检索结果-内蒙古大学图书馆

华南农业大学学报 2025年第03期46卷 342-350页

作者：唐铮向勇孙敏华冯赛祥廖明黄瑜万春和刘荣昌傅光华罗开健华南农业大学兽医学院广东省农业科学院动物卫生研究所/农业农村部禽流感等家禽重大疾病防控重点实验室/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省禽病防治重点实验室

【目的】构建稳定过表达波形蛋白(Vimentin,VIM)基因的鸡肝癌(Leghorn male hepatoma,LMH)细胞系以提高鹅星状病毒(Goose astrovirus,GAstV)增殖效率。【方法】从鹅源细胞中通过PCR扩增VIM基因，结合同源重组的方法将其连接至慢病毒基... 详细信息

【目的】构建稳定过表达波形蛋白(Vimentin,VIM)基因的鸡肝癌(Leghorn male hepatoma,LMH)细胞系以提高鹅星状病毒(Goose astrovirus,GAstV)增殖效率。【方法】从鹅源细胞中通过PCR扩增VIM基因，结合同源重组的方法将其连接至慢病毒基因过表达系统载体pLV-sfGFP (2A) Puro，获得重组慢病毒质粒pLV-sfGFP(2A) Puro-VIM-Flag(pLV-VIM)；利用293T细胞包装重组慢病毒颗粒，随后感染LMH细胞，并利用嘌呤霉素进行筛选以获得目标细胞；通过Western blot、RT-qPCR、间接免疫荧光试验和TCID50测定等方法评估VIM对GAstV增殖效率的影响；最后通过抗体阻断试验分析细胞表面VIM对GAstV侵入的影响。【结果】经测序和酶切鉴定，成功构建了重组慢病毒载体pLV-VIM；经筛选后获得了过表达VIM基因的LMH细胞系(LMHVIM)及其对照组细胞系(LMH-NC)。Western blot结果显示，LMH-VIM细胞中波形蛋白的表达水平显著高于LMH-NC。接种病毒后发现，过表达VIM显著上调LMH-VIM细胞中GAstV的mRNA和蛋白表达水平，以及细胞上清液中的病毒滴度。抗体阻断试验表明，细胞表面VIM可促进GAstV侵入细胞。【结论】本研究为提高GAstV在体外细胞培养的增殖滴度提供了新的见解和思路，对GAstV感染引起的雏鹅痛风疾病的疫苗研发、生产和该疾病的防控具有重要意义。

关键词：波形蛋白基因鸡肝癌细胞系基因过表达鹅星状病毒增殖效率

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瘤胃微生物对反刍动物甲烷排放的影响及减排策略研究进展

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饲料研究 2025年第1期48卷 206-211页

作者：杨佳纯赖洁微闵力李大刚谭昇巴桑珠扎杨舒黎佛山大学动物科技学院广东省动物分子设计与精准育种重点实验室广东佛山528225 广东省农业科学院动物科学研究所农业农村部华南动物营养与饲料重点实验室/广东省动物育种与营养公共实验室/广东省畜禽育种与营养研究重点实验室广东广州510640 西藏自治区农牧科学院畜牧兽医研究所西藏拉萨850009

瘤胃是反刍动物特有的消化器官,其错综复杂的微生物区系在整个消化过程中扮演核心角色,通过一系列厌氧代谢途径对饲料中的有机物质进行降解,同时生成甲烷(CH_(4))。作为一种强效温室气体,CH_(4)的产生不仅导致能量的损失,还会加剧全球... 详细信息

瘤胃是反刍动物特有的消化器官,其错综复杂的微生物区系在整个消化过程中扮演核心角色,通过一系列厌氧代谢途径对饲料中的有机物质进行降解,同时生成甲烷(CH_(4))。作为一种强效温室气体,CH_(4)的产生不仅导致能量的损失,还会加剧全球气候变暖。因此,寻找更多更有效的措施来抑制瘤胃CH_(4)排放对于提高动物生产性能及缓解气候变化具有重要意义。瘤胃微生物和饲粮营养是影响反刍动物CH_(4)排放的两大因素。文章阐述了产甲烷菌、细菌、原生动物和厌氧真菌在瘤胃CH_(4)生成过程中发挥的作用,归纳总结了调整饲粮组成、添加化学抑制剂、植物性饲料添加剂和直接饲喂微生物等方法在降低CH_(4)排放方面的作用效果,为反刍动物CH_(4)减排策略的实施与应用提供参考。

