检索结果-内蒙古大学图书馆

中国农业科学 2024年第22期57卷 4578-4588页

作者：钱艳红宋帅温肖会牛瑞辉杨燕秋郑博彬袁子国罗胜军广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室/农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站华南农业大学兽医学院

【背景】旋毛虫（Trichinella spiralis）是一种食源性人兽共患寄生线虫，被列为世界七大食源性寄生虫，在家畜中，旋毛虫主要感染猪，并且能够通过猪肉及副产品传播给人类，不仅给我国生猪养殖产业带来了巨大的经济损失，而且严重危害... 详细信息

【背景】旋毛虫（Trichinella spiralis）是一种食源性人兽共患寄生线虫，被列为世界七大食源性寄生虫，在家畜中，旋毛虫主要感染猪，并且能够通过猪肉及副产品传播给人类，不仅给我国生猪养殖产业带来了巨大的经济损失，而且严重危害人类健康和公共卫生安全。【目的】建立一种灵敏度高，特异性强，快速自动化的猪旋毛虫血清学检测方法,为阻止人兽共患寄生虫病的传播提供帮助。【方法】利用基因克隆和原核表达技术构建原核表达载体，通过诱导表达获得旋毛虫14-3-3重组蛋白，并验证其反应原性。用制备的重组蛋白包被磁性微粒，以此为检测抗原建立化学发光免疫分析方法，并对建立的方法进行条件优化。最后对优化后的方法进行临界值的界定及特异性、敏感性和重复性的确定；通过对来自广东省和贵州省不同养猪场的1 000份猪临床血清样本进行检测，评估该检测方法的实用性及符合率。【结果】成功表达并纯化出Ts14-3-3重组蛋白，该蛋白能特异性识别猪旋毛虫阳性血清中的抗体。建立的检测方法经过优化，结合缓冲液最佳pH为5,Ts14-3-3重组蛋白最佳包被量为5μg·mg-1-beads，活化剂最佳使用量为50μg·mg-1-beads,1%BSA封闭效果最好，酶标二抗最佳稀释度为1﹕40 000，最佳反应时间为10 min，待检样本最佳孵育时间为5 min，最佳酶促反应时间为2 min。最后经过评估，该检测方法的临界化学发光值为374 185 RLU，与猪弓形虫、猪球虫、猪结肠小袋纤毛虫、猪繁殖与呼吸综合征、经典猪瘟、猪伪狂犬和猪口蹄疫抗体均无交叉反应，该检测方法与现有ELISA检测方法相比敏感性更高，批内和批间重复性均小于10%，检测的1 000份临床猪血清样本中旋毛虫抗体阳性率为0.6%，与市售ELISA试剂盒检出总符合率为98.18%。【结论】成功建立了猪旋毛虫抗体管式化学发光免疫分析检测方法，该检测方法特异性强，稳定性好，与ELISA方法相比更灵敏，快速，临床检测符合率高。

关键词：旋毛虫血清学诊断 Ts14-3-3 原核表达管式化学发光免疫分析

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猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体化学发光检测方法的建立与应用

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微生物学通报 2025年第5期52卷 2344-2358页

作者：黄亦奇温肖会宋帅向国庆吕殿红罗胜军李家奎西藏农牧学院动物科学学院广东省农业科学院动物卫生研究所广东省畜禽疫病防治研究重点实验室农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站

