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牡荆素调控Epac1/Rap1通路介导H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用机制

中国临床药理学与治疗学 2024年第10期29卷 1091-1099页

作者：甘琴王鑫杨换花董六一合肥职业技术学院基础医学教研室安徽合肥230000 安徽医科大学基础医学院药理学教研室安徽合肥230032

目的:研究Epac/Rap1信号通路在H9c2细胞缺氧复氧损伤中的作用,并探明牡荆素(vitexin,VT)调控Epac/Rap1信号通路保护心肌细胞缺氧复氧损伤的作用机制。方法:采用氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)构建H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤... 详细信息

目的:研究Epac/Rap1信号通路在H9c2细胞缺氧复氧损伤中的作用,并探明牡荆素(vitexin,VT)调控Epac/Rap1信号通路保护心肌细胞缺氧复氧损伤的作用机制。方法:采用氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)构建H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤模型。实验随机分为7组:正常对照组、OGD组、OGD+VT组、OGD+Epac1激动剂(8-CPT)+VT组、OGD+Epac1抑制剂(ESI-09)+VT组、OGD+8-CPT+VT+PKA抑制剂(H-89)组、OGD+ESI-09+VT+H-89组。MTT检测细胞活力;LDH检测细胞损伤;Western blot检测H9c2细胞中Epac1及其下游Rap1-GTP、CaMK II和ERK蛋白的表达量;免疫荧光检测H9c2心肌细胞中Epac1和Rap1蛋白的表达;PCR实时荧光定量检测H9c2心肌细胞中Rap1和Epac1的m RNA表达;钙离子荧光探针(Fluo-3 AM)检测细胞内[Ca^(2+)]i含量;Co-IP检测细胞中Epac1与Rap1的相互作用。结果:与正常对照组相比,OGD组H9c2心肌细胞在缺氧5 h复氧1 h后,LDH释放量显著升高,心肌细胞细胞活力显著降低,Epac1蛋白表达显著升高,Rap1活化,Rap1-GTP上调。VT(10μmol/L)可显著抑制OGD后H9c2心肌细胞Epac1的激活,继而抑制其下游Rap1活性形式Rap1-GTP的表达,另外CaMK II蛋白表达下调,但ERK磷酸化增加,同时减轻心肌细胞内钙超载;8-CPT可抵消VT的作用,ESI-09与VT联合处理后具有协同作用;H-89对心肌细胞Epac1及其下游相关蛋白表达无影响。结论:缺氧复氧可介导心肌细胞Epac1/Rap1信号通路激活,VT通过抑制Epac1/Rap1信号通路,下调CaMKⅡ蛋白表达,促进ERK磷酸化,对心肌细胞缺氧复氧损伤起保护作用。

关键词：牡荆素 Epac1 Rap1 缺氧复氧损伤

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Src激酶抑制剂PP2对慢性酒精暴露大鼠学习记忆能力的影响

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神经解剖学杂志 2024年第3期40卷 359-364页

作者：李志达张勇鹤壁职业技术学院医学院医学影像技术教研室鹤壁458030 空军军医大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室西安710032

目的:研究Src激酶抑制剂PP2对慢性酒精暴露大鼠学习记忆能力的影响及分子机制。方法:通过饮用方法制备大鼠慢性酒精暴露模型,通过腹膜腔注射给予PP2。Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠海马中IL-1... 详细信息

目的:研究Src激酶抑制剂PP2对慢性酒精暴露大鼠学习记忆能力的影响及分子机制。方法:通过饮用方法制备大鼠慢性酒精暴露模型,通过腹膜腔注射给予PP2。Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠海马中IL-1β和TNF-α的含量,通过Western Blot检测大脑海马磷酸化Src、Iba-1和iNOS的表达。结果:慢性酒精暴露可导致大鼠逃避潜伏期延长,逃避时间延长。同时海马中磷酸化Src、Iba-1和iNOS的表达增加,以及IL-1β和TNF-α的含量增加。PP2能够降低慢性酒精暴露大鼠的逃避潜伏期,降低海马中磷酸化Src、Iba-1和iNOS表达。此外,IL-1β和TNF-α的含量下降。结论:PP2通过抑制神经系统炎症改善慢性酒精暴露导致的学习记忆能力障碍。

