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中国民族民间医药 2014年第8期23卷 36-38页

作者：李浩华章卫民陈玉婵高晓霞严寒静广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 广东药学院广东广州51000

目的:研究白木香果皮不同溶剂提取物清除DPPH自由基的能力及对酪氨酸酶活性的抑制作用,为白木香果皮的应用和开发提供理论依据。方法:以水、乙醇、丙酮、乙酸乙酯和石油醚5种极性不同的溶剂,采用回流、超声、冷浸方法提取白木香果皮,采... 详细信息

目的:研究白木香果皮不同溶剂提取物清除DPPH自由基的能力及对酪氨酸酶活性的抑制作用,为白木香果皮的应用和开发提供理论依据。方法:以水、乙醇、丙酮、乙酸乙酯和石油醚5种极性不同的溶剂,采用回流、超声、冷浸方法提取白木香果皮,采用DPPH法和L-DOPA法分别测定提取物对DPPH自由基的清除能力和酪氨酸酶活性的抑制作用。结果:极性较大的水、乙醇提取物对DPPH自由基均有显著的清除能力,其IC50值分别为26.9、19.9μg/ml;而极性中等的丙酮、乙酸乙酯提取物则对酪氨酸酶活性具有较为明显的抑制作用,其IC50值分别为93.2、122.9μg/ml。结论:白木香果皮提取物具有开发天然有效的自由基清除剂和酪氨酸酶抑制剂的潜力。

关键词：白木香果皮提取物酪氨酸酶

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食源性小肠结肠炎耶尔森氏菌生物学特性和分子分型研究进展

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食品科学技术学报 2014年第4期32卷 1-7页

作者：吴清平胡惠娟张菊梅广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室/广东省菌种保藏与应用重点实验室/广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 华南理工大学生物科学与工程学院广东广州510006

小肠结肠炎耶尔森氏菌(Yersinia enterocolitica)是一种重要的嗜冷肠道致病菌,研究表明***血清型有60多种,我国致病性菌株生物/血清型以3/O:3和2/O:9型为主;另外***具有1A、1B、2、3、4、5共6个生物型,除了1A型可能具有潜在致病性外,其... 详细信息

小肠结肠炎耶尔森氏菌(Yersinia enterocolitica)是一种重要的嗜冷肠道致病菌,研究表明***血清型有60多种,我国致病性菌株生物/血清型以3/O:3和2/O:9型为主;另外***具有1A、1B、2、3、4、5共6个生物型,除了1A型可能具有潜在致病性外,其他5个已确定具有致病性,且1B为高致病性菌株;主要毒力因子有ail、ystA、ystB、yadA和virF,常用来判断小肠结肠炎耶尔森菌的致病性;***对氨苄西林和一代头孢类抗生素天然耐药,对其他抗生素有不同程度耐药性,并且许多菌株具有多重耐药性.常用的分子分型方法有脉冲场凝胶电泳、扩增基因重复序列、多位点序列分型等,其中具有操作简便和多态性高的ERIC-PCR在***分型中也将发挥较好作用.

关键词：小肠结肠炎耶尔森氏菌生物特性分子分型

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6株大型真菌发酵提取物的抑菌及细胞毒活性研究

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中国民族民间医药 2014年第9期23卷 17-19,21页

作者：陈玉婵吕华明谭国慧李浩华李赛妮章卫民广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 大理学院农学与生物科学学院云南大理671003

目的:对6株广东大型真菌红汁乳菇(Lactarius hatsudake)G027、鸟巢菌(Cyathus sp.)G026、革耳菌(Panus sp.)G028、光亮小红孔菌(Pycnoporellus fulgens)G033、菌核斗菇(Lentinus tuber-regium)G025和有柄灵芝(Ganoderma gibbosum)G036的发酵提取物进行抑菌和细胞毒活性研究。方法:分别采用滤纸片扩散法和SRB法对这6株大型真菌的发酵提取物进行抑菌和细胞毒活性研究。结果:菌株G027、G028、G026和G033对金黄色葡萄球菌具有显著的抑菌活性,其抑菌圈直径分别为25.00、18.23、14.96和14.30mm;6株大型真菌对神经胶质瘤细胞SF-268、乳腺癌细胞MCF-7、大细胞肺癌细胞NCI-H460和人肝癌细胞HepG-2均有不同程度的抑制作用,其中菌株G027的活性最为显著,对这4种肿瘤细胞株的IC50值分别为2.84、6.44、11.88和2.96μg/mL。结论:6株大型真菌具有抑菌和(或)细胞毒活性,值得进一步深入研究。