【背景】猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)引起的母猪流产或死胎、仔猪呼吸道症状并伴随死亡率升高的一种传染性疾病。【目的】建立一种特异性强、灵敏度高、操作简捷、检测时间短的PRRSV抗体化学发光检测方法，用于检测PRRSV抗体水平。【方法】以羧基磁珠作为固相载体偶联PRRSV重组N蛋白，用适量的牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)进行封闭，加入检测样品进行反应，以兔抗猪IgG-AP抗体作为酶标二抗，加入相应底物进行显色，优化各项反应条件，建立PRRSV抗体化学发光检测方法，并对该方法的特异性、灵敏度、重复性和符合率进行验证。【结果】建立的PRRSV抗体化学发光检测方法的血清样品稀释倍数为1:30，蛋白与羧基磁珠偶联pH值为8.0，蛋白偶联量为20μg/mL，使用20μL 10%BSA溶液封闭最佳，磁珠稀释液用量为1 mL，酶标二抗稀释度为1:20 000，一步反应时间为20 min，二步反应时间为10 min，底物反应时间为3 min。根据背景清晰的PRRSV临床血清样本制标准曲线，通过绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic, ROC)曲线确定阴阳临界点为32.56 U，当临床PRRSV抗体阳性样品稀释到4倍时，ELISA和化学发光检测方法均鉴定为阴性，说明该化学发光检测方法具有良好的灵敏度。与非洲猪瘟病毒、经典猪瘟病毒、猪乙脑病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型、猪流行性腹泻病毒抗体阳性血清均无交叉反应。重复性试验中，批内变异系数为2.79%-5.32%，批间变异系数为1.05%-11.31%，均<15%，与商品化猪繁殖与呼吸综合征抗体检测试剂盒阳性符合率93.8%，阴性符合率96.3%，总符合率96.1%。【结论】本研究建立的PRRSV抗体化学发光检测方法可用于PRRSV疫苗接种后或感染痊愈后抗体水平检测，为后续试剂盒的开发提供参考。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征重组N蛋白羧基磁珠化学发光检测方法

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不同贮藏温度下稻花鸡肉优势腐败菌变化及Arrhenius货架期预测模型的建立

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现代食品科技 2024年第2期40卷 178-186页

作者：刘梦竹徐志宏魏琦麟涂杜康桦华岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心广东肇庆526238 广东省农业科学院动物卫生研究所农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站广东省畜禽疫病防治研究重点实验室广东广州510640

为获得稻花鸡肉腐败菌的Arrhenius货架期预测模型,采用培养基初步筛选与16S rDNA全基因序列鉴定优势腐败菌,研究不同贮藏温度(25、4、0℃)下优势腐败菌和菌落总数的生长变化,通过化学反应动力学方程构建菌落总数、假单胞菌和沙雷氏菌货... 详细信息

为获得稻花鸡肉腐败菌的Arrhenius货架期预测模型,采用培养基初步筛选与16S rDNA全基因序列鉴定优势腐败菌,研究不同贮藏温度(25、4、0℃)下优势腐败菌和菌落总数的生长变化,通过化学反应动力学方程构建菌落总数、假单胞菌和沙雷氏菌货架期预测模型并进行验证。结果表明,稻花鸡肉在贮藏过程中逐渐占主导地位的优势腐败菌是假单胞菌属莓实假单胞菌和肠杆菌科沙雷氏菌属液化沙雷氏菌。稻花鸡肉25℃常温贮藏下货架期不超过0.5 d,腐败中后期沙雷氏菌占主导地位,4℃冷藏保鲜货架期不超过4 d,假单胞菌和沙雷氏菌均随贮藏时间的延长呈增长趋势,0℃冰温贮藏货架期不超过10 d,贮藏后期假单胞菌和沙雷氏菌差异性不显著。利用菌落总数、假单胞菌、沙雷氏菌3个指标建立货架期预测模型,3种货架期预测模型预测值与实测值对比,平均相对误差均在允许范围内,预测效果最佳的是假单胞菌货架期预测模型。菌落总数、假单胞菌和沙雷氏菌货架期预测模型均能对稻花鸡肉的货架期进行真实预测。

关键词：稻花鸡肉菌落总数假单胞菌沙雷氏菌货架期预测模型

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不同组学视角分析中药抗病毒作用研究进展

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中国畜牧兽医 2025年第2期52卷 554-561页

作者：罗琴刘丁语刘宝玲乔常宏陈翔宇何振文王晓虎陈晶张翩黄元王刚刘昊蔡汝健广东省农业科学院动物卫生研究所广东省畜禽疫病防治研究重点实验室农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站广州510640 佛山大学动物科技学院佛山528225

病毒是引起疾病的重要微生物之一,严重危害了人类和动物的健康及生命安全。随着病毒的不断变异与重组,如流感病毒、新型冠状病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等,使得疫苗提供的保护有限。同时,有效抗病毒药物的缺乏使得病毒感染后治疗困难... 详细信息

