损的效果。方法分别取新西兰大白兔皮下脂肪和肋软骨，消化后体外扩增培养分别得到P1代ADSCs和软骨细胞。将ADSCs消化后制成细胞悬液，... 详细信息

目的探讨利用脂肪间充质干细胞（ADSCs）复合壳聚糖水凝胶支架构建的组织工程软骨修复兔关节软骨缺损的效果。方法分别取新西兰大白兔皮下脂肪和肋软骨，消化后体外扩增培养分别得到P1代ADSCs和软骨细胞。将ADSCs消化后制成细胞悬液，并种植于灭菌后的壳聚糖水凝胶上，体外培养1周构建组织工程软骨，将构建的组织工程软骨植入到兔的关节软骨缺损处。实验分为复合组（缺损处植入ADSCs复合新型壳聚糖水凝胶支架）、细胞组（缺损处注射一定浓度的软骨细胞悬液）、材料组（缺损处植入单纯的壳聚糖水凝胶）和对照组（缺损处未做任何处理），各组分别于术后12周取样，通过大体观察、HE染色、番红-O及Ⅱ型胶原免疫组化染色等方法观察缺损关节软骨的修复情况，并用国际关节软骨修复协会（ICRS）制订的评分法进行组织学评分。结果复合组缺损软骨的修复效果明显优于其他3组，新生组织与正常组织结合紧密，且结构和细胞外基质的分泌情况类似于正常组织。对照组、细胞组、材料组和复合组ICRS评分分别为（7．06±0．19）分、（7．14±0．22）分、（7．46±0．26）分和（13．89±0．14）分，复合组与其他各组差异有统计学意义（P〈0．01）。结论ADSCs复合壳聚糖凝胶支架构建的组织工程软骨对缺损关节软骨具有良好的修复作用，且修复是一种结构性的修复。

关键词：壳聚糖间质干细胞软骨关节组织工程

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BMG／PBST双相组织工程纤维环的体外构建

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中华骨科杂志 2016年第1期36卷 35-42页

作者：袁德超陈竹向小聪刘康冯刚川北医学院第二临床医院南充市中心医院组织工程与干细胞研究所南充637000

目的探讨骨基质明胶（bone matrix gelatin，BMG）／聚对苯二甲酸-共-丁二酸丁二醇酯[poly（butylenesucci—nate-co-terephthalate），PBST]双相组织工程纤维环的构建。方法PBST通过静电纺丝的方式制备成薄膜，检测其吸水率、孔隙率。... 详细信息

目的探讨骨基质明胶（bone matrix gelatin，BMG）／聚对苯二甲酸-共-丁二酸丁二醇酯[poly（butylenesucci—nate-co-terephthalate），PBST]双相组织工程纤维环的构建。方法PBST通过静电纺丝的方式制备成薄膜，检测其吸水率、孔隙率。取兔纤维环细胞进行体外培养，并通过番红“O”、Ⅱ型胶原免疫组化染色进行细胞鉴定；鉴定后的细胞种植到PBST薄膜支架上，通过扫描电镜观察细胞在支架上的生长情况。以BMG作为外纤维环支架，以PBST纺丝作为内纤维环支架，构建新型双相组织工程纤维环支架。将细胞种植到双相支架上，体外培养3、7、21d后，分析双相组织工程纤维环的生物学特性及力学性能。结果PBST纺丝薄膜的孔隙率为61．83％±7．33％，吸水率为297．34％±57．13％。纤维环细胞经番红“O”、Ⅱ型胶原免疫组化染色鉴定呈阳性，表现出纤维环细胞的特征。经鉴定后的细胞种植在薄膜支架上培养3、7d后，扫描电镜显示细胞在薄膜支架上黏附并增殖；将纤维环细胞接种到BMG／PBST双相支架上，培养3、7、21d后，HE染色显示细胞随培养时间的增加逐渐渗透到薄膜支架内部；番红“O”、Ⅱ型胶原免疫组化染色呈阳性，表明细胞在支架上分泌出大量糖胺聚糖和Ⅱ型胶原等纤维环细胞特有的细胞外基质。种植细胞后的双相支架体外培养21d后，支架的弹性模量[（17．56±1．47）MPa]明显较无细胞的双相支架的弹性模量[（14．83±1．02）MPa]增加。结论初步构建的BMG／PBST双相组织工程纤维环具有良好的细胞相容性和力学性能，为进一步构建完整组织工程椎间盘奠定了基础。

