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中国水产学会鱼病专业委员会2017年学术讨论会

作者：郑琦黄瑜袁满蔡佳汤菊芬鲁义善吴灶和简纪常广东海洋大学水产学院湛江524088 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室湛江524088 广东省水产经济动物病害控制重点实验室湛江524088 广东海洋大学水产学院湛江524088

非特异性细胞毒性细胞(non-specific cytotocixcell,NCC)是硬骨鱼类中一类淋巴细胞,在非特异性免疫中通过上调炎症反应释放细胞因子发挥重要的作用,是哺乳动物中NK细胞的等价物.鱼类NCC在体内多个组织器官中均有分布,其细胞毒性是自发的... 详细信息

非特异性细胞毒性细胞(non-specific cytotocixcell,NCC)是硬骨鱼类中一类淋巴细胞,在非特异性免疫中通过上调炎症反应释放细胞因子发挥重要的作用,是哺乳动物中NK细胞的等价物.鱼类NCC在体内多个组织器官中均有分布,其细胞毒性是自发的,可杀死多种靶细胞,例如同种异源或异种异源肿瘤细胞,寄生性原生动物和被病原侵染的细胞.NCCRP-1是NCC上的一种标志性受体.本研究对尼罗罗非鱼的脑,头肾,肝脏和脾脏进行切片,对NCCRP-1进行染色,通过免疫组化分析得知NCC在这些组织中的分布情况.另外采用Percoll非连续密度梯度法分离纯化得到头肾NCC,采用免疫组化染色和FITC标签标记,与组织中的染色结果分布相同.相较于qPCR等技术,本研究更直观地观察NCC在组织中的分布特点,为深入研究NCC的功能奠定了基础.

关键词：尼罗罗非鱼 NCCRP-1 免疫组化

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南美白对虾养成期间病害防治技术的调查

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河北渔业 2017年第12期 34-37页

作者：韦光本唐黎广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨水产经济动物病害控制广东省普通高等学校重点实验室广东湛江524088 贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025

随着南美白对虾(Penaeus vannamei)种质质量下降、养殖水体污染及养殖技术落后等问题的出现,制约了南美白对虾养殖业的发展。笔者调查海南省南美白对虾养成过程中常见病害及其防治技术,记录各种疾病的病原、发病症状及防治技术等,并研... 详细信息

随着南美白对虾(Penaeus vannamei)种质质量下降、养殖水体污染及养殖技术落后等问题的出现,制约了南美白对虾养殖业的发展。笔者调查海南省南美白对虾养成过程中常见病害及其防治技术,记录各种疾病的病原、发病症状及防治技术等,并研讨南美白对虾、水体、病原菌三者之间的影响关系,确定致病机理。调查发现,病害的发生与对虾体质下降和养殖水体的恶化程度有直接与间接关系,而病害防治的基本要求是增强对虾体质,促进养殖环境的物质转换和物质能量流动,提高水体的自净能力和减少有害物质的长期积累,从而减少病害发生,提高养成率和生产收益。

关键词：南美白对虾(Penaeus vannamei) 病害防治调查海南

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乌鳢出血病的病原及组织病理学研究

乌鳢出血病的病原及组织病理学研究

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中国水产学会鱼病专业委员会2017年学术讨论会

作者：伍元植简纪常蔡双虎广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨水产经济动物病害控制广东省普通高等学校重点实验室广东湛江524088

对广东顺德勒流镇某水产养殖场患出血病的乌鳢进行病原分离，对分离菌进行形态学分析、生化鉴定、PCR鉴定和人工感染.经鉴定，分离菌为温和气单胞菌，其半致死温度LD50为1.645×105CFU/g.组织病理学观察表明，鳃小片毛细血管严重充... 详细信息

对广东顺德勒流镇某水产养殖场患出血病的乌鳢进行病原分离，对分离菌进行形态学分析、生化鉴定、PCR鉴定和人工感染.经鉴定，分离菌为温和气单胞菌，其半致死温度LD50为1.645×105CFU/g.组织病理学观察表明，鳃小片毛细血管严重充血，基部细胞增生，部分鳃小片相互融合成肉芽肿结构;肝细胞出现空泡，部分区域肝细胞坏死、溶解和脂肪变性;肾小体血管球充血破裂，部分肾小管上皮细胞玻璃样变，细胞质中出现大量空泡;脾脏中血细胞明显增多，淋巴细胞减少;肠黏膜下层和固有膜可见结缔组织增生、水肿现象.温和气单胞菌可引起乌鳢的肝、脾和肾等重要器官出现典型的病理变化并引起死亡.

关键词：乌鳢出血病病原温和气单胞菌病理观察

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NK-lysin可提高尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)对细菌病原体的抗菌防御能力

NK-lysin可提高尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)对细菌病原体...

