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日化产品中洋葱伯克霍尔德氏菌复合群(Bcc)的分类和神秘伯克霍尔德氏菌的耐药性研究

微生物学报 2023年第9期63卷 3616-3627页

作者：张淑瑶文霞苏皑庭黄迪陶宏兵陈漪汶谢小保广东省科学院微生物研究所、广东省微生物分析检测中心、华南应用微生物国家重点实验室、农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室、农业农村部农业微生物组学重点实验室、广东省菌种保藏与应用重点实验室广东广州510070 广东迪美生物技术有限公司广东广州510663

【目的】对从2020–2022年不同日化产品中分离的29株洋葱伯克霍尔德氏菌复合群(Burkholderia cepacia complex,Bcc)进行分类和分型,另将2020年前来源于日化产品中6株被鉴定为Burkholderia lata的菌株进行分类更正。探究神秘伯克霍尔德氏... 详细信息

【目的】对从2020–2022年不同日化产品中分离的29株洋葱伯克霍尔德氏菌复合群(Burkholderia cepacia complex,Bcc)进行分类和分型,另将2020年前来源于日化产品中6株被鉴定为Burkholderia lata的菌株进行分类更正。探究神秘伯克霍尔德氏菌(Burkholderia aenigmatica)的耐药性。【方法】本文主要应用多位点分型研究方法(multilocus sequence typing,MLST),PCR扩增atpD、gltB、gyrB、recA、lepA、phaC和trp B 7个管家基因片段,将测序结果与MLST数据库中的数据比对分析,获得菌株各管家基因的编号和ST型(sequence type),对本检测中心分离自日化产品的Bcc进行分型;利用多位点序列分析(multilocus sequence analysis,MLSA),结合MLST中等位基因的核苷酸序列构建进化树,从而对Bcc进行系统发育分析和鉴定。利用最小抑菌浓度法(minimum inhibitory concentration,MIC)测定Bcc对常见防腐剂(1,3-二羟甲基-5,5-二甲基乙内酰脲、卡松、苯甲酸钠、山梨酸钾)和抗生素(头孢他啶、卡那霉素、四环素)的耐药性。【结果】本文29株Bcc菌株共有5个菌种类型(***、***、***、***和***)和15个不同分型,分类过程中发现了7个新等位基因,7个新ST分型(ST2118、ST2120、ST2122、ST2127、ST2128、ST2129和ST2130)并鉴定了其种类。另将2020年前来源于样品中6株被鉴定为Burkholderia lata的菌株用MLST法重新分类鉴定,其鉴定结果均为Burkholderia aenigmatica。11株***分离株中只有1株对头孢他啶耐药,其他菌均对其不耐药,分别有9株和8株***对卡那霉素和四环素耐药。卡松和1,3-二羟甲基-5,5-二甲基乙内酰脲(1,3-dimethylmethylol-5,5-dimethylhydantoin,DMDMH)在最大允许量范围内能有效抑制***的生长,有9株***表现出苯甲酸钠和山梨酸钾的耐药性。【结论】Bcc的分类较为复杂且存在许多未知等位基因和分型,Burkholderia aenigmatica已经成为污染日化产品的主要Bcc菌株。大部分***对氨基糖苷类和四环素类抗生素具有耐药性,大部分来自日化产品中的***对苯甲钠和山梨酸钾均具有耐药性。

关键词：洋葱伯克霍尔德氏菌复合群多位点序列分析神秘伯克霍尔德氏菌耐药性日化产品

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动态浊度法测定饲料中细菌内毒素含量的研究

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中国饲料 2025年第5期 112-117页

作者：陈家舒熊雄段锦梅韩和悦熊诗阳朱红惠广东省科学院微生物研究所广东省微生物分析检测中心华南应用微生物国家重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室农业农村部农业微生物组学重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东广州510070