关键词：组织工程组织支架明胶

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Rh-Endostatin作用肺癌血管正常化时相与CA9表达的关系初探

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四川大学学报（医学版） 2017年第3期48卷 342-346页

作者：何朗孙永红刘康徐幸幸杨蜜吴迅蒋莉川北医学院第二临床医学院四川省南充市中心医院肿瘤中心南充637000 川北医学院组织工程与干细胞研究所南充637000 川北医学院临床医学系南充637000 川北医学院第二临床医学院四川省南充市中心医院呼吸科南充637000

目的初步探索重组人血管内皮抑素(rh-Endostatin,rh-ES)作用于肺癌的血管正常化时相与CA9的关系,以及CA9在肺癌中的表达水平。方法收集对数生长期的Lewis细胞,制成1×106 mL-1的单细胞悬液,注射入40只C57/BL6小鼠(0.2mL/只),建立Le... 详细信息

目的初步探索重组人血管内皮抑素(rh-Endostatin,rh-ES)作用于肺癌的血管正常化时相与CA9的关系,以及CA9在肺癌中的表达水平。方法收集对数生长期的Lewis细胞,制成1×106 mL-1的单细胞悬液,注射入40只C57/BL6小鼠(0.2mL/只),建立Lewis肺癌皮下移植瘤(LLC)模型,然后随机分成对照组和rh-ES组,各20只。rh-ES组小鼠腹腔注射rh-ES 5 mg/(kg·d),9d,1次/d。对照组小鼠同时点腹腔注射生理盐水(NS)0.2mL/次。于治疗第2、4、6、9天,每组各处死5只小鼠。免疫组化检测肿瘤组织和癌旁组织中CA9表达,Real-time PCR及ELISA技术分别检测两组不同时间点肿瘤组织中CA9表达。结果 C57/BL6小鼠成瘤率为100%。同时,对照组不同时间点CA9在肿瘤组织中表达均高于癌旁组织(P<0.05)。Real-time PCR及ELISA发现在LLC移植瘤模型中CA9基因和蛋白表达在rh-ES组给药后第4天和第6天(血管正常化时相)降低,与同组第2天、第9天比较,差异有统计学意义(P<0.05),与对照组第4天和第6天比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CA9在肿瘤组织中高表达。rh-ES可于血管正常化时间段内降低CA9表达,逆转Lewis肺癌乏氧。

关键词：重组人血管内皮抑素 Lewis肺癌 CA9

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肝癌转移相关基因预后模型的建立与验证

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电子科技大学学报 2022年第2期51卷 184-193页

作者：刘燕群熊蓉肖婷杨燕刘康冯刚宋桂芹川北医学院基础医学院四川南充637100 南充市中心医院·川北医学院第二临床医学院组织工程与干细胞研究所四川南充637000 川北医学院医学影像学院四川南充637000 四川驰鼎盛通生物科技有限公司成都610000

肝细胞肝癌(HCC)是一种具有高侵袭性和转移性的恶性肿瘤。采用Cox分析和Lasso回归分析逐步建立基于转移相关基因的预测模型,分析了风险评分与HCC患者的生存和临床特性的关系。构建了包含4个转移相关基因的预后模型。在TCGA训练集中,低... 详细信息

肝细胞肝癌(HCC)是一种具有高侵袭性和转移性的恶性肿瘤。采用Cox分析和Lasso回归分析逐步建立基于转移相关基因的预测模型,分析了风险评分与HCC患者的生存和临床特性的关系。构建了包含4个转移相关基因的预后模型。在TCGA训练集中,低风险组HCC患者的风险评分更低,死亡病例数更少,5年生存率更高(P<0.01),Cox分析表明该模型可独立于其他临床特征预测HCC患者的生存(P<0.01),时间依赖性ROC曲线预测分析1年、2年和3年的AUC值均大于0.74。同时,验证集获得与训练集一致的模型评估结果。最后,构建了肝癌转移相关基因的预后模型,有望成为一个独立的因素对HCC患者预后进行预测判断。

关键词：肝细胞肝癌转移相关基因预后模型验证

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