【目的】MADS-box转录因子是植物最大的转录因子家族之一，在植物生长发育和胁迫响应中均发挥重要功能。前期通过转录组数据获得一个辣椒热响应基因，该基因编码MADS-box转录因子家族成员CaAGL61(Agamous-like MADS-box protein AGL61)...
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【目的】MADS-box转录因子是植物最大的转录因子家族之一，在植物生长发育和胁迫响应中均发挥重要功能。前期通过转录组数据获得一个辣椒热响应基因，该基因编码MADS-box转录因子家族成员CaAGL61(Agamous-like MADS-box protein AGL61)。在此基础上，进一步研究CaAGL61在辣椒耐热性调控中的功能，为深入了解辣椒耐热分子机制提供理论参考，为辣椒耐热性的遗传改良提供基因位点。【方法】通过SMART在线工具预测CaAGL61保守结构域，使用MEGA7构建辣椒和其他植物物种AGL61蛋白的系统发育树，利用实时荧光定量PCR技术探究CaAGL61在辣椒中的表达模式，运用烟草亚细胞定位技术和酵母双杂交自激活系统检测CaAGL61的转录因子特性，利用病毒诱导的基因沉默技术和基因瞬时过表达技术探究CaAGL61表达对辣椒耐热性的影响。【结果】CaAGL61编码179个氨基酸，包含一个MADS结构域，在系统进化方面高度保守。CaAGL61在辣椒花器官中的表达量最高、其次是茎和果实，根中的表达量最低；进一步分析发现CaAGL61的表达量随着花器官的成熟而增加，尤其在授粉坐果期的花药中表达量最高；45℃高温处理显著上调了CaAGL61的表达水平。亚细胞定位显示，CaAGL61定位于细胞核中；酵母转录激活分析表明，CaAGL61具有转录激活活性。CaAGL61沉默植株的耐热性显著增强，热胁迫处理后，与对照相比，CaAGL61沉默植株生长点萎蔫程度减轻，叶片相对电导率降低，丙二醛含量、死细胞和活性氧积累减少，而叶绿素含量升高。相反，CaAGL61瞬时过表达降低了辣椒的耐热性，与对照相比，表现为植株受热胁迫损伤程度更严重，叶片相对电导率升高，丙二醛含量、死细胞和活性氧积累增多，叶绿素含量下降。【结论】鉴定了一个辣椒热响应MADS-box转录因子基因CaAGL61，该基因通过加剧氧化胁迫而负调控辣椒耐热性。
[目的]为筛选防治二化螟高效低毒轮换及混用药剂,对新型间苯二酰胺类杀虫剂环丙氟虫胺进行了室内生物活性测定及与5种不同类型杀虫剂混用的田间防效研究。[方法]采用浸虫法测定环丙氟虫胺对二化螟2龄幼虫的室内生物活性,开展环丙氟虫胺单用及其与5种不同作用机制杀虫剂混用的田间药效试验。[结果]环丙氟虫胺对浙江4个二化螟种群的LC50为0.20~0.24 mg/L,显著低于氯虫苯甲酰胺、甲氧虫酰肼,略低于乙基多杀菌素。20%环丙氟虫胺SC分别与25%乙基多杀菌素WG、24%甲氧虫酰肼SC、5%阿维菌素EC、25%喹硫磷EC混用,对二化螟防效均在90%以上,高于复配制剂34%乙多·甲氧虫SC 102 g a.i./hm^(2),其中20%环丙氟虫胺SC 30 g a.i./hm^(2)与25%乙基多杀菌素SC 25 g a.i./hm^(2)混用效果最佳,第2次药后20 d保叶效果和杀虫防效分别为97.59%、98.35%。[结论]环丙氟虫胺对二化螟具有良好的室内生物活性,单独或与常规二化螟防治药剂混用时田间防效显著,待上市后可以作为首选轮换药剂,可单用也可与乙基多杀菌素或甲氧虫酰肼混用,田间危害较轻时可以与阿维菌素或喹硫磷混用。
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