检索结果-内蒙古大学图书馆

中国实验血液学杂志 2016年第6期24卷 1863-1868页

作者：范荻何文茵牛晓华欧展辉陈玉嫦孙筱放广州医科大学附属第三医院广东省产科重大疾病重点实验室广东省普通高校生殖与遗传重点实验室广东广州510150

目的:探讨不同培养体系条件下诱导多能干细胞(iPS)体外分化为造血干细胞的能力差异。方法:比较2种无滋养层培养液——E8和mTESR及经典ES培养体系下培养的iPS细胞,在体外与小鼠骨髓基质细胞OP9细胞共培养,诱导iPS细胞分化为造血干/祖细... 详细信息

目的:探讨不同培养体系条件下诱导多能干细胞(iPS)体外分化为造血干细胞的能力差异。方法:比较2种无滋养层培养液——E8和mTESR及经典ES培养体系下培养的iPS细胞,在体外与小鼠骨髓基质细胞OP9细胞共培养,诱导iPS细胞分化为造血干/祖细胞。采用流式细胞术及实时定量PCR方法分别检测造血特异标志物的表达,比较3种培养液对iPS体外造血分化的影响。结果:3种不同培养液培养的iPS均可分化为造血干细胞,经典ES培养体系培养的iPS诱导造血效率达28.4%,明显高于无滋养层E8和m TESR培养体系。结论:iPS与OP9共培养可分化为造血干/祖细胞,且使用经典ES培养液培养iPS更有利于其向造血系的分化。

关键词：诱导多能干细胞造血干/祖细胞培养体系

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十溴联苯醚暴露对人胚胎干细胞分化潜能的影响

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卫生研究 2016年第3期45卷 350-355页

作者：杜丽丽匡丽云汤雯婷陈敦金广州医科大学附属第三医院广东省产科重大疾病重点实验室广东普通高校生殖与遗传重点实验室广州510150

目的探讨十溴联苯醚(BDE-209)暴露对人胚胎干细胞分化潜能的影响。方法分别将对数生长期未分化的人胚胎干细胞FY-h ES-10细胞暴露于含有终浓度为0(溶剂对照)、1、10和100 nmol/L BDE-209的培养基中培养96 h后,采用悬浮法培养拟胚体(embr... 详细信息

目的探讨十溴联苯醚(BDE-209)暴露对人胚胎干细胞分化潜能的影响。方法分别将对数生长期未分化的人胚胎干细胞FY-h ES-10细胞暴露于含有终浓度为0(溶剂对照)、1、10和100 nmol/L BDE-209的培养基中培养96 h后,采用悬浮法培养拟胚体(embryoid body,EB)自发分化10 d,实时荧光定量PCR检测EB中OCT4、内胚层标志基因AFP、外胚层标志基因PAX6、中胚层标志基因SMA及氧化应激相关基因HIF1a、HIF2a和SOD1基因的表达,并测定SOD活性。结果与对照组比较,各剂量BDE-209暴露组FY-h ES-10细胞EB分化10 d OCT4、SMA、HIF1a和HIF2a表达水平均较高,而AFP、PAX6、SOD1表达水平均较低,差异有统计学意义(P<0.05)。且随着BDE-209暴露剂量的升高,FY-h ES-10细胞分化10 d EB中OCT4的表达水平均呈上升趋势,SOD1基因的表达水平呈下降趋势。同时BDE-209暴露后FY-h ES-10细胞分化10 d EB中SOD活性降低。结论 BDE-209可能通过影响早期胚胎的分化潜能从而产生发育毒性。

关键词：十溴联苯醚胚胎干细胞分化潜能氧化应激

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5-氮杂-2-脱氧胞苷对母系表达基因3启动子超甲基化的逆转作用及其对卵巢癌细胞增殖活性的抑制作用

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中华肿瘤杂志 2015年第5期37卷 324-329页

作者：李剑琦周冬梅汪志辉谭琳玉周艳清李娟生秀杰广州医科大学附属第三医院妇科广东省产科重大疾病重点实验室广东省普通高校生殖与遗传重点实验室510150

目的探讨不同浓度DNA甲基化抑制剂5-氮杂。2．脱氧胞苷对母系表达基因3（MEG3）基因启动子超甲基化的逆转作用，以及恢复MEG3表达对上皮性卵巢癌细胞增殖活性的影响。方法以0、1、5、10、20μmol／L的5-氮杂-2-脱氧胞苷作用上皮性卵巢癌... 详细信息