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中国水产学会鱼病专业委员会2017年学术讨论会

作者：简纪常黄瑜郑琦牛金忠汤菊芬王蓓 Emmanuel Delwin Abarike 鲁义善蔡佳广东海洋大学水产学院湛江524088 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室湛江524088 广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室湛江524088

NK-lysin是细胞毒性T细胞和自然杀伤细胞的效应产物,是广泛分布在哺乳动物中有效的抗菌肽.NK-lysin的同源物已经在多种硬骨鱼中被发现,但只有少数几种进行了功能研究.本研究从尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)鉴定出一种NK-lysin,定义... 详细信息

NK-lysin是细胞毒性T细胞和自然杀伤细胞的效应产物,是广泛分布在哺乳动物中有效的抗菌肽.NK-lysin的同源物已经在多种硬骨鱼中被发现,但只有少数几种进行了功能研究.本研究从尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)鉴定出一种NK-lysin,定义为On-NKL,同时分析了 On-NKL应对病原体感染时的表达模型和生物学效应.

关键词：尼罗罗非鱼 NK-lysin 无乳链球菌抗菌活性抗菌肽

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尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)CD28和CD80/86分子保守的结构和相互作用特征

尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)CD28和CD80/86分子保守的结构...

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中国水产学会鱼病专业委员会2017年学术讨论会

作者：黄瑜汪志文郑琦汤菊芬蔡佳鲁义善简纪常广东海洋大学水产学院湛江524088 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室湛江524088 广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室湛江524088

CD28与CD80或CD86分子的相互作用可提供T细胞激活所需的共刺激信号。在本研究中，我们克隆并分析了尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)CD28 基因(On-CD28)和 CD80/86 基因(On-CD80/86)。序列分析揭示 On-CD28蛋白具有典型特征;例如，与C... 详细信息

CD28与CD80或CD86分子的相互作用可提供T细胞激活所需的共刺激信号。在本研究中，我们克隆并分析了尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)CD28 基因(On-CD28)和 CD80/86 基因(On-CD80/86)。序列分析揭示 On-CD28蛋白具有典型特征;例如，与CD80/86配体结合所必需的脯氨酸基序(117TYPPPL122)。

关键词：尼罗罗非鱼 CD28 CD80/86 无乳链球菌酵母双杂交

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徐闻方斑东风螺暴发性疾病病原分离鉴定以及防治手段探索

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基因组学与应用生物学 2016年第12期35卷 3401-3409页

作者：黄瑜汪志文周维蔡小辉张海艳鲁义善简纪常汤菊芬广东海洋大学水产学院湛江524088 广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室湛江524088 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室湛江524088

为了明确引起方斑东风螺急性死亡症的病原,对2015年6月广东省徐闻县发生的方斑东风螺(Babylonia areolata)急性死亡症进行了病原分离纯化,获得1株优势细菌,命名为XW-01。将XW-01人工感染方斑东风螺,表现出自然发病症状,证实分离菌株为... 详细信息

为了明确引起方斑东风螺急性死亡症的病原,对2015年6月广东省徐闻县发生的方斑东风螺(Babylonia areolata)急性死亡症进行了病原分离纯化,获得1株优势细菌,命名为XW-01。将XW-01人工感染方斑东风螺,表现出自然发病症状,证实分离菌株为致病菌。分离的菌株经形态学观察、生理生化鉴定和病原16S r RNA序列分析,结果显示该病原菌为哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)。XW-01对方斑东风螺半致死剂量(LD50)测定值为6.3×106 cfu/m L。药敏试验结果显示,该病原菌对常见的7种抗菌药物氟哌酸、氟苯尼考、氨苄西林、恩诺沙星、头孢三嗪、左旋氧氟沙星和妥布霉素敏感。添加不同剂量的三联生物噬菌王产品到水族箱中,对方斑东风螺用浸泡法进行人工感染哈维氏弧菌试验,观察东风螺发病及死亡情况。试验结果表明,添加1%的此产品可以明显降低东风螺的死亡率,表明三联生物噬菌王产品对东风螺感染哈维氏弧菌所引起的急性坏死病有明显的预防作用。

关键词：方斑东风螺急性死亡症哈维氏弧菌三联生物噬菌王

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无乳链球菌phoB基因缺失株构建及其作为金鲳减毒活疫苗潜力的评估

无乳链球菌phoB基因缺失株构建及其作为金鲳减毒活疫苗潜力的评估

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2017广西海上丝绸之路建设·钦州论坛

作者：蔡小辉王蓓彭银辉黎源鲁义善黄郁葱简纪常吴灶和钦州学院海洋学院海洋生命科学与技术研究中心北部湾海洋生物多样性养护重点实验室中国钦州536011 广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨水产经济动物病害控制广东广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨水产经济动物病害控制广东省普通高等学校重点实验室中国湛江524025 钦州学院海洋学院海洋生命科学与技术研究中心北部湾海洋生物多样性养护重点实验室中国钦州536011

无乳链球菌可以在吞噬细胞和非吞噬细胞中存活从而引起鱼类的败血症和脑膜炎。目前无乳链球菌的疫苗是基于胞外产物(extracellular,products,ECP)、亚单位和灭活全菌制备,然而无乳链球菌多种血清型的存在导致其免疫保护率大大降低。

