检索结果-内蒙古大学图书馆

2014年中国水产学会学术年会

作者：张燕飞庞欢瑛吴灶和简纪常鲁义善广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室广东省水产经济动物病害控制重点实验室仲恺农业工程学院

为探究kdp D对溶藻弧菌HY9901生物学特性的影响,本研究利用自杀性载体系统,通过正负向筛选标记的同源重组方法筛选kdp D基因敲除突变株,生物学功能实验研究比较kdp D突变株和野生株HY9901在生长速率、胞外蛋白酶活性以及毒力等方面的差... 详细信息

为探究kdp D对溶藻弧菌HY9901生物学特性的影响,本研究利用自杀性载体系统,通过正负向筛选标记的同源重组方法筛选kdp D基因敲除突变株,生物学功能实验研究比较kdp D突变株和野生株HY9901在生长速率、胞外蛋白酶活性以及毒力等方面的差异。体外试验表明,kdp D的缺失,没有明显影响溶藻弧菌的生长曲线和胞外蛋白酶活性,但是缺失株的泳动能力和生物被膜形成能力明显降低。斑马鱼致病性试验结果显示,突变体毒力显著减弱。以上结果表明Kdp D在溶藻弧菌的泳动能力、被膜形成和致病性等方面都发挥着重要作用,为进一步研究Kdp D在溶藻弧菌感染机制中的作用奠定了基础。

关键词：溶藻弧菌 kdp D 基因敲除生物特性

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溶藻弧菌vscO基因在不同环境下的表达差异

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吉首大学学报（自然科学版） 2014年第4期35卷 59-63页

作者：庞欢瑛周泽军丁燏黄郁葱吴灶和简纪常广东海洋大学水产学院广东湛江524088 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室广东湛江524088 广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室广东湛江524088 仲恺农业工程学院广东广州510225

为阐明溶藻弧菌vscO的在不同环境下的表达情况,用半定量RT-PCR方法检测vscO mRNA在不同生长时期、不同环境因子(温度、盐度和pH值)培养下的相对表达量.结果表明,溶藻弧菌vscO在对数期,温度为28℃,盐度为2%以及培养基起始pH值为7.0时的... 详细信息

为阐明溶藻弧菌vscO的在不同环境下的表达情况,用半定量RT-PCR方法检测vscO mRNA在不同生长时期、不同环境因子(温度、盐度和pH值)培养下的相对表达量.结果表明,溶藻弧菌vscO在对数期,温度为28℃,盐度为2%以及培养基起始pH值为7.0时的表达量最高.

关键词：溶藻弧菌 Ⅲ型分泌系统(T3SS) vscO基因环境因子基因表达

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草鱼呼肠孤病毒096 vp7基因生物信息学分析及其酵母表达载体的构建

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广东海洋大学学报 2014年第6期34卷 31-37页

作者：郑树城谢吉国王雅蔡双虎简纪常吴灶和闫秀英广东海洋大学水产学院//广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨广东省高等学校水产经济动物病害控制重点实验室广东湛江524088 北京市大兴区水产技术推广站北京102600

草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)是草鱼出血病的病原。从患病草鱼体内分离到一株草鱼呼肠孤病毒GCRV 096,经反转录PCR,克隆得GCRV 096长度为855 bp的vp7基因,并分析该基因编码蛋白的特性。结果表明,同一基因型分离株VP7蛋白... 详细信息

草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)是草鱼出血病的病原。从患病草鱼体内分离到一株草鱼呼肠孤病毒GCRV 096,经反转录PCR,克隆得GCRV 096长度为855 bp的vp7基因,并分析该基因编码蛋白的特性。结果表明,同一基因型分离株VP7蛋白间的差异不大,但不同基因型分离株VP7蛋白间存在很大的差异。对GCRV 096 VP7蛋白生物信息学分析表明,信号肽位点位于20氨基酸处,且VP7含有4个潜在的抗原决定簇。构建GCRV 096 vp7基因的酵母表达载体p GBKT7-S10,并成功转化至酵母中。

