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中国菌物学会2018年学术年会

作者：叶伟黄自磊刘桃妹朱牧孜李赛妮刘帅孔亚丽李浩华许丽琼章卫民广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室

胶霉毒素是一种具有广谱抑菌、抑病毒、抗氧化、强抗肿瘤活性和免疫调节活性的毒素,由胶霉毒素制备的杀菌剂和杀虫剂对防治水稻纹枯病、稻瘟病和稻曲病有很好的防治效果。胶霉毒素在治疗肝纤维化方面已经有应用,胶霉毒素类似物应用小细... 详细信息

胶霉毒素是一种具有广谱抑菌、抑病毒、抗氧化、强抗肿瘤活性和免疫调节活性的毒素,由胶霉毒素制备的杀菌剂和杀虫剂对防治水稻纹枯病、稻瘟病和稻曲病有很好的防治效果。胶霉毒素在治疗肝纤维化方面已经有应用,胶霉毒素类似物应用小细胞肺癌已经进入临床III期,证明胶霉毒素在生物医药领域有很好的应用前景。本课题组组前期在深海真菌埃德菌FS110的代谢产物中分离纯化得到了大量结构新颖的胶霉毒素及其衍生物,分离得到的胶霉毒素对肿瘤细胞具有显著的细胞毒性。在此基础上对埃德菌FS110进行了全基因组测序,本项目组对深海真菌D. cejpii进行全基因组测序。测序结果表明,所得碱基数为40,830,384,909 bp, Q20为98.87%,所得数据的测序单分子clean数据序列的长度分布统计如下图所示,说明本次测序质量较高,可用于后续分析,所得基因组大小为24.32M。GC含量为49.697%。FS110基因组共预测得到8550个基因。从FS110基因组结果中共获得88个与胶霉毒素生物合成相关的基因。预测Cluster18为胶霉毒素生物合成基因簇,与二酮哌嗪类化合物Aspirochlorine生物合成基因簇的相似度为13%。为了更好地解析FS110中胶霉毒素生物合成转录调控机制,并对其生物合成基因进行更好的异源表达,对其中胶霉毒素的生物合成基因启动子功能进行了分析。通过3-4次巢式PCR反应,筛选阳性克隆,获得gliG/gliI/gliO三个基因的启动子片段G1、G2、I1、I2、O1、O2并测序成功。寻找启动子核心区域,然后扩增出gliG/gliI/gliO三个功能基因的上游包括核心启动子区域200-700bp左右片段,如gliG基因上游500bp,gliI基因上游700 bp,gliO基因上游300 bp。萤火虫荧光素酶检测试剂得出,gliG核心启动子区域具有较高的转录活性。将启动子插入pGL3-basic载体中,将0.5 kb gliG核心启动子区域替换pGPDA启动子,将2μ-pAN7-1-gliG核心启动子载体以及2μ-pAN7-1载体(阳性对照)分别电转入酿酒酵母,含有2μ-pAN7-1-gliG核心启动子载体的酵母生长较快,而且菌落数较多。为了对胶霉毒素的生物合成基因进行基因编辑,我们成功构建了适用于海洋真菌FS110的PFC332-sgRNA载体和PX459-sgRNA-GFP-Ble载体。其中PFC332-sgRNA载体中加入了在酵母细胞中发挥作用的sg RNA靶向序列骨架基因;在PX459-sgRNA-GFP-Ble中加上了sg RNA靶向序列以及博来霉素抗性Marker,为后续突变菌株的筛选提供了更加可靠的筛选标记。gliG、gliI、gliO靶向序列的PFC332-sgRNA质粒成功导入到D. cejpii原生质体中,并且筛选出阳性克隆,利用潮霉素抗性基因引物克隆,得到gliG阳性克隆2个,gliO阳性克隆1个,并通过验证了目的基因gliG、gliO的成功敲除。本研究关于深海真菌FS110的基因组测序及胶霉毒素生物合成基因及其启动子的分析为FS110中胶霉毒素生物合成途径的阐明奠定了分子生物学基础。

关键词：埃德菌胶霉毒素基因组测序生物合成 CRISPR/Cas9

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华南地区食品中非O157致泻大肠杆菌分布特点及分型研究

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现代食品科技 2017年第3期33卷 266-273页

作者：张淑红杨广珠赖泽冰吴清平张菊梅广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070

为深入了解华南地区食品中非O157致泻大肠杆菌(DEC)的污染分布情况和特点,本研究随机采集了该地区12个城市的食品样品,参考GB/T 4789.36-2003方法进行检测,并利用多重PCR对DEC进行了分子鉴定。另外,分别采用MLST分型方法和药敏纸片法对... 详细信息

