检索结果-内蒙古大学图书馆

现代食品科技 2025年第1期41卷 1-7页

作者：张文鑫曾淑娴田先兵吴杰根郭莲仙梁一广东医科大学医学技术学院检验医学研究所临床免疫学教研室广东省医学分子诊断重点实验室广东东莞523808 深圳市龙岗区妇幼保健院(汕头大学医学院龙岗妇幼临床学院)中心实验室广东深圳518172 广东医科大学公共卫生学院广东东莞523808

为探索食物砷暴露对肝脏脂质代谢的作用及其分子机制,该研究构建了长时间喂养含砷饲料的C57BL/6小鼠模型及HepG2细胞模型。利用透射电子显微镜观察小鼠肝脏切片的超微结构,通过免疫印迹及试剂盒法检测细胞脂质代谢相关指标。结果显示,... 详细信息

为探索食物砷暴露对肝脏脂质代谢的作用及其分子机制,该研究构建了长时间喂养含砷饲料的C57BL/6小鼠模型及HepG2细胞模型。利用透射电子显微镜观察小鼠肝脏切片的超微结构,通过免疫印迹及试剂盒法检测细胞脂质代谢相关指标。结果显示,砷暴露小鼠肝脏脂滴明显减少、变小。体外实验中,HepG2细胞在10、20、30、40μmol/L砷暴露后,固醇调节元件结合蛋白1c(Sterol Regulatory Element-Binding Protein 1c,SREBP-1c)相对表达分别为0.73、0.60、0.54、0.40,脂肪酸合成酶(Fatty Acid Synthase,FASN)相对表达水平分别为0.88、0.77、0.75、0.82;甘油三酯(Triglyceride,TG)相对表达分别为0.94、0.78、0.78、0.73;胆固醇(Total Cholesterol,TC)相对表达分别为0.95、0.73、0.70、0.57,细胞脂质代谢发生紊乱。细胞外信号调节激酶(Extracellular Signal-Regulated Kinase,ERK)磷酸化相对表达水平分别为5.72、23.78、33.20、47.17,ERK信号通路被激活。ERK抑制剂PD98059预处理后,HepG2细胞的SREBP-1c、FASN相对表达水平分别上升至1.2、1.3;TG、TC相对表达也分别恢复到1.2、1.2。该研究为ERK信号在砷暴露引起HepG2细胞脂质代谢紊乱中的作用提供了理论基础。

关键词：砷细胞外信号调节激酶脂质代谢

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大肠癌组织中nm23-H_1、Fas和FasL的表达及临床意义

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四川大学学报（医学版） 2005年第4期36卷 503-505页

作者：林满华姚运红余建华广东医学院检验学院临床血液学检验教研室湛江524023 广东医学院病理学教研室

目的探讨nm23-H1、Fas和FasL在大肠癌组织中的表达及其意义。方法采用SP免疫组织化学法检测48例大肠癌组织和15例正常肠粘膜组织中nm23-H1、Fas和FasL的表达情况。结果正常肠粘膜组织中nm23-H1、Fas和FasL阳性表达率分别为(75.0±2.... 详细信息

目的探讨nm23-H1、Fas和FasL在大肠癌组织中的表达及其意义。方法采用SP免疫组织化学法检测48例大肠癌组织和15例正常肠粘膜组织中nm23-H1、Fas和FasL的表达情况。结果正常肠粘膜组织中nm23-H1、Fas和FasL阳性表达率分别为(75.0±2.3)%、(73.3±2.5)%和(6.7±1.0)%,而大肠癌组织中三者的阳性表达率分别为(25.0±2.6)%、(41.7±2.7)%和(77.1±2.7)%;大肠癌组织nm23-H1和Fas的阳性表达率均低于正常肠粘膜组织(P<0.01);而FasL阳性表达率高于正常肠粘膜组织(P<0.01);nm23-H1、Fas低表达和FasL高表达均与大肠癌组织分化程度、淋巴结转移、Duke's分期及预后有关(P均<0.01)。结论nm23-H1、Fas低表达和FasL高表达可作为判断大肠癌分期、预测淋巴结转移和预后的良好指标。