本实验基于动态浊度法的基础,旨在利用动态试管仪建立饲料中细菌内毒素的测定方法。将供试品配成10%溶液,涡旋混合后,采用10000 r/min离心10 min后取上清液,应用动态浊度法进行细菌内毒素测定。结果显示:该方法的相关系数(r)为0.9977,... 详细信息

本实验基于动态浊度法的基础,旨在利用动态试管仪建立饲料中细菌内毒素的测定方法。将供试品配成10%溶液,涡旋混合后,采用10000 r/min离心10 min后取上清液,应用动态浊度法进行细菌内毒素测定。结果显示:该方法的相关系数(r)为0.9977,加标回收率为97.1%~156.4%,相对标准偏差(RSD)(n=6)为2.0%~7.9%,28种不同类型的饲料样品中细菌内毒素含量在0~349.220 EU/mg。研究表明,实验所用方法操作简便、准确度高、重复性好、应用范围广,适用于饲料中细菌内毒素含量的测定。

关键词：饲料细菌内毒素动态浊度法动态试管仪

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噬菌体作为指示病毒的应用研究进展

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微生物学报 2023年第7期63卷 2511-2522页

作者：孙廷丽韩玉茹王青柏黎玉莲谢小保广东省科学院微生物研究所、广东省微生物分析检测中心、华南应用微生物国家重点实验室、农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室、农业农村部农业微生物组学重点实验室、广东省菌种保藏与应用重点实验室广东广州510070 中纺标检验认证股份有限公司北京100025

噬菌体是一类专性侵染细菌的病毒,在形态大小、结构组成等生物特性上与高等生物病毒具有相似性,同时噬菌体实验室操作技术简单,安全性高,在培养、计数、稳定性和灵敏度等方面具有非常大的优势。因此,将噬菌体作为指示生物模拟或替代高... 详细信息

噬菌体是一类专性侵染细菌的病毒,在形态大小、结构组成等生物特性上与高等生物病毒具有相似性,同时噬菌体实验室操作技术简单,安全性高,在培养、计数、稳定性和灵敏度等方面具有非常大的优势。因此,将噬菌体作为指示生物模拟或替代高等生物病毒的研究和应用已开始受到国内外研究人员的关注,并取得一定进展。本文论述了噬菌体作为指示病毒的优势,并对噬菌体在病毒过滤去除效果评价、消毒效果评价、病毒传播规律研究、环境及水质监测等领域的研究和应用进行了总结分析,综述了噬菌体在各领域应用的可行性证据、应用案例及难点问题,并结合噬菌体作为指示病毒的不足之处,对进一步以噬菌体作为指示病毒的研究和应用提出建议和展望。

关键词：噬菌体指示病毒消毒效果评价病毒去除评价病毒传播规律研究环境及水质监测

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碱熔-电感耦合等离子体质谱法测定土壤中全硼

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质谱学报 2025年第3期46卷 361-369页

作者：陈家舒熊雄段锦梅陈颖麟江家俊朱红惠广东省科学院微生物研究所广东省微生物分析检测中心华南应用微生物国家重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室农业农村部农业微生物组学重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室

本研究使用碳酸钠高温碱熔消解试样，通过优化熔融温度、熔融时间、酸溶解条件等实验条件，建立了碱熔-电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）法测定土壤中全硼。实验表明，向样品中加入2.0 g Na2CO3于950℃碱熔20 min后，使用HCl水溶液（1:1,... 详细信息

本研究使用碳酸钠高温碱熔消解试样，通过优化熔融温度、熔融时间、酸溶解条件等实验条件，建立了碱熔-电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）法测定土壤中全硼。实验表明，向样品中加入2.0 g Na2CO3于950℃碱熔20 min后，使用HCl水溶液（1:1,V/V）溶解熔块的效果最好。碱熔法可以有效避免硼在HF中易挥发损失的问题。使用有证标准物质和实际样品对方法进行验证，结果表明，该方法测定全硼含量在0～100μg/L浓度范围内的线性关系良好，线性相关系数为0.999 5，方法检出限为0.20 mg/kg，定量限为0.65 mg/kg，方法精密度（RSD,n=6）为1.92%～3.79%，相对误差（RE）为-0.32%～3.69%。实际样品测定的相对标准偏差（RSD,n=6）为0.99%～1.82%。相比于电感耦合等离子体发射光谱（ICP-OES）法，本方法的数据稳定性更好、工作效率更高，适用于土壤中全硼的测定。