为深入了解华南地区食品中非O157致泻大肠杆菌(DEC)的污染分布情况和特点,本研究随机采集了该地区12个城市的食品样品,参考GB/T 4789.36-2003方法进行检测,并利用多重PCR对DEC进行了分子鉴定。另外,分别采用MLST分型方法和药敏纸片法对DEC菌株的遗传特性和耐药性进行了分析。结果表明,1000份样品中有164份检出DEC,总污染率高达16.4%。肉类和水产品污染较严重。在五种DEC中,EPEC检出率最高(8.0%),其次为ETEC(6.2%),EIEC(3.4%)和STEC(0.4%)。样品中共分离到207株DEC。MLST分型产生了58种ST型,其中44个为已报道的ST型,14个为数据库中新的ST型。聚类分析表明这些菌株共有8个克隆复合物(CC),CC10为其中最大的一个。DEC菌株对四环素、复方新诺明、氨苄西林、头孢噻吩和氯霉素等具有高抗性。有关部门应加强非O157致泻大肠杆菌的监控,减少食源性疾病的发生。

关键词：食品致泻大肠杆菌污染分布毒力基因 MLST分子分型耐药性

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蒙脱土/还原氧化石墨烯负载纳米铜复合物的制备及其抗菌性能的研究

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工业微生物 2018年第5期48卷 32-36页

作者：严亚媛施庆珊谭绍早广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广州510070 暨南大学化学系广州510632

本文研究了蒙脱土/还原氧化石墨烯负载纳米铜(MMT-rGO-CuNPs)复合抗菌材料的制备及其抗菌性能。通过X射线衍射图谱的检测,确定MMT-rGO-CuNPs复合物已经成功。为了研究复合物的抗菌活性,通过观察大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的表面形貌变化... 详细信息

本文研究了蒙脱土/还原氧化石墨烯负载纳米铜(MMT-rGO-CuNPs)复合抗菌材料的制备及其抗菌性能。通过X射线衍射图谱的检测,确定MMT-rGO-CuNPs复合物已经成功。为了研究复合物的抗菌活性,通过观察大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的表面形貌变化和细菌体外离子浓度变化,证明MMT-rGO-CuNPs复合物对金黄色葡萄球菌的抗菌性能要强于对大肠杆菌。

关键词：蒙脱土还原氧化石墨烯纳米铜纳米复合材料抗菌性

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高压脉冲电场灭菌对木瓜果酒中维生素C损失的影响

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酿酒科技 2018年第9期 22-25页

作者：王惠惠莫树平柏建玲罗金棠吴清平丘明泉任鹏荣广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 广州市果树科学研究所广东广州510405

研究了高压脉冲电场在不同电场强度和处理时间对木瓜果酒Vc损失的影响,还进一步比较了高压脉冲电场和热处理灭菌后的木瓜果酒的菌落总数和Vc含量的变化。结果表明,随着高压脉冲电场的电场强度的增大和处理时间的延长,木瓜果酒的Vc损失... 详细信息

研究了高压脉冲电场在不同电场强度和处理时间对木瓜果酒Vc损失的影响,还进一步比较了高压脉冲电场和热处理灭菌后的木瓜果酒的菌落总数和Vc含量的变化。结果表明,随着高压脉冲电场的电场强度的增大和处理时间的延长,木瓜果酒的Vc损失越来越大,35 k V/cm、400μs处理时,混合木瓜果酒的Vc含量下降了18.75%,而100℃热处理的Vc含量降低了79%;高压脉冲电场灭菌效果良好,与传统热处理相比,高压脉冲电场处理的木瓜果酒中Vc损失程度更小。

关键词：木瓜果酒高压脉冲电场热杀菌

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地下水中可培养微生物多样性研究进展

地下水中可培养微生物多样性研究进展

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2018中国·鼎湖长寿峰会暨首届全养生大会

作者：吴清平魏磊张菊梅广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州 510070

目前世界上对微生物多样性的认识及分布规律研究还处在初级阶段,多数研究集中在地表环境,对地下水中微生物多样性及其生命活动规律的研究十分匮乏.地下水生态系统为微生物提供庞大而且复杂的栖息环境,地球上约40％的原核生物都栖息在地... 详细信息

目前世界上对微生物多样性的认识及分布规律研究还处在初级阶段,多数研究集中在地表环境,对地下水中微生物多样性及其生命活动规律的研究十分匮乏.地下水生态系统为微生物提供庞大而且复杂的栖息环境,地球上约40％的原核生物都栖息在地下水中.随着人们对地下水饮用安全和其有机物污染降解情况的重视,越来越多的研究开始对地下水微生物多样性展开了系统深入的调查.

