检索结果-内蒙古大学图书馆

福建农业学报 2023年第3期38卷 322-328页

作者：陈晨高永峰王新荣袁永强蔡书静刘松松叶雯华王燕华南农业大学植物保护学院/广东省微生物信号与作物病害防控重点实验室广东广州510642

【目的】制备针对南方根结线虫食道腺蛋白MiPDCD6多克隆抗体,为进一步研究南方根结线虫MiPDCD6蛋白的致病机制提供技术支持和材料准备。【方法】将扩增MiPDCD6基因的功能片段,与原核表达质粒pET-32a(+)构建重组质粒pET-32a-MiPDCD6,然... 详细信息

【目的】制备针对南方根结线虫食道腺蛋白MiPDCD6多克隆抗体,为进一步研究南方根结线虫MiPDCD6蛋白的致病机制提供技术支持和材料准备。【方法】将扩增MiPDCD6基因的功能片段,与原核表达质粒pET-32a(+)构建重组质粒pET-32a-MiPDCD6,然后将重组质粒转化大肠杆菌BL21细胞进行诱导表达;将纯化的根结线虫Mi PDCD6融合蛋白免疫雄性新西兰大白兔,获得高效价高纯度的多克隆抗体。【结果】构建的重组质粒pET-32a-MiPDCD6转化大肠杆菌BL21细胞后,在诱导剂IPTG浓度1.0 mmol·L^(-1)、摇床温度37℃、转速150r·min^(-1)和振荡培养5 h条件下,成功表达MiPDCD6融合蛋白。ELISA和SDS-PAGE检测表明:将纯化的根结线虫Mi PDCD6融合蛋白免疫雄性新西兰大白兔,获得高效价高纯度的多克隆抗体,效价约为1∶50 000。【结论】明确了MiPDCD6基因原核表达条件;制备获得的根结线虫MiPDCD6蛋白的多克隆抗体效价和纯度较高,可用于后续研究MiPDCD6蛋白在南方根结线虫致病机理中发挥的功能。

关键词： MiPDCD6 多克隆抗体南方根结线虫效价

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稻曲病菌一种新型真菌病毒UvBV7的分子特征

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华北农学报 2023年第6期38卷 168-174页

作者：曾蕊何桢锐黄晓彤范煜杨媚周而勋上海农林职业技术学院上海201699 华南农业大学植物保护学院广东省微生物信号与作物病害防控重点实验室广东广州510642

为了挖掘稻曲病菌中的真菌病毒资源,深入解析新型真菌病毒基因组结构与功能的关系,以分离自海南省的一株表型异常的稻曲病菌菌株Uv321为研究对象,在前期宏转录组数据的基础上,鉴定该菌株中存在的新型真菌病毒的种类,并围绕着该新型真菌... 详细信息

为了挖掘稻曲病菌中的真菌病毒资源,深入解析新型真菌病毒基因组结构与功能的关系,以分离自海南省的一株表型异常的稻曲病菌菌株Uv321为研究对象,在前期宏转录组数据的基础上,鉴定该菌株中存在的新型真菌病毒的种类,并围绕着该新型真菌病毒开展了一系列的研究。结果表明,在菌株Uv321中鉴定到一种新型真菌病毒,命名为Ustilaginoidea virens botourmiavirus 7(UvBV7)。UvBV7基因组为正单链RNA(+ssRNA),全长2406 nt,GC含量为53.78%,包含一个编码RNA依赖的RNA聚合酶(RdRP)的开放阅读框(ORF),该ORF编码643个氨基酸,分子量约为72.727 ku。病毒末端二级结构预测表明,UvBV7的5′和3′末端的碱基均互补配对,形成发夹结构。BlastP比对表明,UvBV7与隶属于葡萄孢欧尔密病毒科、Botoulivirus病毒属的病毒Erysiphe necator associated ourmia-like virus 72有着最高的相似度,但仅为44.52%。基于UvBV7及其他相似病毒的RdRP序列的多重比对结果表明,UvBV7与葡萄孢欧尔密病毒科成员的RdRP氨基酸序列存在8个保守结构域,并在第Ⅵ保守结构域中发现GDD基序,这是病毒RdRP蛋白典型的高度保守核心基序;基于病毒RdRP氨基酸序列构建的系统发育树的结果也表明,UvBV7与隶属于Botoulivirus属的成员聚集成一簇。因此,UvBV7是隶属于葡萄孢欧尔密病毒科、Botoulivirus属的一种新型真菌病毒。稻曲病菌不同菌株的对峙培养结果表明,UvBV7可在营养体亲和的菌丝间进行水平传播,但菌丝尖端-利巴韦林法、高温-利巴韦林法和原生质体再生-利巴韦林法处理均不能将菌株Uv321中的真菌病毒UvBV7脱除。综上所述,本研究不仅丰富了稻曲病菌中真菌病毒的多样性,也为稻曲病的生物防治提供了潜在的低毒力生防因子。

