检索结果-内蒙古大学图书馆

白木香内生真菌多节孢Nodulisporium sp. A4的化学成分研究

中国中药杂志 2011年第23期36卷 3276-3280页

作者：李冬利吴正超陈玉婵陶美华章卫民广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地广东广州510070 中国科学院南海海洋研究所广东广州510301

目的:研究来源于药用植物白木香、具有抗肿瘤活性的内生真菌多节孢Nodulisporium sp.A4的化学成分。方法:采用马铃薯葡萄糖(PD)液体培养基培养、乙酸乙酯萃取得到内生真菌A4的发酵液和菌丝体粗提物,采用正相硅胶柱色谱、反相硅胶柱色谱... 详细信息

目的:研究来源于药用植物白木香、具有抗肿瘤活性的内生真菌多节孢Nodulisporium sp.A4的化学成分。方法:采用马铃薯葡萄糖(PD)液体培养基培养、乙酸乙酯萃取得到内生真菌A4的发酵液和菌丝体粗提物,采用正相硅胶柱色谱、反相硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱色谱、制备薄层色谱和重结晶等方法对粗提物进行分离纯化,运用现代波谱技术(NMR,MS)结合文献对照鉴定化合物结构。采用MTT法测定化合物的体外抗肿瘤活性。结果:从内生真菌A4的发酵液中分离获得7个化合物,分别为5-methyl-2-vinyltetrahydrofuran-3-ol(1),6-methyl-2-(5-methyl-5-vinyltetrahydrofuran-2-yl)hept-5-en-2-ol(2),6α-hydroxycyclonerolidol(3),rel-(1S,4S,5R,7R,10R)-10-desmethyl-1-methyl-11-eudesmene(4),酪醇(5),8-甲氧基-1-萘酚(6),1,8-二甲氧基萘(7)。从内生真菌A4的菌丝体中分离获得3个化合物,分别为麦角甾醇(8),过氧化麦角甾醇(9),啤酒甾醇(10)。药理活性评价结果表明在作用浓度为100 mg.L-1时,化合物3和4对肿瘤细胞SF-268和NCI-H460的抑制率分别为89.1%,44.2%和82.3%,79.8%。结论:化合物1为新的天然产物,化合物2,3,7,10为首次从该属真菌中分离得到,化合物3和4对肿瘤细胞SF-268和NCI-H460的增殖具有一定的抑制作用。

关键词：内生真菌化学成分白木香多节孢

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针层孔菌(Phellinus sp.)P11提取物体外抗肿瘤活性研究

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中药材 2011年第8期34卷 1260-1263页

作者：陶美华陈玉婵李冬利章卫民广东省菌种保藏与应用重点实验室/广东省微生物应用新技术公共实验室/广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地/广东省微生物研究所广东广州510070

目的:对针层孔菌(Phellinus sp.)P11水提物及醇提物的不同溶剂萃取部位进行体外抗肿瘤活性评价。方法:针层孔菌P11子实体经醇提、水提获得提取物,乙醇提取物经氯仿、乙酸乙酯、正丁醇分步萃取获得萃取物。采用MTT法测定各样品对肿瘤细... 详细信息

目的:对针层孔菌(Phellinus sp.)P11水提物及醇提物的不同溶剂萃取部位进行体外抗肿瘤活性评价。方法:针层孔菌P11子实体经醇提、水提获得提取物,乙醇提取物经氯仿、乙酸乙酯、正丁醇分步萃取获得萃取物。采用MTT法测定各样品对肿瘤细胞的抑制率。结果:针层孔菌P11的乙醇提取物抗肿瘤活性明显优于水提取物,对中枢神经系统癌细胞SF-268、肺癌细胞NCI-H460及乳腺癌细胞MCF-7的抑制率分别达到86.90%、86.25%、95.15%。乙醇提取物分步萃取获得的乙酸乙酯部位活性最好,对以上3种肿瘤细胞的IC50分别达到65.3、110.9、56.7μg/mL。

关键词：针层孔菌提取物萃取部位抗肿瘤活性

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海洋真菌汤姆青霉FS77的抗菌活性研究

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中药材 2013年第1期36卷 99-101页

作者：李浩华王磊潘清灵章卫民广东省微生物研究所/广东省菌种保藏与应用重点实验室/广东省微生物应用新技术公共实验室/广东省华南应用微生物重点实验室--省部共建国家重点实验室培育基地广东广州510070

