检索结果-内蒙古大学图书馆

WTAP通过m^(6)A修饰增强MAP3K9 mRNA稳定性促进食管鳞状细胞癌细胞的恶性生物学行为

中国肿瘤生物治疗杂志 2025年第2期32卷 140-150页

作者：潘英杰孙姗杨航谭劲松陈巧玲赵全能杨蜜刘康宋桂芹川北医学院基础医学与法医学研究所四川南充637100 川北医学院第二临床医学院暨首都医科大学附属北京安贞医院南充医院暨南充市中心医院组织工程与干细胞研究所四川南充637000

目的:探讨肾母细胞瘤1相关蛋白(WTAP)对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞生物学特性的影响及分子机制。方法:收集2019年9月至2021年4月期间在川北医学院第二临床医学院手术切除的31对ESCC组织及其配对的癌旁组织,常规培养食管癌细胞KYSE30、KYS... 详细信息

目的:探讨肾母细胞瘤1相关蛋白(WTAP)对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞生物学特性的影响及分子机制。方法:收集2019年9月至2021年4月期间在川北医学院第二临床医学院手术切除的31对ESCC组织及其配对的癌旁组织,常规培养食管癌细胞KYSE30、KYSE410、KYSE150、KYSE510、TE-1和正常人食管上皮细胞HET-1A,用转染试剂将si-NC、si-WTAP#1和si-WTAP#2核酸转染至KYSE150和KYSE510细胞中,实验分为si-NC、si-WTAP#1和si-WTAP#2组,用qPCR法检测各组细胞中WTAP和MAP3K9 mRNA的表达,CCK-8法、克隆形成实验、划痕愈合实验、Transwell小室实验检测敲减WTAP表达对ESCC细胞增殖、迁移、侵袭能力和凋亡的影响,WB法检测各组ESCC细胞中WTAP、MAP3K9、EMT及MAPK通路相关蛋白的表达,免疫组化法检测ESCC组织中WTAP蛋白的表达,甲基化RNA免疫共沉淀(MeRIP)-qPCR实验检测ESCC细胞MAP3K9 m^(6)A水平,放线菌素D实验检测MAP3K9的mRNA的稳定性,用数据库数据分析WTAP的表达、靶基因、功能富集和互作RNA。结果:WTAP在ESCC组织和细胞中高表达(P<0.05或P<0.01或P<0.001)且与分化程度有关联(P<0.01);在KYSE150和KYSE510细胞中成功地敲减了WTAP mRNA和蛋白的表达(P<0.01或P<0.001);敲减WTAP可明显抑制KYSE150和KYSE510细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05或P<0.01或P<0.001),促进KYSE150和KYSE510细胞凋亡(P<0.05或P<0.01),敲低WTAP后MAP3K9的m^(6)A水平显著下降(P<0.05),其mRNA表达水平及mRNA稳定性均显著降低(P<0.05);数据库数据分析显示,WTAP靶基因富集于MAPK信号通路;敲减WTAP后KYSE150和KYSE510细胞中MAP3K9、p-ERK、N-cadherin和MMP9表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01),E-cadherin表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:WTAP在ESCC组织和细胞中呈高表达且与其分化相关,其通过m^(6)A修饰促进MAP3K9 mRNA稳定性,激活MAPK通路进而促进ESCC细胞的恶性生物学行为。

关键词：食管鳞状细胞癌肾母细胞瘤1相关蛋白 N^(6)-甲基腺苷增殖迁移侵袭凋亡

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NECTIN1缺失在食管鳞癌发生和发展中的作用及其机制

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基因组学与应用生物学 2025年第1期44卷 92-106页

作者：杨航潘英杰龙元凤张佳怡乔彦刘云杨思芸宋桂芹刘康川北医学院基础医学与法医学研究所南充637100 首都医科大学附属北京安贞医院南充医院南充市中心医院·川北医学院第二临床医学院组织工程与干细胞研究所南充637000