关键词：碱熔电感耦合等离子体质谱(ICP-MS) 土壤全硼

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噬菌体作为指示病毒的研究和应用进展

噬菌体作为指示病毒的研究和应用进展

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ASTF 2023（第五届）抗菌科学与技术论坛

作者：孙廷丽谢小保广东省科学院微生物研究所广东省微生物分析检测中心华南应用微生物国家重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室农业农村部农业微生物组学重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室

近年来,病毒性疾病的高发频发已经成为了世界性的公共卫生问题,给经济和社会造成了巨大的影响。加强对病毒的生命周期、传播规律、环境抗性等的研究,对于病毒性疾病的预防、控制、疫苗开发及消毒等都具有积极的意义。在对上述问题进行... 详细信息

近年来,病毒性疾病的高发频发已经成为了世界性的公共卫生问题,给经济和社会造成了巨大的影响。加强对病毒的生命周期、传播规律、环境抗性等的研究,对于病毒性疾病的预防、控制、疫苗开发及消毒等都具有积极的意义。在对上述问题进行研究时,直接以相关病毒为研究对象是是非常理想的,但在实际实施过程中却受到各种限制。此时,使用指示病毒或模式生物进行替代性的研究,从中获得相关可迁移的信息,是非常有效的技术手段。噬菌体是一种细菌病毒,以特定的细菌为宿主,在形态大小、结构组成等生物特性上与高等生物病毒具有相似性,同时噬菌体实验室操作技术简单,安全性高,在培养、计数、稳定性和灵敏度等方面具有非常大的优势。因此,因此将噬菌体作为高等生物病毒的指示生物或替代生物,已成为新的研究趋势并受到广泛关注。本文通过对目前国内外以噬菌体作为指示生物的研究和应用的情况进行总结分析,综述了噬菌体作为指示病毒的优势及可行性,以及病毒在各领域的研究现状和应用要点,对进一步以噬菌体作为指示病毒的研究和应用进行了展望,为下一步研究提供建议和参考。

关键词：噬菌体指示生物应用研究标准化

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洗手产品除菌效果评价的离体试验方法研究

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工业微生物 2022年第6期52卷 10-15页

作者：孙廷丽李彩玲陈静叶一均林小涵杨义熙谢小保广东省科学院微生物研究所广东省微生物分析检测中心华南应用微生物国家重点实验室/农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室/农业农村部农业微生物组学重点实验室/广东省菌种保藏与应用重点实验室广东广州510070

本文以金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为实验菌种,以仿真皮为实验载体,以四种洗手产品为试验对象,验证了仿真皮离体试验与在体试验的相关性,建立了一种洗手产品离体洗手除菌效果评价的试验方法,并建立以统计学为基础的评价方法。结果显示,离... 详细信息

本文以金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为实验菌种,以仿真皮为实验载体,以四种洗手产品为试验对象,验证了仿真皮离体试验与在体试验的相关性,建立了一种洗手产品离体洗手除菌效果评价的试验方法,并建立以统计学为基础的评价方法。结果显示,离体仿真皮为试验载体时,与在体试验相关性好;离体实验方法适用于多种洗手产品,具有良好的可重复性,是一种简单可行的洗手产品除菌效果的评价方法,具有较好的应用价值。

关键词：离体洗手模型洗手产品除菌效果试验方法

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洗手产品除病毒效果离体实验方法研究

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中国公共卫生 2019年第1期35卷 42-47页

作者：孙廷丽周少璐杨秀茳文霞黎玉莲谢小保广东省微生物研究所广东省微生物分析检测中心省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广州510070