关键词：慢性酒精暴露学习记忆 Src激酶抑制剂神经炎症大鼠

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冬凌草甲素对CCl_(4)诱导的肝纤维化模型大鼠的免疫调节作用

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中国老年学杂志 2024年第12期44卷 2986-2990页

作者：张明晓郭少阳贾阳阳潘丽雅闫君宝洛阳职业技术学院基础医学院河南洛阳471000 洛阳职业技术学院中医教研室河南洛阳471000 新乡医学院解剖教研室广西医科大学第四附属医院神经内科洛阳职业技术学院生理教研室

目的探究冬凌草甲素对四氯化碳(CCl_(4))诱导的肝纤维化模型大鼠的免疫调节作用。方法将大鼠随机分为正常对照组、模型组、冬凌草甲素5、10、20 mg/kg(低、中、高剂量)组和阳性对照组各10只,除正常对照组外,其余各组通过皮下注射40%CCl_... 详细信息

目的探究冬凌草甲素对四氯化碳(CCl_(4))诱导的肝纤维化模型大鼠的免疫调节作用。方法将大鼠随机分为正常对照组、模型组、冬凌草甲素5、10、20 mg/kg(低、中、高剂量)组和阳性对照组各10只,除正常对照组外,其余各组通过皮下注射40%CCl_(4)花生油混合溶液,首剂量为5 ml/kg,后为3 ml/kg,2次/w,连续12 w,构建肝纤维化大鼠模型。造模4 w后,冬凌草甲素低、中、高剂量组分别灌胃冬凌草甲素5、10、20 mg/kg,阳性对照组灌胃秋水仙碱0.2 mg/kg,正常对照组和模型组灌胃等量生理盐水,1次/d。苏木素-伊红(HE)染色检测肝组织病理变化;试剂盒检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中羟脯氨酸(HYP)、白细胞介素(IL)-1、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α和IL-6水平;流式细胞仪检测CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)表达水平并计算CD4^(+)/CD8^(+)比值;试剂盒检测肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量;Western印迹检测转化生长因子(TGF)-β1、细胞信号传导分子(Smad)3、Smad7蛋白表达水平。结果与模型组比较,中、高剂量组和阳性对照组肝组织病理损伤程度明显减轻,血清中ALT、AST和HYP水平显著降低,血清中IL-1、TNF-α和IL-6水平显著降低,血清中IL-10水平显著升高,CD3^(+)、CD4^(+)表达水平和CD4^(+)/CD8^(+)比值显著升高,CD8^(+)表达水平显著降低,肝组织中SOD、GSH-Px活性显著升高,MDA含量显著降低,TGF-β1、Smad3蛋白表达水平显著降低,Smad7蛋白表达水平显著升高(均P<0.05)。结论冬凌草甲素通过平衡T淋巴细胞亚群、调节免疫功能、抑制氧化应激改善CCl_(4)诱导的肝纤维化模型大鼠肝纤维化,其作用机制可能与抑制TGF-β1/Smad信号通路有关。

关键词：肝纤维化冬凌草甲素免疫调节转化生长因子(TGF)-β1/细胞信号传导分子(Smad)信号通路

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牡荆素调控Epac1/CaMKⅡ通路减轻小鼠急性心肌缺血再灌注损伤的作用机制

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安徽医科大学学报 2023年第10期58卷 1652-1656页

作者：甘琴杨换花张玲玉刘小嘉董六一安徽医科大学基础医学院药理学教研室合肥230032 合肥职业技术学院基础医学教研室合肥230012

目的研究小鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)中Epac1/CaMKⅡ信号通路的作用,并探明牡荆素(VT)对急性MIRI的保护作用。方法取C57/BL小鼠随机分为5组,每组8只,分别为假手术组(Sham组),缺血再灌注组(I/R组),缺血再灌注+VT组(VT设置3、6、12 mg/k... 详细信息