目的:研究海洋真菌汤姆青霉Penicillium thomii FS77发酵提取物对细菌和植物病原真菌的抗菌活性,为进一步开发抗菌活性物质奠定基础。方法:采用滤纸片法、生长速率法分别测定海洋真菌汤姆青霉FS77的发酵液和菌丝体提取物对金黄色葡萄球... 详细信息

目的:研究海洋真菌汤姆青霉Penicillium thomii FS77发酵提取物对细菌和植物病原真菌的抗菌活性,为进一步开发抗菌活性物质奠定基础。方法:采用滤纸片法、生长速率法分别测定海洋真菌汤姆青霉FS77的发酵液和菌丝体提取物对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、大肠杆菌(Escherichia coli)和植物病原真菌链格孢(Alternaria alternata)、胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)、柱枝双孢霉(Cylindrocladium scoparium)的抑制作用;采用连续稀释法测定这2种提取物对供试菌株的最低抑制浓度。结果:汤姆青霉FS77提取物对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌具有抑菌活性,其中发酵液和菌丝体提取物对枯草芽孢杆菌的抑制效果最好,抑菌圈直径均为14.35、10.67 mm,最低抑菌浓度分别为1.56 mg/mL;对植物病原真菌链格孢、胶孢炭疽菌也有较好的抑制效果,抑制率均达50%以上,最低抑菌浓度均为3.12mg/mL。结论:海洋真菌汤姆青霉FS77具有潜在的应用价值,其抗菌活性物质值得进一步深入研究。

关键词：海洋真菌汤姆青霉提取物抗细菌抗植物病原真菌南海

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阪崎肠杆菌α-葡萄糖苷酶的原核表达及其多克隆抗体制备

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食品工业科技 2013年第2期34卷 198-201页

作者：徐晓可吴清平张淑红张菊梅李程思郭伟鹏广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地广东省微生物研究所广东广州510070

以阪崎肠杆菌(ATCC29544)的基因组DNA为模板通过PCR扩增出α-葡萄糖苷酶基因malA,将其克隆入表达载体PET22b(+),构建重组表达质粒pET22b-malA。将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),进行优化表达。采用尿素洗涤包涵体并切胶回收纯化融... 详细信息

以阪崎肠杆菌(ATCC29544)的基因组DNA为模板通过PCR扩增出α-葡萄糖苷酶基因malA,将其克隆入表达载体PET22b(+),构建重组表达质粒pET22b-malA。将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),进行优化表达。采用尿素洗涤包涵体并切胶回收纯化融合蛋白,然后再免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。通过ELISA测定效价,并通过免疫荧光法鉴定与菌体表面结合能力。结果表明克隆的目的基因全长1677bp,与Genebank的malA比较具有100%的同源性。带His标签的融合蛋白以包涵体形式表达,其最优化的表达条件是37℃下用0.8mmol/L IPTG诱导5h。ELISA测定效价为5×105;免疫荧光法鉴定表明多克隆抗体能与阪崎肠杆菌表面结合。本实验为阪崎肠杆菌的免疫磁珠检测奠定了基础。

关键词：阪崎肠杆菌 α-葡萄糖苷酶克隆原核表达多克隆抗体

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矿泉水臭氧消毒中溴酸盐的形成与控制

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食品与生物技术学报 2013年第12期32卷 1298-1302页

作者：张永清吴清平张菊梅杨秀华广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东广州510070

为控制矿泉水中溴酸盐含量,采用改变臭氧浓度的方法,对添加溴离子的矿泉水、超纯水和自来水分别进行臭氧氧化5 min,观察臭氧氧化过程中臭氧、溴离子以及水质对溴酸盐生成的影响;同时利用向自来水中添加一定浓度溴离子的方法,研究CT值(Oz... 详细信息