病毒是引起疾病的重要微生物之一,严重危害了人类和动物的健康及生命安全。随着病毒的不断变异与重组,如流感病毒、新型冠状病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等,使得疫苗提供的保护有限。同时,有效抗病毒药物的缺乏使得病毒感染后治疗困难,因此,迫切需要寻找新的、安全、有效的防控方法来预防病毒感染。中药因具有成分安全、不易产生耐药性且能多途径、多靶点作用于病毒等优点而被广泛应用于抗病毒研究中。传统中药为抗病毒药物提供了丰富的基础,但传统试验手段进行抗病毒药物研发耗时久且工作量大,组学技术的发展为抗病毒药物研发提供了新的视角,利用组学数据分析药物和疾病之间的关系已成为筛选、评价药物疗效和发现新的药物靶点的有力手段。因此,笔者总结分析了转录组学、蛋白质组学、代谢组学及多组学联合分析在中药抗病毒中的研究进展,通过不同组学视角分析中药在抗病毒研究中的应用,不仅有助于深入理解中药的抗病毒机制,还可为抗病毒药物的研发和优化提供科学依据。

关键词：中药抗病毒作用转录组学蛋白质组学代谢组学多组学联合分析

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广东地区人工驯养灵长动物的病毒组特征及猴痘病毒筛查

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中国人兽共患病学报 2024年第5期40卷 391-400页

作者：李娜任照文张翩袁子国陈晓凡廖明王晓虎广东省农业科学院动物卫生研究所广东省畜禽疫病防治研究重点实验室农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站广州510640 华南农业大学兽医学院广州510640

目的明确广东地区灵长动物携带病毒群落的结构特征,并评估重要人兽共患病毒猴痘病毒(MPXV)通过人工驯养灵长动物传入我国的风险。方法在广东省14个地级市的20个野生动物救护中心或动物园采集灵长动物样品,通过Illumina测序技术鉴定广东... 详细信息

目的明确广东地区灵长动物携带病毒群落的结构特征,并评估重要人兽共患病毒猴痘病毒(MPXV)通过人工驯养灵长动物传入我国的风险。方法在广东省14个地级市的20个野生动物救护中心或动物园采集灵长动物样品,通过Illumina测序技术鉴定广东地区人工驯养灵长动物携带病毒组的结构特征;并通过荧光定量PCR方法,对MPXV进行检测,以确认MPXV经广东省人工驯养灵长动物传入的风险。结果共收集灵长动物口咽拭子和粪便489份。高通量测序结果显示,广东地区人工驯养灵长动物粪便中的病毒组结构复杂且具有地区差异,其中丰度最高的是Alphaflexiviridae和Virgaviridae的成员,其次为Parvoviridae和Genomoviridae成员。荧光定量PCR结果显示,广东省内野生动物救护中心或动物园的灵长动物全部为MPXV阴性。结论广东省人工驯养灵长动物携带病毒引起动物源性人兽共患病的风险极低,且MPXV通过广东省人工驯养灵长动物传入我国的风险几乎为零。

关键词：灵长动物宏病毒组猴痘病毒人兽共患病荧光定量PCR

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旋毛虫免疫逃避机制的研究进展

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中国人兽共患病学报 2024年第1期40卷 70-75页

作者：钱艳红宋帅温肖会贾春玲吕殿红袁子国罗胜军华南农业大学兽医学院广州510642 广东省农业科学院动物卫生研究所广东省畜禽疫病防治研究重点实验室农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站广州510640

旋毛虫病是由旋毛虫引起的一种全球分布的食源性人兽共患寄生虫病,对动物生产和人兽公共卫生安全造成严重危害。旋毛虫发育史复杂,整个生命周期都在同一宿主体内完成,为了能与宿主相互共存,其进化出各种免疫逃避机制来躲避宿主的免疫清... 详细信息

旋毛虫病是由旋毛虫引起的一种全球分布的食源性人兽共患寄生虫病,对动物生产和人兽公共卫生安全造成严重危害。旋毛虫发育史复杂,整个生命周期都在同一宿主体内完成,为了能与宿主相互共存,其进化出各种免疫逃避机制来躲避宿主的免疫清除,从而建立长期的慢性感染。本研究从旋毛虫抗原变异、对宿主的免疫调节作用和通过形成包囊产生免疫隔离3个方面,对其免疫逃避机制进行阐述,将为深入了解旋毛虫的致病机制提供重要帮助。