关键词：反刍动物瘤胃微生物甲烷排放营养调控减排策略

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APOBEC家族蛋白的结构功能及其在疾病控制中的作用

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微生物学报 2025年第5期 1849-1866页

作者：张志杰王松祺聂晶晶瞿云芝沈海燕广东省农业科学院动物卫生研究所广东省畜禽疫病防治研究重点实验室西北农林科技大学动物医学院华南农业大学兽医学院

活化诱导胞苷脱氨酶(activation-induced cytidine deaminase, AID)和载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽(apolipoprotein B mRNA-editing enzyme, catalytic polypeptide, APOBEC)构成了一类保守的胞苷脱氨酶家族，各成员蛋白在机体内发挥着各不相同的功能，并且在机体的天然免疫防御机制中也发挥着重要作用。AID在脊椎动物的获得性免疫系统中发挥重要作用，其介导抗体类别转换重组(class switch recombination, CSR)、促进抗体亲和力成熟，并参与抗体多样性的产生。APOBEC1则具有催化胞嘧啶脱氨基化、介导RNA编辑以调控细胞功能的作用，同时还展现出抗逆转录病毒活性，并与肿瘤和癌症的发生存在一定的关联。APOBEC2主要在心肌和骨骼肌中表达，与肌肉纤维类型的转变、体重下降、肌肉再生以及体细胞肌肉组织相关疾病有关，同时在控制基因表达方面也具有潜在作用。APOBEC3s在天然免疫和获得性免疫应答中均占据重要地位，其成员蛋白在抑制逆转录转座子、抑制病毒复制、DNA降解、RNA编辑以及影响细胞周期等方面均发挥着关键作用。APOBEC4基因在各种动物中相对保守，其活性中心序列与其他APOBEC蛋白不同，是公认的胞苷对尿苷编辑酶，并具有抗病毒活性。目前，关于动物源APOBEC家族成员的研究相对较少，本文综述了APOBEC家族成员的结构特征和生物功能，为日后研究动物源APOBEC家族成员在机体免疫应答及对疾病影响方面提供参考，同时也为进一步探索利用增强APOBEC家族成员功能的活性物质来寻找抗病毒药物提供新思路。

关键词：载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽(APOBEC) 活化诱导的胞苷脱氨酶 APOBEC3s 生物功能

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2024年我国禽流感等禽病流行情况与2025年预测分析

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养禽与禽病防治 2025年第2期 2-5页

作者：贾伟新曹伟胜孙敏华刘文俊信爱国李珂叶贺佳王友令于可响瞿孝云亓文宝任涛廖明华南农业大学兽医学院国家禽流感专业实验室(广州)人兽共患病防控制剂国家地方联合工程实验室农业农村部人畜共患病重点实验室农业农村部兽用疫苗创制重点实验室广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室广东省人兽共患病防控制剂工程实验室广州510640 广东省农业科学院动物卫生研究所农业农村部禽流感等家禽重大疾病防控重点实验室广州510640 仲恺农业工程学院动物科技学院广州510550 云南省畜牧兽医科学院养禽与禽病研究所昆明650224 广州市华南农大生物药品有限公司广州511399 广州达农生物科技有限公司广州510145 山东省农业科学院家禽研究所济南250023

2024年我国家禽生产整体上保持良好态势,市场行情有喜有忧。禽流感防控形势严峻,威胁我国养禽业并在局部地区造成损失。本文将对我国2024年禽流感等重要家禽疫病发生情况进行简要回顾,对2025年禽病的流行趋势进行预测分析。

关键词：禽流感防控家禽生产养禽业禽病家禽疫病市场行情预测分析流行趋势

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广东地区副猪嗜血杆菌KRG血清分型及基因分型多态性分析

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农业生物技术学报 2010年第1期18卷 103-107页

作者：贾爱卿李春玲王贵平杨冬霞何丽丽广东省农业科学院兽医研究所广东省兽医公共卫生公共实验室

本研究对保存的2007～2008年广东地区发病猪群中分离的48株副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis)进行了分析。用琼脂扩散进行血清分型,结果表明48株临床分离菌株鉴定出7个血清型,其中以5型为主,占总菌株的23.68%。采用肠杆菌基因间重复序... 详细信息

本研究对保存的2007～2008年广东地区发病猪群中分离的48株副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis)进行了分析。用琼脂扩散进行血清分型,结果表明48株临床分离菌株鉴定出7个血清型,其中以5型为主,占总菌株的23.68%。采用肠杆菌基因间重复序列-PCR(Enterobacterial repetitive intergenic consensus-PCR)法进行基因分型分析,结果显示,48株不同来源副猪嗜血杆菌菌株基因型呈现多态性分布;分析得到31个基因型PHYLIP-3.68软件对31个基因型的电泳图谱进行基因分型及遗传关系的分析,结果得到8个群,其中B为优势群,占总菌株数的66.67%。表明广东地区的副猪嗜血杆菌的基因型和血清型十分丰富,ERIC-PCR技术可成为其分子流行病学研究的有效手段。