关键词：稻曲病真菌病毒 +ssRNA 葡萄孢欧尔密病毒科 Botoulivirus属

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核转运蛋白SsKapJ调控甘蔗鞭孢堆黑粉菌有性配合与菌丝生长

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菌物学报 2022年第3期41卷 478-491页

作者：陈金辉甘永健崔国兵邓懿祯华南农业大学植物保护学院广东省微生物信号与病害防控重点实验室群体微生物研究中心广东广州510642

为了研究核转运蛋白SsKapJ在甘蔗鞭孢堆黑粉菌中发挥的作用,本研究利用PEG介导的原生质体转化方法获得基因敲除突变体,并进行了相关生物学表型分析。结果显示潜在核转运蛋白基因SsKapJΔ突变体有性配合和菌丝生长显著减弱,转录组分析SsK... 详细信息

为了研究核转运蛋白SsKapJ在甘蔗鞭孢堆黑粉菌中发挥的作用,本研究利用PEG介导的原生质体转化方法获得基因敲除突变体,并进行了相关生物学表型分析。结果显示潜在核转运蛋白基因SsKapJΔ突变体有性配合和菌丝生长显著减弱,转录组分析SsKapJ参与环磷酸腺苷/蛋白激酶A(cAMP/PKA)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号途径调控。另一方面,SsKapJΔ突变体担孢子对吡唑醚菌酯杀真菌剂敏感性增强,但突变体对苯菌灵杀真菌剂敏感性以及环境胁迫测试(渗透压、细胞壁抑制剂、氧化还原和乙醇)中较野生型没有明显变化。本研究结果揭示了SsKapJ核转运蛋白在甘蔗鞭孢堆黑粉菌的有性配合和菌丝生长过程中具有重要调控作用,为后续开展核运输途径调控真菌有性配合/二态型转变研究提供基础。

关键词：甘蔗鞭孢堆黑粉菌有性配合核转运蛋白杀真菌剂菌丝生长

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植物免疫诱抗剂在作物病害绿色防控中的应用

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中国植保导刊 2025年第2期45卷 64-68,73页

作者：周杨蕾段灵涛周而勋广东生态工程职业学院经济贸易学院广东广州510520 华南农业大学植物保护学院/广东省微生物信号与作物病害防控重点实验室广东广州510642

植物免疫诱抗剂是一类基于植物诱导抗性原理开发的生物农药,通过激活植物的免疫系统、增强其抗病能力以促进植物健康生长,实现防病增产的目标。近年来,植物免疫诱抗剂的研发和应用已成为农业研究热点之一。基于相关的文献报道,介绍了植... 详细信息

植物免疫诱抗剂是一类基于植物诱导抗性原理开发的生物农药,通过激活植物的免疫系统、增强其抗病能力以促进植物健康生长,实现防病增产的目标。近年来,植物免疫诱抗剂的研发和应用已成为农业研究热点之一。基于相关的文献报道,介绍了植物免疫诱抗剂的种类与作用机理,论述了目前使用量最多、防病增产效果最好的两类植物免疫诱抗剂——寡糖、蛋白多肽在农业生产中的应用现状,并分析该研究领域的发展前景,以期为我国农药的减施增效提供技术支撑,促进我国绿色农业的发展。