为控制矿泉水中溴酸盐含量,采用改变臭氧浓度的方法,对添加溴离子的矿泉水、超纯水和自来水分别进行臭氧氧化5 min,观察臭氧氧化过程中臭氧、溴离子以及水质对溴酸盐生成的影响;同时利用向自来水中添加一定浓度溴离子的方法,研究CT值(Ozone Concentration×Contact Time,CT)对溴酸盐生成的影响。结果表明,随着臭氧浓度和溴离子浓度的增加,溴酸盐生成量增加。当臭氧质量浓度≥0.4 mg/L,添加相同浓度的溴离子时,矿泉水中生成的溴酸盐量大于自来水和超纯水中溴酸盐量。矿泉水不同,添加相同浓度的溴离子,生成的溴酸盐量也不同,但当臭氧质量浓度≥0.4 mg/L时,溴酸盐量均大于10μg/L。CT值增大导致溴酸盐生成量大幅增加。因此,可以通过降低臭氧浓度和溴离子浓度的方法,减少臭氧消毒中溴酸盐的生成量。

关键词：矿泉水臭氧溴离子溴酸盐

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扩增型和非扩增型CRISPR/Cas系统在食源性致病菌快速检测领域应用的研究进展

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食品科学 2023年第5期44卷 257-265页

作者：徐文星邵艳娜吴清平王涓张菊梅丁郁广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州510070 暨南大学理工学院广东广州510632 华南农业大学食品学院广东广州510642

食源性致病菌引起的食品安全事件频发已对公众健康和社会经济造成巨大的影响,构建针对其快速、高效的检测方法是保障食品安全的重要手段。成簇的间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR... 详细信息

食源性致病菌引起的食品安全事件频发已对公众健康和社会经济造成巨大的影响,构建针对其快速、高效的检测方法是保障食品安全的重要手段。成簇的间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)及其相关蛋白(CRISPR-associated protein,Cas)组成的CRISPR/Cas是广泛存在于细菌和古细菌中的一种免疫系统,可以有效地识别并切割外源核酸。因此,可以利用CRISPR/Cas系统这一对外源核酸的识别及切割活性实现对食源性致病菌的快速高效检测。本文详细介绍基于核酸扩增和免核酸扩增的两种CRISPR/Cas系统,综述其在对各种食源性致病菌检测中的应用,讨论它们的优势、局限性以及未来的发展趋势,旨在为建立更高效的食源性致病菌检测方法提供技术参考,以期更有效地减少食源性致病菌造成的食品安全问题。

关键词： CRISPR/Cas 食源性致病菌等温扩增非扩增核酸检测

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深海真菌Penicillium herquei FS83次生代谢产物研究

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天然产物研究与开发 2016年第3期28卷 327-330,381页

作者：李浩华潘清灵陈玉婵李赛妮谭国慧叶伟刘洪新孙章华章卫民广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广州510070

利用正相硅胶柱、反相硅胶柱、凝胶柱、薄层层析以及高效液相色谱法等色谱技术从深海真菌Penicillium herquei FS83的液体发酵产物中分离得到5个化合物,通过波谱数据分析结合文献对照,分别鉴定为peniherin A(1)、sclerodin(2)、对羟基... 详细信息

利用正相硅胶柱、反相硅胶柱、凝胶柱、薄层层析以及高效液相色谱法等色谱技术从深海真菌Penicillium herquei FS83的液体发酵产物中分离得到5个化合物,通过波谱数据分析结合文献对照,分别鉴定为peniherin A(1)、sclerodin(2)、对羟基苯乙酸甲酯(3)、对羟基苯乙酮(4)、(R)-甲羟戊酸内酯(5)。其中化合物1为新化合物,化合物2为首次从该属真菌中分离得到。生物活性实验显示,化合物1无明显细胞毒活性及抑菌活性。

关键词： Penicillium herquei 深海真菌次生代谢产物异香豆素

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Phomopsis tersa FS441聚酮杂萜类化合物生物合成基因启动子的鉴定

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生物技术通报 2024年第12期40卷 248-255页

作者：刘玉萍张维阳章卫民叶伟李冬利五邑大学药学与食品工程学院江门529020 广东省科学院微生物研究所、华南应用微生物国家重点实验室、广东省菌种保藏与应用重点实验室广州510070

【目的】Phomeroids为分离自海洋真菌Phomopsis tersa FS441的聚酮杂萜类新骨架化合物,具有良好的抗肿瘤活性。为便于后期对phomeroids生物合成关键基因萜类环化酶编码基因ctg1509和P450单加氧酶编码基因ctg1511进行转录调控,对其启动... 详细信息