本研究旨在探究黏连蛋白细胞黏附分子1(nectin cell adhesion molecule 1,NECTIN1)缺失对食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)细胞发生和发展的影响及其分子作用机制。利用UCSC数据库分析食管癌(esophageal carcinoma,ESCA)中NECTIN1基因的线性拷贝数,通过Western blot和免疫组化染色分析NECTIN1在食管鳞癌细胞、食管鳞癌组织和癌旁组织中的蛋白水平。利用TISIDB数据库分析NECTIN1表达与食管癌临床特征的相关性。采用shRNA敲低NECTIN1在KYSE150和KYSE510细胞中的表达,利用CCK-8实验、克隆形成实验、细胞划痕和Transwell实验以及流式细胞术检测敲低NECTIN1对细胞功能的影响。对敲低NECTIN1的KYSE510细胞进行转录组测序,筛选差异表达基因;通过GO、KEGG富集分析,探讨NECTIN1可能影响的信号调控网络。结果表明,NECTIN1在部分食管癌患者中拷贝数减少,蛋白水平显著低于癌旁组织的(P<0.0001),NECTIN1低表达的食管鳞癌患者分化较差(P<0.0001),与临床晚期分期呈负相关。敲低NECTIN1基因后KYSE150和KYSE510细胞增殖、迁移和侵袭能力均增强(P<0.05),细胞S期增多,并使细胞凋亡减少(P<0.01)。在KYSE150细胞中敲低NECTIN1,进行转录组测序分析后发现115个基因显著上调、209个基因显著下调。KEGG分析表明,差异表达基因富集于肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)信号通路(P<0.01),通过GEPIA数据库分析发现,在ESCA患者中,该通路中的3个基因(IL1B、TNFAIP3、CSF2)的表达水平与NECTIN1呈显著正相关(P<0.05),与转录组测序结果相符。NECTIN1的缺失促进了ESCC细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能是通过TNF信号通路发挥抑癌作用,调控ESCC的发生与发展。

关键词：黏连蛋白细胞黏附分子1(NECTIN1) 食管鳞癌(ESCC) 增殖侵袭肿瘤坏死因子(TNF)信号通路

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钛表面多酚介导铜离子涂层制备及抗菌抗氧化性能

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中国组织工程研究 2025年第10期29卷 1997-2005页

作者：官振菊谢永林向守刚张成栋李小龙李兴平蒲超张波罗栩伟肖东琴川北医学院第二临床学院·南充市中心医院组织工程与干细胞研究所四川省南充市637000 川北医学院第二临床学院·南充市中心医院口腔科四川省南充市637000 成飞医院骨科四川省成都市610031 川北医学院第二临床学院·南充市中心医院骨科四川省南充市637000

背景:钛植入体因比强度高及良好的生物相容性被广泛应用于临床,然而在植入手术过程中,细菌感染及组织受损环境产生大量活性氧物质易导致组织延迟愈合与手术失败,因此开发具有抗菌和抗氧化性能的钛植入体极为重要。目的:鉴于铜离子良好... 详细信息