关键词：大型真菌发酵提取物抑菌细胞毒

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广东肇庆星湖湿地放线菌多样性研究

广东肇庆星湖湿地放线菌多样性研究

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第六届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会

作者：薛冬赵国振姚青朱红惠广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州 510070 安徽农业大学生命科学学院安徽合肥 210095 广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州 510070 华南农业大学园艺学院广东广州 510642

微生物对湿地生态系统中的物质转化和能量流动起着重要作用,是湿地生态系统中不可缺少的重要成员.我国华南地区分布着丰富的淡水湿地资源,然而有关淡水湿地环境放线菌资源开发、利用和生态学研究的报道较少.本研究,应用PCR-DGGE技术对...

微生物对湿地生态系统中的物质转化和能量流动起着重要作用,是湿地生态系统中不可缺少的重要成员.我国华南地区分布着丰富的淡水湿地资源,然而有关淡水湿地环境放线菌资源开发、利用和生态学研究的报道较少.本研究,应用PCR-DGGE技术对星湖湿地10个样点放线菌群落进行研究,根据DGGE图谱及克隆测序结果对其物种多样性进行分析.通过PCR-DGGE指纹图谱发现各样品放线菌物种丰富度(S)、多样性指数(H')和均匀度指数(J')均有所不同.其中,8号样品的多样性指数最高,指数为2.66,2号样品最低,指数为1.81;丰富度指数8号样品最高为24,6号样品最低为11;均匀度1号样品最高为0.97,2号样品均匀度最低为0.71.

关键词：

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10株白玉菇菌株的品比试验

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中国食用菌 2014年第4期33卷 40-42页

作者：黄浩邱成书宋斌叶运寿广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地广东广州510070 华南理工大学生物科学与工程学院广东广州510006 广东星河生物科技股份有限公司广东东莞523722

对10株白玉菇菌株进行了品比试验。结果显示,在本试验条件下,MYSYB菌株的菌丝生长速度最快、生物学效率最高、生长周期最短,综合性状良好。

关键词：白玉菇菌株栽培技术

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空肠弯曲菌分离株ERIC-PCR分型和生化分型的比较研究

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现代食品科技 2013年第8期29卷 1843-1850页

作者：郑扬云吴清平吴克刚吴葵张菊梅广东工业大学轻工化工学院广东广州510006 广东省微生物研究所广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 中国科学院南海海洋研究所广东广州510632

建立空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)的ERIC-PCR分子生物学分型技术,比较ERIC-PCR分型和生化分型的分型效果。从菌株TY1273出发,运用L16(54)正交试验,对Mg2+、dNTPs、引物和TaqDNA聚合酶浓度等因素在较大范围水平内进行反应体系条件摸... 详细信息

建立空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)的ERIC-PCR分子生物学分型技术,比较ERIC-PCR分型和生化分型的分型效果。从菌株TY1273出发,运用L16(54)正交试验,对Mg2+、dNTPs、引物和TaqDNA聚合酶浓度等因素在较大范围水平内进行反应体系条件摸索,得到一个初步的优化体系;在此基础之上进行单因素的进一步小范围水平内的微调优化,得到最终的优化体系;最后以优化的ERIC-PCR方法对24株***分离株分型;同时根据API Campy生化反应结果进行生化分型,比较ERIC-PCR分子分型方法和生化分型方法。结果显示ERIC-PCR方法将24株菌扩增均得到大小在100 bp-3000 bp之间的条带,并可将其分为22个基因型,分辨系数为0.92,具有较高的分辨力。生化分型将24株菌分为19个生化型,显示了菌株基因的多样性。表明ERIC-PCR技术比生化分型能更好的体现菌株的遗传多样性,且具有简便和分辨力搞等优点,可用于***的多样性研究。

