目的探讨双调蛋白(amphiregulin,AREG)对糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡和氧化应激的的影响。方法25 mmol/L葡萄糖和500μmol/L棕榈酸(HGHF)诱导大鼠心肌细胞(H9C2)18 h,建立体外糖尿病心肌病大鼠心肌细胞模型。采用实时定量聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)和蛋白质印迹(Western blotting,WB)检测AREG基因的表达,采用流式细胞分析和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidyltransferase-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)染色观察siRNA下调AREG后H9C2细胞凋亡和氧化应激情况。通过qRT-PCR检测心肌细胞肥厚和纤维化的分子水平。结果在HGHF处理的H9C2细胞中AREG表达上调。抑制AREG的表达,减轻了HGHF导致的大鼠心脏氧化应激的增强,且减少了心肌细胞的凋亡,改善了心肌肥厚和纤维化的分子指标。结论AREG下调通过抑制细胞氧化和细胞凋亡来缓解心肌损伤,AREG可以作为治疗糖尿病心肌病的分子靶标。
目的利用PANDORA-seq鉴定年轻和老年小鼠心房组织中的sncRNA表达差异,观察姜黄素干预对老年小鼠差异sncRNA和靶基因的影响。方法年轻组(5个月龄)和老年组(18个月龄)小鼠心房组织进行PANDORA-seq,SPORTS1.1注释sncRNA的表达谱,R包DESeq2展示差异sncRNA,对差异miRNA进行靶基因预测和构建miRNA-mRNA网络,实时定量聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)鉴定靶分子。姜黄素干预后,在体电生理标测和Western-blot观察老年小鼠心房颤动可诱发率,心房衰老程度及衰老和纤维化相关蛋白的表达。结果从年轻组和老年组小鼠心房组织中鉴定出大量sncRNA,包括miRNA、tsRNA、rsRNA和piRNA,老年组sncRNA表达丰度比年轻组明显增多(P=0.048),rsRNA和tsRNA的起源位点也存在差异。两组小鼠间4种sncRNA存在大量序列差异,而其种类差异只存在于miRNA中,且老年组小鼠miR-298(P=0.005)和miR-301b(P=0.004)明显降低。姜黄素干预可使老年小鼠心房组织中miR-298(P=0.000)和miR-301b(P=0.000)表达上调,降低衰老和纤维化蛋白的表达和改善心房颤动易感性。结论sncRNA参与小鼠心房衰老过程,姜黄素可靶向miR-298和miR-301b参与心房衰老相关纤维化过程,为老年心房颤动的防治提供新思路。
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