关键词：植物免疫诱抗剂寡糖蛋白类激发子超敏蛋白农作物病害绿色防控

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茶树CsbHLH024和CsbHLH133转录因子功能鉴定

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茶叶科学 2022年第3期42卷 347-357页

作者：刘任坚王玉源刘少群舒灿伟孙彬妹郑鹏华南农业大学园艺学院广东广州510642 华南农业大学植物保护学院/广东省微生物信号与作物病害防控重点实验室/群体微生物研究中心广东广州510642

茶树叶片毛状体含有多种次生代谢产物,在茶叶外观质量以及茶树响应生物和非生物胁迫方面起着重要作用。通过双荧光分子互补(BiFC)试验、GUS活性染色试验以及过表达试验对茶树叶片毛状体相关候选基因CsbHLH024和CsbHLH133的功能进行鉴定... 详细信息

茶树叶片毛状体含有多种次生代谢产物,在茶叶外观质量以及茶树响应生物和非生物胁迫方面起着重要作用。通过双荧光分子互补(BiFC)试验、GUS活性染色试验以及过表达试验对茶树叶片毛状体相关候选基因CsbHLH024和CsbHLH133的功能进行鉴定。结果表明,CsbHLH024/CsbHLH133和CsTTG1蛋白在植物中能够相互作用,并且它们的启动子能够在叶片组织中驱动下游基因的表达。进一步将它们分别过表达到野生型拟南芥Col和对应的拟南芥纯合突变体中,发现它们能够影响拟南芥叶片毛状体的形成,恢复突变体的表型,并引起毛状体相关基因表达水平的变化。本研究为进一步揭示茶树叶片毛状体形成的分子调控机制提供理论依据。

关键词：茶树毛状体形成 CsbHLH024 CsbHLH133 分子调控

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茶树R2R3-MYB转录因子CsTT2表达分析及功能初步鉴定

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茶叶科学 2022年第4期42卷 463-476页

作者：王玉源刘任坚刘少群舒灿伟孙彬妹郑鹏华南农业大学园艺学院广东广州510642 华南农业大学植物保护学院/广东省微生物信号与作物病害防控重点实验室/群体微生物研究中心广东广州510642

儿茶素是茶树中特色的次生代谢产物之一,是影响茶叶的品质与风味的主要组分,具有抗氧化、抗病毒、降脂减肥等药理功效。通过系统发育进化树分析、基因表达模式分析和分子生物学试验对茶树儿茶素生物合成相关调控因子CsTT2的功能进行初... 详细信息

儿茶素是茶树中特色的次生代谢产物之一,是影响茶叶的品质与风味的主要组分,具有抗氧化、抗病毒、降脂减肥等药理功效。通过系统发育进化树分析、基因表达模式分析和分子生物学试验对茶树儿茶素生物合成相关调控因子CsTT2的功能进行初步鉴定。结果显示,CsTT2是R2R3-MYB转录因子,与拟南芥中调控次生代谢产物的MYB转录因子同在一个分支。在茶树品种顶芽组织中总儿茶素含量较高,CsTT2和儿茶素生物合成相关基因的表达水平也较高。亚细胞定位、酵母试验和双荧光素酶报告系统试验结果表明,CsTT2定位在细胞核中,其编码的蛋白是具有转录激活能力的调控因子,可以结合儿茶素生物合成关键基因ANR的启动子激活其表达。

关键词：茶树 R2R3-MYB转录因子 CsTT2 儿茶素生物合成

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最短尾短体线虫转录组及潜在效应蛋白分析

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生物技术通报 2023年第3期39卷 254-266页

作者：扈丽丽林柏荣王宏洪陈建松廖金铃卓侃广东省森林培育与保护利用重点实验室广东省林业科学研究院广州510520 华南农业大学植物线虫研究室广州510642 广东省微生物信号与病害防治重点实验室广州510642 广东生态工程职业学院广州510520

