检索结果-内蒙古大学图书馆

中国细胞生物学学报 2014年第7期36卷 884-891页

作者：杜融骆玉梅王鼎孙筱放陈耀勇广东省产科重大疾病重点实验室广东省高校生殖与遗传重点实验室广州医科大学附属第三医院广州510150

21-三体综合征是染色体异常导致的疾病,通过重编程21-三体综合征患儿两种组织来源的细胞成为多能干细胞,比较两种组织来源的细胞建立21-三体综合征诱导多能干细胞(T21-iPSCs)系的效率,为进一步研究21-三体综合征发病机制提供细胞模型,... 详细信息

21-三体综合征是染色体异常导致的疾病,通过重编程21-三体综合征患儿两种组织来源的细胞成为多能干细胞,比较两种组织来源的细胞建立21-三体综合征诱导多能干细胞(T21-iPSCs)系的效率,为进一步研究21-三体综合征发病机制提供细胞模型,并为选择高效制备T21-iPSCs的组织类型提供理论依据。该实验利用慢病毒介导4种转录因子(Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc)分别诱导人21-三体综合征的羊水细胞和胎儿皮肤成纤维细胞,建立诱导多能干细胞系(Trisomy 21 human amniotic fl uid induced pluripotent stem cells,T21 hAF-iPSCs;Trisomy 21 human dermal fi broblast induced pluripotent stem cells,T21 hDF-iPSCs),T21 hAF-iPSCs及T21 hDF-iPSCs在蛋白和mRNA水平上均表达人胚胎干细胞的多能性分子标记,如Oct4、Nanog等,具有在体外及体内分化三个胚层的能力,其在培养过程中能维持异常核型并能维持自我更新状态。结果发现,利用羊水细胞建立T21-iPSCs效率高于皮肤成纤维细胞,羊水细胞可能是制备T21-iPSCs的理想细胞类型。

关键词： 21-三体综合征羊水细胞人皮肤成纤维细胞诱导多能干细胞

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辅助生殖技术中HBV携带者胚胎发育和IVF结局的回顾分析

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中山大学学报（医学科学版） 2014年第4期35卷 570-574页

作者：杜红姿刘寒艳李莉康祥锦张伟良陈欣洁广州医科大学附属第三医院生殖医学中心//广东省生殖医学重点实验室//广东省产科重大疾病重点实验室//广东省普通高校生殖与遗传重点实验室广东广州510150

【目的】探讨乙肝病毒(HBV)感染以及不同感染模式的夫妇胚胎发育情况和体外授精/卵胞浆内单精子显微注射(IVF/ICSI)结局。【方法】回顾性分析行IVF/ICSI治疗,637个HBV感染患者周期与1 892个未感染者周期的基础参数以及临床结局,同时进... 详细信息

【目的】探讨乙肝病毒(HBV)感染以及不同感染模式的夫妇胚胎发育情况和体外授精/卵胞浆内单精子显微注射(IVF/ICSI)结局。【方法】回顾性分析行IVF/ICSI治疗,637个HBV感染患者周期与1 892个未感染者周期的基础参数以及临床结局,同时进一步比较不同模式HBV感染者之间的临床结局。基础参数包括女方年龄、月经第3天基础内分泌水平、不孕原因、原发还是继发不孕、不孕年限、第几次周期、卵巢刺激方案是长方案还是短方案、IVF还是ICSI。临床结局包括比较各组人群在获卵数、受精率、卵裂率、着床率、临床妊娠率、流产率方面有无差异。【结果】一方或双方感染HBV的夫妻与未感染的夫妻在基础参数方面没有显著性差异。获卵数、受精数、卵裂数、优质胚胎数、冷冻胚胎数、着床率、妊娠率以及流产率与未感染组比较没有差异(P均>0.05),不同模式的HBV感染者之间着床率、妊娠率和早期流产率均没有显著差异(P均>0.05)。【结论】HBV感染夫妇的胚胎继续发育的潜能和IVF结局与未感染者相似。不同模式的HBV感染者IVF结局相似。

关键词：辅助生殖技术体外授精胚胎移植胚胎发育流产率临床妊娠率 HBV

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植物凝集素刺激外周血单个核细胞增殖及分泌因子表达的变化

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中国组织工程研究 2014年第23期18卷 3707-3714页

作者：王鼎宋兵钟旋孙筱放范勇广东省产科重大疾病重点实验室广东省高校生殖与遗传重点实验室广州医科大学附属第三医院广东省广州市510150

背景:植物凝集素可以刺激外周血单个核细胞分裂并引起免疫细胞的活化,是常用的细胞增殖模型。但是全血中的非外周血单个核细胞成分(血浆和无核细胞)在植物凝集素参与的体外培养过程中起到什么作用,以及内皮分泌因子的表达情况尚不明确... 详细信息