目的探讨不同浓度DNA甲基化抑制剂5-氮杂。2．脱氧胞苷对母系表达基因3（MEG3）基因启动子超甲基化的逆转作用，以及恢复MEG3表达对上皮性卵巢癌细胞增殖活性的影响。方法以0、1、5、10、20μmol／L的5-氮杂-2-脱氧胞苷作用上皮性卵巢癌OVCAR3细胞6d后，采用甲基化特异性PCR（MSP）检测MEG3启动子的甲基化状态，逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测MEG3mRNA的表达水平，采用四甲基偶氮唑蓝（MrIT）比色法和5-乙炔基-2-脱氧尿嘧啶核苷（EdU）掺人实验检测细胞增殖活性的变化。结果MSP检测显示，0μmol／L5-氮杂-2-脱氧胞苷组（对照组）、1p,mol／L5-氮杂-2一脱氧胞苷组、5μmol／L5-氮杂-2-脱氧胞苷组、10μmoL／L5-氮杂-2-脱氧胞苷组和20μmol／L5-氮杂-2-脱氧胞苷组的甲基化水平分别为1．00±0．00、0．79±0．00、0．67±0．00、0．65±0．03和0．61±0．01，各组间差异均有统计学意义（均P〈0．05）。RT-PCR检测显示，对照组、1μmol／L5-氮杂-2-脱氧胞苷组、5IxmoL／L5-氮杂-2-脱氧胞苷组、10μmol／L5-氮杂-2-脱氧胞苷组和20μmol／L5-氮杂-2-脱氧胞苷组MEG3mRNA的相对表达水平分别为1．00±0．00、2．04±0．16、2．44±0．17、3．19±0．34和5．34±0．39，各组间差异均有统计学意义（均P〈0．05）。MTT比色法检测显示，与对照组比较，1μmol／L5-氮杂-2-脱氧胞苷组、5μmol／L5-氮杂-2-脱氧胞苷组、10μmol／L5-氮杂-2-脱氧胞苷组和20μmol／L5-氮杂-2-脱氧胞苷组OVCAR3细胞的增殖活性受到明显抑制，5-氮杂-2-脱氧胞苷作用2、4、6d时，各组间细胞抑制率差异均有统计学意义（均P〈0．01）。EdU掺人实验显示，对照组、1p,mol／L5-氮杂-2一脱氧胞苷组、5μmoL／L5-氮杂-2-脱氧胞苷组、10μmol／L5-氮杂-2-脱氧胞苷组和20μmol／L5-氮杂-2-脱氧胞苷组OVCAR3细胞中的EdU阳性细胞率分别为（40．78＋0．80）％、（35．65±0．33）％、（31．81±0．66）％、（27．33±1．27）％和（17．75±1．85）％，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。结论5-氮杂-2-脱氧胞苷可逆转上皮性卵巢癌细胞抑癌基因MEG3启动子超甲基化状态，进而使MEG3重新表达，从而参与了抑制卵巢癌细胞的增殖活性。

关键词：卵巢肿瘤甲基化细胞增殖母系表达基因3 5-氮杂-2-脱氧胞苷

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多溴联苯醚母源性暴露对子代发育影响的研究进展

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中华围产医学杂志 2020年第12期23卷 854-858页

作者：唐境蔓杜丽丽陈兢思孙雯陈敦金广州医科大学附属第三医院妇产科广东省产科重大疾病重点实验室广东普通高校生殖与遗传重点实验室510150

广泛应用的溴代阻燃剂多溴联苯醚(polybrominated diphenyl ethers,PBDEs)污染已成为全球性问题,PBDEs可通过饮食、呼吸和皮肤吸收等方式进入生物体内,并可以通过胎盘和乳汁传递给胎儿和新生儿。评估妊娠期PBDEs母源性暴露水平及其对胎... 详细信息

广泛应用的溴代阻燃剂多溴联苯醚(polybrominated diphenyl ethers,PBDEs)污染已成为全球性问题,PBDEs可通过饮食、呼吸和皮肤吸收等方式进入生物体内,并可以通过胎盘和乳汁传递给胎儿和新生儿。评估妊娠期PBDEs母源性暴露水平及其对胎儿发育的影响成为母胎医学及环境科学集中关注的重点问题。本文将针对PBDEs母源性暴露对子代体格生长、神经行为发育、生殖泌尿系统、脏器及免疫功能的影响及相关机制进行综述。

关键词：母亲暴露环境污染物火焰抑制剂卤化二苯醚类胎儿发育

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长链非编码RNA MEG3靶向调控Rb1抑制上皮性卵巢癌细胞增殖研究

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中华肿瘤防治杂志 2021年第20期28卷 1555-1561页