关键词：草鱼呼肠孤病毒 vp7基因生物信息学酵母表达载体

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温度、盐度对卵形鲳鲹呼吸代谢的影响

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广东海洋大学学报 2014年第1期34卷 30-36页

作者：李金兰陈刚张健东汤保贵周晖王忠良黄建盛施刚初庆柱李向明广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室广东省普通高校南海水产经济动物增养殖重点实验室广东湛江524088 海南省海洋与渔业科学院海南海口570100

运用间歇流水式呼吸仪研究卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus L.)在不同温度、盐度下呼吸代谢的变化。结果表明:在19~33℃内,随温度升高,卵形鲳鲹的耗氧率(RO)、排氨率(RN)、代谢率(REO)、排泄率(REN)均不断增大,差异有统计学意义(P<0... 详细信息

运用间歇流水式呼吸仪研究卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus L.)在不同温度、盐度下呼吸代谢的变化。结果表明:在19~33℃内,随温度升高,卵形鲳鲹的耗氧率(RO)、排氨率(RN)、代谢率(REO)、排泄率(REN)均不断增大,差异有统计学意义(P<0.05),氨商(QA)与蛋白质供能比(PEP)则下降,差异有统计学意义(P<0.05),并在28~33℃组达到稳定;温度系数(Q10值)在水温由28℃升至33℃时最小,为1.59;肝糖原(LG)及乳酸(LD)均呈下降趋势,且各组LG差异均具统计学意义(P<0.05)。在盐度15~30时,随盐度增大,卵形鲳鲹RO、RN、REO、REN、QA与PEP均呈U型抛物线变化,并在盐度20~25时有最小值;LG与LD变化均不明显。在19~33℃内,卵形鲳鲹代谢水平与水温呈正相关,主要由氧化蛋白质供能,28~33℃的温度条件更利于卵形鲳鲹生长。在盐度15~30内,卵形鲳鲹代谢水平与盐度呈U型抛物线变化,主要由氧化蛋白质供能,盐度20~25利于机体储备蛋白质,即利于生长。

关键词：卵形鲳鲹温度盐度耗氧率排氨率能源物质

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凡纳滨对虾白斑病毒VP28基因的RNA干扰体内研究

凡纳滨对虾白斑病毒VP28基因的RNA干扰体内研究

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第九届世界华人虾蟹养殖研讨会

作者：朱卫卫邱德全甘桢广东海洋大学水产学院湛江52408 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室湛江52408 广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室湛江52408

VP28是对虾白斑综合症病毒(WSSV)的一种囊膜蛋白,在病毒侵染早期发挥了极其关键的作用.设计了VP28的一条21bp的siRNA(生物公司合成),已有研究结果在体外证实其有效性.在凡纳滨对虾第2腹节注射100 μL BSS(PH7.2)缓冲液稀释104倍的病毒... 详细信息

VP28是对虾白斑综合症病毒(WSSV)的一种囊膜蛋白,在病毒侵染早期发挥了极其关键的作用.设计了VP28的一条21bp的siRNA(生物公司合成),已有研究结果在体外证实其有效性.在凡纳滨对虾第2腹节注射100 μL BSS(PH7.2)缓冲液稀释104倍的病毒粗提液.24h后,对照组直接注射100μl BSS,实验组分为注射100μl的0.05 μg/μl siRNA组(S05组)和注射100μl的0.10 μg/μl siRNA组(S10组),阴性对照不注射任何溶液,每组20尾虾,分别在24h、48h采集对虾的鳃,提取病毒,利用荧光定量检测分析仪检测病毒的拷贝数.

关键词： VP28 WSSV RNA干扰凡纳滨对虾

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氟苯尼考在美国红鱼体内的药代动力学和组织分布

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广东海洋大学学报 2014年第3期34卷 58-64页

作者：黄月雄汤菊芬简纪常秦青英廖建萌蔡佳广东海洋大学水产学院广东湛江524088 广东海洋大学广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室广东湛江524088 广东省湛江市质量计量监督检测所广东湛江524022

在水温20±2℃的条件下,按10 mg/kg的剂量通过腹腔注射和口灌方式,以液-质联用法研究氟苯尼考在美国红鱼(Sciaenops ocellatus)体内的药代动力学和组织分布,所得药时数据用DAS3.0软件分析。结果显示,美国红鱼腹注氟苯尼考后血药经... 详细信息