关键词：地下水环境微生物多样性生命活动规律

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海洋真菌Westerdykella dispersa FS350次级代谢产物的分离纯化与鉴定

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广东药科大学学报 2018年第2期34卷 132-136页

作者：许建林刘洪新陈玉婵李赛妮郭珩李浩华章卫民高晓霞广东药科大学药学院广东广州510006 广东省微生物研究所/省部共建华南应用微生物国家重点实验室/广东省菌种保藏与应用重点实验室/广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070

目的研究海洋真菌Westerdykella dispersa FS350的次级代谢产物。方法利用正相硅胶柱、反相硅胶柱、凝胶柱和高效液相色谱等多种色谱方法对菌株FS350的液体发酵产物进行分离纯化,采用NMR、MS等波谱方法鉴定化合物结构,采用SRB法和DPPH... 详细信息

目的研究海洋真菌Westerdykella dispersa FS350的次级代谢产物。方法利用正相硅胶柱、反相硅胶柱、凝胶柱和高效液相色谱等多种色谱方法对菌株FS350的液体发酵产物进行分离纯化,采用NMR、MS等波谱方法鉴定化合物结构,采用SRB法和DPPH法测定化合物的生物活性。结果从发酵产物中分离得到了8个成分,分别鉴定为:2-(4-羟苯基)乙酸乙酯(1)、3-hydroxy-1-(2,6-dihydroxyphenyl)butan-1-one(2)、4-epiradicinol(3)、2-糠酸(4)、2-(4-羟苯基)-乙醇(5)、对羟基苯乙醇α-羟基丙酸酯(6)、(R)-甲羟戊酸内酯(7)和asterric acid(8)。结论化合物1~8均是首次从Westerdykella属真菌中分离得到,这些化合物均无明显的细胞毒和抗氧化活性。

关键词：海洋真菌 Westerdykella dispersa 次级代谢产物分离纯化鉴定

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γ-聚谷氨酸/壳聚糖复合磷酸钙骨水泥制备、表征及性能

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中国组织工程研究 2017年第26期21卷 4185-4191页

作者：疏秀林施庆珊陈铭杰冯劲广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室和省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省广州市510070

背景:骨缺损修复是一个复杂的过程,将成骨因子施加于骨缺损区域以刺激成骨,已被证明有显著的效果。目的:制备γ-聚谷氨酸/壳聚糖复合磷酸钙骨水泥,并观察其理化性质,探索其作为生长因子载体的缓释功能。方法:通过喷雾冷冻干燥法制备γ-... 详细信息

背景:骨缺损修复是一个复杂的过程,将成骨因子施加于骨缺损区域以刺激成骨,已被证明有显著的效果。目的:制备γ-聚谷氨酸/壳聚糖复合磷酸钙骨水泥,并观察其理化性质,探索其作为生长因子载体的缓释功能。方法:通过喷雾冷冻干燥法制备γ-聚谷氨酸/壳聚糖凝胶颗粒,装载重组人骨形态发生蛋白2生长因子,与磷酸钙骨水泥的固相通过湿法预混、研磨和冷冻干燥,按比例添加固化液,注模按压成型,即制备复合磷酸钙骨水泥载体。以磷酸钙骨水泥为空白对照,对该复合载体凝固时间、抗压强度、物相分析、微观表征、体外释放性能及生物相容性等进行观察和分析。结果与结论:(1)γ-聚谷氨酸/壳聚糖的添加未改变磷酸钙骨水泥的理化性质,各组间初凝时间与终凝时间及抗压强度未见明显差异;(2)扫描电子显微镜观察改性后的磷酸钙骨水泥呈片状晶体形态,γ-聚谷氨酸/壳聚糖颗粒均匀分散其中;(3)γ-聚谷氨酸/壳聚糖复合磷酸钙骨水泥能明显促进骨细胞体外增殖;(4)体外模拟实验表明γ-聚谷氨酸/壳聚糖复合磷酸钙骨水泥具有较好的缓释功能。

关键词：生物材料骨生物材料 γ-聚谷氨酸/壳聚糖骨形态发生蛋白2 磷酸钙骨水泥骨组织工程广东省自然科学基金

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车八岭自然保护区大型食药用菌及毒菇资源调查

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食用菌 2018年第2期40卷 24-28页

作者：宋相金黄秋菊宋斌林敏黄浩李挺束祖飞广东车八岭国家级自然保护区广东始兴512526 广东省微生物研究所/省部共建华南应用微生物国家重点实验室/广东省菌种保藏与应用重点实验室/广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070