背景:钛植入体因比强度高及良好的生物相容性被广泛应用于临床,然而在植入手术过程中,细菌感染及组织受损环境产生大量活性氧物质易导致组织延迟愈合与手术失败,因此开发具有抗菌和抗氧化性能的钛植入体极为重要。目的:鉴于铜离子良好的抗菌性能及多酚类物质优良的抗氧化性能,拟在钛表面制备多酚介导的铜离子涂层,评价其体外抗菌及抗氧化性能。方法:利用碱热法在钛表面制备纳米结构,然后将钛片置于单宁酸及铜离子溶液中,获得多酚介导的铜离子涂层,检测样品的表面形貌与水接触角,利用原子吸收光谱法检测铜离子的携载及释放。将金黄色葡萄球菌分别接种于纯钛片(空白组)、碱热处理钛片(对照组)、多酚介导的铜离子修饰钛片(实验组)表面,观察细菌存活状态。将成骨前体细胞MC3T3-E1分别接种于3组钛片表面,评价材料的抗氧化性能及生物活性。结果与结论:(1)扫描电镜下可见多酚介导的铜离子修饰钛片表面存在棒状纳米结构,并且涂层无裂纹;多酚介导的铜离子修饰钛片表面亲水性接近纯钛片;原子吸收光谱结果显示,多酚介导后钛片表面铜离子的携载量增加了51%,铜离子呈均匀释放。(2)空白组、对照组、实验组钛片的抗菌率为0%,21.65%,93.75%;活死染色与CTC染色显示,空白组钛片表面的活细菌最多,实验组钛片表面的活细菌最少。(3)活死染色与CCK-8检测结果显示,3组钛片均具有良好的细胞相容性,并且实验组钛片更有利于MC3T3-E1细胞增殖;活性氧荧光探针检测显示,相较于其他两组,实验组钛片表面活性氧荧光强度明显减弱;碱性磷酸酶与茜素红S染色结果显示,相较于其他两组,实验组钛片表面MC3T3-E1细胞的成骨分化与细胞外基质矿化能力更强。(4)结果表明,多酚介导的铜离子涂层具有较强的抗菌、抗氧化及促成骨分化性能。

关键词：钛植入体抗菌抗氧化多酚铜离子涂层

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脂肪间充质干细胞外泌体促进微血管内皮细胞增殖、迁移和血管生成

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西部医学 2025年第2期37卷 198-204页

作者：尹海林刘翔宇贺红林田超李均丁娜袁怡君刘康彭海涛川北医学院第二临床医学院·南充市中心医院烧伤整形美容外科四川南充637000 川北医学院第二临床医学院·南充市中心医院妇科四川南充637000 川北医学院第二临床医学院·南充市中心医院组织工程与干细胞研究所四川南充637000

目的探讨人脂肪间充质干细胞外泌体(ADSCs-Exo)对微血管内皮细胞(HMEC-1)增殖、迁移和血管生成的影响。方法通过分离纯化离体脂肪获取人脂肪间充质干细胞(ADSCs)并进行体外培养,收集其上清液,分离提取ADSCs-Exo。体外培养HMEC-1,分为... 详细信息

目的探讨人脂肪间充质干细胞外泌体(ADSCs-Exo)对微血管内皮细胞(HMEC-1)增殖、迁移和血管生成的影响。方法通过分离纯化离体脂肪获取人脂肪间充质干细胞(ADSCs)并进行体外培养,收集其上清液,分离提取ADSCs-Exo。体外培养HMEC-1,分为实验组(含ADSCs-Exo)和对照组。通过CCK8评估ADSCs-Exo对HMEC-1增殖的影响。通过划痕试验、Transwell实验,评估ADSCs-Exo对HMEC-1迁移能力的影响。通过ELISA法评估ADSCs-Exo对HMEC-1细胞外液血管内皮生长因子(VEGF)的影响。通过小管形成实验评估ADSCs-Exo对HMEC-1血管生成的影响。通过Western blot法评估ADSCs-Exo对HMEC-1 Ras、Raf、ERK1/2及VEGF相关蛋白表达的影响。结果分离提取的ADSCs-Exo符合外泌体特征,体外实验发现,与ADSCs-Exo共培养,能显著促进HMEC-1增殖、迁移和血管生成能力,提高VEGF水平(P<0.05);相较于对照组,实验组细胞RAS/RAF/ERK信号通路相关蛋白表达量上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 ADSCs-Exo可促进HMEC-1的增殖、迁移以及血管化,其机制可能与RAS/RAF/ERK信号通路有关。