目的研究小鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)中Epac1/CaMKⅡ信号通路的作用,并探明牡荆素(VT)对急性MIRI的保护作用。方法取C57/BL小鼠随机分为5组,每组8只,分别为假手术组(Sham组),缺血再灌注组(I/R组),缺血再灌注+VT组(VT设置3、6、12 mg/kg 3个剂量组)。小鼠左冠状动脉前降支(LAD)结扎,使部分心脏组织缺血30 min,血液再灌注120 min,构建小鼠MIRI模型。Sham组小鼠只手术不结扎LAD。检测小鼠血清中乳酸脱氢酶(LDH)水平;取小鼠左室心肌组织进行HE染色观察心肌病理组织学变化;免疫组织化学观察心肌组织中Epac1的表达水平;Western blot法测定Epac1、Rap1、CaMKⅡ、ERK/p-ERK蛋白表达的变化。结果与Sham组比较,I/R组小鼠血清中LDH百分比水平显著升高,心肌组织中Epac1、Rap1、CaMKⅡ蛋白表达显著上调,ERK1/2磷酸化水平降低。与I/R组比较,VT(3、6、12 mg/kg)预处理组可显著降低小鼠血清中LDH水平,抑制小鼠心肌组织中Epac1、Rap1与CaMKⅡ蛋白表达,促进ERK1/2磷酸化。病理组织学结果显示,I/R组小鼠心肌纤维排列紊乱、断裂,间隙增加,炎性细胞浸润明显;VT(3、6、12 mg/kg)预处理组小鼠心肌纤维排列较整齐,炎性细胞浸润较少。结论VT可能通过调节Epac1/CaMKⅡ信号通路,下调CaMKⅡ蛋白表达,促进ERK磷酸化,有效减轻MIRI。

关键词：牡荆素 Epac1 CaMKⅡ 心肌缺血再灌注损伤

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基于UHPLC-QE-MS技术的两色金鸡菊总黄酮干预肺癌移植瘤小鼠瘤组织的代谢组学研究

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中国临床药理学杂志 2023年第9期39卷 1321-1325页

作者：国鲁源阿不来提·阿合买提布威阿丽耶·胡加阿布都拉岳进巧吴桂霞新疆医科大学基础医学院生理教研室新疆医科大学基础医学院机能中心新疆昌吉职业技术学院医学分院生物微生物教研室

目的利用超高效液相色谱-质谱联用（UHPLC-QE-MS）技术，分析两色金鸡菊总黄酮（CTFs）对非小细胞肺癌移植瘤裸鼠瘤组织中代谢物的影响，初步探讨其抗瘤作用的潜在机制。方法建立非小细胞肺癌移植瘤裸鼠模型。CTFs干预组(100 mg·... 详细信息

目的利用超高效液相色谱-质谱联用（UHPLC-QE-MS）技术，分析两色金鸡菊总黄酮（CTFs）对非小细胞肺癌移植瘤裸鼠瘤组织中代谢物的影响，初步探讨其抗瘤作用的潜在机制。方法建立非小细胞肺癌移植瘤裸鼠模型。CTFs干预组(100 mg·kg-1)从小鼠接种肿瘤细胞起灌胃给药；CTFs治疗组(100 mg·kg-1)从移植瘤体积达40～50 mm3后开始灌胃给药，模型组给予等量的羧甲基纤维素钠盐溶液，每天1次，连续21 d,记录瘤质量和体积，并进行苏木精-伊红染色。用UHPLC-QE-MS技术对3组瘤组织进行代谢组分析，用主成分分析法（PCA）和正交偏最小二乘判别分析法（OPLS-DA）筛选出相关差异代谢物，通过KEGG、HMDB数据库进行潜在的代谢通路分析。结果模型组、CTFs干预组和CTFs治疗组瘤质量分别为（0.60±0.15）、（0.21±0.14）、（0.52±0.23）g,瘤体积分别为（453.89±72.38）、（306.71±70.35）、（422.20±77.55）mm3,与模型组相比，CTFs干预组中瘤质量及瘤体积明显降低，而CTFs治疗组差异无统计学意义。UHPLC-QE-MS的结果显示，与模型组小鼠相比，CTFs干预组共有43个差异代谢物，涉及15条代谢通路；CTFs治疗组有23个差异代谢物，涉及5条代谢通路。结论 CTFs可能通过调节牛磺酸和亚牛磺酸代谢、苯丙氨酸代谢等通路，调控相关代谢产物水平，进而发挥抗肺癌的作用。

关键词：两色金鸡菊肺癌凋亡代谢组学

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基于GINS家族成员在胶质瘤组织中的表达水平对其进行分型及其临床意义