关键词：旋毛虫感染免疫逃避

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多组学视角下中药抗菌机制研究进展

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中国畜牧兽医 2025年第1期52卷 52-59页

作者：乔常宏陈翔宇刘宝玲罗琴刘丁语何振文王晓虎陈晶张翩黄元白挨泉王刚蔡汝健广东省农业科学院动物卫生研究所广东省畜禽疫病防治研究重点实验室农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站广州510640 佛山大学动物科技学院佛山528225

随着抗生素滥用引发的耐药性问题的日益严重,新型抗菌药物的开发利用迫在眉睫,传统中草药(traditional Chinese medicine, TCM)具有多靶点、副作用小、抗耐药性和广谱等优点,在抗菌方面具有广泛应用和显著效果。随着测序技术、高分辨率... 详细信息

随着抗生素滥用引发的耐药性问题的日益严重,新型抗菌药物的开发利用迫在眉睫,传统中草药(traditional Chinese medicine, TCM)具有多靶点、副作用小、抗耐药性和广谱等优点,在抗菌方面具有广泛应用和显著效果。随着测序技术、高分辨率质谱等的发展,转录组学、蛋白质组学与代谢组学技术被广泛应用于中药抗菌机制的研究。转录组学技术可用于筛选和验证差异表达基因,以了解中药和细菌之间的相互作用途径。蛋白质组学可帮助识别中药中的活性成分,并解析其与致病菌蛋白质之间的相互作用。代谢组学技术可用于检测代谢产物的变化,以识别在中药和细菌之间的相关代谢物的差异。然而,单一的组学研究具有一定的局限性,多组学联合分析可更全面地了解细菌与宿主之间的相互作用及中药对细菌感染的调控机制。笔者从转录组学、蛋白质组学、代谢组学及多组学联用技术方面系统性总结了中药抗菌活性及中药影响群体感应、生物膜形成、物质代谢和氧化应激反应等抗菌机制的研究,旨在为中药抗菌机理的解析和抗菌药物筛选开发提供理论依据。

关键词：多组学研究蛋白组学转录组学代谢组学中药抗菌

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罗非鱼无乳链球菌ΔessA、ΔessB、ΔessC敲除菌株的构建及其特性分析

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南方水产科学 2022年第4期18卷 76-86页

作者：马艳平郝乐冯国清梁志凌马江耀柯浩刘振兴广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室/农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站广东广州510640

Ⅶ型分泌系统存在于无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)中,其组成膜蛋白对底物蛋白的分泌转运至关重要。为此利用热敏型自杀质粒,构建了含氯霉素筛选标签的膜蛋白重组敲除载体pSET4s-ΔessA、pSET4s-ΔessB、pSET4s-ΔessC,经同源重... 详细信息

Ⅶ型分泌系统存在于无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)中,其组成膜蛋白对底物蛋白的分泌转运至关重要。为此利用热敏型自杀质粒,构建了含氯霉素筛选标签的膜蛋白重组敲除载体pSET4s-ΔessA、pSET4s-ΔessB、pSET4s-ΔessC,经同源重组后,利用PCR技术筛选到了其缺失突变株-无乳链球菌ΔessA、ΔessB、ΔessC。通过菌株生长曲线分析,ΔessA、ΔessB、ΔessC敲除株均较野生株(WT)生长过程变慢,其中ΔessA、ΔessB敲除株在生长早期有显著性差异(P<0.01)。对ESAT6蛋白分泌影响分析显示,与WT株相比,ΔessA、ΔessB、ΔessC敲除株ESAT6的表达量均显著下调(P<0.01)。结果显示,ΔessA、ΔessB、ΔessC敲除株均较WT株毒力显著降低(P<0.01)。研究表明,essA、essB、essC为无乳链球菌Ⅶ型分泌系统重要的膜蛋白,其基因缺失造成了分泌蛋白ESAT6 mRNA表达水平下降,影响了菌株毒力。

关键词：罗非鱼无乳链球菌 Ⅶ型分泌系统膜蛋白敲除菌株构建生物学特性分析

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胸膜肺炎放线杆菌纳米PCR检测方法的建立与应用

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中国动物传染病学报 2023年第2期31卷 114-119页

作者：张昆丽席振军徐民生李艳勾红潮楚品品蔡汝健李春玲广东省农业科学院动物卫生研究所广东省畜禽疫病防治研究重点实验室农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站广州510640