作者：李剑琦刘艳周冬梅汪志辉生秀杰广州医科大学附属第三医院妇科广东省产科重大疾病重点实验室广东省普通高校生殖与遗传重点实验室广东广州510150

目的研究母系表达基因3(MEG3)对上皮性卵巢癌细胞埴殖影响及其作用机制。方法逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测67例人上皮性卵巢癌组织和20例正常卵巢组织中MEG3表达。实验设置MEG3过表达质粒组(MEG3组)和空质粒pcDNA3.1对照组(NC组)。... 详细信息

目的研究母系表达基因3(MEG3)对上皮性卵巢癌细胞埴殖影响及其作用机制。方法逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测67例人上皮性卵巢癌组织和20例正常卵巢组织中MEG3表达。实验设置MEG3过表达质粒组(MEG3组)和空质粒pcDNA3.1对照组(NC组)。过表达MEG3质粒转染卵巢癌细胞OVCAR3和SKOV3,MTT实验、细胞周期和细胞凋亡实验检测MEG3对卵巢癌细胞生长的影响;双荧光素酶报告系统检测MEG3靶基因Rb1的转录活性;RT-PCR和蛋白质印迹法检测Rb1 mRNA和蛋白表达水平。结果正常卵巢组织中MEG3表达量为3.32±0.25,上皮性卵巢癌组织为0.35±0.11,差异有统计学意义,t=10.932,P<0.001.转染MEG3过表达质粒后,12、24、36和48 h的OVCAR3和SKOV3细胞生长抑制率分别为(37.26±2.21)%和(23.06±1.67)%、(38.19±1.98)%和(42.71±2.36)%、(44.30±2.14)%和(44.31±3.38)%、(47.67±4.32)%和(50.36±2.76)%,差异有统计学意义,F值分别为131.203和353.782,均P<0.001;转染MEG3过表达质粒后OVCAR3和SKOV3细胞S期比例下降.差异有统计学意义(t=7.471,P<0.001;t=5.197,P<0.001);OVCAR3和SKOV3细胞凋亡率增加,差异有统计学意义(t=6.820,P=0.029,t=4.235,P<0.001)。对比NC组.MEG3组Rb1转录活性增加,OVCAR3和SKOV3细胞RB1 mRNA表达分别增加(1.74±0.54)和(1.95±0.72)倍,差异有统计学意义(t=24.504,P<0.001,t=28.276.P<0.001);OVCAR3和SKOV3细胞Rb1蛋白表达分别增加(1.92±0.32)和(1.75±0.25)倍,差异有统计学意义(t=10.500.P<0.001,t=9.375,P<0.001)。结论MEG3在上皮性卵巢癌组织和细胞中表达降低,推测可能与上皮性卵巢癌的发生发展相关。MEG3可能通过调控Rb1抑制上皮性卵巢癌细胞增殖并促进凋亡。

关键词：上皮性卵巢癌母系表达基因3 长链非编码RNA 细胞增殖

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羊水1q12．1微缺失细胞的诱导多能干细胞系的建立

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中华医学遗传学杂志 2015年第2期32卷 175-179页

作者：龚亚飞李颖宋艳琴孙筱放宋兵孙雯陈欣洁广州医科大学附属第三医院妇产科研究所、广东省产科重大疾病重点实验室、广东省普通高校生殖与遗传重点实验室 510150

目的建立1q21．1微缺失的多能干细胞系，为进一步探讨该疾病的发病机制提供模型。方法采用逆转录病毒介导4种基因（Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc，简称OSKM）诱导1q21．1微缺失羊水细胞，建立1q21．1微缺失羊水诱导性多能干细胞系（human am... 详细信息

目的建立1q21．1微缺失的多能干细胞系，为进一步探讨该疾病的发病机制提供模型。方法采用逆转录病毒介导4种基因（Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc，简称OSKM）诱导1q21．1微缺失羊水细胞，建立1q21．1微缺失羊水诱导性多能干细胞系（human amniotic fluid-derived cells induced pluripotent stemcells，hAF-IPsCs），并对其进行多能性、核型、芯片、体内外分化能力等鉴定。结果所建立的1q21．1微缺失的hAF-iPSCs在体外能维持自我更新和多能性的状态，可表达多能标志基因，在体外长期培养能维持正常核型，在体内、体外均可向三个胚层分化。芯片结果显示仍具有1q21．1微缺失。结论1q21．1微缺失hAF-iPSCs具有正常多能干细胞所有的各种特性。可用于体外定向诱导分化，模拟疾病发病过程，可为1q21．1微缺失疾病机制的研究提供模型。

关键词： 1q21.1微缺失诱导性多能干细胞多能性

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CDAN1基因突变导致的胎儿期非免疫性水肿的家系遗传学分析