目的建立一种安全、简便和费用低廉的测试洗手及洗手产品除病毒效果的离体试验方法。方法以噬菌体为替代病毒,仿真皮为载体设计试验流程,分析影响试验结果的要素,通过数据分析,研究洗手产品回收稀释液种类、噬菌体初始接种浓度及回收方... 详细信息

目的建立一种安全、简便和费用低廉的测试洗手及洗手产品除病毒效果的离体试验方法。方法以噬菌体为替代病毒,仿真皮为载体设计试验流程,分析影响试验结果的要素,通过数据分析,研究洗手产品回收稀释液种类、噬菌体初始接种浓度及回收方式对结果稳定性的影响。使用不同洗手产品对多种噬菌体分别进行除病毒效果测试后进行统计分析,确定方法的适用性。结果以噬菌体φX174为污染病毒,0.1%蛋白胨生理盐水做为香皂和洗手液的回收稀释液使用时,其噬菌体的回收值为5.57和5.54,明显高于改良李氏肉汤吐温培养基(MLBT)、多用中和剂(PVUN)及磷酸缓冲液(PBS);对手摇瓶子2 min、摇床200 r/min振摇2 min、均质器标准强度快速拍打2 min后测得的噬菌体回收量进行单因素方差分析,P_(0.05)=0.72,表明3者无统计学差异,但是在使用均质器拍打时的变异系数(CV)为0.74%最小,数据最稳定;4个初始接种浓度中,只有在10~7 pfu/mL与10~8 pfu/mL的浓度下,平皿上的噬菌体数量符合实验设计,超过4 Log10,对这2个浓度实验结果进行t检验,其P_(0.05)=0.003,结合回收数据,认为10~8pfu/mL是最合适的加样浓度;使用上述参数,分别以噬菌体MS2、φX174、φ6为污染病毒,使用香皂、洗手液及清水进行洗手除病毒评价,所有结果 CV均<15%。结论采用10~8 pfu/mL的噬菌体悬液污染仿真皮后使用洗手产品模拟洗手,均质器拍打2 min、0.1%蛋白胨生理盐水进行回收稀释,实验结果最稳定。多次重复实验结果显示,该方法适用于多种噬菌体,也适用于多种洗手产品,是一种简单可行的洗手及洗手产品除病毒效果评价方法,具有较高的应用价值。

关键词：离体洗手模型洗手洗手产品替代病毒除病毒效果噬菌体

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光催化材料及制品抗菌性能检测情况及标准化现状分析

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化工新型材料 2019年第5期47卷 257-259,263页

作者：孙廷丽周少璐黎玉莲彭如群谢小保广东省微生物研究所广东省微生物分析检测中心省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广州510070

对2016—2017年收到的356份光催化材料及制品的性能测试,特别是抗生物性能测试需求、标准采用等情况进行了统计分析。结果表明,我国光催化材料及制品市场比较活跃,测试需求量大,其主要应用、研发及测试方向为去除空气中的污染物及抗菌... 详细信息

对2016—2017年收到的356份光催化材料及制品的性能测试,特别是抗生物性能测试需求、标准采用等情况进行了统计分析。结果表明,我国光催化材料及制品市场比较活跃,测试需求量大,其主要应用、研发及测试方向为去除空气中的污染物及抗菌性能的评价,分别占据检测量的63%及24%;在标准制定及应用方面,抗细菌的性能评价标准体系已经比较完善,其测试条件及菌种都有标准规定,采用专门的光催化材料抗菌性能标准的检测占比合计达34%(可见光16%,紫外光18%),但抗真菌及抗病毒的性能测试则只能依据相关的产品标准。采用专门的标准方法,对材料和制品进行定量分析,是十分必要的,对促进技术进步,规范和稳定光催化材料及制品市场,具有积极的意义。