关键词：大肠癌 nm23-H1 Fas FasL 免疫组织化学

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茶树菇凝集素检测醋酸格拉替雷诱导小鼠的CD8~＋T淋巴细胞表面糖基化研究

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现代食品科技 2016年第5期32卷 9-13,8页

作者：巫伟鹏黄碧霞关鑫文钰棣梁一广东医学院医学检验学院临床免疫教研室广东东莞523808

醋酸格拉替雷是治疗多发性硬化症的一线药物,可通过诱导调节性CD8+T细胞发挥免疫调节作用。为研究GA诱导的CD8+T淋巴细胞,我们将茶树菇分离的两种凝集素AAL(Agrocybe aegerita lectin)和AAL2(Agrocybe aegerita lectin 2),通过生物素标... 详细信息

醋酸格拉替雷是治疗多发性硬化症的一线药物,可通过诱导调节性CD8+T细胞发挥免疫调节作用。为研究GA诱导的CD8+T淋巴细胞,我们将茶树菇分离的两种凝集素AAL(Agrocybe aegerita lectin)和AAL2(Agrocybe aegerita lectin 2),通过生物素标记结合流式细胞仪,分别分析GA诱导的免疫耐受小鼠模型中脾脏、腹股沟淋巴结CD8+T淋巴细胞的糖基化水平,及细胞因子的表达。发现脾脏AAL+CD8+,AAL2+CD8+T淋巴细胞的比例(%)分别为8.46±3.1和9.08±2.8,淋巴结AAL+CD8+,AAL2+CD8+T淋巴细胞的比例(%)分别为10.65±4.6和8.25±5.9,且脾脏、淋巴结CD8+T淋巴细胞中AAL+细胞的百分比均显著高于CD8-T淋巴细胞(p<0.05)。淋巴结中AAL+CD8+T细胞表达IFN-γ的细胞比例显著高于AAL-CD8+T细胞,AAL2+CD8+T细胞表达IFN-γ和perforin细胞比例均显著高于AAL2-CD8+T细胞。该结果为CD8+T淋巴细胞表面糖基化研究提供了初步数据,并暗示糖基化水平与细胞因子分泌有关。

关键词：糖基化茶树菇半乳糖凝集素 CD8+T淋巴细胞醋酸格拉替雷

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人CD1d分子胞外区的原核表达及其多克隆抗体的制备

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细胞与分子免疫学杂志 2008年第4期24卷 348-350页

作者：陈章权黄震梁晓东陆田田何天文广东医学院临床免疫学教研室广东湛江524023

目的:原核细胞表达人CD1d分子胞外区及制备其多克隆抗体。方法:用RT-PCR法扩增人CD1d分子胞外区基因,将其克隆入原核表达载体pET28中,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导重组蛋白的表达,用亲和层析法纯化重组蛋白,以之为免疫原免疫小鼠... 详细信息

目的:原核细胞表达人CD1d分子胞外区及制备其多克隆抗体。方法:用RT-PCR法扩增人CD1d分子胞外区基因,将其克隆入原核表达载体pET28中,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导重组蛋白的表达,用亲和层析法纯化重组蛋白,以之为免疫原免疫小鼠制备多克隆抗体,并以ELISA、Western blot及免疫组织化学法检测抗体。结果:在原核细胞中高效表达和纯化了人CD1d分子胞外区蛋白,用其免疫小鼠,获得了效价高、特异性较好的多克隆抗体,免疫组织化学检测显示该抗体可识别人小肠组织中的天然CD1d分子。结论:成功制备了人CD1d分子胞外区重组蛋白及鼠抗人CD1d分子胞外区抗体,为进一步建立人CD1d分子的免疫学检测方法及其生物学功能的深入研究奠定了基础。

关键词： CD1d 基因表达抗体制备

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兔抗人CD1d分子α3结构域抗体的制备与鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2008年第3期24卷 250-252页

作者：陈章权黄震梁晓东何天文陆田田广东医学院临床免疫学教研室广东湛江524023

目的:制备兔抗人CD1d分子α3结构域(hCD1d-α3)多克隆抗体。方法:PCR法扩增出人hCD1d-α3编码区基因,将其克隆入原核表达载体pET28中,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导重组蛋白的表达,用Ni2+-NTA Agarose亲和层析法纯化重组蛋白,以之... 详细信息