关键词：无乳链球菌 phoB基因敲除减毒活疫苗金鲳

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红笛鲷LITAF基因的克隆与表达分析

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上海海洋大学学报 2016年第1期25卷 18-24页

作者：郑琦蔡佳汤菊芬鲁义善吴灶和简纪常广东海洋大学水产学院广东湛江524088 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室广东湛江524088 广东省水产经济动物病害控制重点实验室广东湛江524088

通过同源克隆和RACE PCR技术从红笛鲷脾脏中鉴定得到了脂多糖诱导的肿瘤坏死因子(LITAF)基因,命名为Ls-LITAF。该基因c DNA全长815 bp,开放阅读框为447 bp,编码148个氨基酸,理论分子量为15.7 ku。序列分析显示Ls-LITAF蛋白具有保守的LI... 详细信息

通过同源克隆和RACE PCR技术从红笛鲷脾脏中鉴定得到了脂多糖诱导的肿瘤坏死因子(LITAF)基因,命名为Ls-LITAF。该基因c DNA全长815 bp,开放阅读框为447 bp,编码148个氨基酸,理论分子量为15.7 ku。序列分析显示Ls-LITAF蛋白具有保守的LITAF结构域,其中包含一个CXXC基序与一个(H)x Cxx C基序。Ls-LITAF蛋白与其他鱼类LITAF蛋白相似度较高,在系统进化树中也与其他鱼类该蛋白聚为一支。Ls-LITAF基因在健康鱼体多种组织均有表达,其中鳃、脾脏、皮肤与头肾的表达量较高;且哈氏弧菌刺激鱼体后,Ls-LITAF在脾脏和头肾中的表达量显著上调。以上研究结果为进一步了解Ls-LITAF在红笛鲷免疫反应中的作用提供了参考。

关键词：红笛鲷 LITAF基因克隆表达分析

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溶藻弧菌肽聚糖和vp28-siRNA对凡纳滨对虾白斑综合征病毒的抑制作用

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广东海洋大学学报 2016年第1期36卷 57-62页

作者：朱卫卫邱德全甘桢鲁义善简纪常广东海洋大学水产学院//广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室//广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室广东湛江524025

对感染白斑综合征病毒(WSSV)的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)分别注射0.05和0.10μg/μL的vp28-si RNA,干扰效果实验表明,si RNA最佳浓度为0.10μg/μL。凡纳滨对虾感染WSSV 24 h时注射0.10μg/μL的vp28-si RNA,检测免疫后不同时... 详细信息

对感染白斑综合征病毒(WSSV)的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)分别注射0.05和0.10μg/μL的vp28-si RNA,干扰效果实验表明,si RNA最佳浓度为0.10μg/μL。凡纳滨对虾感染WSSV 24 h时注射0.10μg/μL的vp28-si RNA,检测免疫后不同时间点的干扰效果。结果表明:在注射vp28-si RNA 6 h后,实验组与对照组WSSV病毒拷贝数差异有统计学意义(P<0.05);在48 h时实验组病毒拷贝数急剧下降,对照组则保持较高水平,可较好干扰WSSV病毒复制,干扰效果持续120 h,对凡纳滨对虾的保护率为40%。凡纳滨对虾用0.10 mg/m L肽聚糖(Peptidoglycan)免疫24 h后感染WSSV,检测6、12、24 h注射vp28-si RNA的保护率。结果显示:6 h注射组的保护率为80%,12 h注射组为63.33%,24 h注射组为56.67%。凡纳滨对虾在肽聚糖和vp28-si RNA作用后,可增加其对WSSV抗感染作用,降低死亡率,干扰时间越早,对对虾的保护率越高。

关键词：凡纳滨对虾免疫增强剂 RNA干扰肽聚糖 vp28-siRNA 白斑综合征病毒

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五味子和黄精对副溶血弧菌及其生物膜的体外抑制作用

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广东农业科学 2016年第9期43卷 119-123页

作者：庞欢瑛黄芝凤黄洋黄郁葱鲁义善简纪常广东海洋大学水产学院/广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室/广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室广东湛江524088

采用琼脂扩散法,分别测定五味子(Shisandra chinensis)、黄精(Polygonatum sibiricum)对副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)的体外抑菌作用;选用倍比稀释法确定五味子、黄精对副溶血弧菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);采用... 详细信息

采用琼脂扩散法,分别测定五味子(Shisandra chinensis)、黄精(Polygonatum sibiricum)对副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)的体外抑菌作用;选用倍比稀释法确定五味子、黄精对副溶血弧菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);采用改良微孔板法(MTT)评价两种中草药液对溶藻弧菌生物膜形成的影响。结果表明,两种中草药都有不同程度的抑制副溶血弧菌的作用,五味子对副溶血弧菌的抑菌圈直径为18.67(±0.2)mm,MIC为1.56 mg/m L,MBC为3.125 mg/m L;黄精的抑菌圈直径为11.26(±0.6)mm,MIC和MBC分别为1.56、3.125 mg/m L。当药物浓度达到3.125 mg/m L以上时,五味子和黄精对副溶血弧菌生物膜的形成有极显著抑制作用。

关键词：五味子黄精副溶血弧菌体外抑制作用生物膜

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