关键词：光催化材料及制品抗菌性能测试情况标准化现状

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中和剂对Petrifilm测试片检测化妆品微生物的影响

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中国卫生检验杂志 2019年第24期29卷 2945-2947页

作者：文霞杨秀茳刘静霞李彩玲谢小保广东省微生物研究所广东省微生物分析检测中心省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室

目的评价不同中和剂对Petrifilm测试片检测化妆品微生物的影响。方法分别采用3M PetrifilmTM大肠菌群测试片、细菌总数测试片和金黄色葡萄球菌测试片对化妆品微生物进行检测,其中添加不同浓度中和剂(卵磷脂、吐温-80、L-组氨酸、硫代硫... 详细信息

目的评价不同中和剂对Petrifilm测试片检测化妆品微生物的影响。方法分别采用3M PetrifilmTM大肠菌群测试片、细菌总数测试片和金黄色葡萄球菌测试片对化妆品微生物进行检测,其中添加不同浓度中和剂(卵磷脂、吐温-80、L-组氨酸、硫代硫酸钠、巯基乙酸钠、半胱氨酸)。结果添加半胱氨酸后,3种测试片上菌落数量明显减少;添加质量浓度为1. 0%、2. 0%和3. 0%吐温-80会使大肠菌群和细菌总数测试片中的微生物菌落模糊不清,无法计数;添加2. 0%和3. 0%吐温-80会使金黄色葡萄球菌测试片中的菌落数量减少。结论在采用Petrifilm测试片检测化妆品微生物时,避免使用含半胱氨酸的中和剂,且使用大肠菌群和细菌总数测试片时,吐温-80的质量浓度不应超过0. 5%。本研究可为化妆品微生物检测提供技术支撑。

关键词：化妆品微生物 Petrifilm测试片中和剂

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标准化测试种子发芽和根伸长毒性试验的基质应用研究

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生态毒理学报 2018年第4期13卷 191-196页

作者：邓桂荣梅承芳陈燕玲梁燕珍许玉洁梁秋曾国驱广东省微生物分析检测中心生态毒理与环境安全实验室广州510070 广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广州510070 省部共建华南应用微生物国家重点实验室广州510070

种子发芽和根伸长毒性试验是研究和评价新化学物质对陆生生物危害性的重要手段之一。为探究在标准化测试中能否使用非推荐基质,以及使用推荐基质时能否用灭菌法替代酸洗法处理石英砂,选取8种植物种子在5种基质中进行试验。结果表明,不... 详细信息

种子发芽和根伸长毒性试验是研究和评价新化学物质对陆生生物危害性的重要手段之一。为探究在标准化测试中能否使用非推荐基质,以及使用推荐基质时能否用灭菌法替代酸洗法处理石英砂,选取8种植物种子在5种基质中进行试验。结果表明,不同基质对种子发芽率的影响较小,但基质较低的养分含量和特殊的物理结构易对部分种子根长形成胁迫,甚至直接制约根系发育。生菜、水稻在5种基质中的发芽率和根长无显著性差异;绿豆、甘蓝、西瓜在酸洗石英砂中的根长分别为25.1、24.5、29.0 mm,在其余4种基质中根长显著缩短;青瓜在吸水纸和发芽纸中发芽率偏低,仅为83.3%;玉米在酸洗石英砂和灭菌石英砂中的发芽率和根长无明显差异,为100%/45.7 mm和93.3%/44.8 mm,其他基质中显著偏低。标准化测试条件下,以推荐的酸洗石英砂上各种子的发芽率和根长为评判依据,生菜和水稻试验可使用本研究中任意基质,绿豆、甘蓝和西瓜试验仅可使用酸洗石英砂作为基质,青瓜和玉米试验可使用干热灭菌法替代酸洗法处理石英砂,并且青瓜试验还可使用滤纸基质。以上结果为测试机构在工作实践中优化试验条件提供理论依据。

关键词：种子发芽根伸长基质石英砂滤纸吸水纸发芽纸

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