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中国肿瘤生物治疗杂志 2024年第3期31卷 261-270页

作者：廖永珍梁禄李意丛丽顺德职业技术学院医药卫生学院临床与药学教研室广东佛山528333 湖南师范大学医学院基础医学系湖南长沙410013

目的:基于GINS家族成员在胶质瘤组织中表达水平对其分型,探究此分型预测胶质瘤患者的预后、免疫治疗疗效的有效性,采用TCMOI数据库虚拟筛选可靶向GINS的中药小分子。方法:数据库分析GINS基因组学、胶质瘤组织中差异表达基因与患者预后... 详细信息

目的:基于GINS家族成员在胶质瘤组织中表达水平对其分型,探究此分型预测胶质瘤患者的预后、免疫治疗疗效的有效性,采用TCMOI数据库虚拟筛选可靶向GINS的中药小分子。方法:数据库分析GINS基因组学、胶质瘤组织中差异表达基因与患者预后的关系,基于GINS家族成员基因表达对胶质瘤进行分型并分析各亚型的预后情况,数据库数据分析各亚型中的基因突变、基因富集、肿瘤纯度和免疫细胞浸润评分,以及与GINS2可能相互作用的中药小分子,最后用qPCR法检测中国人胶质瘤组织中GINS1~4 mRNA的表达水平以验证其与数据库数据的一致性。结果:GINS家族各成员间的基因、蛋白结构和功能相似,胶质瘤组织中GINS家族成员呈高表达且与患者不良预后密切相关(P<0.05),基于GINS家族成员在胶质瘤组织中表达水平的S1、S2亚型分类能较好地预测胶质瘤患者的预后,S1亚型主要突变基因为CDKN2A/B、EGFR、PTEN而S2亚型的突变基因为IDH1、TP53和ATRX,GINS家族可能通过调控免疫微环境影响胶质瘤患者预后,CD276和CX3CL1可能是S1亚型胶质瘤患者实施免疫治疗的潜在靶点,CHEMBL66033、266935、293914、436859、1594881可能是潜在的靶向GINS2的中药小分子。结论:基于GINS家族构建的胶质瘤分子分型有助于识别更适合免疫治疗的高风险患者,筛选出的中药小分子可为胶质瘤患者分子靶向治疗和免疫治疗提供参考。

关键词：胶质瘤 GINS家族分子分型预后分子对接中药

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两种方法构建小鼠过敏性接触性皮炎的比较研究

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中国药理学通报 2022年第10期38卷 1591-1596页

作者：朱晓筱周兰兰安徽医科大学基础医学院药理教研室安徽合肥230022 深圳职业技术学院医护学院广东深圳518055

目的探讨2,4-二硝基氟苯(2,4-dinitrofluorobenzene,DNFB)诱导不同建模周期的过敏性接触性皮炎(allergic contact dermatitis,ACD)模型的差异,为在皮肤瘙痒和炎症的研究中明确和选择更适合的动物模型提供参考和依据。方法DNFB作为致敏剂... 详细信息

目的探讨2,4-二硝基氟苯(2,4-dinitrofluorobenzene,DNFB)诱导不同建模周期的过敏性接触性皮炎(allergic contact dermatitis,ACD)模型的差异,为在皮肤瘙痒和炎症的研究中明确和选择更适合的动物模型提供参考和依据。方法DNFB作为致敏剂,0.5%DNFB构建2周ACD模型,敏化5 d后,造模部位间隔1 d给药1次,重复4次;0.15%DNFB构建5周ACD模型,敏化1周后,DNFB涂抹造模部位,每周2次,持续4周。每次涂抹DNFB 24 h后记录行为学视频60 min。造模结束后,ELISA检测血清中Ig-E水平,且造模处皮肤进行组织病理学染色并观察。结果两种建模的ACD小鼠整个建模过程都伴随着皮肤反复接触DNFB后的严重刮擦反应,且抓挠次数明显增多(P<0.01)。组织病理学结果显示,两种造模方法均存在表皮增厚(P<0.01),角化过度和炎症性细胞浸润(P<0.01),且血清中Ig-E水平显著升高。结论DNFB引起的ACD模型非常稳定,两种建模周期均表现出瘙痒、皮肤损伤和免疫炎症反应,而5周模型可能有更典型的症状,且有足够时间观察药物的作用,这为进一步研究瘙痒和炎症相关药物提供实验基础和证据。