最短尾短体线虫(Pratylenchus brachyurus)是一种重要的迁移性内寄生植物病原线虫。对其转录组进行测序和分析,是进一步研究其寄生特点和致病机理的重要基础。通过转录组测序和分析,得到72516个unigenes,其中38266个(52.76%)unigenes注... 详细信息

最短尾短体线虫(Pratylenchus brachyurus)是一种重要的迁移性内寄生植物病原线虫。对其转录组进行测序和分析,是进一步研究其寄生特点和致病机理的重要基础。通过转录组测序和分析,得到72516个unigenes,其中38266个(52.76%)unigenes注释到7个蛋白质数据库中。Cazyme分析预测到541条具有植物/真菌细胞壁降解活性的蛋白质序列,分别属于GH5、GH30、GH53、GH28、PL3、GH16、GH18和GH20家族。转录组中有56个蛋白序列与秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)的RNAi通路蛋白具有同源性。鉴定到51个与已知植物寄生线虫效应蛋白具有同源性的蛋白序列,检测了9个潜在效应蛋白在抑制植物防卫反应中的作用,其中7个能够抑制由Gpa2/Rbp-1引起的细胞程序性死亡反应。研究结果表明最短尾短体线虫转录组与同属的短体线虫基因分布特点相似,其潜在效应蛋白具有抑制植物防卫反应的特点。

关键词：最短尾短体线虫转录组效应蛋白细胞程序性死亡

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核转运蛋白SsKapM涉及调控甘蔗鞭孢堆黑粉菌的菌丝生长

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植物病理学报 2022年第6期52卷 913-926页

作者：甘永健陈金辉崔国兵唐金阳邓懿祯华南农业大学植物保护学院/广东省微生物信号与病害防控重点实验室广州510642 华南农业大学群体微生物研究中心广州510642

核转运蛋白是真核生物中负责大分子物质进出核孔的重要载体,承担着维持正常生命活动的任务。本研究通过序列同源比对鉴定了甘蔗鞭孢堆黑粉菌核转运蛋白编码基因,根据注释命名为SsKapM。使用同源重组方法对SsKapM进行敲除后,发现ΔSsKap... 详细信息

核转运蛋白是真核生物中负责大分子物质进出核孔的重要载体,承担着维持正常生命活动的任务。本研究通过序列同源比对鉴定了甘蔗鞭孢堆黑粉菌核转运蛋白编码基因,根据注释命名为SsKapM。使用同源重组方法对SsKapM进行敲除后,发现ΔSsKapM突变体担孢子的生长速率、适宜的生长温度、有性配合/菌丝生长等方面均发生改变。研究中还发现SsKapM缺失会导致双核菌丝体对高浓度磷酸盐敏感性下降。同时,通过转录组数据分析探究SsKapM的功能机制。结果表明SsKapM调控热激反应、磷酸盐信号与转运通路等基因的表达。这一发现将为甘蔗鞭孢堆黑粉菌的防治提供新的思路。

关键词：核转运蛋白甘蔗鞭孢堆黑粉菌有性配合/菌丝生长担孢子双核菌丝体最适生长温度磷酸盐

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广东省木榄炭疽病病原菌鉴定及其拮抗细菌筛选

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林业科学研究 2025年第2期38卷 185-195页

作者：袁永强周舜米仁军潘继东邓小大辛琨蔡书静王福生饶雪琴 Waqar Ahmed 王新荣华南农业大学植物保护学院广东省微生物信号与作物病害防控重点实验室广东广州510642 湖南省辰溪县林业局湖南怀化419500 中国林业科学研究院热带林业研究所广东广州510520

[目的]]明确引起广东省湛江市木榄炭疽病的病原菌,揭示病原菌生物学特性,并筛选拮抗菌,为该病的防控提供依据。[方法]采用组织分离法和单孢分离法进行病原分离纯化,通过形态学和多基因系统发育分析(ITS-TUB2-ACT-GAPDH)相结合的方法对... 详细信息