关键词：脂肪间充质干细胞外泌体微血管内皮细胞增殖血管生成

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牙槽骨缺损修复的组织工程新进展

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西部医学 2025年第3期37卷 463-468页

作者：范子露(综述) 罗栩伟(综述) 谢永林(审校) 川北医学院第二临床医学院·首都医科大学附属北京安贞医院南充医院口腔科四川南充637000 川北医学院第二临床医学院·首都医科大学附属北京安贞医院南充医院组织工程与干细胞研究所四川南充637000

牙槽骨缺损常由于外伤、牙齿拔除或骨质疾病引起,对于患者咀嚼功能和面部外观都可能带来严重的影响。随着人口老龄化趋势的增加,对于牙槽骨缺损修复的需求日益凸显。传统的修复方法往往面临着术后愈合周期长、效果难以预测等问题。因此... 详细信息

牙槽骨缺损常由于外伤、牙齿拔除或骨质疾病引起,对于患者咀嚼功能和面部外观都可能带来严重的影响。随着人口老龄化趋势的增加,对于牙槽骨缺损修复的需求日益凸显。传统的修复方法往往面临着术后愈合周期长、效果难以预测等问题。因此,研究者们迫切寻求更创新、高效的修复手段,以提高患者的生活质量。近年来,组织工程学和材料科学的迅速发展为牙槽骨缺损修复提供了全新的研究方向。本综述深入剖析了当前牙槽骨缺损修复领域的前沿研究,聚焦于生物材料的前沿应用,例如人工骨料和生物活性物质,这些创新材料为骨组织再生提供了强有力的支持。同时,干细胞技术的巧妙引入为治疗个性化提供了新思路,通过促进骨组织再生迅速推动修复过程。在技术的最前沿,3D打印技术展示了根据个体需求定制复杂结构的潜能。生长因子的精准运用成为调控骨细胞分化和增殖的关键策略。这些发现不仅反映了当前科技和医学的创新潮流,更为未来治疗牙槽骨缺损提供了引人瞩目的展望,为读者提供了对这一领域深刻理解的机会。

关键词：牙槽骨缺损组织工程 3D打印干细胞技术个体化治疗

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铁过载诱导成骨前体细胞铁死亡并抑制成骨分化

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中国组织工程研究 2025年第30期29卷 6381-6390页

作者：潘玉赵刃峰李兴平张成栋匙峰蒲超罗栩伟肖东琴川北医学院基础医学与法医研究所四川省南充市637000 川北医学院第二临床学院南充市中心医院组织工程与干细胞研究所四川省南充市637000 通用医疗成飞医院骨科四川省成都市610091 西华师范大学组织修复材料工程技术协同创新中心四川省南充市637002

背景:铁过载作为诱发骨质疏松的独立因素,其作用机制目前尚不清楚,因此探讨铁过载对成骨相关细胞的影响,有助于深入理解骨质疏松发病机制并为骨质疏松治疗提供潜在策略。目的:探讨铁过载环境对成骨前体细胞活性、铁死亡及成骨分化的影... 详细信息