背景:植物凝集素可以刺激外周血单个核细胞分裂并引起免疫细胞的活化,是常用的细胞增殖模型。但是全血中的非外周血单个核细胞成分(血浆和无核细胞)在植物凝集素参与的体外培养过程中起到什么作用,以及内皮分泌因子的表达情况尚不明确。目的:在体外单独培养或全血培养外周血单个核细胞过程中,观察植物凝集素对其增殖和凋亡的影响,以及相关炎症因子以及内皮分泌因子的表达变化。方法:分离正常核型成人的外周血单个核细胞,应用无植物凝集素培养基和加入植物凝集素培养基分别进行单独培养,观察细胞形态学变化。收集全血培养或不同条件单独培养的外周血单个核细胞,提取mRNA,荧光定量RT-PCR检测细胞增殖、凋亡,以及炎症因子和内皮分泌因子的表达变化,并进行统计学分析。结果与结论:外周血单个核细胞单独培养和全血培养存在差异,植物凝集素会促进外周血单个核细胞Ki67、增殖细胞核抗原、蛋白水解酶3、γ-干扰素、肿瘤坏死因子β和白细胞介素6的基因表达,抑制蛋白C表达。提示植物凝集素促进体外培养外周血单个核细胞的增殖及凋亡,促使炎症因子表达上调,部分血液生物学相关的内皮分泌因子下调。

关键词：干细胞培养植物凝集素外周血单个核细胞细胞因子细胞增殖细胞凋亡炎症因子内皮分泌因子全血培养体外培养荧光定量RT-PCR 国家自然科学基金

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植物雌激素在雌性生殖系统中的抗氧化作用

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广东医学 2014年第21期35卷 3289-3293页

作者：余波澜郑婷蒋露广州医科大学附属第三医院产科广东省产科重大疾病重点实验室广东省普通高校生殖与遗传重点实验室广州510150

目的探讨植物雌激素白藜芦醇、染料木黄酮和大豆黄酮在人类宫颈癌细胞He La、乳腺癌细胞MCF7和卵巢癌细胞SK-OV-3中对抗氧化信号通路的影响。方法将抗氧化响应元件ARE报告基因转染入He La、MCF7和SK-OV-3细胞。稳定表达ARE荧光报告基因... 详细信息

目的探讨植物雌激素白藜芦醇、染料木黄酮和大豆黄酮在人类宫颈癌细胞He La、乳腺癌细胞MCF7和卵巢癌细胞SK-OV-3中对抗氧化信号通路的影响。方法将抗氧化响应元件ARE报告基因转染入He La、MCF7和SK-OV-3细胞。稳定表达ARE荧光报告基因后,细胞培养基中分别加入50、25、12.5、6.25、3.125、1.56和0μmol/L的3种植物雌激素,检测ARE诱导倍数的变化。分别检测3种植物雌激素24 h处理后诱导细胞中抗氧化基因Nrf2、SOD1、SOD2、SOD3、HO-1、GSTm、GSTp、NQO1、CAT和CLGC等的mRNA表达水平。在MCF7细胞中,检测25μmol/L的白藜芦醇和大豆黄酮对野生型Keap1蛋白抑制Nrf2-ARE表达的影响。结果在MCF7、He La和SK-OV-3细胞中,3种植物雌激素均能诱导ARE报告基因的高表达,并促进Nrf2、SOD3、GSTp、CAT和CLGC等抗氧化基因的高表达。同时,25μmol/L的白藜芦醇和大豆黄酮在MCF7细胞中能够有效淬灭Keap1蛋白对ARE表达的抑制作用。结论植物雌激素白藜芦醇、染料木黄酮和大豆黄酮能够在人类宫颈癌细胞He La、乳腺癌细胞MCF7和卵巢癌细胞SK-OV-3中诱导抗氧化信号通路。诱导效应具有剂量依赖性和组织特异性。转录调控蛋白Keap1可能参与了诱导反应机制。

关键词：植物雌激素抗氧化 Keap1

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高龄孕妇脐血遗传产前诊断的成功率及异常率分析

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广东医学 2014年第13期35卷 2098-2100页

作者：王鼎潘倩莹赖炜强丘文君郑育红刘海波孔舒范勇孙筱放广州医科大学附属第三医院妇产科研究所实验部广东省产科重大疾病重点实验室广东省普通高校生殖与遗传重点实验室广州510150

目的应用脐血进行产前诊断,探讨高龄孕妇脐血送检染色体核型分析的成功率及异常检出率。方法对产前诊断送检的脐血样本行染色体分析。统计2008年1月至2013年10月1 120份送检脐血染色体核型分析的成功率以及异常检出率,分析高龄因素对染... 详细信息