对车八岭国家级自然保护区野生菌资源进行调查统计,共鉴别出野生菌标本119种,其中食药用菌101种、毒菇18种。简要列出它们的中文名、拉丁学名及其生境、用途。最后简述了对保护区内野生菌资源调查研究、保护与合理开发利用的一些建议,... 详细信息

对车八岭国家级自然保护区野生菌资源进行调查统计,共鉴别出野生菌标本119种,其中食药用菌101种、毒菇18种。简要列出它们的中文名、拉丁学名及其生境、用途。最后简述了对保护区内野生菌资源调查研究、保护与合理开发利用的一些建议,为保护区的发展提供科学资料和依据。

关键词：车八岭食药用菌毒菇真菌资源

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空气净化器除菌和净化空气中颗粒物效果的比较

空气净化器除菌和净化空气中颗粒物效果的比较

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2018年第十六届全国防霉防菌技术研讨及产品交流会

作者：李素娟文霞李聪颖郭梓珊袁英姿陆舜盈谢小保广东省微生物研究所广东省微生物分析检测中心省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070

《消毒技术规范》(2002年版)进行自然菌除菌实验,和按国家标准GB/T18801-2015《空气净化器》进行颗粒物净化效果实验,比较不同品牌的空气净化器除菌效果和对颗粒物净化效果.实验结果表明,紫外线空气净化器除菌效果为89.13％,洁净空气量(... 详细信息

《消毒技术规范》(2002年版)进行自然菌除菌实验,和按国家标准GB/T18801-2015《空气净化器》进行颗粒物净化效果实验,比较不同品牌的空气净化器除菌效果和对颗粒物净化效果.实验结果表明,紫外线空气净化器除菌效果为89.13％,洁净空气量(CADR)为10.3m3/h;光催化空气净化器除菌效果为93.23％,CADR为150.1m3/h;过滤式空气净化器除菌效果为62.47％,CADR为273.1m3/h;负离子净化器除菌效果为91％,CADR为408.7m5/h.在测试的四种空气净化器中,除菌效果依次为光催化空气净化器＞负离子净化器＞紫外线空气净化器＞过滤式空气净化器,颗粒物净化效果依次为负离子净化器＞过滤式空气净化器＞光催化空气净化器＞紫外线空气净化器.在选择空气净化器时,针对不同的污染对象,可选择相应用途的空气净化器.

关键词：空气净化器颗粒物净化效果除菌效果

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中国喇叭菌属研究及一新种介绍

中国喇叭菌属研究及一新种介绍

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中国菌物学会2018年学术年会

作者：钟祥荣邓旺秋宋斌黄浩张明李泰辉广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室华南农业大学

喇叭菌属（Craterellus）是分布广泛的世界性食用菌,其主要特征为:喇叭状（漏斗状）的中空子实体,菌盖与菌柄无明显的界限,通常成簇生长。目前关于该属的报道记录有142个,而中国仅报道了4个种,即金黄喇叭菌C. aureus、灰喇叭菌C. cornuc... 详细信息

喇叭菌属（Craterellus）是分布广泛的世界性食用菌,其主要特征为:喇叭状（漏斗状）的中空子实体,菌盖与菌柄无明显的界限,通常成簇生长。目前关于该属的报道记录有142个,而中国仅报道了4个种,即金黄喇叭菌C. aureus、灰喇叭菌C. cornucopioides、变黄喇叭菌C. lutescens和芳香喇叭菌C. odoratus。最近,作者在华南地区发现了一种内表面呈淡黄色至浅黄绿色,外表面呈白色至淡黄白色的喇叭菌属标本,形态学研究发现,该种与原报道于北美东部并在我国记载有分布的C. odoratus,和原报道于我国的C. aureus较为相似,但不同点在于C. odoratus有着橙黄色且较容易碎的子实体,***有着赭黄色的子实体和尺寸更小的孢子;进一步的基于ITS和LSU的系统发育分析结果表明,该种与C. odoratus为亲缘关系较近的独立类群,并确定其为分布于中国华南地区的喇叭菌属一新种,定名为黄色喇叭菌C. luteus T. H. Li＆X. R. Zhong。同时,本研究还结合我国不同地区采集到的黄颜色喇叭菌属标本,基于ITS和LSU两个基因片段进行了系统发育分析,探讨了该类群物种间的系统发育关系,明确了黄色喇叭菌的系统发育位置与其在我国的分布情况;并进一步发现,在我国华南地区有分布记载的C. odoratus可能并不存在,早期基于华南地区材料命名的芳香喇叭菌系为错误鉴定,应该是C. luteus。

关键词：食用菌喇叭菌属分子生物学

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