目的:制备兔抗人CD1d分子α3结构域(hCD1d-α3)多克隆抗体。方法:PCR法扩增出人hCD1d-α3编码区基因,将其克隆入原核表达载体pET28中,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导重组蛋白的表达,用Ni2+-NTA Agarose亲和层析法纯化重组蛋白,以之为免疫原免疫家兔,制备多克隆抗体,并用ELISA、Western blot及免疫组织化学法检测抗体。结果:成功构建了hCD1d-α3原核表达载体pET28/h CD1d-α3,高效表达并纯化hCD1d-α3蛋白,间接ELISA检测所制备抗体的效价为1∶6400,Western blot显示该抗体能与hCD1d特异结合,免疫组织化学法检测结果表明该抗体识别人小肠组织中的天然hCD1d。结论:通过制备重组hCD1d-α3蛋白为免疫原,免疫家兔,成功地制备了效价高、特异性好的抗hCD1d-α3多克隆抗体。

关键词： CD1d α3结构域表达抗体制备

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细菌生物被膜菌群间遗传物质的转移

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中国抗生素杂志 2013年第2期38卷 98-101页

作者：黄娟杨维青赵祖国广东医学院医学检验学院临床微生物学教研室

细菌在环境中多以生物被膜的形式存在。细菌间的基因水平转移能使细菌在短时间内产生新的基因型菌株,改变物种特征以适应环境的变化。从生物强化策略和生物被膜的结构特点来讲,在生物被膜菌群中细菌的基因水平转移更具优势和特点。

关键词：细菌生物被膜基因水平转移

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小鼠BTLA慢病毒表达载体的构建及鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2013年第3期29卷 261-264页

作者：曾今诚鲍晶晶王红梅张慧张俊爱王万党关向前徐军发广东医学院检验医学研究所广东东莞523808 广东医学院临床免疫学教研室广东东莞523808

目的构建小鼠BTLA慢病毒表达载体,并对表达产物进行鉴定。方法以pET-28a-mBTLA质粒为模板,通过PCR技术构建pMD18-T-mBTLA质粒,将小鼠BTLA基因全长编码序列克隆到慢病毒转移载体,通过脂质体转染293T细胞包装成小鼠BTLA慢病毒颗粒。PCR技... 详细信息

目的构建小鼠BTLA慢病毒表达载体,并对表达产物进行鉴定。方法以pET-28a-mBTLA质粒为模板,通过PCR技术构建pMD18-T-mBTLA质粒,将小鼠BTLA基因全长编码序列克隆到慢病毒转移载体,通过脂质体转染293T细胞包装成小鼠BTLA慢病毒颗粒。PCR技术和基因测序对重组质粒进行鉴定。荧光显微镜观察重组慢病毒感染293T细胞形态学变化。RT-PCR和Western blot法鉴定BTLA在重组慢病毒感染293T细胞中的表达。50%组织培养感染剂量法(TCID50法)检测重组慢病毒滴度。结果成功构建的pMD18-T-mBTLA质粒和pSL6-mBTLA质粒,经双酶切电泳后均出现大小约为1 kb的条带与mB-TLA编码序列的大小相符。基因测序并比对分析进一步证实mBTLA编码序列成功整合到质粒载体。病毒上清PCR扩增和293T细胞形态学观察证实Lenti-mBTLA慢病毒包装成功。TCID50法测定Lenti-mBTLA慢病毒滴度为1.3×108pfu/mL。RT-PCR和Western blot法证实Lenti-mBTLA慢病毒能有效表达mBTLA mRNA和蛋白质。结论成功构建了表达小鼠BTLA的慢病毒。

关键词：慢病毒 B、T淋巴细胞弱化因子 293T细胞 PCR技术

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人BTLA分子胞外区的原核表达及其多克隆抗体的制备与鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2011年第4期27卷 419-421页

作者：郑淑华刘伟吕晶王红梅鲍晶晶徐军发广东医学院临床免疫学教研室广东东莞523808 广东医学院检验医学研究所广东东莞523808

目的:表达并纯化重组人BTLA(hBTLA)分子胞外区,制备和鉴定兔抗hBTLA多克隆抗体,为进一步实验研究奠定基础。方法:采用特异性引物扩增hBTLA胞外功能区DNA,经酶切、连接构建原核表达载体pET28a-hBTLA。将构建的重组表达质粒转化入***21(D... 详细信息