【目的】Phomeroids为分离自海洋真菌Phomopsis tersa FS441的聚酮杂萜类新骨架化合物,具有良好的抗肿瘤活性。为便于后期对phomeroids生物合成关键基因萜类环化酶编码基因ctg1509和P450单加氧酶编码基因ctg1511进行转录调控,对其启动子功能进行鉴定。【方法】对海洋真菌*** FS441中ctg1509、ctg1511基因启动子p1509、p1511进行克隆,用荧光素酶报告基因载体分析启动子的转录活性,并进一步采用点板实验和生长曲线鉴定其在大肠杆菌中启动氨苄青霉素抗性基因转录的功能,采用PlantCARE数据库分析启动子的调控元件。【结果】p1509的启动子转录活性最强,其活性远强于阳性对照PgpdA启动子,p1509和p1511能在大肠杆菌中启动氨苄青霉素抗性基因的转录。p1509、p1511启动子区域除了含有CAAT-box、TATA-box核心元件,还有参与低温响应、光响应等顺式调控元件。【结论】验证了启动子p1509和p1511的功能。发掘了一个转录活性强于阳性对照的新型强启动子p1509,该启动子含有丰富的调控元件。

关键词：生物合成基因启动子转录活性 Phomopsis tersa 聚酮杂萜元件分析

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冬虫夏草促繁地土壤真菌种群结构的变性梯度凝胶电泳技术分析

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中草药 2013年第4期44卷 478-481页

作者：李挺宋斌王超群李泰辉广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地广东广州510070

目的采用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术对冬虫夏草促繁地土壤真菌多样性进行初步研究。方法利用PCR方法选择特异性引物ITS3-GC和ITS4扩增ITS rDNA基因的ITS2片段,结合DGGE分离技术,并借助生物信息学软件进行分析。结果所测的土壤样品中真... 详细信息

目的采用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术对冬虫夏草促繁地土壤真菌多样性进行初步研究。方法利用PCR方法选择特异性引物ITS3-GC和ITS4扩增ITS rDNA基因的ITS2片段,结合DGGE分离技术,并借助生物信息学软件进行分析。结果所测的土壤样品中真菌ITS2基因序列与GenBank已报道的丝盖伞属Inocybe(Fr.)Fr.、口蘑属Tricholoma(Fr.)Staude、根肿黑粉菌属Entorrhiza ***及未确定的子囊菌Ascomycota、土壤真菌等的序列相似性较高,土壤真菌种群结构相似性仅有19.4%～50.1%。结论冬虫夏草促繁地土壤真菌多样性丰富。

关键词：冬虫夏草土壤真菌多样性变性梯度凝胶电泳技术

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用于PCR扩增的细菌DNA提取方法比较

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华南农业大学学报 2013年第3期34卷 439-442页

作者：冯广达陈美标羊宋贞朱红惠广东省微生物研究所/广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地/广东省菌种保藏与应用重点实验室/广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070

以14个属的革兰阴性菌和阳性菌为研究对象,采用16S rRNA基因PCR扩增对4种细菌DNA提取法进行了比较.结果表明,对细菌DNA的提取效果排序,依次为冻融法、煮沸法、碱解法、ROSE法.冻融法效果最好,具有成本低、省时省力、无污染等优点,但仍... 详细信息

以14个属的革兰阴性菌和阳性菌为研究对象,采用16S rRNA基因PCR扩增对4种细菌DNA提取法进行了比较.结果表明,对细菌DNA的提取效果排序,依次为冻融法、煮沸法、碱解法、ROSE法.冻融法效果最好,具有成本低、省时省力、无污染等优点,但仍存在少数革兰阳性菌DNA提取失败的现象.因此,在菌株较多的情况下可先采用冻融法提取细菌DNA,对少数提取失败的菌株,弃冻融法得到的上清液,再以SDS法、CTAB法或DNA试剂盒的提取进行补充.采用该操作流程既能节省成本和时间,又减少了提取过程中有机废弃物的产生.

关键词： DNA提取冻融法 16S rRNA基因 PCR

来源：评论

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