[目的]]明确引起广东省湛江市木榄炭疽病的病原菌,揭示病原菌生物学特性,并筛选拮抗菌,为该病的防控提供依据。[方法]采用组织分离法和单孢分离法进行病原分离纯化,通过形态学和多基因系统发育分析(ITS-TUB2-ACT-GAPDH)相结合的方法对分离菌株进行鉴定,通过人工接种测定其致病性。用菌丝生长速率法和产孢量法研究其生长特性;利用平板对峙法进行拮抗菌的筛选。[结果]28℃条件下,木榄炭疽病病原菌菌株MLYB1A5在PDA培养基上菌落为圆形,气生菌丝绒毛状,中间灰色,边缘白色,菌落背面为灰白色,子囊壳棕色,分生孢子梗透明,光滑,有隔膜,分支,12~15 d开始产孢,分生孢子单细胞,椭圆形,两端钝圆或一端钝圆一端稍尖。分生孢子平均大小为(16.48±2.13)×(4.82±1.03)μm,(n=100)。根据形态特征和多基因系统发育分析将分离菌株鉴定为果生刺盘胞(Colletotrichum fructicola)。人工接种分离菌株,可以引起木榄叶片发病,症状与林间一致。从发病部位同样可以分离获得接种菌株。果生刺盘孢菌株MLYB1A5最适生长温度为28℃,最适pH值范围为4~9,最适产孢温度为30℃,平均产孢量为(23.54±0.53)×10^(6)个·mL^(-1),温度高于30℃时,产孢量急剧下降。果生刺盘孢菌株MLYB1A5最适碳源为蔗糖和可溶性淀粉,最适氮源为酵母粉和牛肉膏,最适培养基为PDA培养基。最适产孢碳源为果糖和麦芽糖。解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)对果生刺盘孢菌株MLYB1A5的菌丝生长抑制率达到(74.69±3.14)%。[结论]首次明确了果生刺盘胞是引起广东省湛江市木榄炭疽病的致病菌。该菌最适生长温度为28℃,对pH适应范围较广。首次发现解淀粉芽孢杆菌对果生刺盘孢菌株MLYB1A5的拮抗效果较好。

关键词：木榄炭疽病病原菌鉴定多基因系统分析生物学特性拮抗菌

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基于CRISPR/Cas9系统的番茄LeMYB330突变体制作及突变位点分析

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分子植物育种 2022年第23期20卷 7785-7795页

作者：康志强邓小大袁永强蔡书静郑礼军赵利锋叶雯华王燕王新荣华南农业大学植物保护学院广东省微生物信号与作物病害防控重点实验室广州510642

植物MYB转录因子在植物防卫反应过程中发挥重要作用,番茄LeMYB330是与根结线虫效应蛋白MiPDCD6互作的靶标蛋白。本研究利用在线软件CRISPR-GE (http://***/)设计了番茄LeMYB330基因编辑双靶点,在番茄LeMYB330基因第3外显子区域找到彼此... 详细信息

植物MYB转录因子在植物防卫反应过程中发挥重要作用,番茄LeMYB330是与根结线虫效应蛋白MiPDCD6互作的靶标蛋白。本研究利用在线软件CRISPR-GE (http://***/)设计了番茄LeMYB330基因编辑双靶点,在番茄LeMYB330基因第3外显子区域找到彼此相距124 bp的2个靶点,分别为TG1:5’-ATGCAACAGTGGTACAACTGAGG-3’和TG2:5’-GGTGGTCAAGAAGTTGTATGAGG-3’。将靶点T1和靶点T2的sg RNA表达盒进行Golden Gate克隆连接到pYLCRISPR/Cas9Pubi-H双元表达载体,成功获得CRISPR/Cas9重组双元载体(pCas9-MYB330T1T2)。利用农杆菌介导的遗传转化将重组载体转入‘新金丰一号’番茄愈伤组织,经潮霉素抗性筛选获得共计50株CRISPR/Cas9突变番茄植株。番茄转基因后代测序结果表明,有3株阳性植株发生突变,由此成功构建了番茄LeMYB330突变体。试验结果可为加快番茄LeMYB330功能基因资源的开发利用提供有力的理论与方法支持。

关键词：番茄 LeMYB330基因 CRISPR/Cas9

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