关键词：空肠弯曲菌 ERIC-PCR 分子分型生化分型

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南方食品中沙门氏菌污染调查及分型

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微生物学报 2013年第12期53卷 1326-1333页

作者：陈玲张菊梅杨小鹃吴清平徐明芳广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广州510070 暨南大学生命科学技术学院广州510632

【目的】系统调查我国南方代表性地区食品中沙门氏菌污染情况,并对分离株进行血清分型和肠杆菌基因间重复共有序列聚合酶链式反应(Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus Polymerase Chain Reaction,ERIC-PCR)分型研究,为溯... 详细信息

【目的】系统调查我国南方代表性地区食品中沙门氏菌污染情况,并对分离株进行血清分型和肠杆菌基因间重复共有序列聚合酶链式反应(Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus Polymerase Chain Reaction,ERIC-PCR)分型研究,为溯源和控制食品中沙门氏菌的污染提供数据。【方法】采用定性法和最大可能数(Most Probable Number,MPN)法对七大类食品(肉与肉制品、水产品、速冻食品、熟食、蔬菜、乳制品和食用菌)中的沙门氏菌进行检测。利用血清分型和分子分型确定南方沙门氏菌血清型的分布和优势血清型,研究分离株的遗传多样性。【结果】从400份食品样品共检出75份沙门氏菌阳性样品,污染率为18.8%(75/400)。其中,97.3%(73/75)的阳性样品污染水平均低于10 MPN/g。对93株分离株进行血清分型,分属9个群、29种血清型。优势血清型为德尔卑沙门氏菌(Salmonella Derby)和鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella Typhimurium)。利用ERIC-PCR对96株沙门氏菌(包括93株分离株和3株标准株)进行分型研究发现,在相似系数为0.75时可分为15个聚类簇,56种型别,分离株的基因型别呈现多样性。【结论】南方食品中沙门氏菌的污染率较高,但污染水平低。***和***为优势血清型。初步建立了沙门氏菌ERIC-PCR指纹图谱数据库,南方食品中沙门氏菌的血清型和基因型呈现多样性。

关键词：沙门氏菌污染调查血清分型肠杆菌基因间重复共有序列聚合酶链式反应

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白木香果皮化学成分及其生物活性研究

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中草药 2013年第10期44卷 1248-1252页

作者：张兴陶美华陈玉婵高晓霞谭毓治章卫民广东药学院药科学院广东广州510006 广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地广东广州510070

目的研究白木香Aquilaria sinensis果皮的化学成分及其细胞毒性与抗菌活性。方法采用正、反相硅胶柱、凝胶柱和薄层制备等色谱技术和重结晶进行分离纯化,通过波谱分析进行结构鉴定;以神经胶质瘤细胞SF-268、乳腺癌细胞MCF-7、大细胞肺... 详细信息

目的研究白木香Aquilaria sinensis果皮的化学成分及其细胞毒性与抗菌活性。方法采用正、反相硅胶柱、凝胶柱和薄层制备等色谱技术和重结晶进行分离纯化,通过波谱分析进行结构鉴定;以神经胶质瘤细胞SF-268、乳腺癌细胞MCF-7、大细胞肺癌细胞NCI-H460、肝癌细胞HepG-2为供试细胞株,采用SRB染色法对化合物进行体外细胞毒活性研究;以金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为供试菌株,采用刃天青染色法对化合物进行体外抗菌活性研究。结果从白木香果皮中分离到10个化合物,经波谱数据分析分别鉴定为isorhamnetin 3-O-(6″-O-(Z)-p-coumaroyl)-β-D-glucopyranoside(1)、buddlenoid A(2)、7-甲氧基-4′-羟基异黄酮(3)、木犀草素(4)、反式对香豆酸乙酯(5)、木香烃内酯(6)、表木栓醇(7)、豆甾醇(8)、对羟基苯甲酸甲酯(9)、邻苯二酚(10)。结论化合物1～3、5、6、9、10为首次从该植物中分离得到,化合物1～3、5、6为首次从沉香属植物中分离得到;其中化合物6对上述4种肿瘤细胞株表现出较好的抑制作用,化合物1、4对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌具有一定的抗菌活性。