目的:表达并纯化重组人BTLA(hBTLA)分子胞外区,制备和鉴定兔抗hBTLA多克隆抗体,为进一步实验研究奠定基础。方法:采用特异性引物扩增hBTLA胞外功能区DNA,经酶切、连接构建原核表达载体pET28a-hBTLA。将构建的重组表达质粒转化入***21(DE3)菌株,采用IPTG诱导表达,Ni-NTA柱亲和层析纯化目的蛋白,SDS-PAGE电泳分析蛋白纯度。将纯化的目的蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,并对抗体进行纯化、效价测定及特异性鉴定。结果:序列测定证实构建的pET28a-hBTLA重组表达载体含有hBTLA编码序列,其序列比对分析与GenBank中公布序列一致,质粒在***中诱导表达相对分子质量(Mr)为15720的目的蛋白,SDS-PAGE电泳分析纯化后的目的蛋白达到电泳纯。双向琼脂扩散法检测抗体效价为1∶16,ELISA法检测抗体效价为1∶20 000,Western blot分析显示抗体能特异性结合重组hBTLA蛋白。结论:成功构建了hBTLA蛋白的原核表达载体,获得高纯度的融合蛋白,制备高效价、高特异性的多克隆抗体。

关键词： BTLA 原核表达多克隆抗体

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群体感应系统对细菌耐药的调控作用

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中国抗生素杂志 2011年第1期36卷 7-10页

作者：朱艮苗杨维青广东医学院检验学院临床微生物学教研室湛江524023

群体感应是细菌依赖于细胞密度、调节群体适应能力的一种普遍机制。细菌群体感应系统调节许多特定的功能,如对细菌耐药相关性状的调节。本文就群体感应系统对细菌耐药相关性状的调控作用进行综述。

关键词：群体感应系统细菌耐药性生物被膜:外排泵

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猫爪草多糖免疫调节及抗氧化活性研究

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中国中药杂志 2010年第14期35卷 1862-1865页

作者：吕小华王会敏韩红霞吕世静覃冬云广东医学院药理学教研室广东湛江524023 广东医学院临床免疫学教研室广东湛江524023 广东省中医院二沙岛分院检验科广东广州510105

目的:探讨猫爪草多糖(polysaccharide of Radix Ranunculi Ternati,PRT)对小鼠免疫功能的调节及抗氧化活性研究。方法:用MTT法检测PRT对小鼠胸腺细胞、脾脏淋巴细胞和腹腔巨噬细胞增殖活性的影响;用中性红比色法检测PRT对小鼠腹腔巨噬... 详细信息

目的:探讨猫爪草多糖(polysaccharide of Radix Ranunculi Ternati,PRT)对小鼠免疫功能的调节及抗氧化活性研究。方法:用MTT法检测PRT对小鼠胸腺细胞、脾脏淋巴细胞和腹腔巨噬细胞增殖活性的影响;用中性红比色法检测PRT对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响;采用普鲁士兰法测定PRT的还原能力;水杨酸捕捉法测定PRT对.OH的清除能力;邻苯三酚自氧化法测定PRT对O2.-的清除能力。结果:25～400 mg.L-1PRT呈剂量依赖式增强小鼠胸腺细胞和脾脏淋巴细胞增殖功能以及巨噬细胞的吞噬功能;PRT在200 mg.L-1时,对巨噬细胞增殖作用最强;在不同浓度梯度,PRT均表现出一定的还原能力;PRT在8 g.L-1时,接近同浓度Vit C对.OH自由基的清除作用;PRT在800 mg.L-1时,对O2.-的清除率达到95.39%。结论:PRT能增强小鼠胸腺细胞、脾脏淋巴细胞和腹腔巨噬细胞增殖能力,且对巨噬细胞有一最佳作用浓度;PRT能增强巨噬细胞的吞噬功能,并呈剂量-效应关系;PRT具有一定的还原能力,具有较强的清除.OH和O.2-的能力。

关键词：猫爪草多糖免疫功能抗氧化细胞增殖

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