背景:铁过载作为诱发骨质疏松的独立因素,其作用机制目前尚不清楚,因此探讨铁过载对成骨相关细胞的影响,有助于深入理解骨质疏松发病机制并为骨质疏松治疗提供潜在策略。目的:探讨铁过载环境对成骨前体细胞活性、铁死亡及成骨分化的影响。方法:①将成骨前体细胞(MC3T3-E1细胞)分为空白组、铁过载组、fer-1组和去铁胺组,铁过载组在培养基中添加300μmol/L柠檬酸铁铵作用48 h模拟铁过载微环境,fer-1组和去铁胺组细胞采用5μmol/L抗氧化剂fer-1与5μmol/L去铁胺分别预处理8 h,然后加入300μmol/L柠檬酸铁铵作用48 h,采用CCK-8法测定细胞活力,采用活性氧荧光探针检测细胞内活性氧水平,采用线粒体膜电位荧光探针检测细胞内线粒体膜电位变化,使用透射电镜观察线粒体形态变化,采用还原型谷胱甘肽比色法试剂盒检测细胞谷胱甘肽水平,采用丙二醛比色法试剂盒检测细胞内脂质氧化水平,采用亚铁离子比色法试剂盒检测细胞亚铁离子水平,采用碱性磷酸酶染色、茜素红染色验证细胞成骨及矿化能力,采用天狼星红染色检测胶原分泌能力,采用RT-qPCR及Western blot检测成骨/铁死亡相关基因及蛋白的表达。结果与结论:①铁过载环境下,细胞线粒体膜电位下降且结构受损,细胞内脂质过氧化水平升高,铁死亡抵抗相关基因与蛋白表达均降低;而fer-1与去铁胺预处理后,细胞内线粒体膜电位升高且形态部分恢复,细胞内脂质过氧化水平降低,铁死亡抵抗相关基因与蛋白表达均升高。②铁过载环境下,细胞碱性磷酸酶含量、矿化结节形成与胶原纤维生成均降低,fer-1与去铁胺预处理均能逆转此现象。③综上所述,铁过载会上调细胞内氧化应激水平,介导MC3T3-E1细胞发生铁死亡并抑制成骨分化,进而诱导骨质疏松。因此,维持铁稳态及抑制成骨相关细胞铁死亡可能是预防或治疗骨质疏松症的潜在策略。

关键词：铁过载骨质疏松铁死亡柠檬酸铁铵成骨前体细胞线粒体功能:成骨分化脂质过氧化

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Ⅱ型胶原-透明质酸构建组织工程软骨复合三维纳米支架的体外实验研究

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中国修复重建外科杂志 2013年第10期27卷 1240-1245页

作者：杨泽龙陈竹刘康白亦光蒋婷冯大雄冯刚南充市中心医院川北医学院第二临床学院组织工程与干细胞研究所四川南充637000 泸州医学院附属医院脊柱外科川北医学院第二临床学院整形美容外科四川南充637000 川北医学院第二临床学院组织工程与干细胞研究所四川南充637000

目的探讨Ⅱ型胶原-透明质酸（hyaluronic acid，HA）构建软骨组织工程复合三维纳米支架的可行性。方法将Ⅱ型胶原和HA以8∶1（W∶W）比例溶于三氟乙醇和水按1∶1（V∶V）比例混合的溶剂中制成溶液，通过静电纺丝技术制备三维多孔纳米... 详细信息

目的探讨Ⅱ型胶原-透明质酸（hyaluronic acid，HA）构建软骨组织工程复合三维纳米支架的可行性。方法将Ⅱ型胶原和HA以8∶1（W∶W）比例溶于三氟乙醇和水按1∶1（V∶V）比例混合的溶剂中制成溶液，通过静电纺丝技术制备三维多孔纳米支架材料，通过光镜和扫描电镜观察其表面形貌，测定其孔隙率、吸水率、表面接触角和降解率。取1周龄日本大耳兔肋软骨，采用酶消化法制备软骨细胞。取第2代软骨细胞种植于支架上，用细胞计数试剂盒8（cell counting kit 8，CCK-8）评价其细胞黏附性及增殖情况；细胞-支架复合物体外连续培养2周后，行组织学和免疫组织化学染色观察其生物学形态及细胞外基质（extracellular matrix，ECM）分泌情况。结果以最佳电纺液浓度为10%、接收距离为10 cm、纺丝注射速度为5 mL/h电纺获得的支架材料，光镜及扫描电镜观察示其孔隙均匀，纳米纤维直径均匀（300～600 nm），孔隙率为89.5% ± 25.0%，表面接触角为（35.6 ± 3.4）°，24 h内支架吸水率可达1 120% ± 34%，48 d内支架降解率可达42.24% ± 1.51%。CCK-8检测结果显示，培养12 h细胞在支架上黏附率可达169.14% ± 11.26%，培养7 d时细胞存活率可达126.03% ± 4.54%。组织学和免疫组织化学染色示，细胞在支架上黏附增殖情况良好，可分泌ECM；细胞在支架上培养2周后，有类似于软骨陷窝的结构形成。结论以Ⅱ型胶原-HA制备的复合三维纳米支架材料具有良好的物理性能、生物学性能和促进细胞黏附及增殖的能力，是一种良好的组织工程软骨支架材料。