关键词：过敏性接触性皮炎 2,4-二硝基氟苯慢性瘙痒免疫炎症肥大细胞动物模型

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椰壳活性炭对百草枯的吸附研究

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湖北农业科学 2022年第23期61卷 69-73,77页

作者：范凯轩李孟值谢尚宏冯小云李涛梁珍鲍继海巴中职业技术学院医学院/基础医学教研室四川巴中636601

采用分批吸附技术,研究硝酸改性后的椰壳炭对百草枯去除能力的影响因素及机理。以YK-6为研究对象,研究了pH、转速、投加量、温度和初始浓度的影响。从动力学数据来看,将6 h作为测定吸附等温试验的平衡时间。将吸附数据拟合到Langmuir、F... 详细信息

采用分批吸附技术,研究硝酸改性后的椰壳炭对百草枯去除能力的影响因素及机理。以YK-6为研究对象,研究了pH、转速、投加量、温度和初始浓度的影响。从动力学数据来看,将6 h作为测定吸附等温试验的平衡时间。将吸附数据拟合到Langmuir、Freundlich、Temkin和Brouers-Sotolongo(BS)吸附等温模型中,在pH为2~9时,吸附作用随着pH的增加而增加,这是百草枯分子与椰壳炭表面的酸性官能团亲和力增加的结果;通过阿仑尼乌斯公式拟合计算,发现该过程具有明显的化学吸附作用;BS等温线模型描述的吸附过程,在37℃下测定的BS模型最大吸附能为88.47 mg/g;应用Lagergren准一级、Lagergren准二级、Elovich和Avrami模型拟合动力学结果,发现Avrami模型最适合。

关键词：百草枯吸附等温线动力学模型

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活性炭表面酸性基团对百草枯吸附的影响

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湖北农业科学 2022年第21期61卷 67-72页

作者：范凯轩蒋帅李孟值李田田郝盼盼严湘杨纯金巴中职业技术学院医学院基础医学教研室四川巴中636601 巴中职业技术学院医学院临床医学教研室四川巴中636601

用硝酸对煤质活性炭进行改性,考察了改性前后活性炭表面基团、织构变化及对百草枯的吸附影响,以GAC-6为研究对象进行动力学和热力学试验。采用Boehm滴定法和液态氮吸附法对活性炭进行了表征以及热力学和动力学模型的拟合。结果表明,硝... 详细信息

用硝酸对煤质活性炭进行改性,考察了改性前后活性炭表面基团、织构变化及对百草枯的吸附影响,以GAC-6为研究对象进行动力学和热力学试验。采用Boehm滴定法和液态氮吸附法对活性炭进行了表征以及热力学和动力学模型的拟合。结果表明,硝酸改性活性炭对表面官能团有较大影响,随着氧化时间的延长,GAC系列活性炭的吸附主要以酸性官能团的影响为主,介孔亦有影响。改性可以提高对百草枯的吸附,吸附过程符合准二级动力学模型。与Langmuir等温模型相比,Freundlich吸附等温模型更能描述百草枯在活性炭上的吸附过程,用Dubbininin-Redushkevuch模型进行拟合,证明该吸附过程是一个物理过程,用Van’t Hoff模型拟合,表明煤质活性炭对百草枯的吸附是一个吸热过程。

关键词：活性炭改性百草枯吸附

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手法治疗退行性腰椎滑脱症的研究进展

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每周文摘·养老周刊 2023年第22期 296-298页

作者：方飞宇赵印震任京龙洛阳职业技术学院基础医学院中医教研室河南洛阳 471000 洛阳职业技术学院基础医学院中医教研室河南洛阳 471000 洛阳职业技术学院基础医学院中医教研室河南洛阳 471000

退行性腰椎滑脱症(Degenerative lumbar spondylolisthesis,DLS)是临床常见病、多发病,手法治疗作为一种有效的治疗手段,在临床中被越来越多的医师所接受.本文通过对文献中手法治疗的整理总结,为临床医师提供治疗思路.

关键词：退行性腰椎滑脱症手法

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