关键词：副猪嗜血杆菌血清分型 ERIC-PCR 基因分型

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鹅源鸭疫里默氏杆菌的分离、鉴定与生物学特性研究

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微生物学通报 2012年第12期39卷 1755-1761页

作者：吕敏娜戚南山覃宗华廖申权吴彩艳孙铭飞广东省农业科学院兽医研究所广东省兽医公共卫生公共实验室广东广州510640

【目的】从疑似鸭疫里默氏杆菌病的病死雏鹅分离病原菌进行鉴定。【方法】根据细菌培养特性、生化特性、动物试验、血清型鉴定及分子生物学特性对分离菌株进行鉴定。【结果】分离菌株为革兰氏阴性菌,不发酵糖类和醇类,尿素酶试验和氧化... 详细信息

【目的】从疑似鸭疫里默氏杆菌病的病死雏鹅分离病原菌进行鉴定。【方法】根据细菌培养特性、生化特性、动物试验、血清型鉴定及分子生物学特性对分离菌株进行鉴定。【结果】分离菌株为革兰氏阴性菌,不发酵糖类和醇类,尿素酶试验和氧化酶还原试验为阳性,致病,不同分离株的16S rRNA基因经多重序列比对分析,结果显示鹅源分离株与鸭源鸭疫里默氏杆菌处于同一进化支上,与鸡源鸭疫里默氏杆菌进化关系稍远,血清型鉴定为1型。【结论】分离菌株为血清1型的鸭疫里默氏杆菌,对鸭和鹅均有高致病性,自家疫苗能够较好地保护雏鹅。

关键词：鹅鸭疫里默氏杆菌 16S rRNA基因

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不同表达条件对Eimeria tenella丙二酰单酰辅酶A:ACP转移酶活性的影响

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畜牧兽医学报 2010年第9期41卷 1158-1165页

作者：孙铭飞覃宗华谢明权袁建丰吕敏娜余劲术吴彩艳蔡建平广东省农业科学院兽医研究所广东省兽医公共卫生公共实验室广州510640

为探讨不同原核表达载体、不同表达温度对重组表达Eimeria tenella丙二酸单酰辅酶A:ACP转移酶活性的影响,以生物信息学技术预测的***Ⅱ型脂肪酸合成代谢途径中的丙二酰单酰辅酶A:ACP转移酶(Et-MCAT)编码序列为基础,分别设计引物扩增完整... 详细信息

为探讨不同原核表达载体、不同表达温度对重组表达Eimeria tenella丙二酸单酰辅酶A:ACP转移酶活性的影响,以生物信息学技术预测的***Ⅱ型脂肪酸合成代谢途径中的丙二酰单酰辅酶A:ACP转移酶(Et-MCAT)编码序列为基础,分别设计引物扩增完整ORF,采取截除信号肽而保留转导肽以及切除信号肽和转导肽的不同策略,选择pMAL-c2x、pET-32a(+)和pProExHTa3种不同表达载体分别构建重组表达质粒,转化大肠杆菌Rosseta(DE3)后,在不同条件下诱导表达,利用酮戊二酸脱氢酶(KDH)偶联系统测定表达产物的酶活性,以评价不同表达策略对表达效果和表达产物活性的影响。表达水平和酶活性分析结果显示,惟切除信号肽和转导肽后的功能蛋白编码区能表达,Rosseta(DE3)/pMAL-c2x-mcat体系的可溶性表达量高于Rosseta(DE3)/pET-32a(+)-mcat,但二者表达产物的酶活性相似,且均随着诱导温度的降低其可溶性蛋白表达量增加。但Rosseta(DE3)/pProExHTa-mcat体系仅能表达不溶性蛋白,且复性后无酶活性,改变诱导温度对表达效果无明显影响。结果表明不同表达载体和诱导温度对大肠杆菌所表达EtMCAT的活性及其表达形式有显著影响,其中融合标签和表达温度可能是主要的影响因素,包涵体表达的重组酶即使复性处理仍难达到酶活性分析的要求。

关键词：柔嫩艾美耳球虫丙二酰单酰辅酶A:ACP转移酶表达载体酶活性

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鸭疫里默氏菌甲羟戊酸激酶基因的重组表达与免疫保护效果研究