关键词：组织工程软骨复合三维纳米支架静电纺丝 Ⅱ型胶原透明质酸

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椎间盘纤维环组织工程研究进展

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生物医学工程学杂志 2011年第3期28卷 627-631页

作者：易强英刘康冯刚南充市中心医院川北医学院第二临床医学院组织工程与干细胞研究所南充637000

椎间盘退行性变疾病(DDD)是一类具有高发病率及高致残率的疾病,是临床上引起下腰痛的最主要病因,导致了重大的社会问题和经济问题。目前临床应用的各种治疗手段还不能完全解决椎间盘退行性变导致的脊柱结构和功能不全,尤其是针对已经发... 详细信息

椎间盘退行性变疾病(DDD)是一类具有高发病率及高致残率的疾病,是临床上引起下腰痛的最主要病因,导致了重大的社会问题和经济问题。目前临床应用的各种治疗手段还不能完全解决椎间盘退行性变导致的脊柱结构和功能不全,尤其是针对已经发生了纤维环变性甚至破裂的患者。利用组织工程学方法构建一个完整的具有生物学功能的组织工程纤维环成为最终构建组织工程化椎间盘的重要环节。本文重点介绍了近年来椎间盘纤维环组织工程的研究进展和发展方向。

关键词：纤维环种子细胞生物活性因子支架组织工程

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防己诺林碱对宫颈癌HeLa细胞的作用及其机制研究

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中国临床药理学杂志 2021年第12期37卷 1531-1534页

作者：蔡鑫熊蓉范佳杨梁婷汤亚兰刘康刘先平岳秋菊罗岳西川北医学院第二临床医学院妇产科川北医学院第二临床医学院组织工程与干细胞研究所

目的探索防己诺林碱（FAN）对宫颈癌He La细胞的作用及分子机制。方法人宫颈癌He La细胞随机分为空白组(0μmol·L-1FAN)和低、高剂量实验组(7.5,15μmol·L-1FAN)。通过CCK-8法、细胞划痕和Transwell检测FAN对宫颈癌He La细胞... 详细信息

目的探索防己诺林碱（FAN）对宫颈癌He La细胞的作用及分子机制。方法人宫颈癌He La细胞随机分为空白组(0μmol·L-1FAN)和低、高剂量实验组(7.5,15μmol·L-1FAN)。通过CCK-8法、细胞划痕和Transwell检测FAN对宫颈癌He La细胞增殖、迁移和侵袭的影响,采用流式细胞术检测FAN对细胞周期和凋亡的作用。用Western Blot法检测细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）,P27,P53,B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl2）,细胞外调节蛋白激酶（ERK）和磷酸化细胞外调节蛋白激酶（p-ERK）的表达。结果 FAN对宫颈癌He La细胞有明显抑制作用,呈现浓度和时间依赖关系（P<0.05）。给药48 h后,空白组、低、高剂量实验组划痕愈合率分别为（48.10±5.19）%,（22.68±3.36）%,（12.31±2.79）%;侵袭细胞数量分别为（248.60±33.34）,（186.60±24.58）,（53.00±13.04）个。给药24 h后,空白组、低、高剂量实验组G0/G1期细胞比例分别为（68.67±2.32）%,（77.43±3.51）%,（85.90±1.31）%;细胞凋亡率分别为（4.07±0.40）%,（5.48±1.36）%,（10.25±1.88）%;Cyclin D1蛋白相对表达量分别为0.75±0.07,0.45±0.07,0.20±0.03;P27蛋白相对表达量分别为0.01±0.00,0.17±0.02,0.55±0.04;P53蛋白相对表达量分别为0.08±0.01,0.12±0.03,0.34±0.08;Bcl-2蛋白相对表达量分别为0.40±0.03,0.17±0.02,0.06±0.01;p-ERK蛋白相对表达量分别为0.61±0.03,0.34±0.03,0.15±0.04;低、高剂量实验组的上述指标与空白组比较,差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论 FAN能抑制宫颈癌He La细胞的增殖、迁移及侵袭能力,同时阻滞细胞周期并促进细胞凋亡,其作用机制可能与抑制ERK信号通路有关。