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南方医科大学学报 2021年第12期41卷 1899-1903,F0003页

作者：王燕超黎青孙筱放李少英何健淳张敏聪黄玲玲何文智广州医科大学附属第三医院妇产科研究所实验部广东广州510150 广东省产科重大疾病重点实验室广东广州510150 广东省普通高校生殖与遗传重点实验室广东广州510150

目的对一例因不明原因胎儿期水肿的流产组织进行临床和遗传学分析,为该家系产前诊断以及遗传咨询提供可靠的理论依据。方法采集孕妇外周血进行血常规、Rh血型和TORCH检测。采集羊水细胞用于细胞培养和G显带核型分析。提取胎儿引产组织... 详细信息

目的对一例因不明原因胎儿期水肿的流产组织进行临床和遗传学分析,为该家系产前诊断以及遗传咨询提供可靠的理论依据。方法采集孕妇外周血进行血常规、Rh血型和TORCH检测。采集羊水细胞用于细胞培养和G显带核型分析。提取胎儿引产组织基因组DNA行全基因组拷贝数变异测序;采用Agilent's SureSelect XT Human All Exon V6进行文库制备和外显子捕获,并使用Illumina NovaSeq 6000对胎儿及其家系成员DNA行全外显子组测序(trios-WES),并利用SIFT、I-mutant2、PolyPhen-2及PROVEAN生物信息学软件对变异位点进行蛋白功能预测。利用Alpha Fold 2和PyMOL软件对CDAN1的结构进行建模和可视化分析;用Sanger测序对先证者及家系成员进行突变检测和验证。结果胎儿17周超声提示胎儿全身皮下广泛水肿,右侧胸腔大量积液,肝脾增大,胎盘增厚,心包缺损。染色体核型分析检测和染色体拷贝数变异测序结果均正常;全外显子组测序显示CDAN1基因:c.2140C>T(***714Trp)和c.1264_1265delCT(***422Glyfs*16)复合杂合突变,分别来自先证者父亲和母亲,生物信息学预测为可能致病性突变,对应的疾病为先天性红细胞生成障碍性贫血1型。结论全外显子组测序结果显示,该胎儿为先天性红细胞生成障碍性贫血(CDAN1基因突变)导致的胎儿期非免疫性水肿,其中CDAN1基因c.1264_1265delCT为首次报道的突变。

关键词：先天性红细胞生成障碍性贫血1型 CDAN1基因胎儿期非免疫性水肿全外显子组测序

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脊髓小脑共济失调3型诱导多能干细胞系的建立和神经分化

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中国组织工程研究 2015年第28期19卷 4555-4561页

作者：罗敏胡丹牛晓华宋兵欧展辉范迪王鼎何文茵孙筱放广东省产科重大疾病重点实验室广东省高校生殖与遗传重点实验室广州医科大学附属第三医院广东省广州市510150

背景:脊髓小脑共济失调3型(spinocerebellar ataxia type 3,SCA3)是一种典型的遗传相关的神经退行性疾病。建立患者遗传背景的特异的疾病模型有利于研究疾病的发病机制,探讨针对疾病的治疗手段。目的:观察脊髓小脑共济失调3型诱导多能... 详细信息

背景:脊髓小脑共济失调3型(spinocerebellar ataxia type 3,SCA3)是一种典型的遗传相关的神经退行性疾病。建立患者遗传背景的特异的疾病模型有利于研究疾病的发病机制,探讨针对疾病的治疗手段。目的:观察脊髓小脑共济失调3型诱导多能干细胞系的神经分化效率以及CAG拷贝数的稳定性。方法:临床获取脊髓小脑共济失调3型患者皮肤组织,分离培养患者特异的皮肤成纤维细胞,重编程成纤维细胞获得诱导多能干细胞。对患者特异的诱导多能干细胞和正常人的诱导多能干细胞(NHF)和胚胎干细胞(ES-10)进行神经诱导分化,通过流式细胞术比较分化效率,Western Blot检测神经元中ataxin-3的聚集,PCR检测培养过程SCA3/ATXN3基因CAG重复数目。结果与结论:成功获得与成纤维细胞相同遗传背景的诱导多能干细胞,具有与人胚干细胞相似的形态学及多向分化潜能,各细胞系都能定向分化为神经干细胞,重编程前后和诱导神经分化前后的CAG数目无明显改变。来源于脊髓小脑共济失调3型患者的诱导多能干细胞分化为神经干细胞的效率低于正常人诱导多能干细胞(NHF)和胚胎干细胞(ES-10)。这些结果说明通过重编程技术可以成功建立人诱导多能干细胞并将其定向诱导分化为神经干细胞,整个实验过程CAG数目无明显改变,与患者的体细胞相一致。