在水温20±2℃的条件下,按10 mg/kg的剂量通过腹腔注射和口灌方式,以液-质联用法研究氟苯尼考在美国红鱼(Sciaenops ocellatus)体内的药代动力学和组织分布,所得药时数据用DAS3.0软件分析。结果显示,美国红鱼腹注氟苯尼考后血药经时符合一级吸收二室模型,而口灌氟苯尼考则符合一级吸收一室模型;腹腔注射组,美国红鱼血浆、肝脏、肾脏、肌肉的氟苯尼考出峰时间(tp)分别为0.5、4、0.5、4 h,峰浓度(ρmax)分别为15.47、9.90、6.83、2.73μg/g,药时曲线下面积(AUC)分别为394.10、105.66、157.37、120.01 mg/(L·h),消除半衰期分别为45.39、7.42、148.25、39.22 h;口灌组,美国红鱼血浆、肝脏、肾脏、肌肉的氟苯尼考出峰时间(tp)分别为2、1.5、4、4 h,峰浓度(ρmax)分别为6.31、5.44、9.10、5.12μg/g,药时曲线下面积(AUC)分别为136.21、162.32、213.32、157.37 mg/(L·h),消除半衰期t1/2β分别为12.08、27.9、14.85、38.53 h。结果表明,氟苯尼考注射给药在美国红鱼体内的吸收快于口灌给药,腹注给药氟苯尼考除在肝脏中的消除快于口灌给药外,在血浆、肌肉和肾脏中的消除均慢于口灌给药。

关键词：氟苯尼考美国红鱼药代动力学组织分布

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HPLC-MS/MS法同时测定水产品中的诺氟沙星、盐酸小檗碱、盐酸氯苯胍残留

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中国兽药杂志 2014年第8期48卷 55-60页

作者：汤菊芬蔡佳廖建萌王蓓秦青英黄月雄简纪常广东海洋大学水产学院广东湛江524088 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室广东湛江524088 广东省湛江市质量计量监督检测所广东湛江524022

建立了一种同时测定水产品中诺氟沙星、盐酸小檗碱和盐酸氯苯胍残留量的HP LC-MS/MS法。样品经1％甲酸甲醇提取，正己烷脱脂，冷冻、离心后，用高效液相色谱-串联质谱仪，选择反应监测（ SRM）、正离子模式进行定性和定量分析。结果表... 详细信息

建立了一种同时测定水产品中诺氟沙星、盐酸小檗碱和盐酸氯苯胍残留量的HP LC-MS/MS法。样品经1％甲酸甲醇提取，正己烷脱脂，冷冻、离心后，用高效液相色谱-串联质谱仪，选择反应监测（ SRM）、正离子模式进行定性和定量分析。结果表明：诺氟沙星、盐酸小檗碱和盐酸氯苯胍在1～100 ng/mL范围内线性关系良好，线性相关系数≥0．9996，检出限为1 ng/g。诺氟沙星、盐酸小檗碱、盐酸氯苯胍在5、50和100 ng/g三个添加水平下，三种水产品肌肉的平均加标回收率在79．83％～104．06％之间，相对标准偏差在2．97％～9．15％之间。本方法重现性好，灵敏度高，能够满足水产品中诺氟沙星、盐酸小檗碱和盐酸氯苯胍的残留检测和药代动力学的研究需要。

关键词：诺氟沙星盐酸小檗碱盐酸氯苯胍水产品液质联用

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红笛鲷TRAF3基因的克隆、表达及其功能研究

红笛鲷TRAF3基因的克隆、表达及其功能研究

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2014年中国水产学会学术年会

作者：夏洪丽蔡佳鲁义善简纪常吴灶和广东海洋大学水产学院广东省水产动物病原生物学及流行病学重点实验室广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室仲恺农业工程学院