目的应用脐血进行产前诊断,探讨高龄孕妇脐血送检染色体核型分析的成功率及异常检出率。方法对产前诊断送检的脐血样本行染色体分析。统计2008年1月至2013年10月1 120份送检脐血染色体核型分析的成功率以及异常检出率,分析高龄因素对染色体分析和异常检出率的影响。结果 2008至2011年产前诊断脐血染色体送检数量呈上升趋势,2011年后逐渐下降,但高龄孕妇所占比例无显著变化。高龄孕妇脐血染色体的成功率与总成功率相当,差异无统计学意义(P>0.05)。异常核型检出率略高于总体检出率,分别为8.33%和5.38%,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论脐血细胞遗传产前诊断的减少预示着孕早期筛查和诊断的完善,高龄孕妇的脐血染色体核型异常率略高于总体人群,但高龄因素对脐血染色体细胞遗传检查的成功率和异常检出率无明显影响。

关键词：产前诊断脐血核型分析高龄孕妇

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小鼠睾丸特异性基因Vad1.2重组蛋白的构建及多克隆抗体制备

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激光生物学报 2014年第4期23卷 331-337页

作者：孙源刘见桥杜红姿曹善柏广州医科大学附属第三医院生殖医学中心广东省生殖医学重点实验室广东省产科重大疾病重点实验室广东省普通高校生殖与遗传重点实验室广东广州510150

目的:构建小鼠睾丸特异性基因Vad1.2重组蛋白,制备多克隆抗体。方法:将小鼠睾丸组织Vad1.2转录本行RT-PCR扩增,通过DNA重组技术插入克隆载体p ET15b,进行酶切及DNA序列分析。将表达载体转化入大肠杆菌BL21(DE3)RIL感受态细胞,10 mmol/L ... 详细信息

目的:构建小鼠睾丸特异性基因Vad1.2重组蛋白,制备多克隆抗体。方法:将小鼠睾丸组织Vad1.2转录本行RT-PCR扩增,通过DNA重组技术插入克隆载体p ET15b,进行酶切及DNA序列分析。将表达载体转化入大肠杆菌BL21(DE3)RIL感受态细胞,10 mmol/L IPTG诱导表达重组蛋白,通过10%SDS-PAGE、Western blotting及质谱分析进行鉴定。随后对重组Vad1.2蛋白进行纯化和进一步鉴定。最后,制备兔抗小鼠Vad1.2多克隆抗体,并通过Vad1.2-EGFP质粒转染GC-2spd(ts)细胞对其特异性进行验证。结果:大肠杆菌BL21(DE3)RIL细胞中诱导表达并纯化的小鼠Vad1.2重组蛋白构建正确并经Western blotting和质谱分析得到证实。所制备的多克隆抗体可特异性识别GC-2spd(ts)细胞中过表达的Vad1.2-EGFP融合蛋白。结论:成功构建小鼠Vad1.2重组蛋白,并制备多克隆抗体,为Vad1.2基因的进一步研究奠定了实验基础。

关键词：精子发生 Vad1.2 重组蛋白多克隆抗体小鼠

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精子中DNA甲基化修饰研究进展

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生殖与避孕 2014年第9期34卷 771-777页

作者：刘丹王芳孙筱放余波澜广州医科大学附属第三医院妇产科研究所广东省高校生殖与遗传重点实验室广东省产科重大疾病重点实验室广州510150

DNA甲基化是表观遗传学的重要内容之一,精子在发生过程中经历了甲基化和去甲基化过程,精子DNA甲基化修饰的稳定性依赖于鱼精蛋白,不育男性精液质量的降低与精子基因组甲基化水平改变有关,但目前大家研究基因位点多而杂,这些位点甲基化... 详细信息

DNA甲基化是表观遗传学的重要内容之一,精子在发生过程中经历了甲基化和去甲基化过程,精子DNA甲基化修饰的稳定性依赖于鱼精蛋白,不育男性精液质量的降低与精子基因组甲基化水平改变有关,但目前大家研究基因位点多而杂,这些位点甲基化模式的改变是否有相互联系尚不清楚,研究热点集中在某一些生精相关的印记基因的甲基化水平改变比较多,但其机制仍然模糊,精子DNA甲基化修饰改变是否影响辅助生殖结果目前也有争论,各种理化环境因素对精子中DNA甲基化修饰影响已被越来越多的研究者发现,但具体机制有待进一步研究。

关键词：表观遗传学精子甲基化男性不育精液质量

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1q21.1微缺失胎儿合并长骨发育异常1例

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广东医学 2014年第23期35卷 3771-3771页