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畜牧兽医学报 2010年第8期41卷 1006-1011页

作者：吕敏娜覃宗华袁建峰孙铭飞余劲术吴彩艳蔡建平广东省农业科学院兽医研究所广东省兽医公共卫生实验室广州510640

在从鸭疫里默氏菌(RA)基因组文库筛选毒力基因的过程中,作者获得了编码RA甲羟戊酸激酶的基因(RAMVA),将该基因片段提交GenBank,收录号为GQ398751。测序分析结果显示其开放阅读框长492 bp,共编码163个氨基酸。根据序列信息设计引物,用PC... 详细信息

在从鸭疫里默氏菌(RA)基因组文库筛选毒力基因的过程中,作者获得了编码RA甲羟戊酸激酶的基因(RAMVA),将该基因片段提交GenBank,收录号为GQ398751。测序分析结果显示其开放阅读框长492 bp,共编码163个氨基酸。根据序列信息设计引物,用PCR方法从RA中扩增出RAMVA的编码区并与表达质粒pMAL-C2X连接,构建重组质粒pMAL-RAMVA。经限制性酶切和序列测序鉴定序列正确无误后将pMAL-RAMVA转化至***21(DE3)构建重组表达菌***21/pMAL-C2X-RAMVA。用IPTG诱导重组菌成功诱导RAMVA的表达,通过SDS-PAGE分析表达产物,表达量占全菌总蛋白的15.6%,且重组表达的甲羟戊酸激酶在大肠杆菌中表达时以可溶性状态存在。雏鸭免疫试验表明,接种重组表达菌***21/pMAL-C2X-RAMVA2周后,可产生对RA致死量攻击达42.3%的免疫保护率。

关键词：鸭疫里默氏菌甲羟戊酸激酶表达免疫保护

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体内诱导抗原技术鉴定细菌毒力基因的研究进展

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中国兽医学报 2011年第10期31卷 1533-1536页

作者：袁建丰覃宗华吕敏娜余劲术吴彩燕孙铭飞谢明权蔡建平广东省农业科学院兽医研究所广东省兽医公共卫生公共实验室广东广州510642

病原细菌的致病作用是其与宿主复杂的相互作用的结果。一方面细菌表达产生、分泌释放多种毒力因子,另一方面宿主通过其防御系统抵抗这些毒力因子的作用[1-2]。一般来说,由于环境条件的显著差差异,病原菌在体内外所表达的产物是明显不同... 详细信息

病原细菌的致病作用是其与宿主复杂的相互作用的结果。一方面细菌表达产生、分泌释放多种毒力因子,另一方面宿主通过其防御系统抵抗这些毒力因子的作用[1-2]。一般来说,由于环境条件的显著差差异,病原菌在体内外所表达的产物是明显不同的,其感染宿主时被诱导表达的基因。

关键词：体内诱导基因细菌毒力基因基因组表达文库体内诱导抗原技术(IVIAT)

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猪Torque teno病毒广东株的PCR检测和序列分析

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中国人兽共患病学报 2012年第10期28卷 1003-1006,1011页

作者：黄元徐敏陈少勤王晓虎向华张健騑广东省农业科学院兽医研究所/广东省兽医公共卫生公共实验室广州510640

目的 Torque teno病毒(Torque teno virus,TTV)是近年来才发现的一种单股负链DNA病毒。猪Torque teno病毒(Torque teno sus virus,TTsuV)在猪群中大量流行,被认为与猪的断奶后多系统衰竭综合征(post-weaning multi-systemic wastingsyndrome,PMWS)等疾病有关。本文旨在为广东TTsuV的流行病学提供数据。方法本文根据TTsuV的非编码区(UTR)合成引物,对来自广东2个猪场的14份猪血清进行了PCR检测。将2个猪场的TTsuV1和TTsuV2PCR产物各取1份,共4份PCR产物,进行克隆,测序并分析。结果 PCR共获得10份TTsuV1阳性(71%),8份TTsuV2阳性(57%),其中TTsuV1和TTsuV2双重阳性的为5份(36%)。PCR产物与参考毒株相应序列的分析证实,GDT1-1和GDT1-2的UTR片段均与TTsuV1参考毒株高度相似,GDT2-1和GDT2-2的UTR片段与TTsuV2参考毒株高度相似。结论广东至少存在两种血清型的TTsuV,在一些猪场有较高的检出率。TTsuV可能具有潜在的致病性,其公共卫生意义不容忽视。

关键词：猪Torque teno病毒 PCR 检测序列分析

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