关键词：防己诺林碱宫颈癌 He La细胞增殖迁移侵袭

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Slit2／Robo4信号通路对小鼠心肌微血管内皮细胞增殖和迁移的影响

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中华心血管病杂志 2013年第12期41卷 1034-1039页

作者：陈桂秀王浩宇刘涛杨明涛周振宇冯刚川北医学院第二临床学院南充市中心医院心内科 637000 河北省石家庄市平山县人民医院心内科川北医学院第二临床学院组织工程与干细胞研究所

目的检测分泌型细胞外基质糖蛋白Slit2及其受体Rob04蛋白在小鼠心室肌的血管组织中的表达情况，探讨Slit2／Rob04信号通路对小鼠心肌微血管内皮细胞增殖及迁移的影响。方法免疫组织化学法检测小鼠心室肌的血管组织中Slit2、Rob04蛋白的... 详细信息

目的检测分泌型细胞外基质糖蛋白Slit2及其受体Rob04蛋白在小鼠心室肌的血管组织中的表达情况，探讨Slit2／Rob04信号通路对小鼠心肌微血管内皮细胞增殖及迁移的影响。方法免疫组织化学法检测小鼠心室肌的血管组织中Slit2、Rob04蛋白的表达情况。从小鼠心室肌分离出微血管内皮细胞，通过免疫荧光和酶联免疫法分别检测小鼠心肌微血管内皮细胞中Rob04和Slit2蛋白的表达情况。利用CCK-8试剂盒，观察不同浓度外源性的Slit2对小鼠心肌微血管内皮细胞增殖的影响。利用transwell小室，设计对照组、VEGF组、Slit2组（100rig／mlSlit2），Slit2＋VEGF组（100ng／ml Slit2＋10ng／mlVEGF），观察外源性Slit2对小鼠心肌微血管内皮细胞迁移的影响。结果免疫组织化学结果显示小鼠心室肌的血管组织中Slit2、Rob04蛋白均有表达。RT—PCR及免疫荧光检测结果显示小鼠心肌微血管内皮细胞中有Robo4 mRNA及其蛋白的表达。酶联免疫法检测结果显示小鼠心肌微血管内皮细胞中有Slit2蛋白的表达。在细胞增殖实验中，不同浓度的Slit2组450nm处的吸光度值与阴性对照组比较差异均无统计学意义（P均〉0．05）。在细胞迁移实验中，Slit2组小鼠心肌微血管内皮细胞迁移数为（22．1±2．8）与对照组的（23．2±3．8）比较差异无统计学意义（P〉0．05），Slit2组小鼠心肌微血管内皮细胞迁移数为（22．1±2．8），Slit2组小鼠心肌微血管内皮细胞迁移数为（22．1±2．8）与VEGF组的（65．3±3．8），Slit2＋VEGF组的（29．2±3．4）之间比较差异均有统计学意义（P均〈0．05）。结论Slit2、Robo4蛋白均表达于小鼠心室肌组织，Rob04蛋白表达于小鼠心肌微血管内皮细胞，不同浓度的外源性Slit2对小鼠心肌微血管内皮细胞的增殖没有影响。100ng／ml外源性Slit2可抑制VEGF诱导的小鼠心肌微血管内皮细胞迁移。

关键词：心肌内皮细胞细胞运动细胞增殖

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