TRAF3(Tumor Necrosis Factor receptor-associated factor 3)是TRAF家族成员之一,能够与胞内多种受体如TNFR、NLR、TLR/IL-1R等相互作用,进而调节NF-κB和MAPK信号通路的活性。为研究TRAF3在鱼类免疫信号转导中的作用。本研究利用RACE技术克隆了红笛鲷TRAF3(Ls-TRAF3)基因全长,通过蛋白结构域分析发现Ls-TRAF3在N端含有1个环指结构,2个锌指结构,C端还有该家族保守的coiled coil和MATH结构域。荧光显微镜观察显示Ls-TRAF3为全细胞分布。Ls-TRAF3在所有组织中均有表达,尤其在脾、头肾和肝脏中表达量较高。在哈氏弧菌、poly I:C分别刺激后,Ls-TRAF3在脾脏中表达量均有不同程度的提高,说明Ls-TRAF3可能参与了红笛鲷的免疫应答过程。上述研究结果为进一步研究TRAF3的功能以及鱼类的免疫机制奠定了基础。

关键词：红笛鲷 TRAF3 免疫

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马氏珠母贝早期生长性状的遗传参数估计

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广东海洋大学学报 2014年第3期34卷 10-16页

作者：陶后全吴灶和白成刘冠刘志刚广东海洋大学水产学院广东湛江524088 广东海洋大学广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室广东湛江524088 广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室广东湛江524088 仲恺农业工程学院广东广州510225 雷州市源源至水产种苗繁育有限公司广东湛江524000

以马氏珠母贝选育系F6代为亲本，采用巢式设计方法和人工解剖授精技术，依照1雄配3雌的原则，建立了8个父系半同胞家系和24个母系全同胞家系，在第8、21、35和50天测定了每个母系全同胞个体的壳长和壳高，以全同胞组内相关分析法估计马... 详细信息

以马氏珠母贝选育系F6代为亲本，采用巢式设计方法和人工解剖授精技术，依照1雄配3雌的原则，建立了8个父系半同胞家系和24个母系全同胞家系，在第8、21、35和50天测定了每个母系全同胞个体的壳长和壳高，以全同胞组内相关分析法估计马氏珠母贝早期生长性状的遗传参数。结果表明，母系半同胞个体具有较大的变异程度，存在着较大的母性效应，父系半同胞组内相关分析法估算的狭义遗传力是马氏珠母贝遗传力的估计值。8．50日龄壳长狭义遗传力估计值为0．11～1．14，壳高狭义遗传力估计值为0．12～1．04，其中利用父系半同胞组内相关法估计壳长的遗传力依次为0．17、0．19、0．12、0．11，壳高的遗传力依次为0．20、0．23、0．13、0．12，属于中等遗传力。马氏珠母贝早期生长性状的遗传相关和表型相关表现为一定的正相关，相关系数的范围分别为0．528～0．746和0．747—0．921。在早期生长阶段以壳长或壳高为参数进行选择育种时，具有较大的遗传改良潜力。

关键词：马氏珠母贝幼体生长性状遗传力遗传相关

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水产品中盐酸小檗碱的高效液相色谱-串联质谱法测定

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广东海洋大学学报 2014年第4期34卷 62-66页

作者：汤菊芬王蓓蔡佳廖建萌秦青英黄月雄简纪常广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室广东湛江524088 广东省湛江市质量计量监督检测所广东湛江524022

建立检测水产品中盐酸小檗碱残留量的高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）方法。样品经酸化甲醇（含体积分数1%甲酸）提取,正己烷脱脂,离心后,用高效液相色谱-串联质谱仪分析。以选择反应监测（SRM）正离子模式分析,定性离子对为336/32... 详细信息

建立检测水产品中盐酸小檗碱残留量的高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）方法。样品经酸化甲醇（含体积分数1%甲酸）提取,正己烷脱脂,离心后,用高效液相色谱-串联质谱仪分析。以选择反应监测（SRM）正离子模式分析,定性离子对为336/320和336/292,定量离子对为336/320,盐酸小檗碱质量浓度在1-100 ng/mL范围内线性关系良好,线性相关系数为0.999 7,检出限为0.001 mg/kg。样品盐酸小檗碱的添加剂量为5-100μg/kg时,平均加标回收率为81.29%-104-06%,相对标准偏差为2.97%-7.87%,可满足水产品中盐酸小檗碱残留检测和药代动力学的研究需要。

关键词：盐酸小檗碱残留水产品高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)

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