关键词：干细胞分化脊髓小脑共济失调3型诱导多能干细胞神经分化 CAG数目国家自然科学基金

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两种细胞来源的21-三体综合征诱导多能干细胞系的建立及比较

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中国细胞生物学学报 2014年第7期36卷 884-891页

作者：杜融骆玉梅王鼎孙筱放陈耀勇广东省产科重大疾病重点实验室广东省高校生殖与遗传重点实验室广州医科大学附属第三医院广州510150

21-三体综合征是染色体异常导致的疾病,通过重编程21-三体综合征患儿两种组织来源的细胞成为多能干细胞,比较两种组织来源的细胞建立21-三体综合征诱导多能干细胞(T21-iPSCs)系的效率,为进一步研究21-三体综合征发病机制提供细胞模型,... 详细信息

21-三体综合征是染色体异常导致的疾病,通过重编程21-三体综合征患儿两种组织来源的细胞成为多能干细胞,比较两种组织来源的细胞建立21-三体综合征诱导多能干细胞(T21-iPSCs)系的效率,为进一步研究21-三体综合征发病机制提供细胞模型,并为选择高效制备T21-iPSCs的组织类型提供理论依据。该实验利用慢病毒介导4种转录因子(Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc)分别诱导人21-三体综合征的羊水细胞和胎儿皮肤成纤维细胞,建立诱导多能干细胞系(Trisomy 21 human amniotic fl uid induced pluripotent stem cells,T21 hAF-iPSCs;Trisomy 21 human dermal fi broblast induced pluripotent stem cells,T21 hDF-iPSCs),T21 hAF-iPSCs及T21 hDF-iPSCs在蛋白和mRNA水平上均表达人胚胎干细胞的多能性分子标记,如Oct4、Nanog等,具有在体外及体内分化三个胚层的能力,其在培养过程中能维持异常核型并能维持自我更新状态。结果发现,利用羊水细胞建立T21-iPSCs效率高于皮肤成纤维细胞,羊水细胞可能是制备T21-iPSCs的理想细胞类型。

关键词： 21-三体综合征羊水细胞人皮肤成纤维细胞诱导多能干细胞

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玻璃化对复苏囊胚移植单胎分娩结局的影响

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中山大学学报（医学版） 2018年第2期39卷 238-244页

作者：刘寒艳陈仕萍杜红姿李莉陈蕊广州医科大学附属第三医院生殖医学中心//广东省生殖医学重点实验室//广东省产科重大疾病重点实验室//广东省普通高校生殖与遗传重点实验室广东广州510150

【目的】比较卵裂期胚胎复苏后囊胚培养移植与复苏嚢胚移植的单胎分娩结局,探讨最佳冻存方案。【方法】回顾性分析2014年1月至2016年10月在本中心行复苏周期移植(FET)并单胎分娩的患者,囊胚复苏组1 037个周期,卵裂胚复苏囊胚培养组690... 详细信息

【目的】比较卵裂期胚胎复苏后囊胚培养移植与复苏嚢胚移植的单胎分娩结局,探讨最佳冻存方案。【方法】回顾性分析2014年1月至2016年10月在本中心行复苏周期移植(FET)并单胎分娩的患者,囊胚复苏组1 037个周期,卵裂胚复苏囊胚培养组690个周期。分析两组的新生儿分娩结局,其中包括平均孕周,平均体质量,男婴出生率,早产率,极早产率,低体质量率,极低体质量率,先天异常率。【结果】平均胎龄,新生儿平均体质量,活产、健康抱婴以及死胎的比例两组没有统计学差异(P>0.05)。出生性别比差异没有统计学意义;早产率,极早产率,低出生体质量率,极低出生体质量率以及先天异常率两组没有统计学差异(P>0.05);校正后,出生男婴率(AOR 1.07,95%CI 0.86~1.34),早产率(AOR 0.7,95%CI 0.49~1.01),极早产率(AOR 1.47,95%CI 0.55~3.96),低出生体质量率(AOR 1.38,95%CI 0.86~2.22),极低出生体质量率(AOR 0.76,95%CI 0.20~2.83)以及先天异常率(AOR 1.58,95%CI 0.66~3.76)两组仍然没有统计学差异(P>0.05)。【结论】新鲜囊胚冷冻后择期复苏移植能获得较好的新生儿结局,是目前较佳的囊胚培养和移植方案。

关键词：玻璃化冷冻卵裂期胚胎囊胚培养囊胚移植单胎分娩结局

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