为了建立一种高效、灵敏的胸膜肺炎放线杆菌(APP)检测方法,本研究针对APP的血清型保守基因-毒素4(APxⅣ)序列合成特异性引物,通过优化引物浓度、退火温度等建立了APP纳米PCR检测方法。敏感性试验结果显示,该纳米PCR对APP的检测下限为1&#... 详细信息

为了建立一种高效、灵敏的胸膜肺炎放线杆菌(APP)检测方法,本研究针对APP的血清型保守基因-毒素4(APxⅣ)序列合成特异性引物,通过优化引物浓度、退火温度等建立了APP纳米PCR检测方法。敏感性试验结果显示,该纳米PCR对APP的检测下限为1×10^(2)CFU/mL,其灵敏度是普通PCR的10倍;特异性结果显示,该方法仅从APP核酸样品可检测到约417 bp的特异性目的条带,而对猪链球菌、副猪嗜血杆菌、大肠杆菌、沙门菌、金色葡萄球菌等其他病原的检测结果均为阴性;应用本研究建立的纳米PCR技术检测了41份临床疑似APP感染病料,结果显示常规PCR和纳米PCR检测APP阳性率分别为17.07%(7/41)和19.51%(8/41)。以上结果表明,本研究成功建立的APP纳米PCR检测方法敏感性高、特异性好,可用于APP感染的临床诊断及流行病学调查。

关键词：胸膜肺炎放线杆菌纳米PCR 检测方法

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白花鬼针草复方提取物对生长猪生长性能和血液生化指标的影响

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家畜生态学报 2024年第2期45卷 33-38页

作者：袁明贵徐志宏彭新宇唐兴刚八晓敏田雅向蓉杨希广东省农业科学院动物卫生研究所广东省畜禽疫病防治研究重点实验室农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站广东广州510640 岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心广东茂名525000 广东省农业科学院动物科学研究所广东广州510640

为了促进入侵植物白花鬼针草(Bidens alba(L.)DC,BD)的资源化利用,将4.00 kg白花鬼针草、1.20 kg车前草、0.10 kg生姜、0.25 kg大蒜组成复方,用水提取,然后用乙醇沉淀,经工艺处理后获得白花鬼针草复方提取物(BD formulation extracts,BD... 详细信息

为了促进入侵植物白花鬼针草(Bidens alba(L.)DC,BD)的资源化利用,将4.00 kg白花鬼针草、1.20 kg车前草、0.10 kg生姜、0.25 kg大蒜组成复方,用水提取,然后用乙醇沉淀,经工艺处理后获得白花鬼针草复方提取物(BD formulation extracts,BDFE)成品0.15 kg。将提取物成品按照0 mg/kg(对照组),125 mg/kg(低剂量组),250 mg/kg(中剂量组),500 mg/kg(高剂量组)比例添加到配合饲料中,饲喂杜长大生长猪。结果表明,饲喂20 d后,与对照组相比,高、中剂量组的料重比(F/G)分别降低4.52%和2.08%。饲喂10 d后,高剂量组胆固醇(CHOL)浓度和碱性磷酸酶(ALKP)活性极显著高于中剂量组(P<0.01);低剂量组谷氨酰转移酶(GGT)活性显著高于中剂量组(P<0.05);高剂量组血清磷(PHOS)浓度显著高于低剂量组(P<0.05)。饲喂20 d后,高、中、低剂量组ALKP活性极显著高于对照组(P<0.01);高、中、低剂量组球蛋白(GLOB)含量显著高于对照组(P<0.05);高、中剂量组肌酐(CREA)浓度显著高于对照组(P<0.05);高剂量组胆固醇(CHOL)浓度和GGT活性显著高于对照组(P<0.05);高剂量组白蛋白(ALB)含量和丙氨酸转氨酶(ALT)活性显著低于对照组(P<0.05)。综上,白花鬼针草复方提取物对生长猪无肝脏毒性,无肾脏毒性,无胰腺毒性,可以促进生长猪对脂肪、能量、蛋白质的新陈代谢,可以促进对钙磷矿物质的吸收,从而提高生长猪的生长性能。

关键词：白花鬼针草杜长大生长猪生长性能血液生化

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