作者：龚亚飞宋艳琴李志华孙筱放陈欣洁广州医科大学附属第三医院产科广东省产科重大疾病重点实验室广东省普通高校生殖与遗传重点实验室广州510150

孕妇31岁,孕1产0,因停经19周,B超示长骨发育异常3 d于2013年5月30日收入院。孕妇平素月经规律,末次月经2013年1月15日,停经40 d自验尿妊娠实验阳性。停经9周B超示：宫内妊娠,胚胎存活,如孕7＋周大小,推算预产期2013年10月29日。孕早期... 详细信息

孕妇31岁,孕1产0,因停经19周,B超示长骨发育异常3 d于2013年5月30日收入院。孕妇平素月经规律,末次月经2013年1月15日,停经40 d自验尿妊娠实验阳性。停经9周B超示：宫内妊娠,胚胎存活,如孕7＋周大小,推算预产期2013年10月29日。孕早期有轻度恶心、呕吐等早孕反应,持续1＋周,孕4＋月开始自觉胎动。孕13＋3周,本院唐氏筛查提示：唐氏综合征低风险。孕18＋2周本院B超示：双顶径39 mm,头围139 mm,肱骨长13mm,股骨长14 mm,长骨呈不同程度弯曲,胎盘位于子宫后壁,单活胎。

关键词：骨发育异常微缺失胎儿宫内妊娠唐氏综合征月经规律末次月经实验阳性

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基因芯片发现基因组拷贝数变异死胎1例

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广东医学 2014年第14期35卷 2308-2308页

作者：李颖陈敏冼业星龚亚飞宋艳琴孙筱放陈欣洁广州医科大学附属第三医院妇产科研究所广东省产科重大疾病重点实验室广东省高校生殖与遗传重点实验室广州510150

孕妇,汉族,25岁,孕1产0。因停经25＋周,发现胎动减少2周于2013年9月20日到我院门诊部就诊。三维超声检查提示胎儿如孕23周,单死胎,颅骨变形,脑部回声紊乱。孕期无特殊,否认发热、药物服用史及放射线接触史,否认近亲结婚和遗传病史,家族... 详细信息

孕妇,汉族,25岁,孕1产0。因停经25＋周,发现胎动减少2周于2013年9月20日到我院门诊部就诊。三维超声检查提示胎儿如孕23周,单死胎,颅骨变形,脑部回声紊乱。孕期无特殊,否认发热、药物服用史及放射线接触史,否认近亲结婚和遗传病史,家族中无类似病患者及畸形史。孕妇及其丈夫外观发育无异常,智力正常。孕中期唐氏筛查提示13三体、18三体、21三体和神经管畸形低风险。孕妇及其丈夫选择终止妊娠。引产后尸检发现胎儿头颅变形,躯干、四肢水肿,胎盘、脐带无异常。

关键词：基因芯片死胎拷贝数基因组神经管畸形变异三维超声检查 18三体

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Protein C启动子区SNP-1654T/C和-1641A/G与脓毒血症中血小板减少症的关系

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广东医学 2013年第23期34卷 3615-3617页

作者：钟旋王鼎孙筱放林荣锋白桂斌黄东健广州医科大学附属第三医院重症监护科广州510150 广州医科大学广州医科大学附属第三医院广东省产科重大疾病重点实验室广东省普通高校生殖与遗传重点实验室广州510150 广州中医药大学中药学院广州510006

目的探讨Protein C基因(PROC基因)启动子区单核苷酸多态性(SNP)与脓毒血症血小板浓度之间的关系。方法提取129例脓毒血症患者外周血基因组DNA,采用聚合酶链反应(PCR)及基因测序技术检测PROC基因启动子区的rs1799808(-1654T/C)和rs179980... 详细信息

目的探讨Protein C基因(PROC基因)启动子区单核苷酸多态性(SNP)与脓毒血症血小板浓度之间的关系。方法提取129例脓毒血症患者外周血基因组DNA,采用聚合酶链反应(PCR)及基因测序技术检测PROC基因启动子区的rs1799808(-1654T/C)和rs1799809(-1641A/G)位点SNP。通过患者血小板浓度分组,分析血小板减少症组与正常对照组中的基因型及等位基因频率的分布,比较脓毒血症患者外周血血小板浓度水平及其在不同基因型中的差异。结果通过PCR与测序得到所有129例患者-1654T/C和-1641A/G的SNP分型。血小板减少症组(n=58)相比正常对照组(n=71),-1654T/C等位基因T频率明显升高(P=0.03),血小板减少症组TA单倍型较正常对照组有较高的频率差异有统计学意义(P=0.04)。结论 PROC基因启动子区SNP的基因型、串联单倍型与脓毒血症发病过程中的血小板浓度相关。

关键词：基因多态性 Protein C 脓毒血症血小板减少症

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