关键词：白木香 7-甲氧基-4′-羟基异黄酮木香烃内酯细胞毒活性抗菌活性

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食品污染克罗诺杆菌(阪崎肠杆菌)的分离及鉴定

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微生物学报 2013年第5期53卷 429-436页

作者：董晓晖李程思吴清平张菊梅莫树平郭伟鹏杨小鹃徐晓可广东省微生物研究所广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广州510070 中国科学院南海海洋研究所广州510301 中国科学院大学北京100049

【目的】对300份奶粉样品和50份非奶粉类食品中克罗诺杆菌的污染情况做定量检测,并对分离得到的克罗诺杆菌进行鉴定。【方法】通过分子方法和9管法对奶粉和其他食品中克罗诺杆菌的污染情况做定量检测;通过吲哚产生、丙二酸盐利用、卫矛... 详细信息

【目的】对300份奶粉样品和50份非奶粉类食品中克罗诺杆菌的污染情况做定量检测,并对分离得到的克罗诺杆菌进行鉴定。【方法】通过分子方法和9管法对奶粉和其他食品中克罗诺杆菌的污染情况做定量检测;通过吲哚产生、丙二酸盐利用、卫矛醇、肌醇、松三糖和松二糖发酵产酸等六种生化试验对分离株进行鉴定;同时对分离株的16S rRNA基因序列进行同源性分析,通过N-J(Neighbour-Joining)法构建系统发育树。【结果】定量检测结果表明,350份样品中有23份样品分离出克罗诺杆菌,共分离到24株克罗诺杆菌,检出率为6.6%;23份受污染样品中有4个样品的克罗诺杆菌大于100 MPN/100g;24株克罗诺杆菌被鉴定到种或亚种,其中19株为阪崎克罗诺杆菌(Cronobacter sakazakii);2株为丙二酸盐克罗诺杆菌(***);2株为都柏林克罗诺杆菌奶粉亚种(*** ***);1株为莫金斯克罗诺杆菌(***)。【结论】分子方法和9管法联用适合污染率低而定量检测要求高的克罗诺杆菌的奶粉调查;采用生化和分子生物学方法将24株分离株鉴定到种或亚种,其中阪崎克罗诺杆菌为优势种;奶粉中克罗诺杆菌的污染问题对婴幼儿安全存在隐患,应引起消费者和有关部门的重视。

关键词：克罗诺杆菌(阪崎肠杆菌) 生化谱 16S rRNA基因系统发育树

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吲哚酚显色底物的合成及其在微生物检测中的应用研究进展

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化学通报 2013年第7期76卷 580-589页

作者：吴清平韦献虎张菊梅郭伟鹏广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东省华南应用微生物重点实验室--省部共建国家重点实验室培育基地广州510070 中国科学院广州化学研究所广州510650 中国科学院大学北京100049

吲哚酚显色底物是由作为产色原的吲哚酚或其取代物与酶底物间接缩合而成,其合成主要包括中间体乙酸1-乙酰基-吲哚-3-基酯的合成及其与酶底物的衍生物缩合两部分。中间体可以通过以取代苯胺、邻氨基苯甲酸、邻氯苯甲酸等为起始物合成,而... 详细信息

吲哚酚显色底物是由作为产色原的吲哚酚或其取代物与酶底物间接缩合而成,其合成主要包括中间体乙酸1-乙酰基-吲哚-3-基酯的合成及其与酶底物的衍生物缩合两部分。中间体可以通过以取代苯胺、邻氨基苯甲酸、邻氯苯甲酸等为起始物合成,而其再与酶底物的衍生物如乙酰溴代糖、酰卤、三氯氧磷、氯磺酸等反应可得到相应的各种显色底物。吲哚酚显色底物应用于微生物检测,依据特异性酶与相应底物的特异性反应,一般通过显色培养基技术来实现,不同的显色底物针对的酶及其应用于检测的微生物会有所不同。

关键词：吲哚酚显色底物中间体乙酸 1-乙酰基-吲哚-3-基酯合成应用显色培养基

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